Homogjenizues të indeve tejzanor
- Ultratingulli është i sigurt & metodë efikase e homogjenizimit të indeve.
- Aplikimet tejzanor përfshijnë përgatitjen e indeve dhe suspensioneve, nxjerrjen e proteinave, ADN/ARN-së dhe komponimeve aktive, si dhe aktivizimin/çaktivizimin e enzimave dhe majave.
- Kontrollueshmëria e saktë e homogjenizuesve tejzanor të tipit sondë lejon një përgatitje të besueshme të mostrave të indeve.
Homogjenizimi i indeve duke përdorur sonda tejzanor
Homogjenizimi i indeve është një proces i përgatitjes së mostrës ku qelizat ose mikroorganizmat e kafshëve dhe bimëve përgatiten përpara nxjerrjes së lëndës ndërqelizore si proteinat, ADN-ja ose ARN-ja. Membrana qelizore duhet të çahet për të çliruar përmbajtjen e qelizës. Pas thyerjes së murit qelizor, makromolekulat ndërqelizore notojnë në tretësirën tampon në mënyrë që organelet, proteinat dhe ADN/ARN të bëhen të disponueshme. Homogjenizuesit tejzanor të indeve dhe përçarësit e qelizave janë mjete shumë efikase për përçarjen, lizën dhe nxjerrjen e qelizave.
Ultrasonikë të tipit sondë (p.sh. UP200St i fuqishëm 200 vat) janë homogjenizues të besueshëm të indeve dhe përdoren gjerësisht për përgatitjen e mostrës.
Homogjenizuesit tejzanor të indeve kundrejt teknikave alternative të lizës
Ju mund të pyesni veten se cila teknikë e përçarjes së qelizave dhe cila pajisje për homogjenizimin e indeve është alternativa më e mirë për laboratorin tuaj. Më poshtë, mund të gjeni disa argumente që flasin për lizën tejzanor dhe homogjenizimin e indeve pasi ultratingulli ka disa përparësi ndaj metodave alternative të homogjenizimit:
- Efikasiteti: Homogjenizimi me ultratinguj është një metodë e shpejtë dhe efikase për prishjen e indeve dhe qelizave. Homogjenizuesit tejzanor të indeve përdorin parimin e punës së kavitacionit akustik. Kjo metodë është shumë efikase dhe mund të prishë qelizat në pak sekonda. Meqenëse niveli i intensitetit mund të rregullohet nga i butë në intensiv, sonikimi është veçanërisht efektiv për indet e forta ose fibroze që janë të vështira për t'u homogjenizuar duke përdorur metoda të tjera.
- Shmangni kontaminimin e kryqëzuar: Hielscher ofron homogjenizues të fuqishëm tejzanor të indeve që përgatisin kampionin në një trajtim indirekt me sonikacion. Me UIP400MTP (ideale për mikrotitrat dhe pllakat me shumë pllakë), si dhe VialTweeter dhe CupHorn (Ideal për shishkat, tuba dhe gota), Hielscher ofron pajisje për ndërprerjen e qelizave tejzanor për homogjenizim pa kontakt, gjë që redukton rrezikun e kontaminimit të kryqëzuar ndërmjet mostrave. Gjithashtu minimizon rrezikun e futjes së ndotësve nga sipërfaqet bluarëse ose pajisje të tjera homogjenizimi.
- Fleksibiliteti: Homogjenizimi tejzanor mund të përdoret me një shumëllojshmëri të madhësive dhe vëllimeve të mostrave, nga vëllimet e vogla deri tek mostrat e mëdha të indeve. Për më tepër, homogjenizimi me ultratinguj është gjithashtu i përshtatshëm për një gamë të gjerë të llojeve të mostrave, duke përfshirë indet bimore, indet e kafshëve dhe kulturat mikrobike. Intensiteti dhe kohëzgjatja e ultrazërit mund të rregullohen për të optimizuar nivelin e ndërprerjes për lloje të ndryshme të indeve.
- Riprodhueshmëria: Homogjenizimi tejzanor siguron rezultate të qëndrueshme dhe lejon kontrollin e saktë të parametrave të homogjenizimit, të tilla si fuqia dalëse dhe koha e sonikimit. Kjo ndihmon në sigurimin e riprodhueshmërisë dhe saktësisë së të dhënave eksperimentale.
- Ruajtja e biomolekulave: Ultratingulli i tipit sonda është një trajtim jo termik. Kjo do të thotë se ndikimi i tij nuk bazohet në nxehtësi. Megjithatë, çdo trajtim mekanik gjeneron nxehtësi në përputhje me ligjin e dytë të termodinamikës. Kjo do të thotë që mostra bëhet më e ngrohtë gjatë kohërave më të gjata të sonikimit. Ultrasonikët më të fundit të Hielscher janë të pajisur me sensorë të temperaturës dhe softuer inteligjent për monitorimin e temperaturës. Opsionet e sofistikuara të ftohjes lejojnë parandalimin e degradimit të nxehtësisë dhe ndihmojnë në ruajtjen e aktivitetit të biomolekulave të ndjeshme ndaj nxehtësisë, të tilla si enzimat dhe proteinat.
- Kursimi i kohës: Efikasiteti i lartë i ultrazërit të tipit të sondës lejon homogjenizimin e shpejtë të indeve, gjë që kursen kohë në krahasim me metodat e tjera që kërkojnë manipulim fizik më të gjerë të indit.
Homogjenizimi i indeve tejzanor ofron disa avantazhe mbi metodat alternative të homogjenizimit. Kjo është arsyeja pse homogjenizuesit tejzanor të indeve janë teknika e preferuar e ndërprerjes së qelizave në aplikime të ndryshme kërkimore dhe industriale.
Shembull për një protokoll homogjenizimi të indeve duke përdorur një sondë tejzanor:
Ultrasonikët lehtësojnë homogjenizimin e indeve me funksionim të thjeshtë dhe një procedurë të shpejtë homogjenizimi. Në të njëjtën kohë, parametrat e procesit tejzanor mund të kontrollohen dhe monitorohen në mënyrë të përpiktë në mënyrë që rezultatet të jenë të besueshme dhe të riprodhueshme.
Materiale:
- Mostra e indit (p.sh. mëlçia, truri, muskujt)
- Bufer (p.sh. PBS, Tris-HCl)
- koktej frenues i proteazës
- Homogjenizues tejzanor (lloji i sondës)
- Akull
- tuba mikrocentrifugues
- Pipetat
Protokolli për homogjenizimin e indeve me ultratinguj:
Shënim: Kohëzgjatja dhe intensiteti i sonikacionit mund të duhet të optimizohen në varësi të llojit të indit, moshës dhe gjendjes shëndetësore, si dhe aplikimeve specifike në rrjedhën e poshtme. Është gjithashtu e rëndësishme që të zgjidhni me kujdes buferin, frenuesit e proteazës dhe aditivë të tjerë për të optimizuar rendimentin dhe cilësinë e homogjenatit.
Homogjenizues i indeve tejzanor UP200Ht me një bri/sondë 2mm për përçarje, lizë, homogjenizim dhe tretje qelizore si dhe nxjerrjen e proteinave.
Përparësitë kryesore të homogjenizuesve të indeve tejzanor Hielscher
- bluarje e shpejtë dhe efikase, homogjenizim, lizë & ndërprerja e qelizave, ose nxjerrja me kavitacion të fuqishëm tejzanor
- përdorim dhe funksionim i lehtë dhe intuitiv (zgjidhni versionin analog ose dixhital)
- pastrim i lehtë i sipërfaqeve në kontakt me produktin duke shpëlarë sonotrode nën sonikacion (CIP pastrohet në vend/ SIP sterilizohet në vend)
- Kutia e mbrojtjes së zërit (kutia e mbrojtjes së zërit për pajisjet laboratorike është bërë tërësisht nga xhami akrilik për shikueshmëri të plotë nga çdo kënd)
- kontroll të plotë mbi parametrat e procesit nëpërmjet ekranit me prekje dixhitale në pajisje (ultrasonikatorë dixhitalë) ose matës të fuqisë (për pajisjet analoge)
- kontrolli i integruar i temperaturës (i rëndësishëm për mostrat e indeve të ndjeshme ndaj nxehtësisë dhe labile)
- pauzat në ekzekutimin e homogjenizimit mund të përcaktohen individualisht dhe të paracaktohen në menynë dixhitale
- të gjitha pajisjet dixhitale janë të pajisura me regjistrim automatik të të dhënave (në një kartë të integruar SD/USB-ComboCard), sensor të temperaturës me prizë dhe telekomandë të shfletuesit.
- trajtim me shumë mostra me VialTweeter, bori i kupës ose duke përdorur sonotroda me 4 ose 8 gishta (p.sh. për integrim në proceset e robotëve laboratorikë)
- për aplikime në shkallë të vogël dhe në shkallë të gjerë
Përgatitja e mostrës me sonda tejzanor UP100H.
Tabela e mëposhtme ju jep një tregues të kapacitetit të përafërt përpunues të homogjenizuesve tanë të indeve tejzanor për shpërbërjen, lizën dhe nxjerrjen e qelizave:
| Vëllimi i grupit | Shkalla e rrjedhjes | Pajisjet e rekomanduara |
|---|---|---|
| pllaka me shumë pus | n/a | UIP400MTP |
| shishe, gotë e vogël | n/a | Kupa tejzanor |
| deri në 10 shishe | n/a | VialTweeter |
| 1 deri në 500 ml | 10 deri në 200 ml/min | UP100H |
| 10 deri në 2000 ml | 20 deri në 400 ml/min | UP200Ht, UP400 St |
| 0.1 deri në 20L | 0.2 deri në 4L/min | UIP2000hdT |
Na kontaktoni! / Na pyesni!
Kupa tejzanor për sonikimin intensiv të tubave të mbyllur dhe flakoneve për homogjenizimin steril të mostrave.
Gjeni homogjenizuesin optimal të indit tejzanor për aplikimin tuaj
Homogjenizuesit tejzanor të indeve Hielscher janë të disponueshëm me një gamë të daljes me ultratinguj midis 50 W deri në 16,000 W (16 kW).
Punëtorët e laboratorit janë të kënaqur nga funksionimi i thjeshtë dhe intuitiv i homogjenizuesve laboratorikë tejzanor Hielscher. Në varësi të kërkesave specifike, pajisjet Hielscher vijnë me kontroll dixhital ose analog.
- VialTweeter është një homogjenizues i fuqishëm tejzanor që lejon sonifikimin e njëkohshëm të deri në 10 flakone ose epruveta me të njëjtin intensitet. Për shkak të sonikacionit indirekt, kontaminimi i kryqëzuar dhe humbja e mostrës shmanget plotësisht. Pastrimi dhe dezinfektimi është reduktuar në minimum për shkak të përdorimit të shisheve të disponueshme. Blloku sonotrode është i autoklavueshëm.
- UIP400MTP Plate-Sonicator është ideale kur punoni me pllaka mikrotitërore dhe me shumë pllakë, si pjata 96 pusesh. Thjesht vendosni pjatën tuaj me shumë gropë ose pjatën tuaj Petri në UIP400MTP dhe të gjitha mostrat tingëllohen në mënyrë të njëtrajtshme. Me UIP400MTP Plate-Sonicator, përpunimi i mostrës me performancë të lartë bëhet i thjeshtë dhe efikas!
- Në gamën e ultrasonikëve laboratorikë të tipit sonda, homogjenizuesit mund të zgjidhen me 50 vat, 100 vat, 200 vat dhe 400 vat.
UP50H (50W)
UP100H (100W)
UP200Ht / UP200St (200W)
UP400St (400W)
Aplikimi dhe përdorimi i homogjenizuesve të indeve tejzanor
Homogjenizuesit tejzanor përdoren zakonisht për bluarjen e indeve, përçarjen e qelizave & liza dhe homogjenizimi i mostrave biologjike përpara nxjerrjes së lëndës ndërqelizore në intervalin molekular. Me anë të sonikimit të kontrolluar të mostrave, të gjitha hapat nga liza deri tek nxjerrja dhe homogjenizimi mund të kryhen duke përdorur të njëjtin ndërprerës të qelizave tejzanor.
Avantazhi i madh i homogjenizuesve tejzanor qëndron në hyrjen lehtësisht të rregullueshme të fuqisë dhe intensitetin e sonikimit. Ndërprerësit tejzanor të qelizave Hielscher (lizerët) lejojnë kontrollin e intensitetit të sonikimit duke rregulluar amplituda nga 20% në 100%.
Në mënyrë alternative për funksionimin e vazhdueshëm, homogjenizuesi tejzanor mund të vendoset në modalitetin e ciklit, p.sh. për sonikimin e indeve të ndjeshme ndaj nxehtësisë. Sonication në modalitetin e pulsit do të thotë që ultrasonikatori gjeneron valë ultrasonike me intensitet të lartë në cikle periodike. Kohëzgjatja e periudhës së sonikacionit dhe koha e pushimit mund të caktohen individualisht nga përdoruesi.
në pulsimi i zërit, gjatë periudhës së pushimit, materiali i sonikuar mund të kthehet në gjendjen e tij të pushimit dhe kampioni mund të ftohet (duke përdorur kohën e pushimit për shpërndarjen e nxehtësisë). Kështu, intensiteti i përpunimit mund të vendoset me saktësi në përputhje me indin dhe ngrohja e padëshiruar e mostrës zvogëlohet.
Homogjenizuesit tejzanor të indeve janë të fortë dhe miqësorë për përdoruesit, ndërkohë që prodhojnë rezultate të besueshme që sigurojnë riprodhueshmëri për shkak të kontrollit të plotë mbi të gjithë parametrat e rëndësishëm të procesit.
Fushat e zakonshme të aplikimit të bluarjes së indeve tejzanor, përçarjes së qelizave, lizës, nxjerrjes dhe homogjenizimit gjenden në laboratorët biologjikë dhe farmaceutikë, mikrobiologjinë, kërkimin proteomik dhe gjenomik (p.sh. lirimi i proteinave përpara blotting-ut Western dhe analiza imunosorbente e lidhur me enzimën ELISA), por edhe në prodhimi i ekstrakteve botanike dhe komponimeve bioaktive për industrinë ushqimore, farmaceutike dhe kozmetike.
- Klikoni këtu për rekomandime specifike të procesit në lidhje me përgatitjen e mostrës, homogjenizimin e indeve, lizën dhe nxjerrjen (p.sh. qeliza, baktere, spore, përbërës aktivë)!
- Lexoni këtu pse sonikatorët janë një mjet i domosdoshëm për kërkimin proteomik!
- Mësoni se si sonication lehtëson punën kërkimore gjenomike!
Literatura / Referencat
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.
Fakte që ia vlen të dihen
Homogjenizuesit tejzanor të indeve shpesh quhen si sonikator, lizer zanor, ndërprerës tejzanor, mulli tejzanor, sono-ruptor, sonifier, dismembrator zanor, përçarës qelizash, shpërndarës tejzanor ose shpërndarës. Termat e ndryshëm rezultojnë nga aplikacionet e ndryshme që mund të përmbushen nga sonication.
Hielscher Ultrasonics prodhon homogjenizues tejzanor me performancë të lartë për përzierjen e aplikimeve, shpërndarjen, emulsifikimin dhe nxjerrjen në shkallë laboratorike, pilot dhe industriale.