超音波によるサンプル調製 VialTweeter

分析前のサンプル調製には、組織の均質化、溶解、タンパク質、DNA、RNA、オルガネラ、その他の細胞内物質の抽出、溶解、脱気など、さまざまな分析前プロセスが必要になる場合があります。世界 VialTweeter は、まったく同じ条件下で複数のサンプルチューブを同時に準備する独自の超音波デバイスです。閉じた試験管の間接的な超音波処理により、交差汚染およびサンプル損失が回避される。

超音波サンプル調製

超音波処理は、ポリマー連鎖反応(PCR)、ウェスタンブロット、アッセイ、分子シーケンシング、クロマトグラフィーなどの分析のためにサンプルを準備するためのサンプル処理の一般的な技術です。超音波処理は、サンプルを分析前に処理するために実験室で広く使用されている技術です。超音波処理の主な利点は、超音波の動作原理が純粋に機械的な力に基づいていることです。超音波溶解および細胞破壊は、超音波処理にタンパク質抽出に使用される溶媒が溶解中にも使用できるという利点を与えるソノメカニカルせん断力によって達成される。超音波細胞かく乱物質 VialTweeterは、細胞壁/膜を破壊し、細胞内部と溶媒との間の物質移動を促進します。これにより、分析物(DNA、RNA、タンパク質、細胞小器官など)が細胞マトリックスから溶媒に効率的に移行されます。これは、クエンチングと抽出のステップが超音波細胞破壊プロセスと重複することを意味し、超音波溶解を非常に効果的にします。さらに、超音波サンプル調製は、溶解物の構造を変化させ破壊する可能性があり、その後の精製の問題で知られている界面活性剤および他の溶解試薬を必要としない。別の溶解法である酵素破壊は、長いインキュベーション時間を必要とし、しばしば再現性のない結果をもたらします。超音波サンプル調製は、組織の均質化、細胞破壊、溶解、タンパク質抽出、溶解物可溶化など、サンプル調製における一般的な問題を克服します。超音波処理の強度を正確に制御し、生物学的サンプルに合わせて調整することができるため、劣化やサンプルの損失が回避されます。自動的に監視および制御されたサンプル温度、パルスモード、および超音波処理時間により、最適な結果が得られます。
 

世界 VialTweeter 同じ条件下で複数のサンプルを同時に調製する必要がある実験室での作業に特に便利です。世界 VialTweeter 超音波ブロックソノトロードは、最大10本のバイアル(例:エッペンドルフ、遠心分離機、NUNCチューブ、クライオバイアル)を保持し、正確に制御された条件下でそれらを激しく超音波処理することができます。超音波エネルギーはバイアルの壁を介してサンプル培地に結合されるため、バイアルは処理中に閉じたままになります。これにより、サンプルの損失やクロスコンタミネーションが完全に回避されます。

VialTweeterに適合するバイアルとチューブ

世界 VialTweeter エッペンドルフ、遠心分離機、クライオバイアル、さまざまなNUNCバイアルタイプなど、10の一般的な円錐形または丸底のチューブを保持するのに適していますが、穴はリクエストに応じて他のバイアルやチューブのサイズにカスタマイズできます。VialTweeterをそれに応じて変更できるように、使用する試験管の種類をお知らせください。ファルコンチューブやその他の試験容器、ビーカー、容器などの大型試験管の場合、VialPressは便利なソリューションです。
についてもっと読む VialTweeterモデルVT26dxx あなたの特定の試験管サイズに合わせてカスタマイズされたもの、例えばファルコンチューブ!

VialPressとVialTweeter

一方 VialTweeter 10本のチューブ穴を備えたそれ自体は、すでにユニークで高機能な超音波デバイスですが、 VialPress アドオンにより、 VialTweeter さらに用途が広く、操作に柔軟に対応できます。世界 VialPress のための付属品です VialTweeter ファルコンチューブやその他の小型から中型のテストビーカーなどの大きなサンプルチューブを固定できるクランプオンバーで構成されています VialTweeter フロント。左の写真は、VialTweeterがブロックに10本のEppendorfバイアルを保持しているのに対し、VialPressは超音波処理のために1本の大きな試験管を前面に固定しています。VialPressは、強力な超音波処理のために最大5本の大きな試験管を保持することができます。

VialTweeterサンプル調製プロトコル

世界 VialTweeterは、生物学的サンプルの超音波処理に広く使用されています。分析の前に、サンプルは、溶解、組織均質化、タンパク質抽出、DNA / RNAせん断、脱気などにより、生化学的または生物物理学的分析およびアッセイのために調製する必要があります。世界 VialTweeter これらの超音波プロセスを確実に実行し、再現性のある結果を提供します。の一般的な用途 VialTweeter は、哺乳類(ヒトおよび動物)組織、細菌細胞、ウイルス粒子の溶解/細胞破壊です。成功したVialTweeterで処理された生物学的サンプルには、ヒト肺上皮細胞、造血幹細胞、骨髄性白血病細胞、 大腸菌, 枯草, 炭疽菌, フランシセラ・トゥラレンシス, エルシニアペスト, 化膿連鎖球菌, カウロバクタークレセントス, マイコプラズマ肺炎、マイコバクテリア/結核菌複合体(MTBC)および他の多くの細菌、植物、および微生物細胞。
以下に、VialTweeterを搭載したいくつかの選択されたプロトコルを示します。

In-vivoグルタチオン測定のためのVialTweeterによる大腸菌溶解

MG1655株の大腸菌菌は、A600が0.5に達するまで、総容量200mlのMOPS最小培地で増殖しました。培養物を50mlの培養物に分割し、ストレス治療を行った。0.79 mM アリシン、1 mM ジアミド、またはジメチルスルホキシド (コントロール) と 15 分間インキュベートした後、細胞を 4,000 g 、4°C で 10 分間回収しました。細胞をKPEバッファーで2回洗浄した後、ペレットを700μlのKPEバッファーに再懸濁しました。タンパク除去のために、300μlの10%(w / v)スルホサリチル酸を超音波処理による細胞の破壊の前に添加しました(3 x 1分;VialTweeter超音波装置)。上清は、遠心分離(30分、13,000g、4°C)後に回収しました。スルホサリチル酸濃度は、3容量のKPEバッファーを添加することにより1%に減少しました。総グルタチオンおよびGSSGの測定は、上記のように行った。細胞のグルタチオン濃度は、6.7×10〜15リットルの大腸菌細胞の容量とA600 0.5の細胞密度(1×108細胞ml-1培養に相当)に基づいて計算されました。GSH濃度は、総グルタチオンから2[GSSG]を差し引くことによって計算されました。(Müller et al. 2016)

VialTweeterによるα-Synuclein線維断片化

世界 VialTweeter 超音波処理器は、α-シヌクレイン線維とリボンの信頼性と効率的な断片化に広く使用されています。 VialTweeterを使用したα-シヌクレインフラグメンテーションの詳細な説明、プロトコル、および参考文献を見つけるには、ここをクリックしてください!

グラファイト炉原子吸光分析法の前にVialTweeterで細胞溶解

枯草菌168(trpC2)を15分間の抗生物質ストレスにさらし、その後、細胞を3,320×gで回収し、100 mM Tris / 1 mM EDTA、pH 7.5で5回洗浄し、10 mM Tris、pH 7.5に再懸濁し、Hielscher VialTweeter装置で超音波処理によって破壊した。(Wenzel et al. 2014)

VialTweeter質量分析前のサンプル調製

ヒトCD344 - 造血幹/前駆細胞の凍結乾燥細胞ペレットを、100 mMアンモニウム水素炭酸塩中の8 M尿素の10μ ml(ペプチド希釈シリーズのためのバルクHEK293調製のための200μl)に再懸濁し、ヒールシャーVialTweeterによる超音波処理によって60%、60%のサイクル、および氷上での中間冷却で20秒の持続時間を3回加熱した。(Amon et al. 2019)

VialPressを使用したサンプル調製プロトコル

フレッシュレタス(Lactuca sativa)を0.5 M HEPES緩衝液(pH 8、KOH調整済み)で、植物1g(新鮮重量)と200、100、50、または20 mLの緩衝液の比率でホモジナイズしました。植物質量と緩衝液容量の比率を変化させて、ホモジネートの総量を3.5〜12 mLに保ちました。植物質量と緩衝液容量の比率を変化させて、ホモジネートの総量を3.5〜12 mLに保ち、プローブによるホモジナイズを可能にしました。その後、ホモジネートは、200xtVialPress(Hielscher Ultrasonics GmbH、ドイツ)を装備したVialTweeterを備えたUP200Stを使用して間接超音波処理を受けました3分間(80%パルスと100%パワー)。この装置を使用することで、汚染を回避しました。(Laughton et al. 2019)

超音波処理中の信頼性の高い温度制御 VialTweeter

温度は、生物学的サンプルの処理に特に重要なプロセスに影響を与える重要な要素です。すべての機械的なサンプル調製技術と同様に、超音波処理は熱を発生させます。ただし、VialTweeterを使用すると、サンプルの温度を適切に制御できます。サンプルの温度を監視および制御しながら、 VialTweeter と VialPress 分析のためにサンプルを準備します。

1. サンプル温度の監視:超音波プロセッサUP200Stを駆動するVialTweeterには、インテリジェントなソフトウェアとプラグ可能な温度センサーが装備されています。温度センサーをUP200Stに差し込み、温度センサーの先端をサンプルチューブの1つに挿入します。デジタルカラータッチディスプレイを介して、UP200Stのメニューでサンプル超音波処理の特定の温度範囲を設定できます。超音波装置は、最高温度に達すると自動的に停止し、サンプル温度が設定温度∆の低い値まで下がるまで一時停止します。その後、超音波処理が自動的に再開されます。このスマートな機能により、熱による劣化を防ぎます。
2. VialTweeterブロックは予冷できます。VialTweeterブロック(トランスデューサーなしのソノトロードのみ)を冷蔵庫または冷凍庫に入れて、チタンブロックを予冷すると、サンプルの温度上昇を延期するのに役立ちます。可能であれば、サンプル自体も予冷することができます。
3. 超音波処理中にドライアイスを使用して冷却します。ドライアイスで満たされた浅いトレイを使用し、 VialTweeter ドライアイスの上に置き、熱が急速に放散されるようにします。

世界中のお客様が使用しています VialTweeter と VialPress 生物学的、生化学的、医療、臨床研究所での日常のサンプル調製作業に。UP200Stプロセッサのインテリジェントなソフトウェアと温度制御により、温度を確実に制御し、熱によるサンプルの劣化を回避します。超音波サンプル調製 VialTweeterとVialPressは、信頼性と再現性の高い結果を提供します!

の技術的な詳細 VialTweeter

世界 VialTweeter は、ブロック内の穴に最大10本のバイアルを保持できるチタン製のブロックソノトロードです。さらに、最大5本の大きな試験管をクランプできます VialTweeter VialPressを使用して、Tweeterの前面に。世界 VialTweeterは、超音波処理エネルギーが挿入された各バイアルに均一に分配され、信頼性と均一な超音波処理結果を確保するように設計されています。小さなピボットで、 VialTweeterソノトロードを不均一な地面に調整し、試験管を垂直に整列させます。

の利点 VialTweeter 一目で

• 最大10バイアルを同時に集中的に超音波処理
• 血管壁を通ってサンプルに高超音波強度で間接超音波処理
• 間接超音波処理は、クロスコンタミネーションとサンプル損失を回避します
• 調整可能で制御可能な超音波処理振幅による再現性のある結果
• VialPressは、より大きなチューブを超音波処理することができます
• 20 から 100% までの調整可能な振幅
• 0〜100%の調整可能なパルスモード
• オートクレーブ

世界 VialTweeter によって駆動されます UP200セント、200ワットの強力な超音波プロセッサ。UP200Stは、振幅、超音波処理時間、脈動、温度などのすべての重要な超音波プロセスパラメータを正確に制御できるインテリジェントなソフトウェアが装備されています。これにより、VialTweeterは、生物学的および生化学的な実験室で再現性のあるプロセス結果を成功させるための信頼性の高いツールになります。
振幅は20〜100%の間で調整でき、それによって超音波強度をサンプルに適合させることができます。例えば、DNAおよびRNAの剪断および断片化は、小さすぎるDNA断片の産生を防ぐためにより穏やかな振幅を必要とし、マウス脳の組織均質化は高強度の超音波処理を必要とする。理想的な振幅、超音波処理強度、持続時間を、UP200Stプロセッサーのスマートで直感的なメニューから選択してください。メニューと設定は、カラータッチディスプレイを介して簡単にアクセスし、操作できます。設定では、振幅、脈動/サイクルモード、超音波処理時間、総エネルギー入力、温度制限などの超音波処理パラメータを事前に設定できます。研究と生産では、試験と試験結果の再現性が重要です。これは、プロセス条件と超音波処理プロトコルの正確な記録が極めて重要であることを意味します。自動データプロトコルは、すべてのソニケーションデータを統合されたSDカード上のCSVファイルに書き込むため、さまざまなソニケーションランを簡単に確認および比較できます。すべての超音波プロセスデータは、CSVファイルとして簡単にアクセスし、共有することができます。
ヒールシャー超音波は、あなたの研究作業を促進し、改善するための高度な技術を提供するよう努めています!