Liza tejzanore e E. Coli
- Bakteret E. coli janë bakteret më të përdorura në mikrobiologji dhe bioteknologji.
- Ndërprerësit tejzanor të qelizave japin rezultate të besueshme dhe të riprodhueshme për lizën e E. coli.
- Forcat intensive, por saktësisht të kontrollueshme të kavitacionit dhe prerjes rezultojnë në ndërprerje të plotë dhe rendimente të larta të nxjerrjes (p.sh. proteina, ADN).
Pse përçarja e qelizave tejzanor të E. coli është metoda e preferuar?
Homogjenizuesit tejzanor ose ultrasonikët e tipit sondë ofrojnë disa avantazhe për lizën e E. coli pasi ultratingulli intensiv prish në mënyrë efikase muret dhe membranat qelizore. Ultrasonikët e tipit sondë përdoren gjerësisht për lizën e E. coli për arsyet e mëposhtme:
Nxjerrja e proteinave nga qelizat E.coli kryhet në mënyrë efikase me sonda tejzanor UP200St
Ultrasonikator i tipit sondë ofron shumë përparësi për lizën e E. coli. Kontrolli i besueshëm dhe i saktë mbi parametrat e procesit tejzanor mundëson optimizimin e parametrave të funksionimit si fuqia, kohëzgjatja dhe trajtimi i mostrës për të arritur rezultatet e dëshiruara.
Analizat elektroforetike të ADN-së gjenomike të E. coli EDL933 i nënshtruar ultrazërit 0 – 15 min. L tregon shkallën e ADN-së.
(studim dhe imazh: ©Basselet et al. 2008)
Ndërprerja e qelizave duke përdorur kavitacion tejzanor
Homogjenizuesit e tipit sondë tejzanor funksionojnë me përafërsisht. 20,000 cikle në sekondë (në 20 kHz) dhe shkaktojnë kavitacion në lëngje ose pezullime. Zonat mikroskopike të kavitacionit akustik me presione të ngjashme me vakum dhe temperatura të larta që copëtojnë qelizat. Megjithëse temperaturat mund të arrijnë disa mijëra gradë Celsius, vëllimet e kavitacionit janë aq të vogla sa nuk e ngrohin ndjeshëm procesin. Kavitacioni akustik i gjeneruar nga ultratingulli dhe forcat e prerjes shpojnë ose thyejnë membranën qelizore të qelizave bakteriale si E.coli. Ultrasonikët Hielscher lejojnë kontrollin e saktë mbi parametrat e procesit si intensiteti tejzanor, amplituda, futja e energjisë dhe temperatura. Kështu, procesi i lizës tejzanor mund të përshtatet në mënyrë optimale me llojin e qelizës, kulturën qelizore dhe qëllimin e procesit.
- kontroll i saktë i lizës (intensiteti, amplituda, temperatura)
- rezultate të besueshme, të riprodhueshme
- përshtatja optimale me mostrat specifike
- kontrollin e temperaturës
- për mostra shumë të vogla deri në shumë të mëdha (µL në litra)
- Trajtim thjesht mekanik
- funksionim i përshtatshëm për përdoruesit, i sigurt
- rritje lineare nga laboratori në prodhim
VialTweeter për lizën tejzanor
Homogjenizues tejzanor kundrejt teknikave të tjera të lizës
Ndërsa liza kimike dhe enzimatike mund të jetë problematike – meqenëse liza kimike mund të ndryshojë strukturat e proteinave dhe të sjellë probleme pastrimi dhe liza enzimatike kërkon kohë të gjata inkubimi dhe nuk është e riprodhueshme – Ndërprerja tejzanor është një metodë e sofistikuar dhe e shpejtë e ndërprerjes së qelizave.
Liza tejzanor bazohet vetëm në forcat mekanike. Nuk shtohen kimikate, sonifikimi thyen murin qelizor nga forcat prerëse. Liza kimike mund të ndryshojë strukturën e proteinave dhe të sjellë probleme pastrimi. Ndërprerja enzimatike kërkon kohë të gjata inkubimi dhe nuk është i riprodhueshëm. Ndërprerja tejzanor e qelizave të baktereve E.coli është e shpejtë, e thjeshtë, e besueshme dhe e riprodhueshme. Kjo është arsyeja pse ultrasonikët Hielscher përdoren në laboratorët biologjikë dhe biokimikë në mbarë botën për përgatitjen e mostrave, para-analitikë, diagonstikë in-vitro dhe analiza të shumëfishta.
Rekomandime të përgjithshme për lizën tejzanor
Sonication është teknika më popullore për lizimin e sasive shumë të vogla, të mesme dhe të mëdha të suspensioneve qelizore – nga pico-litra deri në 100L/orë (duke përdorur një qelizë rrjedhëse tejzanor). Qelizat lizohen me prerje të lëngshme dhe kavitacion. ADN-ja pritet gjithashtu gjatë sonikimit, kështu që nuk është e nevojshme të shtohet DNaza në suspensionin qelizor.
Kontrolli i temperaturës gjatë lizës së E.coli me ultratinguj
Duke e ftohur paraprakisht kampionin dhe duke e mbajtur kampionin gjatë sonikimit në akull, degradimi termik i kampionit mund të parandalohet lehtësisht.
Në mënyrë ideale, mostrat duhet të mbahen të ftohta në akull gjatë lizës, por për shumicën e mostrave është e mjaftueshme nëse temperatura nuk ngrihet mbi temperaturën e kulturës ose burimit të indeve. Prandaj rekomandohet mbajtja e suspensionit në akull dhe sonikimi me disa impulse të shkurtra ultrasonike prej 5-10 sek dhe pauza 10-30 sek. Gjatë pauzave, nxehtësia mund të shpërndahet për të rivendosur një temperaturë të ulët. Për mostrat e qelizave më të mëdha, janë në dispozicion reaktorë të ndryshëm të qelizave rrjedhëse me xhaketa ftohëse.
Lexoni këtu këshilla dhe rekomandime të detajuara për një lizë të suksesshme tejzanor!
Protokollet për përgatitjen me ultratinguj të lizave E. Coli
Studiuesit përdorin homogjenizues tejzanor Hielscher për përçarjen e qelizave E.coli. Më poshtë mund të gjeni protokolle të ndryshme të testuara dhe të vërtetuara për lizën e E.coli duke përdorur homogjenizues tejzanor Hielscher për aplikacione të ndryshme të lidhura me E. coli.
Rritja e qelizave, ndërlidhja dhe përgatitja e ekstrakteve të qelizave E. coli duke përdorur ultratinguj
Për SeqA dhe ARN polimerazë ChiP-Chip E. coli MG1655 ose MG1655 ΔseqA u rrit në 37°C në një OD600 prej rreth 0,15 në 50 ml LB (+ 0,2% glukozë) përpara se të shtoheshin 27 μl formaldehid (37%) për ml medium (përqendrimi përfundimtar 1%). Lidhja e kryqëzuar u krye me tundje të ngadaltë (100 rpm) në temperaturën e dhomës për 20 min e ndjekur nga shuarja me 10 ml glicinë 2.5 M (përqendrimi përfundimtar 0.5 M). Për eksperimentet e goditjes nga nxehtësia, E. coli MG1655 u rrit në 65 ml mjedis LB në 30°C në një OD600 prej rreth 0.3. Më pas 30 ml kulturë u transferua në një balonë të ngrohur paraprakisht në 43°C dhe pjesa e mbetur u mbajt në 30°C. Lidhja e kryqëzuar dhe shuarja ishte siç u përshkrua më sipër, përveç që qelizat u mbajtën në 30 ose 43°C për 5 minuta përpara shkundjes së mëtejshme të ngadaltë në temperaturën e dhomës. Qelizat u mblodhën me centrifugim dhe u lanë dy herë me TBS të ftohtë (pH 7.5). Pas risuspensionit në 1 ml tampon lize (10 mM Tris (pH 8.0), 20% saharozë, 50 mM NaCl, 10 mM EDTA, 10 mg/ml lizozimë) dhe inkubimit në 37°C për 30 minuta, e ndjekur nga shtimi i 4 ml IP. tampon, qelizat u sonikuan në akull me ndërprerje 12 herë 30 sek dhe 30 sek duke përdorur procesorin tejzanor Hielscher UP400St në vendosjen e fuqisë 100%. Pas centrifugimit për 10 minuta në 9000 g, 800 μl pjesë të supernatantit u ruajtën në -20°C. (Waldminghaus 2010)
Mbiprodhimi dhe pastrimi i enzimave me një sondë tejzanor
Për mbiprodhimin e proteinave të etiketuara me dekahistidinë (His10), E. coli BL21(DE3) u transformua me konstruksione pET19b. Një parakulturë brenda natës u korr me centrifugim dhe 1% u përdor për të inokuluar një kulturë shprehëse. Qelizat që mbanin pET19mgtB u rritën në 22°C deri në një densitet optik në 600 nm (OD600) prej 0.7. Kultura u transferua në 17°C dhe u nxit nga 100 μM IPTG. Pas 16 orësh, kultura u korr me centrifugim në 7,500 × g në 4°C. Qelizat u risuspenduan në kripur 50 mM të buferuar me fosfat (PBS) me 0.3 M NaCl në pH 7.4 dhe u ndërprenë nga ultratingulli me një sonotrode mikro-majë S2 në ultrasonikatorin Hielscher UP200St në një cikël prej 0.5 dhe një amplitudë prej 75%.
Mbiprodhimi i GtfC i etiketuar me dekahistidine u nxit në 37°C në një OD600 prej 0.6 me 100 μM IPTG. Më pas qelizat u inkubuan për 4 orë, u korrën dhe u lizuan siç u tha më lart për MgtB.
Ekstraktet e qelizave të papërpunuara u centrifuguan në 15,000 × g dhe 4 ° C për të sedimentuar mbeturinat e qelizave. Ekstraktet e sqaruara u ngarkuan në kolonat 1 ml HisTrap FF Crude duke përdorur një sistem ÄKTAprime Plus. Enzimat u pastruan sipas protokollit të prodhuesit për elucionin gradient të proteinave të etiketuara me His. Tretësirat e proteinave të elutura u dializuan dy herë kundër 1000 vëllimeve 50 mM PBS, pH 7.4, me 0.3 M NaCl në 4°C. Pastrimi u analizua nga 12% SDS-PAGE. Përqendrimi i proteinave u përcaktua me metodën Bradford duke përdorur Roti-Quant. (Rabausch et al. 2013)
Nxjerrja me ultratinguj e proteinave nga bakteret E. coli
Një proteinë karremi me interes (në këtë rast, MTV1 e Arabidopsis thaliana) shkrihet me një etiketë GST dhe shprehet në qelizat BL21 Escherichia coli (E. coli).
- Merrni një topth GST-MTV1 dhe GST (që korrespondon me 50 ml kulturë bakteriale) dhe risuspendoni secilin në 2,5 ml tampon ekstraktimi të ftohtë në akull.
- Përdorni një ultrasonikator UP100H (i pajisur me MS3 microtip-sonotrode për vëllime të vogla prej përafërsisht 2-5 mL) për të prishur qelizat bakteriale derisa ato të lizohen, gjë që tregohet nga zvogëlimi i errësirës dhe viskoziteti i rritur. Kjo duhet të kryhet në akull dhe rekomandohet të bëhet sonikimi në intervale (p.sh. sonikimi 10 sekonda i ndjekur nga pauza 10 sekonda në akull e kështu me radhë). Duhet pasur kujdes që të mos sonikohet me intensitet shumë të lartë. Nëse zbulohet shkumëzimi ose formimi i një precipitati të bardhë, intensiteti duhet të ulet.
- Transferoni tretësirën e baktereve të lizuara në tubat e mikrocentrifugës 1,5 mL dhe centrifugoni në 4°C, 16,000 xg për 20 min.
Ultrasonikë të tipit sondë të tillë si UP400St përdorin parimin e punës së kavitacionit akustik për lizën efikase të E.coli.
Analiza e Shprehjes dhe Pastrimi i Proteinës Rekombinante duke përdorur Sonication
Peleti E. coli u sonikua me ultrasonikatorin Hielscher UP100H. Për këtë qëllim, peleti qelizor u risuspendua në tampon lize të ftohtë (50 mM Tris-HCl pH=7.5, 100 mM NaCl, 5 mM DTT, 1 mM PMSF) dhe u fto në akull për 10 min. Më pas, suspensioni i qelizave u sonikua me 10 breshëri të shkurtra prej 10 s të ndjekura nga një interval prej 30 s për ftohje. Më në fund, mbeturinat e qelizave u hoqën me ultracentrifugim në 4°C për 15 minuta në 14000 rpm. Për konfirmimin e shprehjes rPR, supernatanti u përdor në xhel poliakrilamid 12% dhe u analizua me SDS-PAGE dhe Western blotting. Pastrimi i rPR është bërë duke përdorur rrëshirë Ni2+-NTA (Invitrogen, USA) sipas udhëzuesit të prodhuesit. Në këtë fazë është përdorur metoda e pastrimit vendas. Pastërtia e proteinës së pastruar u vlerësua duke përdorur elektroforezë në xhelin e poliakrilamidit 12% dhe ngjyrosjen e mëvonshme blu Coomassie. Përqendrimi i proteinës së pastruar u mat me kompletin e analizës së proteinës Micro BCA (PIERCE, USA). (Azarnezhad et al. 2016)
Homogjenizues tejzanor për E. coli Lisis
Hielscher Ultrasonics projekton, prodhon dhe furnizon homogjenizues tejzanor me performancë të lartë për lizën e besueshme dhe efikase të baktereve E. coli dhe llojeve të tjera të qelizave, indeve dhe kulturave qelizore.
Portofoli i gjerë i sondave tejzanor si dhe i sistemeve indirekte të sonikacionit na lejon t'ju ofrojmë homogjenizuesin ideal të indeve ultrasonike për aplikimin tuaj të përçarjes dhe nxjerrjes së qelizave.
Dizajn, Prodhim dhe Konsulencë – Cilësi e prodhuar në Gjermani
Ultrasonikët Hielscher janë të njohur për cilësinë e tyre më të lartë dhe standardet e dizajnit. Softueri inteligjent, menyja intuitive, cilësimet e programueshme dhe protokollimi automatik i të dhënave janë vetëm disa veçori të ultrasonikëve Hielscher. Qëndrueshmëria dhe funksionimi i lehtë lejojnë integrimin e qetë të ultrasonikëve tanë në objektet kërkimore dhe bioteknike. Edhe kushtet e vështira dhe mjediset kërkuese trajtohen lehtësisht nga ultrasonikët Hielscher.
Hielscher Ultrasonics është një kompani e certifikuar ISO dhe i kushton theks të veçantë ultratingujve me performancë të lartë që paraqesin teknologjinë më të fundit dhe lehtësinë ndaj përdorimit. Sigurisht, ultrasonikët Hielscher janë në përputhje me CE dhe plotësojnë kërkesat e UL, CSA dhe RoHs.
Tabela e mëposhtme ju jep një tregues të kapacitetit të përafërt të përpunimit të ultrasonikëve tanë:
| Vëllimi i grupit | Shkalla e rrjedhjes | Pajisjet e rekomanduara |
|---|---|---|
| pllaka me shumë pus / mikrotitër | na | UIP400MTP |
| Briri i filxhanit për shishka ose gotë | na | Kupa tejzanor |
| reaktor mikro-rrjedhës tejzanor | na | GDmini2 |
| deri në 10 shishe me 0,5 deri në 1,5 ml | na | VialTweeter |
| 0.5 deri në 1.5mL | na | VialTweeter |
| 1 deri në 500 ml | 10 deri në 200 ml/min | UP100H |
| 10 deri në 2000 ml | 20 deri në 400 ml/min | UP200Ht, UP400 St |
| 0.1 deri në 20L | 0.2 deri në 4L/min | UIP2000hdT |
| 10 deri në 100 litra | 2 deri në 10 l/min | UIP4000 |
| na | 10 deri në 100 l/min | UIP16000 |
| na | më të mëdha | grumbull i UIP16000 |
Na kontaktoni! / Na pyesni!
Protokolle Shtesë për Lizën E. coli me ultratinguj
Proteinat e modifikuara nga alicina në E. coli duke përdorur një VialTweeter tejzanor
Përcaktimi i përmbajtjes së sulfhidrilit me anë të analizës së 5,5'-Dithiobis(2-nitrobenzoic acid) (DTNB)
Një kulturë E. coli MG1655 gjatë natës u përdor për të inokuluar mjedisin minimal MOPS (1:100). Kultura u rrit në mënyrë aerobike derisa u arrit një A600 prej 0.4. Kultura u nda në tre kultura 15 ml për trajtimin e stresit. Një kulturë e patrajtuar shërbeu si një kontroll negativ. 0,79 mM allicin (128 μg ml-1) ose 1 mM diamide iu shtua njërës nga dy kulturat e mbetura secila. Kulturat u inkubuan për 15 min. 5 ml të secilës kulturë u mblodhën me centrifugim (8,525 × g, 4°C, 10 min). Qelizat u lanë dy herë me 1 ml PBS (137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4, pH 7.4, u ruajtën në mënyrë anaerobe përpara përdorimit) dhe u centrifuguan (13,000 × g, 4°C, 10 min). Qelizat u risuspenduan në tampon lize (PBS me 6 mM HCl guanidinium, pH 7.4) përpara ndërprerjes në 4°C me anë të ultrazërit (VialTweeter ultrasonikator, Hielscher GmbH, Gjermani) (3 × 1 min). Mbetjet e qelizave u grumbulluan me centrifugim (13,000 × g, 4 ° C, 15 min). Supernatanti u transferua në një kuvetë makro QS 3,5 ml (10 mm) me një shirit magnetik përzierjeje dhe u përzier me 1 ml tampon lize. Zhdukja e mostrave u monitorua në 412 nm me një spektrofotometër Jasco V-650 të pajisur me mbajtësin e qelizave PSC-718 të kontrolluar nga temperatura në temperaturën e dhomës. U shtuan 100 μl tretësirë 3 mM ditiobis (2-acid nitrobenzoik). Zhdukja u monitorua derisa arriti ngopjen. Llogaritja e përqendrimit të tiolit u krye duke përdorur koeficientin e zhdukjes ϵ412 = 13,700 M-1 cm-1 për acidin tio-2-nitrobenzoik (TNB). Përqendrimet qelizore të tiolit u llogaritën në bazë të një vëllimi të qelizave E. coli prej 6,7 × 10-15 litër dhe një dendësi qelize prej A600 = 0,5 (ekuivalente me 1 × 108 qelizat ml-1 kulturë). (Müller et al. 2016)
Përcaktimi In Vivo Glutathione duke përdorur një Thërrmues qelizash tejzanor
E.coli MG1655 u rrit në mjedis minimal MOPS në një vëllim total prej 200 ml derisa u arrit një A600 prej 0.5. Kultura u nda në kultura 50 ml për trajtimin e stresit. Pas 15 minutash inkubacion me 0,79 mM allicin, 1 mM diamide ose dimetil sulfoksid (kontrolli), qelizat u mblodhën në 4000 g në 4°C për 10 minuta. Qelizat u lanë dy herë me tampon KPE përpara risuspensionit të peletit në 700 μl bufer KPE. Për deproteinim, 300 l acid sulfosalicilik 10% (w/v) u shtuan përpara prishjes së qelizave me anë të ultrazërit (3 x 1 min; VialTweeter ultrasonikator). Supernatantët u mblodhën pas centrifugimit (30 min, 13,000 g, 4°C). Përqendrimet e acidit sulfosalicilik u ulën në 1% me shtimin e 3 vëllimeve të tamponit KPE. Matjet e glutationit total dhe GSSG u kryen siç përshkruhet më sipër. Përqendrimet qelizore të glutationit u llogaritën në bazë të një vëllimi të qelizave E. coli prej 6.7×10-15 litër dhe një dendësi qelize prej A600 0,5 (ekuivalente me 1×108 qelizat ml-1 kulturë). Përqendrimet e GSH u llogaritën duke zbritur 2 [GSSG] nga glutationi total. (Müller et al. 2016)
Shprehja e mAspAT e njeriut në E. coli duke përdorur një homogjenizues tejzanor
Kolonia e vetme e E. coli BL21 (DE3) që strehon vektorin e shprehjes në 30 mL medium Luria-Bertani (LB) që përmban 100μg/mL ampicilinë, dhe më pas kultivohet në 37ºC deri në densitetin optik (OD600) arriti në 0.6. Qelizat u mblodhën me centrifugim në 4000 × g për 10 minuta dhe u risuspenduan në 3L medium LB të freskët që përmban 100μg/mL ampicilinë.
Më pas, shprehja e proteinave u nxit me 1 mM izopropil β-ᴅ-1-tiogalaktopiranozid (IPTG) për 20 orë në 16ºC. Qelizat u mblodhën me centrifugim në 8000 × g për 15 min dhe u lanë me tampon A (20 mM NaH2PO4, 0.5 M NaCl, pH 7.4). Përafërsisht 45 g (peshë të lagësht) qeliza u morën nga kultura 3 L. Pas centrifugimit, peletat qelizore u risuspenduan në 40 mL (për kulturë 1 L) tampon A të ekstraktimit të ftohtë në akull, dhe u lizuan me ultratinguj në temperaturë të ftohtë në akull duke përdorur thërrmuesin e qelizave tejzanor Hielscher UP400St. Liza e qelizave u centrifugua në 12,000 rpm për 15 minuta për të ndarë fraksionet e tretshme (mbipërkatëse) dhe të precipituara (pelet). (Jiang et al. 2015)
Fakte që ia vlen të dihen
E.coli
Escherichia coli (E. coli) është një bakter koliform gram-negativ, fakultativisht anaerobik, në formë shufre, i gjinisë Escherichia që gjendet zakonisht në zorrën e poshtme të organizmave me gjak të ngrohtë (endotermat). Ekziston një numër i madh i shtameve (ose nëntipave) E. coli me karakteristika të ndryshme. Shumica e shtameve të E. coli janë të padëmshme për njerëzit, p.sh. shtamet B dhe K-12 të cilat përdoren zakonisht për aplikime kërkimore në laboratorë. Megjithatë, disa shtame janë të dëmshme dhe mund të shkaktojnë sëmundje serioze.
E. coli luan një rol të rëndësishëm në inxhinierinë moderne biologjike dhe mikrobiologjinë industriale pasi bakteret janë të lehta për t'u manipuluar. Aplikime të zakonshme laboratorike që përfshijnë shpesh përdorimin e E. coli, p.sh. për të krijuar acid deoksiribonukleik rekombinant (ADN) ose për të vepruar si një organizëm model.
E. coli është një pritës shumë i gjithanshëm për prodhimin e proteinave heterologe dhe sistemet e shumëfishta të shprehjes së proteinave janë të disponueshme për të prodhuar proteina rekombinante në E. coli. Duke përdorur plazmide që lejojnë shprehje të nivelit të lartë të proteinave, gjenet mund të futen në baktere, gjë që mundëson prodhimin e proteinave të tilla në sasi të mëdha në proceset e fermentimit industrial.
E.coli përdoren si fabrika të qelizave për të prodhuar insulinë. Zbatime të mëtejshme përfshijnë përdorimin e qelizave të modifikuara E. coli për të zhvilluar dhe prodhuar vaksina dhe enzima të imobilizuara, për të prodhuar biokarburantet, si dhe për bioremediation.
Lloji K-12 është një formë mutante e E. coli që shpreh mbi-shprehjen e enzimës Alkaline Fosfataza (ALP). Ky mutacion ndodh për shkak të një defekti në gjenin që vazhdimisht kodon enzimën. Nëse një gjen prodhon një produkt pa ndonjë frenim, ai njihet si aktivitet konstituiv. Kjo formë specifike mutant përdoret për izolimin dhe pastrimin e enzimës ALP.
Bakteret E. coli përdoren gjithashtu gjerësisht si fabrika të qelizave. Mikrobet e krijuara (p.sh. bakteret) dhe qelizat bimore mund të përdoren si të ashtuquajturat fabrika të qelizave. Këto qeliza të modifikuara gjenetikisht prodhojnë molekula, kimikate, polimere, proteina dhe substanca të tjera, të cilat përdoren për shembull në industrinë farmaceutike, ushqimore dhe kimike. Për të çliruar molekulat e prodhuara në brendësi të qelizave të tilla të bioinxhinieruara, liza tejzanor është një metodë e zakonshme për të prishur muret e qelizave dhe për të transferuar substancat e synuara në lëngun përreth. Lexoni më shumë rreth lizës së qelizave të bioinxhinieruara!
Prerja me ultratinguj e ADN-së
Forcat e prerjes tejzanor janë një metodë e përdorur zakonisht për lirimin e molekulave, organeleve dhe proteinave nga brendësia e qelizës, si dhe për të thyer fijet e ADN-së në copa. Kavitacioni akustik thyen muret dhe membranat qelizore për të nxjerrë ADN-në nga qelizat dhe për të gjeneruar fragmente prej rreth 600 – 800 bp në gjatësi, e cila është ideale për analizë.
Klikoni këtu për të mësuar më shumë rreth homogjenizuesve tejzanor për fragmentimin e ADN-së!
Literatura / Referencat
- Azarnezhad A., Sharifi Z., Seyedabadi R., Hosseini A., Johari B., Sobhani Fard M. (2016): Cloning and Expression of Soluble Recombinant HIV-1 CRF35 Protease-HP Thioredoxin Fusion Protein. Avicenna J Med Biotechnol. 8(4), 2016. 175–181.
- Jiang X., Wang J., Chang H.; Zhou Y. (2016): Recombinant expression, purification and crystallographic studies of the mature form of human mitochondrial aspartate aminotransferase. BioScience Trends 2016.
- Müller A., Eller J., Albrecht F., Prochnow P., Kuhlmann K., Bandow J.E., Slusarenko A.J., Leichert L.I.O. (2016): Allicin Induces Thiol Stress in Bacteria through S-Allylmercapto Modification of Protein Cysteines. Journal of Biological Chemistry Vol. 291, No. 22, 2016. 11477–11490.
- Rabausch U., Juergensen J., Ilmberger N., Böhnke S., Fischer S., Schubach B., Schulte M., Streit W. R. (2013): Functional Screening of Metagenome and Genome Libraries for Detection of Novel Flavonoid-Modifying Enzymes. Applied and Environmental Microbiology 79(15), 2013. 4551–4563.
- Sauer M. (2014): MTV1 Pull-down Assay in Arabidopsis. bio-protocol Vol 4, Iss 12, Jun 20, 2014.
- Waldminghaus T., Skarstad K. (2010): ChIP on Chip: surprising results are often artifacts. BMC Genomics 11, 2010. 414.
Hielscher Ultrasonics prodhon homogjenizues tejzanor me performancë të lartë nga laboratori te madhësia industriale.