Tretësira tampon të përgatitura me ultratinguj

Tretësirat tampon për lizë mund të përgatiten me efikasitet dhe shpejt duke përdorur homogjenizues indesh me ultratinguj. Meqenëse pajisjet me ultratinguj janë një mjet ideal për përzierje, tretje dhe shpërndarje, ato mundësojnë përgatitjen e besueshme dhe të lehtë për përdoruesin të tretësirave tampon për lizë.

Përgatitja me ultratinguj e tretësirave tampon për lizë

Homogjenizuesit e indeve me ultratinguj janë një mjet i zakonshëm për shpërbërjen e qelizave, lizën dhe ekstraktimin, prandaj janë të disponueshëm në shumicën e laboratorëve. Një përdorim dytësor i pajisjeve me ultratinguj me sondë është përgatitja e tretësirave tampon për lizë.

Tretësira tampon për lizë është një tretësirë që përdoret për të hapur qelizat (për t’i lizuar) dhe për të çliruar përmbajtjen e tyre për analizat pasuese. Përbërja specifike e tretësirës tampon për lizë mund të ndryshojë në varësi të llojit të qelizave që lizohen dhe të aplikimit pasues. Megjithatë, një tretësirë tipike tampon për lizë përmban përbërës si detergjente, kripëra dhe inhibitorë të proteazave. Kripërat tamponuese (p.sh. Tris-HCl) dhe kripërat jonike (p.sh. NaCl) përdoren zakonisht për të rregulluar pH-në dhe osmolaritetin e lizatit.
Për të përgatitur një tretësirë tampon për lizë, përbërësit përzihen së bashku në përqendrimet dhe pH-në e përshtatshme. Përzierja zakonisht trazohet ose tundet derisa përbërësit të treten dhe tretësira të jetë homogjene.
Homogjenizimi me ultratinguj është një metodë që mund të përdoret për të ndihmuar në përgatitjen e një tretësire të mirë tampon për lizë, duke përmirësuar përzierjen dhe tretjen e përbërësve. Në këtë metodë, në përzierje aplikohen valë ultratingujsh – zakonisht në intervalin nga 20 deri në 30 kHz – duke krijuar flluska kavitacioni që shemben dhe gjenerojnë energji të lartë lokale, çka shkakton prerje mekanike dhe përzierjen e përbërësve.
Procesi i homogjenizimit me ultratinguj mund të ndihmojë në shpërbërjen e çdo grumbulli ose agregati të përbërësve dhe të sigurojë që tretësira të përzihet në mënyrë të njëtrajtshme. Si rrjedhojë, një tretësirë tampon për lizë e përmirësuar në këtë mënyrë mund të çojë në shpërbërje më efikase të qelizave dhe rendiment më të lartë të materialit të ekstraktuar. Gjithashtu, homogjenizimi me ultratinguj mund të zvogëlojë kohën e nevojshme për përgatitjen e një tretësire tampon për lizë krahasuar me metodat tradicionale të trazimit ose tundjes.
Në përgjithësi, homogjenizimi me ultratinguj është një mjet i fuqishëm për përmirësimin e cilësisë dhe efikasitetit të përgatitjes së tretësirave tampon për lizë.

Protokoll për përgatitjen me ultratinguj të tretësirës tampon për lizë

Ky është një protokoll i përgjithshëm për përgatitjen e një tretësire tampon për lizë duke përdorur një pajisje me ultratinguj me sondë:
 
Materialet:

• Detergjent(e) sipas zgjedhjes (p.sh. Triton X-100, SDS, CHAPS)
• Kripë(ra) sipas zgjedhjes (p.sh. NaCl, KCl)
• Inhibitorë të proteazave (p.sh. PMSF, aprotininë, leupeptinë)
• Pajisje me ultratinguj
• Përzierës
• Ujë i dejonizuar
• pH-metër ose shirita për matjen e pH-së

 
 
Udhëzime hap pas hapi:

1. Përcaktoni përbërjen e tretësirës tampon për lizë në bazë të qelizave ose indit që do të lizoni dhe të aplikimeve pasuese për të cilat do të përdorni lizatin. Përgatitni tretësirat stok të detergjenteve, kripërave dhe inhibitorëve të proteazave në përqendrimet e dëshiruara.
2. Shtoni tretësirat stok të detergjenteve, kripërave dhe inhibitorëve të proteazave në një gotë kimike ose balonë laboratorike.
3. Shtoni ujë të dejonizuar për ta çuar vëllimin në sasinë e dëshiruar të tretësirës tampon.
4. Përzieni përbërësit duke përdorur një përzierës për të përftuar një tretësirë të parapërzier.
5. Matni pH-në e tretësirës tampon duke përdorur një pH-metër ose shirita për matjen e pH-së dhe rregullojeni sipas nevojës me sasi të vogla acidi ose baze.
6. Përdorni pajisjen me ultratinguj me sondë për të homogjenizuar tretësirën e parapërzier, në mënyrë që të përftohet një tretësirë shumë homogjene. Për këtë qëllim, trajtojeni tretësirën me ultratinguj për disa sekonda derisa të përzihet plotësisht dhe të shpërbëhet çdo grumbull ose agregat. Kohëzgjatja dhe fuqia e trajtimit me ultratinguj mund të optimizohen në bazë të tretësirës specifike tampon për lizë dhe pajisjes me ultratinguj të përdorur.
7. Pas trajtimit me ultratinguj, matni sërish pH-në e tretësirës tampon dhe rregullojeni sipas nevojës.
8. Filtrojeni tretësirën tampon përmes një filtri prej 0,2 mikronësh për të hequr çdo mbetje ose agregat që mund të jetë formuar gjatë trajtimit me ultratinguj.
9. Tretësira tampon për lizë tani është gati për përdorim.

 
Shënim: Përbërja e saktë dhe pH-ja e tretësirës tampon për lizë mund të ndryshojnë në varësi të qelizave ose indit që lizohet dhe të aplikimeve pasuese. Protokolli i mësipërm është një udhëzues i përgjithshëm dhe mund të ketë nevojë të optimizohet për aplikime specifike.
 
Homogjenizuesit me ultratinguj përdoren zakonisht për shpërbërjen e qelizave dhe ekstraktimin e molekulave brendaqelizore. Prandaj, shumë aplikime të lizës përdorin trajtimin me ultratinguj me sondë jo vetëm për përgatitjen e tretësirës tampon për lizë, por edhe për shpërbërjen mekanike të qelizave dhe ekstraktimin.
Kjo i bën homogjenizuesit e indeve me ultratinguj një mjet të gjithanshëm për laboratorët dhe shpjegon përdorimin e gjerë të pajisjeve me ultratinguj në mikrobiologji, bioteknologji dhe shkencat e jetës.

Homogjenizues laboratorikë me ultratinguj

Hielscher Ultrasonics prodhon dhe furnizon homogjenizues dhe sonda me ultratinguj (sonotroda) me fuqi nominale dhe për vëllime mostrash të ndryshme. Kjo na mundëson t’ju ofrojmë pajisjen më të përshtatshme me ultratinguj për shpërbërje gjatë përgatitjes së mostrave tuaja. Ne përqendrohemi te cilësia më e lartë, komoditeti i jashtëzakonshëm për përdoruesin dhe rezultatet e besueshme të trajtimit me ultratinguj. Të gjitha pajisjet digjitale me ultratinguj kanë softuer inteligjent, programim dhe paracaktim të protokolleve të trajtimit me ultratinguj, kontroll në distancë përmes shfletuesit, kontroll të temperaturës, ndriçim të mostrës, si dhe regjistrim automatik të të dhënave në një kartë SD të integruar.

Projektim, prodhim dhe këshillim – Cilësi e prodhuar në Gjermani

Pajisjet me ultratinguj Hielscher janë të mirënjohura për standardet e tyre më të larta të cilësisë dhe projektimit. Qëndrueshmëria dhe përdorimi i lehtë mundësojnë integrimin pa vështirësi të pajisjeve tona me ultratinguj në impiantet industriale. Pajisjet me ultratinguj Hielscher përballojnë lehtësisht kushtet e vështira dhe mjediset kërkuese.

Hielscher Ultrasonics është një kompani e certifikuar sipas ISO dhe i kushton rëndësi të veçantë pajisjeve me ultratinguj me performancë të lartë, të cilat ofrojnë teknologji të fjalës së fundit dhe lehtësi përdorimi. Sigurisht, pajisjet me ultratinguj Hielscher janë në përputhje me CE dhe përmbushin kërkesat e UL, CSA dhe RoHs.

Tabela më poshtë ju jep një përmbledhje të pajisjeve tona të ndryshme laboratorike me ultratinguj: