Përgatitja e mostrave me ultratinguj për analizën e THC-së
- Ekstraktimi me ultratinguj është një metodë e provuar për prodhimin e THC-së, por mund të përdoret edhe për qëllime analitike.
- Trajtimi me ultratinguj është një metodë e zakonshme e përgatitjes së mostrave që përdoret për analizën e përmbajtjes totale të THC-së në produktet e kanabisit.
- Ekstraktimi me ultratinguj zbatohet te mostrat përpara analizave TLC, GC dhe HPLC.
Ekstraktimi i THC-së me ultratinguj
THC-ja, ose tetrahidrokanabinoli (delta-9-tetrahidrokanabinol), është substanca kimike që shkakton shumicën e efekteve psikologjike të marihuanës. Për llojin e kanabisit njihen më shumë se 400 varietete të ndryshme. Në varësi të varietetit specifik të kanabisit, kanabisi mund të ketë një përmbajtje THC-je prej vetëm 0,3 wt%. Në varietete të tjera, përmbajtja e THC-së mund të arrijë deri në 20 wt%.
Edhe produktet e ndryshme të kanabisit ndryshojnë ndjeshëm: përqendrimi mesatar i THC-së në marihuanë varion nga 1 deri në 5%; në hashash, përmbajtja e THC-së është nga 5 deri në 15%, ndërsa në vajin e hashashit është mesatarisht 20%. Sasia e THC-së në dozat e marihuanës për përdorim rekreativ ndryshon shumë dhe, sa më e ulët të jetë përmbajtja e THC-së në marihuanë, aq më shumë duhet të konsumojë përdoruesi për të përjetuar efektet e dëshiruara.
Përgatitja e mostrave me ultratinguj përdoret për të analizuar përmbajtjen e THC-së
- për kontrollin e cilësisë së produkteve të THC-së për përdorim rekreativ,
- për përcaktimin e cilësisë së produkteve farmaceutike të THC-së,
- për dallimin e kërpit për përdorim si drogë nga kërpi për prodhimin e fibrave.
Për analizën e THC-së përdoren zakonisht metodat kromatografike në vijim: kromatografia në shtresë të hollë (TLC), kromatografia e gaztë (GC) dhe kromatografia e lëngët me performancë të lartë (HPLC)
Protokolli i përgatitjes së mostrave me ultratinguj për analizën TLC
Përgatitja e mostrave: Për përgatitjen e mostrave, materiali bimor i tharë duhet të macerohet dhe të bluhet në një pluhur homogjen. Për ekstraktimin me ultratinguj, në një flakon përzihen 500mg pluhur i bimës së kanabisit dhe 5mL përzierje metanol–kloroform (në raportin 9 : 1). Sonikimi mund të kryhet duke përdorur një sonikator me majë mikro, pajisjen VialTweeter ose pajisjen ultrasonike CupHorn. Koha e sonikimit është rreth 5 min. Më pas, lëreni mostrën të qëndrojë për të paktën 5 min. Hollojeni supernatantin e kthjellët me përzierjen e ekstraktimit (v/v: 1 : 10). THC e lirë: 1μL në pllakën TLC
Dekarboksilimi: 100μL e ekstraktit avullohen deri në tharje. Mbetja nxehet në 180℃ për 4 min. Shtoni 500μL metanol–kloroform (v/v 9 : 1). Sonikoni për 5 min. Hollojeni supernatantin e kthjellët me përzierjen e ekstraktimit (v/v: 1 : 10).
Kalibrimi: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
Xhel silici për TLC F-254, Merck 5729
Skaner TLC II, softueri CATS3, Camag Muttenz Eluenti:
Acetat etili : Toluen : Kloroform = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
Derivatizimi paskromatografik: kripë Fast Blue 0,1% në NaOH 0,1 M
Densitometria në 550 nm
Tetrahidrokanabinol (Δ9-THC) për analizë dhe ekstraktim
Protokolli i përgatitjes së mostrave me ultratinguj për analizën GC
Përgatitja e mostrave: Materiali bimor i tharë macerohet dhe bluhet në një pluhur homogjen. Për ekstraktimin, në një flakon përzihen 500mg pluhur i bimës së kanabisit dhe 10mL përzierje metanol–heksan (në raportin 9 : 1). Sonikimi mund të kryhet duke përdorur një pajisje ultrasonike me sondë me majë mikro, pajisjen VialTweeter ose pajisjen ultrasonike CupHorn. Sonikojeni mostrën për 15–20 min. Shkundeni mostrën dhe lëreni të qëndrojë për të paktën 5 min. Hollojeni supernatantin e kthjellët me përzierjen e ekstraktimit (v/v 1: 20).
Dekarboksilimi: në insertin e injektorit
Temperatura e injektorit 250℃
Kalibrimi: nga 5 ng/μL deri në 250 ng/μL
GC: HP 6890 me 5973 MSD dhe marrës automatik mostrash 7683, injektimi: 1μL, koha pa ndarje të rrjedhës: 2 min.
Kolona: HP-5 MS, 30m, diametri 250 μm, trashësia e filmit 0,25 μm
Gazi mbartës: He, 35 psi, prurja konstante: 4 mL/min.
Furra: 100℃ për 1min.; rritje e temperaturës me 15℃ /min. deri në 280℃; 280℃ për 5 min. MSD: SCAN: m/e 35 – 550
Protokolli i përgatitjes së mostrave me ultratinguj për analizën HPLC
Përgatitja e mostrave (në mënyrë analoge me përgatitjen për GC): Materiali bimor i tharë macerohet dhe bluhet në një pluhur homogjen. Për ekstraktimin, në një flakon përzihen 500mg pluhur i bimës së kanabisit dhe 10mL përzierje metanol–heksan (në raportin 9 : 1). Sonikimi mund të kryhet duke përdorur një sonikator me sondë me majë mikro, pajisjen VialTweeter ose pajisjen ultrasonike CupHorn. Sonikojeni mostrën për 15–20 min. Shkundeni mostrën dhe lëreni të qëndrojë për të paktën 5 min. Hollojeni supernatantin e kthjellët me përzierjen e ekstraktimit (v/v 1: 20).
VialTweeter për përgatitjen e mostrave me ultratinguj
Parakolona: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Kolona: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Eluenti: izokratik 36% TEAP 25 mmol/L, 64% acetonitril, përcaktimi sasior në 210nm
Kalibrimi: 0,001 – 0,10 μg/μL
Kalibrimi: 0,01 – 0,50 μg/μL
Koha e retencionit: për CBD: 6,2 min.; për CBN: 8,0 min.; për THC: 9,4 min.; për THC-A: 11,0 min
LOD: CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St me majë mikro për sonikimin e mostrave
Literatura/Referencat
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Analiza kimike forenzike të materialit bimor të kërpit që përmban THC. Nga kromatografia në shtresë të hollë, përmes GC-së, te metoda HPLC. Applica 2006.
Fakte që ia vlen të njihni
Marihuana përbëhet nga lulet e thara, si edhe gjethet dhe kërcellet poshtë tyre, të bimës femërore të kanabisit. Kjo është forma më e konsumuar dhe përmban rreth 3% deri në 20% THC. Forma të veçanta të marihuanës, të përftuara përmes seleksionimit intensiv, arrijnë një përmbajtje THC-je prej më shumë se 30%. Marihuana është lënda e parë për të gjitha llojet e tjera të produkteve të kanabisit që përmbajnë THC. Për ta shndërruar kanabinoidin më të bollshëm, acidin tetrahidrokanabinolik (THCA), në THC-në psikoaktive, duhet të nisë një proces dekarboksilimi. Prandaj, kanabisi dhe ekstraktet e tij duhet të nxehen ose të dehidratohen për të shkaktuar dekarboksilimin.
Kief i referohet një pluhuri të pasur me trikome, i cili përftohet duke situr gjethet dhe lulet e kanabisit. Ai konsumohet ose në formë pluhuri, ose i ngjeshur dhe i përdorur në pllaka hashashi.
Hashashi ose hash është një pllakë ose topth rrëshire të përqendruar, që prodhohet ose nga kief-i i ngjeshur, ose nga rrëshira që kruhet nga sipërfaqja e bimës dhe rrotullohet për të formuar toptha. Ai shfaqet në ngjyra të ndryshme, nga e zeza deri te kafeja e artë, në varësi të pastërtisë dhe burimit. Mund të konsumohet nga goja ose të pihet si tym, p.sh. në çibuk, nargjile, bong, çibuk me ujë, avullues, duke përdorur një thikë të nxehtë, në cigare të mbështjella, i përzier me sytha kanabisi ose duhan, duke thithur tymin nga një shishe, ose të përdoret si përbërës në ushqim.
Tinktura e kanabisit i referohet ekstraktit të kanabinoideve në alkool. Kanabinoidet ekstraktohen nga bima e kanabisit duke përdorur pije me përmbajtje të lartë alkooli (kryesisht alkool drithërash) për të krijuar tinkturën.
Vaji i hashashit është një matricë rrëshinore kanabinoidesh e prodhuar me ekstraktim me tretës, e formuar në një masë të ngurtësuar ose viskoze. Vaji i hashashit është një nga produktet më të fuqishme të kanabisit për shkak të nivelit të lartë të përbërjes psikoaktive. Përdorimi i vajit të hashashit të ekstraktuar me butan dhe dioksid karboni superkritik kohët e fundit është bërë gjithnjë e më popullor.
Infuzionet u referohen llojeve të ndryshme të infuzioneve të kanabisit, të cilat ndryshojnë nga njëra-tjetra sipas shumëllojshmërisë së gjerë të tretësve jo të avullueshëm që mund të përdoren për të prodhuar një infuzion kanabisi. Për të përgatitur një infuzion të tillë, materiali bimor i kanabisit përzihet me një tretës dhe më pas presohen dhe filtrohen për të transferuar vajrat nga bima në tretës. Gjalpi i kakaos, gjalpi i qumështit, vaji i gatimit, glicerina dhe hidratuesit e lëkurës janë tretës që përdoren zakonisht.
Marihuana mjekësore i referohet përdorimit të bimës së kanabisit si terapi bimore e rekomanduar nga mjeku, si edhe përdorimit të THC-së sintetike dhe kanabinoideve sintetike. Ky përdorim përgjithësisht kërkon recetë dhe shpërndarja zakonisht bëhet brenda një kuadri të përcaktuar nga ligjet vendore. Disa studime kërkimore kanë treguar se përdorimi i kanabisit ose i derivateve të tij vepron kundër, p.sh., të përzierave dhe të vjellave të shkaktuara nga kimioterapia, dhimbjes neuropatike dhe sklerozës multiple.