Sonication për lizën e qelizave: Përçarja dhe nxjerrja e qelizave
Liza e qelizave tejzanor është një procedurë e përgatitjes së mostrës në laboratorët bioteknikë. Qëllimi është të prishen muret qelizore ose qelizat e tëra për të lëshuar molekula biologjike. Sonicizimi përdoret zakonisht për lizën e qelizave, përçarjen dhe nxjerrjen e qelizave. Avantazhi kryesor i sonikatorëve për lizën e qelizave qëndron në kontrollin e saktë të parametrave të procesit, të tilla si intensiteti dhe temperatura, duke lejuar përçarje dhe nxjerrje të butë por efikase të qelizave.
Liza e qelizave duke përdorur ultratinguj
Liza e qelizave tejzanor përdor valë zanore me frekuencë të lartë për të thyer qelizat e hapura dhe për të nxjerrë përmbajtjen e tyre. Sonicizimi është krijuar dhe i besueshëm për përçarjen e qelizave dhe nxjerrjen e materialit ndërqelizor, të tilla si plazmidet, analizat e receptorëve, proteinat, ADN-ja dhe ARN-ja. Duke rregulluar parametrat e procesit, intensiteti tejzanor mund të akordohet mirë për të përmbushur kërkesat specifike të aplikimit, duke filluar nga sonikimi i butë deri tek ai intensiv. Hapat pas lizës përfshijnë fraksionimin, izolimin e organeleve dhe nxjerrjen dhe pastrimin e proteinave. Lizati që rezulton duhet të ndahet për hetime ose aplikime të mëtejshme, të tilla si kërkimi proteomik.
Nëse dëshironi të mësoni më shumë rreth sonikimit për lizën, përçarjen dhe nxjerrjen e qelizave, ju lutemi na kontaktoni. Ekipi ynë teknik do të jetë i lumtur të punojë me ju në projektin tuaj të lizës së qelizave.
Homogjenizues tejzanor UP100H (100 watts) dhe UP400St (400 watts): Sonication për lizën dhe nxjerrjen e qelizave.
Avantazhet e përdorimit të sonication për lizën e qelizave
Krahasuar me metodat e tjera të lizës dhe nxjerrjes së qelizave, liza e qelizave tejzanor ka disa përparësi:
- Shpejtësia: Liza dhe nxjerrja e qelizave tejzanor është një metodë e shpejtë që mund të thyejë qelizat e hapura në disa sekonda. Kjo është shumë më e shpejtë se metodat e tjera si homogjenizimi, ngrirja-shkrirja ose bluarja me rruaza.
- Efikasiteti: Liza dhe nxjerrja e qelizave tejzanor mund të përdoret për të trajtuar mostra të vogla, të mëdha ose të shumta në të njëjtën kohë, duke e bërë atë më efikase se metodat e tjera që kërkojnë përpunim individual të mostrave të vogla.
- Pa kimikate: Liza dhe ekstraktimi i qelizave tejzanor është një metodë joinvazive që nuk kërkon përdorimin e kimikateve të ashpra ose enzimave. Kjo e bën atë ideal për aplikacionet ku duhet të ruhet integriteti i përmbajtjes së qelizës. Mund të shmanget ndotja e padëshiruar e mostrave.
- Rendiment i lartë: Liza dhe nxjerrja e qelizave tejzanor mund të nxjerrë një rendiment të lartë të përmbajtjes qelizore, duke përfshirë ADN-në, ARN-në dhe proteinat. Kjo ndodh sepse valët e zërit me frekuencë të lartë thyejnë muret e qelizave dhe e lëshojnë përmbajtjen në tretësirën përreth.
- Kontrolli i temperaturës: Ultrasonciatorët e sofistikuar lejojnë kontrollin e saktë të temperaturës së mostrës. Sonicers dixhitale Hielscher janë të pajisur me një sensor të mbyllshëm të temperaturës dhe softuer për monitorimin e temperaturës.
- E riprodhueshme: Protokollet për lizën e qelizave tejzanor mund të riprodhohen lehtësisht dhe madje të përputhen me vëllime të ndryshme të mostrave më të mëdha ose më të vogla me një shkallëzim të thjeshtë linear.
- I gjithanshëm: Liza dhe nxjerrja e qelizave tejzanor mund të përdoret për të nxjerrë një gamë të gjerë të llojeve të qelizave, duke përfshirë bakteret, majat, kërpudhat, qelizat bimore dhe gjitarët. Mund të përdoret gjithashtu për nxjerrjen e llojeve të ndryshme të molekulave, duke përfshirë proteinat, ADN-në, ARN-në dhe lipidet.
- Përgatitja e njëkohshme e mostrave të shumta: Hielscher Ultrasonics ofron disa zgjidhje për të përpunuar me lehtësi mostra të shumta nën të njëjtat kushte procesi. Kjo e bën hapin e përgatitjes së kampionit të lizës dhe nxjerrjes shumë efikas dhe të kursyer në kohë.
- Lehtë për t'u përdorur: Pajisjet tejzanor të lizës dhe nxjerrjes së qelizave janë të lehta për t'u përdorur dhe kërkojnë trajnim minimal. Pajisja është gjithashtu ekonomike pasi është një investim i vetëm pa kërkesë për riblerje të asgjësimit. Kjo e bën atë tërheqës për një gamë të gjerë studiuesish dhe laboratorësh.
Në përgjithësi, liza dhe nxjerrja e qelizave tejzanor është një metodë e shpejtë, efikase, e kontrollueshme saktësisht dhe e gjithanshme për nxjerrjen e përmbajtjeve qelizore. Përparësitë e tij ndaj metodave alternative e bëjnë atë një zgjedhje tërheqëse për një gamë të gjerë kërkimesh dhe aplikimesh industriale.
Parimi i punës së lizës së qelizave tejzanor
Liza dhe nxjerrja e qelizave tejzanor përdor valë zanore me frekuencë të lartë për të prishur qelizat dhe për të nxjerrë përmbajtjen e tyre. Valët e zërit krijojnë ndryshime presioni në lëngun përreth, duke shkaktuar formimin dhe kolapsin e flluskave të vogla në një proces të njohur si kavitacion. Këto flluska gjenerojnë forca mekanike të lokalizuara shumë intensive që mund të thyejnë qelizat e hapura dhe të lëshojnë përmbajtjen e tyre në tretësirën përreth.
Liza e qelizave duke përdorur një ultrasonikë zakonisht përfshin hapat e mëposhtëm:
- Mostra vendoset në një tub ose enë me një tampon të lëngshëm.
- Një sondë tejzanor është futur në mostër dhe valë zanore me frekuencë të lartë me përafërsisht. Aplikohen 20-30 kHz.
- Valët e ultrazërit shkaktojnë lëkundje dhe kavitacion në lëngun përreth, duke gjeneruar forca të lokalizuara që thyejnë qelizat e hapura dhe lëshojnë përmbajtjen e tyre.
- Mostra centrifugohet ose filtrohet për të hequr çdo mbetje qelizore dhe përmbajtja e nxjerrë mblidhet për analizë në rrjedhën e poshtme.
Valët e fuqishme të ultrazërit prishin matricën qelizore të strukturave biologjike dhe çlirojnë përbërjet bioaktive. Transferimi i masës ndërmjet materialit bimor dhe tretësit (p.sh. tampon) është intensifikuar. (grafika: ©Vilkhu et al., 2006)
Disavantazhet e metodave të zakonshme të lizës
Gjatë punës tuaj në laboratorë, mund ta keni përjetuar tashmë mundimin e lizës së qelizave duke përdorur protokollet tradicionale të lizës mekanike ose kimike.
- Liza mekanike: Metodat mekanike të lizës, të tilla si bluarja me llaç dhe shtypës ose homogjenizimi duke përdorur një shtypje franceze, mulli me rruaza ose një sistem rotor-stator, shpesh u mungojnë opsionet e kontrollit dhe rregullimit të saktë. Kjo do të thotë se përdorimi i bluarjes dhe bluarjes mund të gjenerojë shpejt nxehtësi dhe forca prerëse që mund të dëmtojnë kampionin dhe të denatyrojnë proteinat. Ato gjithashtu mund të kërkojnë kohë dhe kërkojnë sasi të mëdha të materialit fillestar.
- Liza kimike: Metodat e lizës kimike, të tilla si liza me bazë detergjenti, mund të dëmtojnë kampionin duke prishur shtresën e dyfishtë lipidike dhe duke denatyruar proteinat. Ato gjithashtu mund të kërkojnë hapa të shumëfishtë dhe mund të lënë ndotës të mbetur që ndërhyjnë në aplikimet në rrjedhën e poshtme. Gjetja e dozës optimale të detergjentit është një sfidë shtesë.
- Ciklet e ngrirjes-shkrirjes: Ciklet e ngrirjes-shkrirjes mund të shkaktojnë këputje të membranave qelizore, por ciklet e përsëritura mund të shkaktojnë gjithashtu denatyrim dhe degradim të proteinave. Kjo metodë mund të kërkojë gjithashtu cikle të shumta, të cilat mund të kërkojnë kohë dhe shpesh rezulton në rendimente më të ulëta.
- Liza enzimatike: Metodat e lizës enzimatike mund të jenë specifike për disa lloje qelizash dhe kërkojnë hapa të shumtë, duke i bërë ato të konsumojnë kohë. Ato gjenerojnë gjithashtu mbetje dhe kërkojnë optimizim të kujdesshëm për të shmangur degradimin e kampionit. Kompletet e lizës enzimatike shpesh janë të shtrenjta. Nëse procedura juaj aktuale e lizës enzimatike jep rezultate të pamjaftueshme, sonikimi si metodë sinergjike mund të aplikohet për të intensifikuar përçarjen e qelizave.
Në kontrast me metodat konvencionale të lizës së qelizave mekanike dhe kimike, sonikimi është një mjet shumë efikas dhe i besueshëm për shpërbërjen e qelizave që lejon një kontroll të plotë mbi parametrat e sonikimit. Kjo siguron një selektivitet të lartë në çlirimin e materialeve dhe pastërtinë e produktit. [krh. Balasundaram et al., 2009]
Është i përshtatshëm për të gjitha llojet e qelizave dhe lehtësisht i zbatueshëm në shkallë të vogël dhe të madhe – gjithmonë në kushte të kontrolluara. Ultrasonikët janë të lehtë për t'u pastruar. Një homogjenizues tejzanor ka gjithmonë funksionin e pastrimit në vend (CIP) dhe sterilizimit në vend (SIP). Sonotrode përbëhet nga një bri masiv titani i cili mund të fshihet ose të shpërlahet në ujë ose tretës (në varësi të mjedisit të punës). Mirëmbajtja e ultrazërit është për shkak të qëndrueshmërisë së tyre pothuajse të neglizhueshme.
Liza tejzanor dhe prishja e qelizave
Në përgjithësi, liza e mostrave në laborator do të zgjasë nga 15 sekonda deri në 2 minuta. Meqenëse intensiteti i sonikacionit është shumë i lehtë për t'u rregulluar duke vendosur amplitudë një kohë të sonikimit, si dhe duke zgjedhur pajisjen e duhur, është e mundur që membranat qelizore të prishen shumë butësisht ose shumë papritur, në varësi të strukturës së qelizës dhe qëllimit të lizës ( p.sh. nxjerrja e ADN-së kërkon sonikacion më të butë, ekstraktimi i plotë i proteinave të baktereve kërkon një trajtim më intensiv me ultratinguj). Temperatura gjatë procesit mund të monitorohet nga një sensor i integruar i temperaturës dhe mund të kontrollohet lehtësisht me ftohje (banjë akulli ose qeliza rrjedhëse me xhaketa ftohëse) ose me sonikacion në modalitetin pulsues. Gjatë tingullit në modalitetin e pulsit, ciklet e shkurtra të shpërthimit të tingullit me kohëzgjatje 1-15 sekonda lejojnë shpërndarjen e nxehtësisë dhe ftohjen gjatë periudhave më të gjata me ndërprerje.
Të gjitha proceset e drejtuara nga ultrazërit janë plotësisht të riprodhueshme dhe të shkallëzueshme në mënyrë lineare.
VialTweeter është një homogjenizues tejzanor për përgatitjen sterile të njëkohshme, uniforme dhe të shpejtë të mostrave të shumta.
Homogjenizues tejzanor për lizën dhe nxjerrjen e qelizave
Lloje të ndryshme pajisjesh tejzanor mundësojnë përputhjen me qëllimin e përgatitjes së kampionit dhe për të siguruar lehtësinë e përdorimit dhe komoditetin e funksionimit. Ultrasonikët e tipit sonda janë pajisjet më të zakonshme në laborator. Ato janë më të përshtatshmet për përgatitjen e mostrave të vogla dhe të mesme me vëllime nga 0.1mL deri në 1000mL. Madhësi të ndryshme të fuqisë dhe sonotrode lejojnë përshtatjen e ultrazërit me vëllimin e mostrës dhe enën për rezultatet më efektive dhe efikase të sonikimit. Pajisja e sondës tejzanor është zgjidhja më e mirë kur duhet të përgatiten mostra të vetme.
Nëse duhet të përgatiten më shumë mostra, p.sh. 8-10 shishe me tretësirë qelizore, një sonikacion intensiv indirekt me sisteme ultrasonike si VialTweeter ose një kupë tejzanor janë metoda më e përshtatshme e homogjenizimit për një lizë efikase. Disa shishe sonikohen në të njëjtën kohë, me të njëjtin intensitet. Kjo kursen jo vetëm kohë, por siguron edhe trajtim të njëjtë të të gjitha mostrave, gjë që i bën rezultatet midis mostrave të besueshme dhe të krahasueshme. Për më tepër, gjatë sonikacionit indirekt shmanget kontaminimi i kryqëzuar duke zhytur sonotrode tejzanor (i njohur edhe si sonda tejzanor, bri, majë ose gisht). Meqenëse përdoren shishka të përputhura individualisht me madhësinë e kampionit, pastrimi që kërkon shumë kohë dhe humbja e kampionit për shkak të dekantimit të enëve janë anashkaluar. Për sonikimin uniform të pllakave me shumë pus ose mikrotitër, Hielscher ofron UIP400MTP.
Për vëllime më të larta, p.sh. për prodhimin komercial të ekstrakteve të qelizave, sistemet tejzanor të vazhdueshëm me një reaktor të qelizave rrjedhëse janë më të përshtatshmet. Rrjedha e vazhdueshme dhe e barabartë e materialit të përpunuar siguron një sonikacion të barabartë. Të gjithë parametrat e procesit të shpërbërjes tejzanor mund të optimizohen dhe përshtaten sipas kërkesave të aplikacionit dhe materialit specifik të qelizave.
Procedura shembullore për lizimin tejzanor të qelizave bakteriale:
- Përgatitja e suspensionit qelizor: Peletat e qelizave duhet të pezullohen plotësisht në një tretësirë tampon duke homogjenizuar (zgjidhni tretësirën tuaj tampon të pajtueshme me analizat e mëposhtme, p.sh. metodën specifike të kromatografisë). Shtoni lizozima dhe/ose aditivë të tjerë, nëse nevojitet (ato duhet të jenë gjithashtu në përputhje me mjetet e ndarjes/purifikimit). Përzieni/homogjenizoni tretësirën butësisht nën sonikacion të lehtë derisa të arrihet pezullimi i plotë.
- Liza tejzanor: Vendoseni kampionin në një banjë akulli. Për ndërprerjen e qelizave, sonikoni pezullimin me breshëri 60-90 sekondash (duke përdorur modalitetin e pulsit të sonikatorit tuaj).
- Ndarja: Centrifugoni lizatin (p.sh. 10 min. në 10,000 xg; në 4 gradë C). Ndani me kujdes supernatantin nga peleti i qelizës. Supernatanti është lizati total i qelizave. Pas filtrimit të supernatantit, ju merrni një lëng të qartë të proteinës së qelizës së tretshme.
Aplikimet më të zakonshme për ultratinguj në biologji dhe bioteknologji janë:
- Përgatitja e ekstraktit të qelizave
- Përçarje e majave, baktereve, qelizave bimore, indeve qelizore të buta ose të forta, materialit nukleik
- nxjerrja e proteinave
- Përgatitja dhe izolimi i enzimave
- Prodhimi i antigjeneve
- Ekstraktimi i ADN-së dhe/ose fragmentimi i synuar
- përgatitja e liposomeve
Ndërprerja e qelizave me ultrasonikë të tipit sondë është një metodë efikase e përgatitjes së mostrës.
Tabela më poshtë ju jep një përmbledhje mbi ultrasonikët tanë për ndërprerjen dhe nxjerrjen e qelizave. Klikoni në llojin e pajisjes për të marrë më shumë informacion për secilin homogjenizues tejzanor. Stafi ynë teknik i trajnuar mirë dhe me përvojë të gjatë do të jetë i lumtur t'ju ndihmojë të zgjidhni ultrasonikatorin më të përshtatshëm për mostrat tuaja!
| Vëllimi i grupit | Shkalla e rrjedhjes | Pajisjet e rekomanduara |
|---|---|---|
| deri në 10 shishka ose tuba | na | VialTweeter |
| pllaka me shumë pus / mikrotitër | na | UIP400MTP |
| tuba / anije të shumta | na | bori i kupës |
| 1 deri në 500 ml | 10 deri në 200 ml/min | UP100H |
| 10 deri në 1000 ml | 20 deri në 200 ml/min | UP200Ht, UP200 St |
| 10 deri në 2000 ml | 20 deri në 400 ml/min | UP400 St |
Aplikimet e shumëfishta të ultrazërit degëzohen në sektorët e bioteknologjisë, bioinxhinierisë, mikrobiologjisë, biologjisë molekulare, biokimisë, imunologjisë, bakteriologjisë, virologjisë, proteomikës, gjenetikës, fiziologjisë, biologjisë qelizore, hematologjisë dhe botanikës.
Liza: Thyerja e strukturave qelizore
Qelizat mbrohen nga një membranë plazmatike gjysmë e depërtueshme e cila përbëhet nga një shtresë e dyfishtë fosfo-lipidike (gjithashtu shtresa e dyfishtë proteinë-lipidike; e formuar nga lipide hidrofobike dhe molekula hidrofile të fosforit me molekula proteinike të ngulitura) dhe krijon një pengesë midis brendësisë së qelizës (citoplazmës) mjedisin jashtëqelizor. Qelizat bimore dhe qelizat prokariote janë të rrethuara nga një mur qelizor. Për shkak të shtresave të shumta të murit të trashë qelizor të celulozës, qelizat bimore janë më të vështira për t'u lizuar sesa qelizat shtazore. Brendësia e qelizës, si organelet, bërthama, mitokondri, stabilizohet nga citoskeleti.
Duke lizuar qelizat, ai synon nxjerrjen dhe ndarjen e organeleve, proteinave, ADN-së, mARN-së ose biomolekulave të tjera.
Metodat konvencionale të lizës së qelizave dhe të metat e tyre
Ka disa metoda për lizimin e qelizave, të cilat mund të ndahen në metoda mekanike dhe kimike, të cilat përfshijnë përdorimin e detergjenteve ose tretësve, aplikimin e presionit të lartë ose përdorimin e një mulli rruazash ose të një preseje franceze. Disavantazhi më problematik i këtyre metodave është kontrolli dhe rregullimi i vështirë i parametrave të procesit dhe rrjedhimisht ndikimi.
Tabela më poshtë tregon disavantazhet kryesore të metodave të zakonshme të lizës:
Tabela: Metodat konvencionale të lizës së qelizave kanë disavantazhe të mëdha
Procedura e Lizës
Liza është një proces i ndjeshëm. Gjatë lizës, mbrojtja e membranës qelizore shkatërrohet, por duhet të parandalohet inaktivizimi, denatyrimi dhe degradimi i proteinave të nxjerra nga një mjedis jofiziologjik (devijimi nga vlera e pH). Prandaj, në përgjithësi liza kryhet në një zgjidhje tampon. Shumica e vështirësive lindin nga përçarja e pakontrolluar e qelizave që rezulton në një çlirim të pacaktuar të të gjithë materialit ndërqelizor ose/dhe denatyrimin e produktit të synuar.
Pyetjet e bëra më shpesh në lidhje me sonikimin dhe lizën e qelizave
- A mund të lizoni qelizat me sonikacion? Po, sonikacioni lizon në mënyrë efektive qelizat duke përdorur valë ultrasonike me frekuencë të lartë që nxisin kavitacion, një fenomen ku formohen flluska të vogla avulli dhe shemben me dhunë brenda pezullimit të qelizës. Forcat mekanike që rezultojnë prishin membranat qelizore dhe lehtësojnë lirimin e përbërësve ndërqelizor në lëng.
- Si të përdorni një sonikator për lizën e qelizave? Përdorimi i një sonikatori për lizën e qelizave përfshin zhytjen e sondës së sonikatorit në një pezullim qelize dhe rregullimin e parametrave të tillë si amplituda dhe kohëzgjatja e pulsit. Procesi duhet të monitorohet nga afër për të optimizuar ndërprerjen e qelizave duke minimizuar denatyrimin e proteinave dhe inaktivizimin e enzimës.
- Cili është parimi i sonikacionit për lizën e qelizave? Sonication funksionon në parimin e kavitacionit akustik. Energjia tejzanor transmetohet në mjedisin e lëngshëm, duke shkaktuar luhatje të shpejta të presionit që çojnë në formimin dhe shpërthimin e mikroflluskave. Këto shpërthime gjenerojnë forca të forta prerëse dhe temperatura të larta të lokalizuara, duke prishur strukturat qelizore dhe duke rritur homogjenitetin e lizatit.
- Sa kohë zgjat sonikacioni i lizës së qelizave? Kohëzgjatja e sonikacionit për lizën e qelizave mund të ndryshojë ndjeshëm në varësi të faktorëve si lloji i qelizës, dendësia e qelizave, fuqia e sonikatorit dhe protokolli specifik i përdorur. Procedurat tipike mund të variojnë nga disa sekonda në disa minuta, shpesh të kryera në cikle për të menaxhuar gjenerimin e nxehtësisë dhe për të siguruar ndërprerje uniforme të qelizave.
- Cili është qëllimi i sonikacionit në nxjerrjen e proteinave? Në nxjerrjen e proteinave, sonikimi shërben për të çarë në mënyrë efikase membranat qelizore dhe për të tretur proteinat. Kjo metodë është veçanërisht e dobishme për çlirimin e proteinave nga brenda ndarjeve qelizore, duke e bërë atë thelbësore për përgatitjen e lizave nga të cilat proteinat do të pastrohen ose analizohen.
- Pse përdoret sonication për nxjerrjen? Sonicizimi favorizohet për ekstraktim për shkak të veprimit të tij të shpejtë dhe aftësisë për të aplikuar energji të synuar, duke zbërthyer strukturat qelizore për të çliruar molekulat bioaktive pa përdorimin e trajtimeve të ashpra kimike, duke ruajtur kështu integritetin funksional të përbërjeve të nxjerra.
- A i prish zëri ndërveprimet protein-proteinë? Ndërsa sonikimi mund të prishë në mënyrë efektive membranat qelizore, ai gjithashtu mund të prishë ndërveprimet protein-proteinë. Niveli i ndërprerjes varet nga intensiteti i sonikacionit dhe kohëzgjatja e ekspozimit, duke çuar potencialisht në denatyrim ose shpërbërje të komplekseve proteinike, të cilat mund të ndikojnë në studimet e mëvonshme analitike ose funksionale.
- A mund të përdoret sonikacioni për lizimin e E. coli? Sonicers Hielscher janë veçanërisht të efektshëm për lizimin e qelizave bakteriale si E. coli, të cilat kanë mure të forta qelizore. Teknika ofron një metodë fizike për të prerë murin qelizor dhe membranën, duke e bërë atë një metodë të preferuar për përgatitjen e lizave bakteriale në laboratorët e biologjisë molekulare dhe biokimisë.
Literatura/Referencat
- Balasundaram, B.; Harrison, S.; Bracewell, D. G. (2009): Advances in product release strategies and impact on bioprocess design. Trends in Biotechnology 27/8, 2009. pp. 477-485.
- Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrasonic Recovery and Modification of Food ingredients. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.