Përgatitja me ultratinguj e serumit të pasur me trombocite
- Plazma e pasur me trombocite (PRP) është plazma e gjakut që është pasuruar me trombocitet, e cila përdoret për trajtime mjekësore dhe estetike.
- Liza dhe kondicionimi tejzanor është një metodë shumë efektive për të përgatitur plazmën e pasur me trombocite.
- Hielscher Ultrasonics ofron sisteme të ndryshme ultrasonike që përputhen me kërkesat e trajtimit të gjakut (p.sh. për përgatitjen e brendshme dhe të jashtme të një dhome të pastër).
serum i pasur me trombocite
Sonication është një metodë e besueshme dhe e lehtë për lizimin e trombociteve në serumin autolog të gjakut në mënyrë që të çlirohen faktorët e rritjes. Fraksionet që rrjedhin nga trombocitet – i njohur gjithashtu si serumi i kushtëzuar autolog (ACS) – përdoren për riparimin e indeve ose për trajtime estetike. Për të marrë rezultate optimale, PRP pasurohet para injektimit.
Për të përgatitur plazmën e pasuruar me faktorë të rritjes së qelizave, sonikimi është një metodë shumë efektive dhe efikase për lizimin e membranave qelizore dhe për të çliruar pothuajse të gjithë faktorët e rritjes së qelizave nga trombocitet. Me anë të lizës dhe kondicionimit tejzanor, mund të përdoret edhe gjaku kundër koagulimit.
Kushtëzimi i PRP nëpërmjet sonication është një mënyrë e përshtatshme dhe me kosto efektive për t'u dhënë në faktorët e përqendruar të rritjes.
Efektet e lizës tejzanor
Trajtimi me ultratinguj i serumit të gjakut rezulton në një lizë homogjene të trombociteve në mënyrë që të çlirohen faktorët e rritjes të bllokuar (faktori i rritjes AB (PDGF-AB), faktori i rritjes AA (PDGF-AA), faktori i rritjes BB (PDGF-BB), vaskular. faktori i rritjes endoteliale (VEGF), faktori i rritjes transformuese β (TGF-β), faktori i rritjes epidermale (EGF), faktori i rritjes i ngjashëm me insulinën (IGF), faktori i rritjes së qelizave epiteliale ECGF dhe faktori i rritjes fibroblastike (FGF)). Trombocitet dhe alfa-granulat e tyre prishen nga sonication, duke përdorur fenomenin e kavitacioni akustik. Përdorimi i kavitacionit tejzanor për lizën e trombociteve zvogëlon ndikimin e mundshëm negativ në aktivitetin e faktorit të rritjes të metodës së përsëritur ngrirje-shkrirje.
Protokolli për përgatitjen e PRP me ultratinguj
Përafërsisht. 16 ml mostër të freskët të gjakut autolog të mbledhur përmbyset butësisht 8-10 herë në një tub në mënyrë që gjaku dhe antikoagulantët të përzihen mirë. Më pas, kampioni centrifugohet në 1800 g për 20 minuta në temperaturën e dhomës. Pas centrifugimit, trombocitet dhe qelizat mononukleare ndërtojnë një shtresë të bardhë në fund të shtresës plazmatike, e cila njihet si plazma e pasur me trombocitet (PRP). Shtresa e sipërme njihet si plazma e varfër me trombocitet (PPP). Qelizat mononukleare mund të hiqen ose të mbeten në mostër. Shpesh, qelizat mononukleare mbeten në kampionin PRP për të shmangur hapat shtesë, të cilët mbajnë rrezikun e kontaminimit.
Shënim: Trajtimi me ultratinguj i PRP autolog duhet të kryhet në kushte sterile.
PRP dhe PPP ndahen dhe mblidhen. PPP-së i shtohet 1.5mL tretësirë klorur kalciumi 10%, ndërsa PRP 0.5mL etanol 5%. Të dy suspensionet trazohen lehtë dhe lihen të qëndrojnë për 5 minuta në temperaturën e dhomës. Së fundi, 1 mL PPP i shtohet suspensionit PRP dhe lihet të qëndrojë derisa të formohet një mpiksje fibrine.
Trajtimi me ultratinguj: Meqenëse xheli i formuar i trombociteve vepron si një rezervuar për faktorët e rritjes të çliruar, xheli i fibrinës duhet të ndërpritet në mënyrë që të çlirojë faktorët e disponueshëm të rritjes. Parametrat për lizën tejzanor dhe çlirimin e faktorit të rritjes janë si më poshtë: Sonicate me një UP200Ht ose UP200 St (200W, 26kHz) me sonotrode S26d2 mostrën në tub. Për të shmangur mbinxehjen e mostrës së gjakut, sonikacioni mund të kryhet në cikle pulsuese (p.sh. 10 sek. ndezur, 30 sek. fikur). Mostra duhet të vendoset në akull për ftohje në mënyrë që temperatura të mbahet në mënyrë optimale midis 2 – 5°C. Pas sonikimit, kampioni centrifugohet në 16000 g për 5 min. në temperaturën e dhomës. Supernatanti mblidhet dhe mund të ruhet në -70°C.
Përqendrimi i trombociteve në fraksionin PRP u pasurua 1.7 – 4.5 herë në metodën e sonikimit kur krahasohet me numrin mesatar të trombociteve në literaturë në gjakun e plotë.
PRP është kombinuar me terapinë e qelizave staminale me prejardhje nga dhjami (qelizat burimore autologe të lëshuara në mënyrë ultrasonike nga indi dhjamor, i përzier me PRP dhe i injektuar përsëri në indin e pacientit për riparim).
Pajisjet me ultratinguj
Hielscher Ultrasonics është ekspert për teknologjinë e sofistikuar dhe të besueshme tejzanor. Pajisjet tona tejzanor përdoren në mbarë botën për lizën, nxjerrjen dhe përgatitjen e mostrës – nga direkt dhe indirekt. E autoklavueshme si dhe të disponueshme aksesorët sigurojnë a pa ndotje trajtimi i mostrave autologe të gjakut. Shumica e sistemeve tona mund të përdoren për lizën tejzanor të qelizat burimore dhe PRP, që i bën pajisjet tona ultrasonike edhe më efikase ekonomikisht.
Kjo tabelë më poshtë liston pajisjet tona ultrasonike, të cilat janë të përshtatshme për përgatitjen e plazmës së pasur me trombocite, dhe vëllimin e rekomanduar të mostrës së tyre, përkatësisht. Janë të disponueshme gjithashtu ultrasonikë më të mëdhenj dhe sisteme të personalizuara.
Pajisja | Fuqia [W] | Freq. [kHz] | Lloji | Vëllimi [mL] | ||
---|---|---|---|---|---|---|
VialTweeter | 200 | 26 | më vete | 0.5 | – | 1.5 |
UP50H | 50 | 30 | të dorës ose të montuara në këmbë | 0.01 | – | 250 |
UP100H | 100 | 30 | të dorës ose të montuara në këmbë | 0.01 | – | 500 |
UP200Ht | 200 | 26 | të dorës ose të montuara në këmbë | 0.1 | – | 1000 |
UP200 St | 200 | 26 | i ngritur në këmbë | 0.1 | – | 1000 |
UP400 St | 400 | 24 | i ngritur në këmbë | 5.0 | – | 2000 |
UP200St-SonoStep | 200 | 26 | më vete | 30 | – | 500 |
GDmini2 | 200 | 26 | qelizë rrjedhëse pa ndotje |
Ju lutemi na kontaktoni sot! Ne do të jemi të lumtur t'ju ndihmojmë të gjeni pajisjen optimale tejzanor!
Na kontaktoni! / Na pyesni!
Literatura/Referencat
- Fortunato, TM; Beltrami, Ch.; Emanueli, C.; De Bank, PA:; Pula, G. (2016): Xheli i lizatit të trombociteve dhe paraardhësit endotelial stimulojnë formimin e rrjetit mikrovaskular in vitro: implikimet e inxhinierisë së indeve. Shkencë. Rep. 6, 2016.
- Hamid, MSA; Jusof, Ashril; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): Plazma e pasur me trombocite (PRP) për dëmtimin akut të muskujve: Një rishikim sistematik. PLOS ONE Vëllimi 9, Numri 2, 2014.
Fakte që ia vlen të dihen
Plazma e pasur me trombocite
Plazma e pasur me trombocite përmban faktorin e rritjes AB (PDGF-AB), faktorin e rritjes që rrjedh nga trombocitet AA (PDGF-AA), faktorin e rritjes nga trombocitet BB (PDGF-BB), faktorin e rritjes endoteliale vaskulare (VEGF), faktorin e rritjes transformuese β (TGF). -β), faktori i rritjes epidermale (EGF), faktori i rritjes i ngjashëm me insulinën (IGF), faktori i rritjes së qelizave epiteliale ECGF dhe faktori i rritjes fibroblastike (FGF), të cilët janë stimulues të rëndësishëm për rritjen dhe rinovimin e qelizave.
Serum i kushtëzuar autolog (ACS)
Plazma e kondicionuar autologe (ACP) është një plazmë e pasur me trombocite që nxirret nga gjaku autolog i cili përdoret për të mbështetur rigjenerimin në një sërë kushtesh ortopedike dhe procedurave kirurgjikale. Serumi i kondicionuar përgatitet duke e ndarë plazmën nga përbërësit e tjerë të gjakut (siç janë eritrocitet) dhe e koncentron atë. ACP është një plazmë e pasur me trombocite (PRP). PRP është një term i përgjithshëm për një lloj plazme që përmban një përqendrim dukshëm më të lartë të trombociteve në krahasim me gjakun e plotë. Ajo nxirret nga gjaku i plotë. Komponentët kryesorë të ACP përfshijnë trombocitet (trombocitet) dhe disa faktorë të rritjes që luajnë një rol të rëndësishëm në procesin e shërimit. Ndryshe nga formulimet e tjera të plazmës së pasur me trombocite, ACP dallohet nga një përqendrim i ulët i qelizave të bardha të gjakut si granulocitet neutrofile që mund të jenë të dëmshme për procesin e shërimit kur janë të pranishme në përqendrime të larta.
injeksione të plazmës së pasur me trombocite
Plazma e pasur me trombocite përdoret si injeksion në mjekësinë rigjeneruese si dhe në procedurat kozmetike. Aplikimi i PRP premton përshpejtim të konsiderueshëm të shërimit të muskujve dhe rikuperimit të muskujve. Për më tepër, përdoret me sukses për të trajtuar inflamacionin, artritin, dhimbjen, plagët, plagët e hapura që shërohen ngadalë dhe djegiet serioze të lëkurës. PRP përmban një nivel të lartë të faktorëve të rritjes, të cilët stimulojnë dhe mbrojnë qelizat shëruese në mënyrë që indi i dëmtuar të riparohet.
Për trajtimet kozmetike, PRP është treguar efektive për të stimuluar rritjen e flokëve, rinovimin e lëkurës (i njohur edhe si trajtimi me vampir).
Faktorët e rritjes që rrjedhin nga trombocitet (PDGF)
Termi faktor i rritjes që rrjedh nga trombocitet (PDGF) i referohet faktorëve PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C dhe PDGF-D. Është një rrjet sinjalizues i katër ligandëve (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C dhe PDGF-D) dhe dy receptorëve, PDGFR-alfa dhe PDGFR-beta.
Faktorët e rritjes, ose proteinat, rregullojnë rritjen dhe ndarjen e qelizave. Si mitogjeni kryesor që gjendet në serumin e gjitarëve, i cili çlirohet nga trombocitet gjatë formimit të mpiksjes, ai luan një rol të rëndësishëm në formimin e enëve të gjakut (angiogjenezën), rritjen e enëve të gjakut nga indet ekzistuese të enëve të gjakut.