Përgatitja me ultratinguj e serumit të pasur me trombocite
- Plazma e pasur me trombocite (PRP) është plazmë gjaku e pasuruar me trombocite, e cila përdoret për trajtime mjekësore dhe estetike.
- Liza dhe kondicionimi me ultratinguj janë një metodë shumë efektive për përgatitjen e plazmës së pasur me trombocite.
- Hielscher Ultrasonics ofron sisteme të ndryshme me ultratinguj që përmbushin kërkesat e trajtimit të gjakut (p.sh. për përgatitje brenda dhe jashtë një dhome të pastër).
Serumi i pasur me trombocite
Trajtimi me ultratinguj është një metodë e besueshme dhe e thjeshtë për lizën e trombociteve në serumin autolog të gjakut, me qëllim çlirimin e faktorëve të rritjes. Fraksionet e prejardhura nga trombocitet – të njohura edhe si serum autolog i kondicionuar (ACS) – përdoren për riparimin e indeve ose për trajtime estetike. Për të marrë rezultate optimale, PRP-ja pasurohet përpara injektimit.
Për përgatitjen e plazmës së pasuruar me faktorë të rritjes qelizore, trajtimi me ultratinguj është një metodë shumë efektive dhe efikase për lizën e membranave qelizore dhe për çlirimin e pothuajse të gjithë faktorëve të rritjes qelizore nga trombocitet. Nëpërmjet lizës dhe kondicionimit me ultratinguj, mund të përdoret edhe gjaku i trajtuar me antikoagulantë.
Kondicionimi i PRP-së nëpërmjet trajtimit me ultratinguj është një mënyrë praktike dhe ekonomike për të përftuar faktorë të përqendruar të rritjes.
Liza me ultratinguj e plazmës së pasur me trombocite (PRP)
Efektet e lizës me ultratinguj
Trajtimi me ultratinguj i serumit të gjakut shkakton lizë homogjene të trombociteve për të çliruar faktorët e rritjes të mbajtur brenda tyre (faktorin e rritjes AB (PDGF-AB), faktorin e rritjes AA (PDGF-AA), faktorin e rritjes BB (PDGF-BB), faktorin e rritjes së endotelit vaskular (VEGF), faktorin transformues të rritjes β (TGF-β), faktorin e rritjes epidermale (EGF), faktorin e rritjes të ngjashëm me insulinën (IGF), faktorin e rritjes së qelizave epiteliale ECGF dhe faktorin e rritjes fibroblastike (FGF)). Trombocitet dhe granulat e tyre alfa shpërbëhen nëpërmjet trajtimit me ultratinguj, duke shfrytëzuar dukurinë e kavitacionit akustik. Përdorimi i kavitacionit ultrasonik për lizën e trombociteve zvogëlon ndikimin e mundshëm negativ të metodës së ngrirjes dhe shkrirjes së përsëritur në aktivitetin e faktorëve të rritjes.
Protokolli për përgatitjen e PRP-së me ultratinguj
Rreth 16mL mostër gjaku autolog të sapomarrë përmbyset butësisht 8–10 herë në një epruvetë, në mënyrë që gjaku dhe antikoagulantët të përzihen mirë. Më pas, mostra centrifugohet me 1800 g për 20 min në temperaturën e dhomës. Pas centrifugimit, trombocitet dhe qelizat mononukleare formojnë një shtresë të bardhë në fund të shtresës së plazmës, e cila njihet si plazma e pasur me trombocite (PRP). Shtresa e sipërme njihet si plazma e varfër me trombocite (PPP). Qelizat mononukleare mund të hiqen ose të mbeten në mostër. Shpesh, qelizat mononukleare mbeten në mostrën e PRP-së për të shmangur hapa shtesë, të cilët mbartin rrezikun e kontaminimit.
Shënim: Trajtimi me ultratinguj i PRP-së autologe duhet të kryhet në kushte sterile.
PRP-ja dhe PPP-ja ndahen dhe mblidhen. PPP-së i shtohen 1,5mL tretësirë kloruri kalciumi 10%, ndërsa PRP-së i shtohen 0,5mL etanol 5%. Të dy suspensionet përzihen butësisht dhe lihen të qëndrojnë për 5 min në temperaturën e dhomës. Në fund, suspensionit të PRP-së i shtohet 1mL PPP dhe lihet të qëndrojë derisa të formohet një koagul fibrine.
Trajtimi me ultratinguj: Meqë xheli i formuar i trombociteve shërben si rezervuar për faktorët e çliruar të rritjes, xheli i fibrinës duhet të shpërbëhet për të çliruar faktorët e disponueshëm të rritjes. Parametrat për lizën me ultratinguj dhe çlirimin e faktorëve të rritjes janë si më poshtë: Trajtojeni mostrën në epruvetë me ultratinguj duke përdorur një UP200Ht ose UP200St (200W, 26kHz) me sonotrodën S26d2. Për të shmangur mbinxehjen e mostrës së gjakut, trajtimi me ultratinguj mund të kryhet në cikle pulsimi (p.sh. 10 sek. në punë, 30 sek. pushim). Mostra duhet të vendoset mbi akull për ftohje, në mënyrë që temperatura të mbahet në mënyrë optimale ndërmjet 2 – 5°C. Pas trajtimit me ultratinguj, mostra centrifugohet me 16 000 g për 5 min. në temperaturën e dhomës. Supernatanti mblidhet dhe mund të ruhet në -70°C.
Përqendrimi i trombociteve në fraksionin e PRP-së u rrit 1,7 – 4,5 herë me metodën e trajtimit me ultratinguj, krahasuar me numrin mesatar të trombociteve në gjakun e plotë të raportuar në literaturë.
PRP-ja është kombinuar me terapinë me qeliza staminale të prejardhura nga indi dhjamor (qeliza staminale autologe të çliruara nga indi dhjamor me ultratinguj, të përziera me PRP dhe të injektuara sërish në indin e pacientit për riparim).
Pajisjet me ultratinguj
Hielscher Ultrasonics është eksperte në teknologjinë e sofistikuar dhe të besueshme të ultratingujve. Pajisjet tona me ultratinguj përdoren në mbarë botën për lizë, ekstraktim dhe përgatitje mostrash – në mënyrë të drejtpërdrejtë dhe të tërthortë. Aksesorët e autoklavueshëm si edhe ata njëpërdorimësh sigurojnë një trajtim pa kontaminim të mostrave të gjakut autolog. Shumica e sistemeve tona mund të përdoren për lizën me ultratinguj të qelizave staminale dhe PRP-së, çka i bën pajisjet tona me ultratinguj edhe më efikase nga ana ekonomike.
Tabela më poshtë rendit pajisjet tona me ultratinguj që janë të përshtatshme për përgatitjen e plazmës së pasur me trombocite dhe vëllimin përkatës të rekomanduar të mostrës. Ofrohen gjithashtu pajisje më të mëdha me ultratinguj dhe sisteme të përshtatura sipas kërkesave.
| Pajisja | Fuqia [W] | Frekuenca [kHz] | Lloji | Vëllimi [mL] | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| VialTweeter | 200 | 26 | e pavarur | 0,5 | – | 1,5 |
| UP50H | 50 | 30 | që mbahet në dorë ose montohet në stativ | 0,01 | – | 250 |
| UP100H | 100 | 30 | që mbahet në dorë ose montohet në stativ | 0,01 | – | 500 |
| UP200Ht | 200 | 26 | që mbahet në dorë ose montohet në stativ | 0,1 | – | 1000 |
| UP200St | 200 | 26 | e montuar në stativ | 0,1 | – | 1000 |
| UP400St | 400 | 24 | e montuar në stativ | 5,0 | – | 2000 |
| UP200St-SonoStep | 200 | 26 | e pavarur | 30 | – | 500 |
| GDmini2 | 200 | 26 | qelizë rrjedhjeje pa kontaminim | |||
Ju lutemi, na kontaktoni sot! Do t’ju ndihmojmë me kënaqësi të gjeni pajisjen optimale me ultratinguj!
Na kontaktoni! / Na pyesni!
GDmini2 te transduktori UP200St-TD (200 vat)
Literaturë/Referenca
- Fortunato, T. M.; Beltrami, Ch.; Emanueli, C.; De Bank, P.A:; Pula, G. (2016): Xheli i lizatit të trombociteve dhe qelizat pararendëse endoteliale nxisin formimin e rrjetit mikrovaskular in vitro: implikime për inxhinierinë e indeve. Sci. Rep. 6, 2016.
- Hamid, M.S.A.; Yusof, Ashril; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): Plazma e pasur me trombocite (PRP) për dëmtimin akut të muskujve: një rishikim sistematik. PLOS ONE Vëllimi 9, Numri 2, 2014.
Fakte që ia vlen të njihen
Plazma e pasur me trombocite
Plazma e pasur me trombocite përmban faktorin e rritjes AB (PDGF-AB), faktorin e rritjes AA të prejardhur nga trombocitet (PDGF-AA), faktorin e rritjes BB të prejardhur nga trombocitet (PDGF-BB), faktorin e rritjes së endotelit vaskular (VEGF), faktorin transformues të rritjes β (TGF-β), faktorin e rritjes epidermale (EGF), faktorin e rritjes të ngjashëm me insulinën (IGF), faktorin e rritjes së qelizave epiteliale ECGF dhe faktorin e rritjes fibroblastike (FGF), të cilët janë stimulues të rëndësishëm për rritjen dhe ripërtëritjen qelizore.
Serumi autolog i kondicionuar (ACS)
Plazma autologe e kondicionuar (ACP) është një plazmë e pasur me trombocite që nxirret nga gjaku autolog dhe përdoret për të mbështetur rigjenerimin në një sërë gjendjesh ortopedike dhe procedurash kirurgjikale. Serumi i kondicionuar përgatitet duke ndarë plazmën nga përbërësit e tjerë të gjakut (si eritrocitet) dhe duke e përqendruar atë. ACP-ja është një plazmë e pasur me trombocite (PRP). PRP është një term i përgjithshëm për një lloj plazme që përmban një përqendrim dukshëm më të lartë trombocitesh krahasuar me gjakun e plotë. Ajo nxirret nga gjaku i plotë. Përbërësit kryesorë të ACP-së përfshijnë trombocitet (pllakëzat e gjakut) dhe disa faktorë të rritjes që janë kyç në proceset e shërimit. Ndryshe nga formulimet e tjera të plazmës së pasur me trombocite, ACP-ja dallohet nga një përqendrim i ulët i qelizave të bardha të gjakut, si granulocitet neutrofile, të cilat mund të dëmtojnë procesin e shërimit kur janë të pranishme në përqendrime të larta.
Injeksionet e plazmës së pasur me trombocite
Plazma e pasur me trombocite përdoret si injeksion në mjekësinë rigjeneruese, si edhe në procedurat kozmetike. Përdorimi i PRP-së premton përshpejtim të ndjeshëm të shërimit dhe rikuperimit të muskujve. Për më tepër, ajo përdoret me sukses për trajtimin e inflamacionit, artritit, dhimbjes, plagëve, plagëve të hapura që shërohen ngadalë dhe djegieve të rënda të lëkurës. PRP-ja përmban një nivel të lartë faktorësh të rritjes, të cilët stimulojnë dhe mbrojnë qelizat që kryejnë shërimin, në mënyrë që indi i dëmtuar të riparohet.
Për trajtimet kozmetike, PRP-ja është treguar efektive për stimulimin e rritjes së flokëve dhe ripërtëritjes së lëkurës (e njohur edhe si trajtimi vampir).
Faktorët e rritjes të prejardhur nga trombocitet (PDGF)
Termi faktor i rritjes i prejardhur nga trombocitet (PDGF) u referohet faktorëve PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C dhe PDGF-D. Ai është një rrjet sinjalizimi me katër ligandë (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C dhe PDGF-D) dhe dy receptorë, PDGFR-alfa dhe PDGFR-beta.
Faktorët e rritjes, ose proteinat, rregullojnë rritjen dhe ndarjen qelizore. Si mitogjeni kryesor që gjendet në serumin e gjitarëve dhe që çlirohet nga trombocitet gjatë formimit të koagulit, ai luan një rol të rëndësishëm në formimin e enëve të gjakut (angiogjenezë), pra në rritjen e enëve të gjakut nga indi i enëve të gjakut tashmë ekzistuese.