Zhvendosja e biofilmit duke përdorur Sonicator me fuqi të lartë UIP400MTP
Sonicers me fuqi të lartë të projektuar për pllaka me shumë pus dhe pllaka 96 pusesh janë mjete thelbësore në kërkimin e biofilmit, veçanërisht për zhvendosjen dhe heqjen e biofilmave nga puset, tubat, kunjat dhe enët Petri. Këta sonikatorë lehtësojnë përpunimin e mostrave të shumta në të njëjtën kohë, duke përmirësuar efikasitetin dhe qëndrueshmërinë. Sonicatori Hielscher me performancë të lartë UIP400MTP është ideali për sonikimin e pllakave me shumë pus, pjata me 96 pusi, disa tuba ose enët Petri. Dridhja dhe kavitacioni uniform tejzanor heq biofilmat nga fundi i pllakës. Kjo e bën sonikatorin me pllaka me shumë pllakë UIP400MTP mjetin ideal për përgatitjen e mostrës për heqjen e biofilmit, analizat e biofilmit dhe kërkimin e baktereve dhe mikrobeve.
Sonicator me shumë pllakë UIP400MTP për Zhvendosjen dhe heqjen e Biofilmit në Përgatitjen e Kampionit me Përçueshmëri të Lartë:
- Biofilmat bakterial
- Biofilmat eukariote
- Biofilmat fungale
- Biofilma arkeale
- Biofilma polimikrobikë / Biofilma të specieve të përziera
- Biofilma dentare (pllakë)
- Biofilmat detarë
- Biofilma mjedisore
- Biofilma të pajisjeve mjekësore
- Pezullimet e qelizave të kultivuara
UIP400MTP sonikator me performancë të lartë për heqjen e biofilmit nga pllakat me shumë pusi, pjatat me 96 pusi, tubat dhe enët Petri.
Ky sonikator Hielscher është i certifikuar ISO, në përputhje me UL, RoHs dhe CE. Ka aftësi operimi 24/7 për flukse pune me performancë të lartë.
Zhvendosja dhe heqja e biofilmit duke përdorur Sonication
Sonicatori Hielscher me performancë të lartë UIP400MTP është përshtatur për sonikimin e besueshëm dhe uniform të pllakave me shumë pus dhe 96 pusi. Thelbësore në kërkimin e biofilmit, sonikatori me pllaka me shumë pllakë UIP400MTP ofron një teknologji të besueshme për zhvendosjen dhe heqjen e biofilmave nga pjatat me shumë pus, tubat dhe enët Petri. Duke lejuar përgatitjen e mostrës me performancë të lartë, UIP400MTP rrit efikasitetin dhe konsistencën e analizave të biofilmit dhe studimeve të tjera të lidhura, gjë që e bën këtë sonikator të domosdoshëm si në kërkimin akademik ashtu edhe në atë industrial të mikrobiologjisë.
Heqja e biofilmit duke përdorur sonikacion: Për heqjen e biofilmit, biofilmat lejohen të formohen në puset e pllakës me shumë pusi në kushte të kontrolluara. Më pas pllaka vendoset në sonikator, ku parametrat si koha, amplituda dhe frekuenca vendosen sipas kërkesave specifike të llojit të biofilmit dhe qëllimeve eksperimentale. Valët ultrasonike gjenerojnë kavitacion brenda çdo pusi, duke ndërprerë në mënyrë efektive matricën e biofilmit dhe duke zhvendosur qelizat.
Përgatitja e mostrës tejzanor për biofilma: Në analizat e biofilmave, sonikatorët me performancë të lartë kanë disa aplikime. Pas sonikimit, qelizat e biofilmave të zhvendosura mund të mblidhen dhe të përcaktohen sasior duke përdorur analiza të ndryshme të tilla si ngjyrosja e kristal vjollcës, numërimi i qelizave të qëndrueshme ose matja e biomasës. Për më tepër, biofilmat mund të trajtohen me agjentë antimikrobikë të ndjekur nga sonikimi për të vlerësuar efikasitetin e këtyre agjentëve në prishjen e biofilmave. Qelizat e biofilmave të shpërndara janë gjithashtu të dobishme për studime gjenomike dhe proteomike, pasi ato mund të përdoren për nxjerrjen e ADN-së, ARN-së dhe proteinave për analiza të mëtejshme molekulare.
Sonicers me performancë të lartë ofrojnë përparësi të shumta. Ato lejojnë përpunimin e njëkohshëm të mostrave të shumta, duke kursyer kohë dhe punë, dhe sigurojnë trajtim uniform të të gjitha puseve, duke reduktuar ndryshueshmërinë dhe duke përmirësuar riprodhueshmërinë e rezultateve. Këto pajisje janë gjithashtu të përshtatshme për studime në shkallë të gjerë, duke mundësuar shqyrtimin me performancë të lartë të formimit, ndërprerjes dhe trajtimit të biofilmit.
(A) Pllakë që përmban TSB me 2% glukozë e përdorur për formimin e biofilmit, rikuperimin e qelizave dhe përcaktimin e MIC dhe MBCB; (B) Kapak me kunja për formimin e biofilmave stafilokoksikë.
Qelizat e biofilmit të formuara në kunjat u zhvendosën duke përdorur sonikatorin Hielscher UIP250MTP për 5 minuta në pllaka 96 pusesh që përmbajnë mjedis të freskët të kulturës për rikuperimin e qelizave.
(Foto dhe studim: ©de Oliveira et al., 2016)
Sonicator me pllaka 96 pusesh UIP400MTP për sonikimin e pllakave mikrotitërore dhe shumëpushash
Rëndësia e heqjes së biofilmit tejzanor në kërkimin e biofilmit
Heqja e biofilmit me ultratinguj është thelbësore në kërkimin e biofilmit për shkak të efektivitetit, qëndrueshmërisë, efikasitetit dhe shkathtësisë së tij. Siguron ndërprerje të plotë dhe uniforme të biofilmave, duke lehtësuar analizën e saktë dhe të riprodhueshme në analizat e ndryshme të biofilmave. Këto analiza, duke përfshirë ngjyrosjen kristal vjollce, numërimin e qelizave të qëndrueshme, bioluminescencën ATP, reduktimin e XTT, analizën mikroskopike dhe nxjerrjen e acidit nukleik/proteinës, ofrojnë njohuri gjithëpërfshirëse në formimin e biofilmit, qëndrueshmërinë, strukturën dhe përgjigjen ndaj trajtimeve.
Sonication zhvendos dhe heq biofilmin butësisht nga nënshtresat e ngurta të tilla si fundi i pllakave, kunjat, kunjat ose mbulesat.
- Ndërprerja efektive e biofilmave:
Kavitacioni: Valët tejzanor krijojnë flluska të kavitacionit që gjenerojnë forca të forta prerëse gjatë kolapsit, duke prishur në mënyrë efektive strukturën komplekse të biofilmave.
Zhvendosja e plotë: Siguron që qelizat e biofilmit të jenë larguar plotësisht nga sipërfaqet, gjë që është thelbësore për sasinë dhe analizën e saktë. - Konsistenca dhe riprodhueshmëria:
Trajtimi i njëtrajtshëm: Sonicers me fuqi të lartë sigurojnë shpërndarje uniforme të energjisë tejzanor në të gjitha mostrat, duke reduktuar ndryshueshmërinë dhe duke përmirësuar riprodhueshmërinë.
Standardizimi: Mundëson standardizimin e protokolleve të ndërprerjes së biofilmit, duke çuar në rezultate më të besueshme dhe të krahasueshme. - Efikasiteti:
Kapaciteti i përçueshmërisë së lartë: Lejon përpunimin e njëkohshëm të mostrave të shumta, duke kursyer kohë dhe duke rritur xhiron në studimet e biofilmit.
Automatizimi: Mund të integrohet lehtësisht në flukset e automatizuara të punës, duke rritur më tej efikasitetin dhe duke reduktuar punën manuale. - Ruajtja e qëndrueshmërisë dhe integritetit:
Kushtet e kontrolluara: Parametrat si koha dhe intensiteti mund të rregullohen mirë për të prishur biofilmat pa kompromentuar qëndrueshmërinë ose integritetin e qelizave, gjë që është e rëndësishme për analizat e mëvonshme. - Shkathtësia:
Zbatueshmëri e gjerë: I përshtatshëm për lloje të ndryshme biofilmash (bakteriale, kërpudhore, lloje të përziera) dhe i pajtueshëm me sipërfaqe dhe materiale të ndryshme të përdorura në kërkimin e biofilmave.
Sonicatori me pllaka me shumë pllakë UIP400MTP ofron përfitime të shumta, të cilat i bëjnë ato një mjet të domosdoshëm në përgatitjen e mostrës me fuqi të lartë.
Hielscher Ultrasonics ofron modele të ndryshme sonikatorësh duke përfshirë sonikatorë të tipit sonda, sonikatorë pa kontakt dhe sonikatorë me fuqi të lartë. Kontaktoni me ne tani! Ekspertët tanë teknikë do të jenë të lumtur të diskutojnë me ju kërkesat tuaja të përpunimit dhe t'ju rekomandojnë sonikatorin më të përshtatshëm për aplikimin tuaj të biofilmit.
Sonicator i pllakës mikrotitërore UIP400MTP përdoret për të hequr biofilmat për kërkime
Literatura / Referencat
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- UIP400MTP-Multi-well-Plate-Sonicator-Infographic
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
Pyetjet e bëra më shpesh rreth Kërkimit të Biofilmit
Cila është Skela më e zakonshme për Biofilma?
Skela më e zakonshme për biofilmat në hulumtimet laboratorike është pllaka e mikrotitrit. Pllakat me mikrotitër, veçanërisht formati 96-pushash, përdoren gjerësisht për shkak të shkathtësisë së tyre, lehtësisë së përdorimit dhe përputhshmërisë me teknika të ndryshme analitike.
Cila është pllaka më e mirë 96 pusesh për biofilmat?
Pllaka më e mirë 96 pusesh për studimet e biofilmit varet nga disa faktorë duke përfshirë llojin e biofilmit që studiohet, vendosjen eksperimentale dhe kërkesat specifike të kërkimit. Megjithatë, disa pllaka 96 pusesh të rekomanduara zakonisht për studime të biofilmit janë:
- Corning® Costar® 3596 Pllakë e sheshtë e pastër e poshtme me 96 pusi: Kjo pllakë përdoret shpesh për shkak të qartësisë së saj të lartë optike, e cila është e dobishme për imazhe dhe analiza spektrofotometrike.
- Pllaka Nunc™ MicroWell™ 96 pusi: Këto pllaka janë të njohura për dimensionet e tyre uniforme të puseve dhe qartësinë e lartë optike. Ato janë të disponueshme në trajtime të ndryshme sipërfaqësore për të mbështetur lloje të ndryshme të kulturës qelizore.
- Mikropllakë Greiner Bio-One CELLSTAR® 96-pus: Kjo pllakë përdoret shpesh për studime të biofilmave për shkak të cilësisë së saj të qëndrueshme dhe disponueshmërisë në veshje të ndryshme sipërfaqësore, të tilla si sipërfaqet e trajtuara me kulturë të indeve ose sipërfaqet me lidhje të ulët.
- Pllaka të zeza/fund të pastër 96 pusi: Për studimet që kërkojnë matje fluoreshence ose lumineshencë, pllakat e zeza me fund të pastër (p.sh. Corning® 3603) janë ideale pasi ato minimizojnë bisedat e kryqëzuara midis puseve dhe përmirësojnë zbulimin e sinjalit.
- Pllaka të veshura hidrofobike ose hidrofile: Në varësi të natyrës së biofilmit dhe mikroorganizmit, pllakat me veshje specifike që nxisin ose pengojnë ngjitjen mund të jenë të dobishme. Për shembull, pllakat hidrofobike mund të jenë të përshtatshme për biofilmat e formuar nga baktere të caktuara.
- Pllaka specifike për biofilm: Disa prodhues ofrojnë pllaka të dizajnuara posaçërisht për kërkimin e biofilmit. Këto pllaka shpesh kanë veti të përmirësuara të sipërfaqes që nxisin formimin e biofilmit dhe janë të optimizuara për analizat e biofilmit.
Kur zgjidhni një pllakë 96 pusesh për studime të biofilmit, merrni parasysh kriteret e mëposhtme:
- Materiali dhe trajtimi i sipërfaqes: Zgjidhni një material pllake dhe trajtim sipërfaqësor që mbështet ngjitjen dhe rritjen e mikroorganizmave që formojnë biofilm që po studioni.
Qartësia optike: Për analizat që përfshijnë matje optike, sigurohuni që pllaka të ketë qartësi të lartë optike. - Dizajni i pusit: Merrni parasysh formën dhe thellësinë e puseve, të cilat mund të ndikojnë në rritjen e biofilmit dhe efektivitetin e trajtimeve ose matjeve të mëvonshme.
- Pajtueshmëria me pajisjet: Sigurohuni që pjata të jetë e përputhshme me sonikatorin, inkubatorin dhe çdo pajisje tjetër të përdorur në studimin tuaj. Sonicatori i pllakave me shumë pusi Hielscher është i përputhshëm me të gjitha pllakat standarde të mikrotitrave dhe shumë puseve.
Në fund të fundit, zgjedhja më e mirë do të varet nga kërkesat specifike të kërkimit tuaj të biofilmit dhe karakteristikat e mikroorganizmave të përfshirë.
Cilat janë analizat tipike të biofilmit që përdoren në kërkime?
Në kërkimin dhe diagnostikimin, lloje të ndryshme të analizave përdoren për të hetuar dhe klasifikuar biofilmat. Sonicizimi është një hap i zakonshëm i përgatitjes së mostrës për të hequr biofilmin nga substrati i tij i ngurtë duke e bërë biofilmin të disponueshëm për analiza dhe analiza.
- Ngjyrosja me kristal vjollce:
Qëllimi: Përcakton sasinë e biomasës totale të biofilmit.
Metoda: Biofilmat ngjyrosen me bojë kristal vjollce dhe më pas boja tretet dhe matet në mënyrë spektrofotometrike.
Aplikimi: Përdoret për të vlerësuar formimin e biofilmit dhe efektet e agjentëve antimikrobikë. - Numërimi i qelizave të qëndrueshme (Anali CFU):
Qëllimi: Përcakton numrin e qelizave të qëndrueshme të biofilmit.
Metoda: Qelizat e biofilmave të shpërndara hollohen në mënyrë serike dhe vendosen në agar për të numëruar njësitë që formojnë koloni (CFU).
Aplikimi: Vlerëson qëndrueshmërinë e qelizave të biofilmit dhe efikasitetin antimikrobik. - ATP Biolumineshenca:
Qëllimi: Mat aktivitetin metabolik të qelizave biofilmike.
Metoda: Nivelet e ATP-së maten duke përdorur një analizë biolumineshente.
Aplikimi: Tregon qëndrueshmërinë e biofilmit dhe gjendjen metabolike. - Analiza e reduktimit të XTT:
Qëllimi: Vlerësimi i aktivitetit metabolik qelizor.
Metoda: Reagenti XTT zvogëlohet nga qelizat metabolike aktive për të formuar një produkt formazan me ngjyrë, i cili matet në mënyrë spektrofotometrike.
Aplikimi: Përdoret për të vlerësuar qëndrueshmërinë e qelizave të biofilmit dhe efektin e trajtimeve. - Analiza mikroskopike:
Qëllimi: Vizualizon strukturën dhe përbërjen e biofilmit.
Metoda: Teknikat përfshijnë mikroskopin e dritës, mikroskopin konfokal të skanimit me lazer (CLSM) dhe mikroskopin elektronik skanues (SEM).
Aplikimi: Ofron njohuri të detajuara në arkitekturën e biofilmit, shpërndarjen dhe efektet e trajtimeve. - Ekstraktimi i ADN-së, ARN-së dhe proteinave:
Qëllimi: Analizon profilet gjenetike dhe proteomike të qelizave biofilmike.
Metoda: Qelizat biofilmike lizohen për të nxjerrë acide nukleike dhe proteina për analiza në rrjedhën e poshtme (p.sh., PCR, qPCR, sekuenca, proteomika).
Aplikimi: Studion shprehjen e gjeneve, diversitetin gjenetik dhe shprehjen e proteinave në biofilma. - Analizat e frenimit dhe çrrënjosjes së biofilmit:
Qëllimi: Ekranon komponimet për aftësinë e tyre për të parandaluar formimin e biofilmit ose për të çrrënjosur biofilmat e krijuar.
Metoda: Biofilmat trajtohen me agjentë të mundshëm anti-biofilm, dhe ndërprerja vlerësohet duke përdorur analizat e sipërpërmendura.
Zbatimi: Zbulimi i barnave dhe zhvillimi i terapive anti-biofilmike.
Hielscher Ultrasonics prodhon homogjenizues tejzanor me performancë të lartë nga laboratori te madhësia industriale.