Sonikimi për lizën qelizore: Shpërbërja e qelizave dhe ekstraktimi

Liza qelizore me ultratinguj është një teknikë e përgatitjes së mostrave që zbatohet gjerësisht në laboratorët modernë të bioteknologjisë. Qëllimi i saj kryesor është të shpërbëjë membranat qelizore ose qelizat e plota për të çliruar përbërësit brendaqelizorë, si proteinat, acidet nukleike ose organelet. Në punën e përditshme laboratorike, kjo do të thotë se sonikimi është një metodë standarde për shpërbërjen e kontrolluar të qelizave dhe ekstraktimin efikas të biomolekulave. Përparësia kryesore e sonikatorëve qëndron në aftësinë e tyre për të rregulluar me saktësi parametrat kritikë të procesit, përfshirë intensitetin e ultratingujve, pulsimin dhe kontrollin e temperaturës. Ky kontroll u mundëson studiuesve të arrijnë lizë të besueshme duke minimizuar dëmtimin termik ose mekanik të biomolekulave të ndjeshme, duke rezultuar në një proces ekstraktimi të butë, por shumë efikas.

Liza qelizore duke përdorur sonikatorë

Liza qelizore me ultratinguj përdor kavitacionin akustik për të shpërbërë membranat qelizore dhe për të çliruar molekulat brendaqelizore. Hielscher Ultrasonics ofron sonikatorin klasik me sondë, si edhe sonikatorë për shumë mostra për përpunim steril: VialTweeter për disa epruveta dhe flakonë dhe sonikatorin UIP400MTP për pllaka me 96 puse për mikropllaka standarde.

Hielscher Ultrasonics ofron sonikatorë të fuqishëm pa kontakt për përgatitjen e mostrave dhe analizat klinike. Sonikatori UIP400MTP për pllaka me shumë puse, VialTweeter, CupHorn dhe sonikatori me rrjedhje GDmini2 i përpunojnë mostrat në kushte sterile.

Sonikimi me dezintegruesit laboratorikë UP100H dhe UP400St për përgatitjen e mostrave. (homogjenizim, lizë qelizore, ekstraktim)

Homogjenizuesit me ultratinguj UP100H (100 vat) dhe UP400St (400 vat): Sonikimi për lizën qelizore dhe ekstraktimin.

Homogjenizues me ultratinguj për lizën qelizore dhe ekstraktimin

Lloji i pajisjes me ultratinguj	Fokusi i zbatimit	Vëllimi i mostrës	Rasti tipik i përdorimit	Përparësitë	Modele shembull
Sonikatorë me sondë	Sonikimi i një mostre të vetme	0,1 mL deri në ~1000 mL	Liza qelizore, ekstraktimi i proteinave, fragmentimi i DNA/RNA	Kontroll i saktë i energjisë; sonotroda të ndryshme; optimalë për mostra të vogla deri në mesatare	UP100H, UP200St, UP400St
VialTweeter / CupHorn	Përpunimi paralel i disa flakonëve të mbyllur hermetikisht	8–10 flakonë (~1–20 mL secili)	Lizë e standardizuar e disa suspensioneve qelizore	Sonikim i njëtrajtshëm; shmang kontaminimin e kryqëzuar; rezultate të riprodhueshme	VialTweeter, CupHorn
Sonikator për pllaka me 96 puse	Sonikimi i pllakave me shumë puse dhe pllakave të mikrotitrimit	Format mikropllake	Depistim me kapacitet të lartë përpunimi të mostrave, proteomikë, analiza qelizore	Sonikim i njëkohshëm dhe i njëtrajtshëm në të gjitha puset; ideal për rrjedha pune me shumë mostra	UIP400MTP
Reaktorë me dhomë rrjedhjeje	Sonikim i vazhdueshëm për vëllime më të mëdha	>1 L, i shkallëzueshëm	Shpërbërja e qelizave në shkallë industriale, prodhimi i ekstrakteve	Përpunim i vazhdueshëm; i shkallëzueshëm; kontroll i plotë i procesit (amplitudë, presion, temperaturë)	UIP1000hdT, UIP2000hdT + dhomë rrjedhjeje
Sisteme sonikimi steril / të tërthortë	Përpunim i mostrave pa kontaminim	Në varësi të flakonit/epruvetës/mikropllakës	Mostra të ndjeshme, mjedise sterile, mjedise që u nënshtrohen kërkesave rregullatore	Pa kontakt me sondën; shmang mbartjen e mbetjeve nga një mostër te tjetra; përpjekje minimale për pastrim	VialTweeter, CupHorn, UIP400MTP

Përparësitë e përdorimit të sonikimit për lizën qelizore

Krahasuar me metodat e tjera të lizës qelizore dhe ekstraktimit, liza qelizore me ultratinguj ka disa përparësi:

Shpejtësia: Liza qelizore dhe ekstraktimi me ultratinguj është një metodë e shpejtë që mund t’i çajë qelizat brenda pak sekondash. Kjo është shumë më e shpejtë se metodat e tjera, si homogjenizimi, ngrirja dhe shkrirja ose bluarja me rruaza.
Efikasiteti: Liza qelizore dhe ekstraktimi me ultratinguj mund të përdoret për të trajtuar mostra të vogla, të mëdha ose disa mostra njëherësh, duke e bërë këtë metodë më efikase se metodat e tjera që kërkojnë përpunimin individual të mostrave të vogla.
Pa kimikate: Liza qelizore dhe ekstraktimi me ultratinguj është një metodë joinvazive që nuk kërkon përdorimin e kimikateve agresive ose enzimave. Kjo e bën ideale për zbatime ku duhet të ruhet integriteti i përmbajtjes qelizore. Kontaminimi i padëshiruar i mostrave mund të shmanget.
Rendimenti i lartë: Liza qelizore dhe ekstraktimi me ultratinguj mund të sigurojë një rendiment të lartë të ekstraktimit të përmbajtjes qelizore, përfshirë DNA, RNA dhe proteinat. Kjo ndodh sepse valët zanore me frekuencë të lartë i çajnë muret qelizore dhe e çlirojnë përmbajtjen në tretësirën përreth.
Kontrolli i temperaturës: Ultrasonikatorët e sofistikuar mundësojnë kontroll të saktë të temperaturës së mostrës. Sonikatorët digjitalë Hielscher janë të pajisur me një sensor temperature që lidhet me prizë dhe me softuer për monitorimin e temperaturës.
E riprodhueshme: Protokollet për lizën qelizore me ultratinguj mund të riprodhohen lehtësisht dhe madje të përshtaten për vëllime të ndryshme mostrash, më të mëdha ose më të vogla, përmes një rritjeje të thjeshtë lineare të shkallës.
E gjithanshme: Liza dhe ekstraktimi qelizor me ultratinguj mund të përdoren për të ekstraktuar një gamë të gjerë llojesh qelizash, përfshirë bakteret, majatë, kërpudhat, qelizat bimore dhe ato të gjitarëve. Ato mund të përdoren gjithashtu për të ekstraktuar lloje të ndryshme molekulash, përfshirë proteinat, DNA, RNA dhe lipidet.
Përgatitja e njëkohshme e shumë mostrave: Hielscher Ultrasonics ofron disa zgjidhje për përpunimin me lehtësi të shumë mostrave në kushte procesi saktësisht të njëjta. Kjo e bën hapin e përgatitjes së mostrave përmes lizës dhe ekstraktimit shumë efikas dhe kursen kohë.
E lehtë për t’u përdorur: Pajisjet për lizën dhe ekstraktimin qelizor me ultratinguj janë të lehta për t’u përdorur dhe kërkojnë trajnim minimal. Pajisjet janë gjithashtu ekonomike, pasi përbëjnë një investim të vetëm pa nevojën për të riblerë materiale njëpërdorimëshe. Kjo i bën ato tërheqëse për një gamë të gjerë studiuesish dhe laboratorësh.

Në përgjithësi, liza dhe ekstraktimi qelizor me ultratinguj janë një metodë e shpejtë, efikase, e kontrollueshme me saktësi dhe e gjithanshme për ekstraktimin e përmbajtjes qelizore. Përparësitë e saj ndaj metodave alternative e bëjnë atë një zgjedhje tërheqëse për një gamë të gjerë zbatimesh kërkimore dhe industriale.

Ky udhëzues shpjegon cili lloj sonikatori është më i përshtatshëm për detyrat tuaja të përgatitjes së mostrave, si liza, shpërbërja e qelizave, izolimi i proteinave dhe fragmentimi i ADN-së dhe ARN-së në laboratorë, analiza dhe kërkime shkencore. Zgjidhni llojin ideal të sonikatorit sipas zbatimit tuaj, vëllimit të mostrës, numrit të mostrave dhe kapacitetit të përpunimit. Hielscher Ultrasonics ka homogjenizuesin ultrasonik ideal për ju!

Parimi i funksionimit të lizës qelizore me ultratinguj

Liza dhe ekstraktimi qelizor me ultratinguj përdorin valë zanore me frekuencë të lartë për të shpërbërë qelizat dhe për të ekstraktuar përmbajtjen e tyre. Valët zanore krijojnë ndryshime presioni në lëngun përreth, duke shkaktuar formimin dhe kolapsin e flluskave të vogla në një proces të njohur si kavitacion. Këto flluska krijojnë forca mekanike të lokalizuara me intensitet shumë të lartë, të cilat mund t’i çajnë qelizat dhe të çlirojnë përmbajtjen e tyre në tretësirën përreth.

Liza qelizore me një ultrasonikator zakonisht përfshin hapat e mëposhtëm:

Mostra vendoset në një epruvetë ose enë me një tretësirë tampon.
Një sondë ultrasonike futet në mostër dhe zbatohen valë zanore me frekuencë të lartë, afërsisht 20–30 kHz.
Valët ultrasonike shkaktojnë lëkundje dhe kavitacion në lëngun përreth, duke krijuar forca të lokalizuara që çajnë qelizat dhe çlirojnë përmbajtjen e tyre.
Mostra centrifugohet ose filtrohet për të larguar çdo mbetje qelizore dhe përmbajtja e ekstraktuar mblidhet për analiza të mëtejshme.

Mangësitë e metodave të zakonshme të lizës

Gjatë punës suaj në laboratorë, mund të keni hasur tashmë vështirësitë e lizës qelizore duke përdorur protokolle tradicionale të lizës mekanike ose kimike.

Liza mekanike: Metodave të lizës mekanike, si bluarja me havan dhe shtypës ose homogjenizimi me një presë franceze, mulli me rruaza ose sistem rotor-stator, shpesh u mungojnë mundësitë për kontroll dhe rregullim të saktë. Kjo do të thotë se përdorimi i mullinjve dhe bluarjes mund të gjenerojë shpejt nxehtësi dhe forca prerëse që mund të dëmtojnë mostrën dhe të denatyrojnë proteinat. Këto metoda gjithashtu mund të kërkojnë shumë kohë dhe sasi të mëdha materiali fillestar.
Liza kimike: Metodat e lizës kimike, si liza me bazë detergjenti, mund ta dëmtojnë mostrën duke prishur shtresën e dyfishtë lipidike dhe duke denatyruar proteinat. Ato gjithashtu mund të kërkojnë hapa të shumtë dhe mund të lënë ndotës të mbetur që ndërhyjnë në zbatimet e mëtejshme. Gjetja e dozës optimale të detergjentit është një sfidë shtesë.
Ciklet e ngrirjes dhe shkrirjes: Ciklet e ngrirjes dhe shkrirjes mund të shkaktojnë çarjen e membranave qelizore, por ciklet e përsëritura mund të shkaktojnë gjithashtu denatyrimin dhe degradimin e proteinave. Kjo metodë gjithashtu mund të kërkojë cikle të shumta, gjë që mund të marrë shumë kohë dhe shpesh rezulton në rendimente më të ulëta.
Liza enzimatike: Metodat e lizës enzimatike mund të jenë specifike për lloje të caktuara qelizash dhe të kërkojnë disa hapa, gjë që i bën ato të marrin shumë kohë. Ato gjithashtu gjenerojnë mbetje dhe kërkojnë optimizim të kujdesshëm për të shmangur degradimin e mostrës. Kompletet për lizë enzimatike shpesh janë të shtrenjta. Nëse procedura juaj aktuale e lizës enzimatike jep rezultate të pamjaftueshme, sonikimi mund të zbatohet si metodë sinergjike për të intensifikuar shpërbërjen e qelizave.

Në krahasim me metodat konvencionale mekanike dhe kimike të lizës qelizore, sonikimi është një mjet shumë efikas dhe i besueshëm për shpërbërjen e qelizave, i cili mundëson kontroll të plotë mbi parametrat e sonikimit. Kjo siguron selektivitet të lartë në çlirimin e materialeve dhe pastërti të lartë të produktit. [cf. Balasundaram et al., 2009]
Ai është i përshtatshëm për të gjitha llojet e qelizave dhe zbatohet lehtësisht në shkallë të vogël dhe të madhe – gjithmonë në kushte të kontrolluara. Pajisjet sonikuese pastrohen lehtë. Një homogjenizues ultrasonik ka gjithmonë funksionet e pastrimit në vend (CIP) dhe sterilizimit në vend (SIP). Sonotroda përbëhet nga një bri masiv prej titani, i cili mund të pastrohet me fshirje ose të shpëlahet me ujë apo tretës (në varësi të mjedisit të punës). Falë qëndrueshmërisë së tyre, pajisjet sonikuese kërkojnë mirëmbajtje pothuajse të papërfillshme.

Liza me ultratinguj dhe shpërbërja e qelizave

Në përgjithësi, liza e mostrave në laborator zgjat nga 15 sekonda deri në 2 minuta. Meqenëse intensiteti i sonikimit rregullohet shumë lehtë duke caktuar amplitudën dhe kohën e sonikimit, si dhe duke zgjedhur pajisjen e duhur, membranat qelizore mund të shpërbëhen shumë butësisht ose shumë vrullshëm, në varësi të strukturës qelizore dhe qëllimit të lizës (p.sh. ekstraktimi i DNA kërkon sonikim më të butë, ndërsa ekstraktimi i plotë i proteinave nga bakteret kërkon trajtim më intensiv me ultratinguj). Temperatura gjatë procesit mund të monitorohet me një sensor të integruar të temperaturës dhe mund të kontrollohet lehtësisht nëpërmjet ftohjes (banjë akulli ose qeliza rrjedhjeje me këmisha ftohëse) ose nëpërmjet sonikimit në regjim pulsues. Gjatë sonikimit në regjim pulsues, ciklet e shkurtra të impulseve të sonikimit me kohëzgjatje 1–15 sekonda mundësojnë shpërndarjen e nxehtësisë dhe ftohjen gjatë intervaleve më të gjata ndërmjet tyre.
Të gjitha proceset e nxitura nga ultratingujt janë plotësisht të riprodhueshme dhe mund të shkallëzohen në mënyrë lineare.

VialTweeter është një sonikator për shumë mostra që mundëson homogjenizimin e besueshëm të mostrave në kushte sterile.

VialTweeter është një homogjenizues ultrasonik për përgatitjen sterile të shumë mostrave njëkohësisht, në mënyrë të njëtrajtshme dhe të shpejtë.

Shembull procedure për lizën e qelizave bakteriale me ultratinguj:

Përgatitja e suspensionit qelizor: Sedimentet qelizore duhet të suspendohen plotësisht në një tretësirë tampon përmes homogjenizimit (zgjidhni një tretësirë tampon të pajtueshme me analizën pasuese, p.sh. një metodë specifike kromatografike). Shtoni lizozima dhe/ ose aditivë të tjerë, nëse nevojiten (edhe ata duhet të jenë të pajtueshëm me mjetet e ndarjes/ pastrimit). Përziejeni/ homogjenizojeni tretësirën me kujdes, duke përdorur sonikim të butë, derisa të arrihet suspendimi i plotë.
Lexoni më shumë rreth sinergjive të lizozimave të kombinuara me sonikimin!
Liza me ultratinguj: Vendoseni mostrën në një banjë akulli. Për shpërbërjen e qelizave, sonikojeni suspensionin me impulse prej 60–90 sekondash (duke përdorur regjimin pulsues të pajisjes suaj sonikuese).
Ndarja: Centrifugojeni lizatin (p.sh. 10 min. në 10 000 x g; në 4degC). Ndajeni me kujdes supernatantin nga sedimenti qelizor. Supernatanti është lizati i plotë qelizor. Pas filtrimit të supernatantit, përftoni një lëng të kthjelluar që përmban proteinën qelizore të tretshme.

Videoja paraqet sistemin ultrasonik UIP400MTP për përgatitjen e mostrave, i cili mundëson përgatitjen e besueshme të mostrave në çdo pllakë standarde me shumë puse duke përdorur ultratinguj me intensitet të lartë. Zbatimet tipike të UIP400MTP përfshijnë lizën qelizore, fragmentimin e ADN-së, ARN-së dhe kromatinës, si dhe ekstraktimin e proteinave.

Zbatimet më të zakonshme të pajisjeve sonikuese në biologji dhe bioteknologji janë:

Përgatitja e ekstrakteve qelizore
Shpërbërja e majave, baktereve, qelizave bimore, indeve qelizore të buta ose të forta, materialit nukleik
Ekstraktimi i proteinave
Përgatitja dhe izolimi i enzimave
Prodhimi i antigjeneve
Ekstraktimi i DNA dhe/ ose fragmentimi i synuar
Përgatitja e liposomeve

Shpërbërja e qelizave, liza dhe ekstraktimi me ultratinguj janë një metodë efikase për përgatitjen e mostrave në laboratorë.

Shpërbërja e qelizave me një pajisje sonikuese me sondë është një metodë efikase për përgatitjen e mostrave.

Tema të lidhura

Zbatimet e shumta të ultratingujve shtrihen në sektorët e bioteknologjisë, bioinxhinierisë, mikrobiologjisë, biologjisë molekulare, biokimisë, imunologjisë, bakteriologjisë, virologjisë, proteomikës, gjenetikës, fiziologjisë, biologjisë qelizore, hematologjisë dhe botanikës.

Liza: Shpërbërja e strukturave qelizore

Qelizat mbrohen nga një membranë plazmatike gjysmë e përshkueshme, e cila përbëhet nga një shtresë e dyfishtë fosfolipidike (gjithashtu shtresë e dyfishtë proteinë-lipid; e formuar nga lipide hidrofobe dhe molekula hidrofile të fosforit, me molekula proteinike të integruara) dhe krijon një barrierë ndërmjet brendësisë së qelizës (citoplazmës) dhe mjedisit jashtëqelizor. Qelizat bimore dhe qelizat prokariote rrethohen nga një mur qelizor. Për shkak të murit të trashë qelizor të përbërë nga shumë shtresa celuloze, qelizat bimore lizohen më vështirë sesa qelizat shtazore. Brendësia e qelizës, si organelet, bërthama dhe mitokondria, stabilizohet nga citoskeleti.
Lizimi i qelizave synon nxjerrjen dhe ndarjen e organeleve, proteinave, DNA-së, mRNA-së ose biomolekulave të tjera.

Metodat konvencionale të lizës qelizore dhe mangësitë e tyre

Ekzistojnë disa metoda për lizimin e qelizave, të cilat mund të ndahen në metoda mekanike dhe kimike dhe përfshijnë përdorimin e detergjenteve ose tretësve, zbatimin e presionit të lartë ose përdorimin e një mulliri me rruaza apo të një prese franceze. Mangësia më problematike e këtyre metodave është vështirësia në kontrollin dhe rregullimin e parametrave të procesit dhe, rrjedhimisht, të ndikimit të tyre.
Tabela më poshtë paraqet mangësitë kryesore të metodave të zakonshme të lizës:

Tabela rendit metodat konvencionale të shpërbërjes dhe lizës së qelizave dhe paraqet disavantazhet kryesore të secilës metodë.

Tabela: Metodat konvencionale të lizës qelizore kanë mangësi të mëdha

Procedura e lizës

Liza është një proces delikat. Gjatë lizës shkatërrohet mbrojtja që ofron membrana qelizore, megjithatë duhet të parandalohet inaktivizimi, denatyrimi dhe degradimi i proteinave të nxjerra nga një mjedis jofiziologjik (devijim nga vlera e pH-së). Prandaj, në përgjithësi, liza kryhet në një tretësirë tampon. Shumica e vështirësive lindin nga shpërbërja e pakontrolluar e qelizave, e cila çon në çlirimin pa përzgjedhje të të gjithë materialit brendaqelizor ose/dhe në denatyrimin e produktit të synuar.

Pyetje të shpeshta rreth sonikimit dhe lizës qelizore

A mund të lizohen qelizat me sonikim? Po, sonikimi i lizon në mënyrë efektive qelizat duke përdorur valë ultrasonike me frekuencë të lartë që shkaktojnë kavitacion, një dukuri gjatë së cilës flluska të imëta avulli formohen dhe shemben vrullshëm brenda suspensionit qelizor. Forcat mekanike që rezultojnë shpërbëjnë membranat qelizore dhe lehtësojnë çlirimin e përbërësve brendaqelizorë në lëng.
Si përdoret një sonikator për lizën qelizore? Përdorimi i një sonikatori për lizën qelizore përfshin zhytjen e sondës së sonikatorit në një suspension qelizor dhe rregullimin e parametrave si amplituda dhe kohëzgjatja e pulsit. Procesi duhet të monitorohet nga afër për të optimizuar shpërbërjen e qelizave, duke minimizuar njëkohësisht denatyrimin e proteinave dhe inaktivizimin e enzimave.
Cili është parimi i sonikimit për lizën qelizore? Sonikimi funksionon sipas parimit të kavitacionit akustik. Energjia ultrasonike transmetohet në mjedisin e lëngshëm, duke shkaktuar luhatje të shpejta të presionit që çojnë në formimin dhe shembjen nga brenda të mikroflluskave. Këto shembje krijojnë forca prerëse intensive dhe temperatura të larta të lokalizuara, duke shpërbërë strukturat qelizore dhe duke rritur homogjenitetin e lizatit.
Sa zgjat sonikimi për lizën qelizore? Kohëzgjatja e sonikimit për lizën qelizore mund të ndryshojë ndjeshëm në varësi të faktorëve si lloji i qelizave, dendësia qelizore, fuqia e sonikatorit dhe protokolli specifik i përdorur. Procedurat tipike mund të zgjasin nga disa sekonda deri në pak minuta dhe shpesh kryhen në cikle për të menaxhuar gjenerimin e nxehtësisë dhe për të siguruar shpërbërje uniforme të qelizave.
Cili është qëllimi i sonikimit në nxjerrjen e proteinave? Në nxjerrjen e proteinave, sonikimi shërben për të çarë me efikasitet membranat qelizore dhe për t’i bërë proteinat të tretshme. Kjo metodë është veçanërisht e dobishme për çlirimin e proteinave nga brendësia e ndarjeve qelizore, gjë që e bën thelbësore për përgatitjen e lizateve nga të cilat proteinat do të pastrohen ose analizohen.
Pse përdoret sonikimi për nxjerrje? Sonikimi parapëlqehet për nxjerrje për shkak të veprimit të tij të shpejtë dhe aftësisë për të aplikuar energji në mënyrë të synuar, duke shpërbërë strukturat qelizore për të çliruar molekula bioaktive pa përdorur trajtime kimike agresive dhe duke ruajtur kështu integritetin funksional të përbërjeve të nxjerra.
A i prish sonikimi ndërveprimet proteinë–proteinë? Ndonëse sonikimi mund t’i shpërbëjë në mënyrë efektive membranat qelizore, ai mund të prishë edhe ndërveprimet proteinë–proteinë. Shkalla e prishjes varet nga intensiteti i sonikimit dhe kohëzgjatja e ekspozimit, duke çuar potencialisht në denatyrimin ose disociimin e komplekseve proteinike, gjë që mund të ndikojë në studimet e mëvonshme analitike ose funksionale.
A mund të përdoret sonikimi për lizën e E. coli? Sonikatorët Hielscher janë veçanërisht efektivë për lizën e qelizave bakteriale si E. coli, të cilat kanë mure qelizore të forta. Kjo teknikë ofron një metodë fizike për të çarë murin dhe membranën qelizore me forca prerëse, duke e bërë atë një metodë të parapëlqyer për përgatitjen e lizateve bakteriale në laboratorët e biologjisë molekulare dhe biokimisë.
Cilat janë proceset pasuese pas hapit të sonikimit?
Hapat pasues pas lizës me ultratinguj zakonisht përfshijnë fraksionimin e lizatit, izolimin e synuar të organeleve dhe ekstraktimin ose pastrimin e mëtejshëm të proteinave.
Lizati i përpunuar më pas ndahet dhe përgatitet për aplikime analitike ose funksionale, si proteomika me rezolucion të lartë, transkriptomika ose studimet e lidhjes me receptorët.

Literatura/Referencat

Balasundaram, B.; Harrison, S.; Bracewell, D. G. (2009): Advances in product release strategies and impact on bioprocess design. Trends in Biotechnology 27/8, 2009. pp. 477-485.
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrasonic Recovery and Modification of Food ingredients. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.