Elucioni i antitrupave me anë të zërit duke përdorur sonikim me fuqi të lartë

Kromatografia e afinitetit është një teknikë e fuqishme për pastrimin e proteinave, e cila kërkon elucionin jospecifik të asistuar me ultratinguj është një teknikë e besueshme e përgatitjes së mostrës për të marrë antitrupa nga kromatografia e afinitetit. Elucioni efikas dhe i riprodhueshëm i antitrupave të synuar të lidhur me matricat e afinitetit është përmirësuar ndjeshëm nga sonikimi. Sonicatori i pllakës me performancë të lartë UIP400MTP është i përshtatshëm në mënyrë optimale për të elustruar numra të lartë të mostrave në pllaka 96 pusesh, mikrotitrash dhe shumëpushash dhe lehtëson rikuperimin e antitrupave në kromatografinë e afinitetit.

Si e lehtëson Sonication Elution?

Duke përdorur elucionin jospecifik të intensifikuar me ultratinguj, punonjësit dhe shkencëtarët e laboratorit mund të rikuperojnë në mënyrë efikase antitrupat e pastruar nga kolonat e kromatografisë së afinitetit. Këto antitrupa të pastruar përdoren përmes aplikimeve në rrjedhën e poshtme në fusha të ndryshme, të tilla si imunologjia, bioteknologjia dhe diagnostikimi mjekësor.

Elucioni është një hap i përgatitjes së mostrës që përdoret zakonisht për kromatografinë e afinitetit: Kromatografia e afinitetit shfrytëzon ndërveprimet shumë specifike midis një molekule të synuar (siç është një antitrup) dhe një ligandi të imobilizuar në një matricë kromatografie. Kjo lejon pastrimin selektiv të molekulës së synuar nga një përzierje komplekse duke përdorur afinitetin specifik të lidhjes së molekulave, p.sh. antitrupat.
Lidhja specifike e antitrupave: Antitrupat shpesh pastrohen duke përdorur kromatografinë e afinitetit, ku ato lidhen në mënyrë selektive me një ligand të imobilizuar në rrëshirën e kromatografisë. Ky mund të jetë një antigjen, një proteinë A/G ose ndonjë molekulë tjetër që ndërvepron në mënyrë specifike me antitrupin e interesit.
Elucioni: Pas lidhjes së antitrupit të synuar me matricën, hapi tjetër përfshin eluimin (ose larjen) e antitrupit të lidhur nga rrëshira. Ky hap i elucionit zakonisht përfshin ndërprerjen e lidhjes specifike midis antitrupit dhe ligandit. Ky hap mund të lehtësohet nga sonication.
Sonda tejzanor UP50H është një homogjenizues laboratorik që përdoret shpesh si ndërprerës, shpërndarës dhe emulsifikues i qelizave në laboratorë.Elucioni jo specifik i asistuar me ultratinguj: Ndryshe nga metodat specifike të elucionit që prishin vetëm ndërveprimin antitrup-ligand, metodat jospecifike të elucionit prishin të gjitha ndërveprimet në rrëshirë, duke përfshirë ato jospecifike. Kjo mund të jetë e dobishme kur kemi të bëjmë me ndotës të lidhur fort që mund të ndërhyjnë në procesin e pastrimit. Këtu hyn në lojë sonication! Valët tejzanor përdoren për të gjeneruar flluska të kavitacionit në tampon elucionin. Kur këto flluska shemben pranë matricës së rrëshirës, ato prodhojnë forca prerëse intensive të lokalizuara dhe mikrostream. Ky ndërprerje mekanike ndihmon në prishjen e ndërveprimeve jo specifike midis antitrupit dhe ligandit, duke lehtësuar elucionin e antitrupit të lidhur nga matrica.

Pllakat me 96 pusi dhe pllaka të tjera shumëpushash përpunohen më së miri duke përdorur sonikatorin UIP400MTP. Ky sistem tejzanor është ideal për lizën, fragmentimin e ADN-së dhe përpunimin e mostrave të tretshmërisë së qelizave në performancë të lartë.

Sonicator me fuqi të lartë UIP400MTP lehtëson elucionin e antitrupave dhe proteinave

Kërkesë informacioni





 

Ky tutorial shpjegon se çfarë lloji i sonikatorit është më i miri për detyrat tuaja të përgatitjes së mostrës si liza, ndërprerja e qelizave, izolimi i proteinave, fragmentimi i ADN-së dhe ARN-së në laboratorë, analiza dhe kërkime. Zgjidhni llojin ideal të sonikatorit për aplikimin tuaj, vëllimin e mostrës, numrin e mostrës dhe xhiros. Hielscher Ultrasonics ka homogjenizuesin ideal tejzanor për ju!

Si të gjeni sonikatorin e përsosur për ndërprerjen e qelizave dhe nxjerrjen e proteinave në shkencë dhe analizë

Miniatura e videos

 

Avantazhet e elucionit tejzanor duke përdorur sonication

Elucioni tejzanor ofron disa avantazhe, veçanërisht në kontekstin e teknikave të pastrimit të proteinave siç është kromatografia e afinitetit.
Për shembull, sonikacioni i kalon metodat alternative për sa i përket integritetit të proteinave, rikuperimit, pastërtisë, shkathtësisë dhe efikasitetit. Këto avantazhe e bëjnë elucionin tejzanor një zgjedhje të preferuar për proceset e pastrimit të proteinave, veçanërisht në aplikimet ku ruajtja e strukturës dhe aktivitetit të proteinave është thelbësore. Për më tepër, elucioni me ultratinguj dallohet për thjeshtësinë, efikasitetin, shkathtësinë dhe pajtueshmërinë me një gamë të gjerë proteinash dhe matricash afiniteti. Duke aplikuar valët e ultrazërit për të prishur ndërveprimet protein-matricë, elucioni tejzanor ofron një metodë të butë dhe të shpejtë për pastrimin e proteinave, duke siguruar shkallë të lartë rikuperimi dhe duke ruajtur integritetin e proteinave për aplikimet në rrjedhën e poshtme.

Më i butë në strukturën e proteinave: Elucioni me pH të ulët përfshin përdorimin e tamponëve acidikë për të prishur lidhjen midis proteinës së synuar (p.sh. antitrupat) dhe matricës së afinitetit. Megjithatë, ekspozimi ndaj pH të ulët mund të denatyrojë proteinat, duke kompromentuar potencialisht strukturën dhe aktivitetin e tyre biologjik. Në të kundërt, elucioni tejzanor kryesisht mbështetet në përçarje mekanike dhe jo në denatyrim kimik, duke e bërë atë më të butë në strukturën e proteinave. Kjo është veçanërisht e dobishme kur pastrohen proteinat delikate ose antitrupat të ndjeshëm ndaj ndryshimeve të pH.

  • Rreziku i reduktuar i grumbullimit: Elucioni me pH të ulët mund të rrisë rrezikun e grumbullimit të proteinave për shkak të shpalosjes së proteinave dhe ekspozimit të rajoneve hidrofobike. Agregimi mund të çojë në humbje të aktivitetit të proteinave dhe vështirësi në përpunimin e rrjedhës së poshtme. Elucioni tejzanor, për krahasim, minimizon rrezikun e grumbullimit duke përdorur forca mekanike për të prishur ndërveprimet midis proteinës dhe matricës së afinitetit pa ndryshuar ndjeshëm konformacionin vendas të proteinës.
  • Rimëkëmbja dhe pastërtia e përmirësuar: Elucioni tejzanor mund të arrijë norma më të larta rikuperimi dhe nivele pastërtie në krahasim me metodat alternative të elucionit. Ndërprerja mekanike e siguruar nga ultratingulli liron në mënyrë efektive proteinat e lidhura nga matrica e afinitetit duke minimizuar ndërveprimet jo specifike. Kjo rezulton në rikuperim të zgjeruar të proteinës së synuar me ndotje të reduktuar nga molekulat e lidhura jo specifike, duke kontribuar në pastërtinë më të lartë të fraksionit të elutur.
  • Përpunimi me përpunim të lartë: Hielscher Ultrasonics ofron sonikatorë të ndryshëm për pastrimin, elucionin dhe biopanizimin e proteinave me ndihmën e ultrazërit. Sonicatori i pllakës mikrotitërore UIP400MTP lejon përpunimin masiv të mostrave në pllaka 96 pusesh dhe pllaka të tjera shumëpushash. VialTweeter është ideal për sonikimin e njëkohshëm pa telashe të deri në 10 tuba si flakonet Eppendorf në të njëjtat kushte. CupHorn është një sonikator i gjithanshëm ideal për disa tuba, gota të vogla dhe enë të tjera. Dhe sigurisht, sonikatorët klasikë të tipit sonda me mikromajë janë një mjet laboratorik i mirëpërdorur për përgatitjen e mostrës. Gama e produkteve Hielscher Ultrasonics ka sonikatorin ideal për konfigurimin e eksperimentit tuaj dhe madhësinë tuaj të mostrës.
  • Shkathtësia dhe pajtueshmëria: Elucioni tejzanor është i pajtueshëm me një gamë të gjerë proteinash dhe matricash afiniteti, duke ofruar shkathtësi në aplikimet e pastrimit. Në të kundërt, elucioni me pH të ulët mund të mos jetë i përshtatshëm për disa proteina që janë të ndjeshme ndaj kushteve acidike ose për matricat e afinitetit që janë të prirura për degradim ose kullim në pH të ulët. Elucioni tejzanor ofron një alternativë të butë dhe universale të zbatueshme që mund të përshtatet për nevojat specifike të pastrimit pa kompromentuar integritetin e proteinave ose stabilitetin e matricës.
  • Koha dhe efikasiteti: Elucioni tejzanor zakonisht kërkon kohë më të shkurtër elucioni në krahasim me metodat e tjera të elucionit. Lëshimi i shpejtë dhe efikas i proteinave të lidhura i lehtësuar nga ultratingulli redukton kohën e përpunimit dhe rrit efikasitetin e përgjithshëm të pastrimit, duke e bërë atë një opsion tërheqës për aplikime me performancë të lartë ose kur kërkohen rezultate të ndjeshme ndaj kohës.
96-Well Plate Sonicator UIP400MTP për lizën e qelizave, nxjerrjen e ADN-së, fragmentimin e ADN-së, tretjen e qelizave dhe pastrimin e proteinave.

96-Sonicator pjatë pusi UIP400MTP për sonikimin e pllakave me shumë pusi, pllaka PCR dhe ELISA

 

VialTweeter në procesorin tejzanor UP200ST

Sonicator VialTweeter për sonikimin e njëkohshëm të 10 mostrave, p.sh. për të prishur qelizat dhe për të nxjerrë proteina

Biopanzim me asistencë tejzanor

Biopanning është një teknikë kritike në pastrimin e antitrupave, veçanërisht kur duhen marrë antitrupa shumë specifikë për kërkime ose diagnostikime mjekësore. Biopanning është procesi në të cilin antitrupat izolohen nga një përzierje e antitrupave, e ashtuquajtura bibliotekë e antitrupave.

Si funksionon Biopanning me ultratinguj?

Fillon me një bibliotekë antitrupash, një përzierje antitrupash të ndryshëm. Çdo antitrup karakterizohet nga forma dhe specifika e tij unike. Për analiza dhe terapeutikë, duhet të izolohen antitrupa specifikë që njohin një objektiv të caktuar, si një virus ose qelizë kanceroze. Duke përdorur biopanning, këto antitrupa specifikë mund të izolohen. Ultratingulli ndihmon në lehtësimin e procesit të biopanizimit duke e bërë pastrimin e antitrupave më efikas.

Duke filluar me një bibliotekë të antitrupave, antitrupat zakonisht shfaqen në sipërfaqen e një bakteriofagu, qelize majaje ose një sistem tjetër ekrani. Kjo bibliotekë përfaqëson një gamë të larmishme antitrupash.
Në hapin e parë, kjo bibliotekë është e ekspozuar ndaj molekulës tuaj të synuar. Antitrupat që lidhen me objektivin do të ngjiten, ndërsa të tjerët do të lahen. Për të hequr antitrupat e palidhur, mostrat lahen disa herë me një zgjidhje tampon.

Tani, ne kemi mostra që përmbajnë vetëm antitrupa të lidhur. Megjithatë, kjo do të thotë se antitrupat janë ende të lidhur me sistemin e tyre të shfaqjes. Për t'i çliruar ato, duhet të prishet ndërveprimi antitrup-ligand. Ky hap njihet si elucioni. Kampionët mund të eliminohen duke përdorur një tretësirë që prish lidhjen, p.sh. duke përdorur një tampon elucioni specifik, një kaotropik, që ul vlerën e pH-së, duke aplikuar nxehtësi etj. Këto teknika elucioni shkatërrojnë lidhjen antitrup-ligand, por gjithashtu mund të përkeqësojnë vetë antitrupat. Kjo është arsyeja pse sonikacioni përdoret si teknikë alternative për të hequr butësisht antitrupat nga objektivi i tyre.

Pas përfundimit të hapit të elucionit, marrim antitrupa të pastruar, të gatshëm për përdorim në kërkime, diagnostike ose terapi.

Biopanning është një teknikë e fuqishme në pastrimin e antitrupave dhe elucioni me ultratinguj lehtëson dhe intensifikon efektivitetin – duke rezultuar në antitrupa shumë të pastruar dhe të padëmtuar. Biopanizimi tejzanor u mundëson shkencëtarëve të izolojnë antitrupa shumë specifikë nga mostrat komplekse, duke hapur dyert për një gamë të gjerë aplikimesh.

Sonicators për pastrimin e antitrupave

Sonicers Hielscher janë mjete të mirë-krijuara që përdoren në objektet më të mira kërkimore në mbarë botën. Të vlerësuar për dizajnin e tyre më të avancuar dhe performancën superiore, sonikatorët Hielscher konsiderohen si mjete të domosdoshme laboratorike në fushat e bioteknologjisë dhe biologjisë molekulare. Hielscher Ultrasonics ofron sonikatorë për një kampion të vetëm, si dhe përgatitjen e mostrës me performancë të lartë, të cilat lehtësojnë pastrimin efikas të antitrupave dhe elucionin e molekulave të lidhura me objektivin, dhe mundësojnë biopanning efikase për të izoluar antitrupa specifikë me saktësi dhe shpejtësi.
Në kontekstin e pastrimit të antitrupave, sonikatorët Hielscher shkëlqejnë në lehtësimin e hapave të larjes dhe elucionit duke hequr në mënyrë efikase antitrupat e palidhur duke ruajtur integritetin e komplekseve të lidhura me objektivin. Kontrolli i saktë dhe shkallëzueshmëria e tyre lejojnë kushte të përshtatura të përpunimit, duke siguruar rezultate optimale të pastrimit në një gamë të gjerë vëllimesh dhe kompleksiteti të mostrave.
Sonicatorët Hielscher përfaqësojnë inovacionin teknologjik në përpunimin me ultratinguj, duke ofruar aftësi të pashembullta për pastrimin, elucionin dhe biopanizimin e antitrupave. Me saktësinë, besueshmërinë dhe lehtësinë e funksionimit të tyre, sistemet e ndryshme tejzanor ofrojnë efikasitet dhe shkathtësi optimale për kërkimin biofarmaceutik, diagnostikimin dhe terapinë.
Na kontaktoni tani për të mësuar më shumë rreth sonikatorëve Hielscher për pastrimin, elucionin dhe biopanizimin e antitrupave! Stafi ynë teknik me përvojë të mirë është i lumtur të diskutojë aplikimin tuaj të lidhur me antitrupat!

Pse Hielscher Ultrasonics?

  • efikasitet te larte
  • Teknologjia më e fundit
  • seriozitet & Fuqia
  • kontroll i rregullueshëm, i saktë i procesit
  • grumbull & në rradhë
  • për çdo vëllim
  • softver inteligjent
  • veçoritë inteligjente (p.sh., të programueshme, protokollimi i të dhënave, telekomanda)
  • Lehtë dhe e sigurt për të vepruar
  • mirëmbajtje të ulët
  • CIP (i pastër në vend)

Dizajn, Prodhim dhe Konsulencë – Cilësi e prodhuar në Gjermani

Ultrasonikët Hielscher janë të njohur për cilësinë e tyre më të lartë dhe standardet e dizajnit. Fortësia dhe funksionimi i lehtë lejojnë integrimin e qetë të ultrasonikëve tanë në objektet industriale. Kushtet e vështira dhe mjediset kërkuese trajtohen lehtësisht nga ultrasonikët Hielscher.

Hielscher Ultrasonics është një kompani e certifikuar ISO dhe i kushton theks të veçantë ultratingujve me performancë të lartë që paraqesin teknologjinë më të fundit dhe lehtësinë ndaj përdorimit. Sigurisht, ultrasonikët Hielscher janë në përputhje me CE dhe plotësojnë kërkesat e UL, CSA dhe RoHs.

Na kontaktoni! / Pyet Na!

Pyesni për më shumë informacion

Ju lutemi përdorni formularin e mëposhtëm për të kërkuar informacion shtesë në lidhje me procesorët tejzanor, aplikacionet dhe çmimin. Ne do të jemi të lumtur të diskutojmë procesin tuaj me ju dhe t'ju ofrojmë një sistem tejzanor që përmbush kërkesat tuaja!









Ju lutem vini re tonë Politika e privatësisë.


Videoja tregon sistemin e përgatitjes së mostrës me ultratinguj UIP400MTP, i cili lejon përgatitjen e besueshme të mostrës së çdo pllake standarde me shumë pusi duke përdorur ultratinguj me intensitet të lartë. Aplikimet tipike të UIP400MTP përfshijnë lizën e qelizave, ADN-në, ARN-në dhe prerjen e kromatinës, si dhe nxjerrjen e proteinave.

Ultrasonicator UIP400MTP për sonifikimin e pllakave me shumë puse

Miniatura e videos

Krahasimi i Elucionit tejzanor kundrejt Teknikave të Elucionit Tradicional

  1. Elucioni i gradientit: Në elucionin e gradientit, forca lidhëse midis proteinës së synuar dhe matricës së afinitetit zvogëlohet gradualisht duke ndryshuar përbërjen e tamponit të elucionit. Kjo mund të përfshijë faktorë që ndryshojnë si pH, përqendrimi i kripës ose përqendrimi i ligandëve konkurrues. Elucioni i gradientit lejon rregullimin e mirë të kushteve të elucionit për të çliruar në mënyrë selektive proteinën e synuar duke minimizuar lidhjen jo specifike.
    Përparësitë e elucionit me ultratinguj: Elucioni tejzanor ofron një çlirim më të shpejtë dhe uniform të proteinave të lidhura në krahasim me elucionin gradient. Ndërsa elucioni me gradient kërkon optimizim dhe monitorim të kujdesshëm të kushteve të elucionit, elucioni tejzanor ofron një metodë më të thjeshtë dhe më efikase për rikuperimin e proteinave.
  2. Elucioni konkurrues: Në elucionin konkurrues, një përqendrim i lartë i një ligandi konkurrues futet në buferin e elucionit për të prishur lidhjen midis proteinës së synuar dhe matricës së afinitetit. Ligandi konkurrues konkurron me proteinën e synuar për vendet lidhëse në matricë, duke zhvendosur kështu proteinën dhe duke e lëshuar atë në eluat.
    Përparësitë e elucionit me ultratinguj: Elucioni tejzanor ofron një alternativë më të butë dhe më të gjithanshme ndaj elucionit konkurrues. Elucioni konkurrues mund të kërkojë përdorimin e përqendrimeve të larta të agjentëve kaotropikë (dmth. një tretësirë e përbashkët që prish rrjetin e lidhjes hidrogjenore midis molekulave të ujit dhe zvogëlon stabilitetin e gjendjes vendase të proteinave duke dobësuar efektin hidrofobik) ose kimikate të ashpra, të cilat mund të ndikojnë Stabiliteti dhe aktiviteti i proteinave. Në të kundërt, elucioni me ultratinguj siguron përçarje mekanike pa pasur nevojë për agjentë kimikë shtesë, duke ruajtur integritetin e proteinave dhe duke siguruar shkallë të lartë rikuperimi.
  3. Elucioni i shkaktuar nga temperatura: Elucioni i shkaktuar nga temperatura përfshin ndryshimin e temperaturës së tamponit të elucionit për të prishur lidhjen midis proteinës së synuar dhe matricës së afinitetit. Kjo mund të arrihet duke rritur ose ulur temperaturën, në varësi të ndërveprimit specifik protein-matricë.
    Përparësitë e elucionit me ultratinguj: Elucioni tejzanor ofron një metodë më të shpejtë dhe më të kontrolluar për elucionin e proteinave në krahasim me metodat e shkaktuara nga temperatura. Ndërsa elucioni i shkaktuar nga temperatura mund të kërkojë kontroll të saktë të gradientëve të temperaturës dhe kohë më të gjata të ekuilibrit, elucioni me ultratinguj siguron ndërprerje të menjëhershme mekanike, duke rezultuar në kohë më të shkurtra elucioni dhe efikasitet të përmirësuar.
  4. Elucioni enzimatik: Elucioni enzimatik përdor enzima specifike që çajnë lidhjet midis proteinës së synuar dhe matricës së afinitetit, duke e lëshuar proteinën në eluat. Kjo metodë është veçanërisht e dobishme për proteinat që janë të lidhura fort me matricën ose për aplikime që kërkojnë kontroll të saktë mbi kushtet e elucionit.
    Përparësitë e elucionit me ultratinguj: Elucioni tejzanor ofron një alternativë jo enzimatike dhe pa kimikate ndaj elucionit enzimatik. Ndërsa elucioni enzimatik mund të kërkojë optimizimin e përqendrimit të enzimës, kohës së inkubacionit dhe kushteve të pH, elucioni me ultratinguj ofron një metodë të drejtpërdrejtë dhe të zbatueshme universale për rikuperimin e proteinave pa nevojën për reagentë shtesë ose pajisje të specializuara.
Sonicator për përgatitjen e mostrës me fuqi të lartë! Sonicatori i pllakave UIP400MTP lehtëson lizën, nxjerrjen e proteinave, fragmentimin e ADN-së dhe tretjen e qelizave të mostrave biologjike në pllaka 96 pusesh.

Sonicator pllakash UIP400MTP për çdo pllakë 96 pusesh, pllakë mikrotitërore dhe pllaka me shumë pusi.



Literatura / Referencat


Ultrasonikë me performancë të lartë! Gama e produkteve Hielscher mbulon spektrin e plotë nga aparati ultratingullor kompakt laboratorik mbi njësitë e sipërme të stolit deri te sistemet tejzanor të plotë industrial.

Hielscher Ultrasonics prodhon homogjenizues tejzanor me performancë të lartë nga laboratormadhësia industriale.


Ne do të jemi të lumtur të diskutojmë procesin tuaj.

Le të kontaktojmë.