ヒールシャー超音波組織ホモジナイザーの使用方法
タンパク質、オルガネラ、酵素、活性化合物などの細胞内高分子を精製または特性評価する前に、組織溶解と細胞崩壊のための効率的な方法を採用することが不可欠です。超音波処理は、細胞調製のための非常に効果的な技術であり、細胞内材料を緩衝液に迅速に放出します。超音波組織の均質化中に発生する機械的せん断力は、特定の材料に合わせて正確に調整することができます。これにより、軟部組織またはDNA/RNAの穏やかな調製が可能で、より穏やかな超音波処理、ならびに破壊的な細胞破壊(例えば、ナンノクロロプシス、酵母)のための強力な超音波キャビテーションが可能になります。
以下は、超音波組織ホモジナイザーまたは細胞粉砕機を使用してサンプルを効率的に調製するための推奨超音波処理プロトコルとガイドラインを含む、組織、細胞、およびその他の生物学的物質の選択です。
生体材料からの溶解物、ホモジネート、抽出物の調製方法
アルファベット順:
アセトバクター・サブオキシダン
放 線 菌
ALPとLDHの活動
アモルファスリン酸三カルシウム(ATCP)
ヒールシャー超音波装置UP400Sを用いて、ヒールシャー超音波装置UP400Sを用いて5分間、粒子の緩和を可能にするためにパルス間隔(50%)を適用して、ヒールシャー超音波装置UP400Sを用いてPLGAと呼ばれる5%(w / w)Tween20を含むクロロホルムに分散させたATCPナノ粒子。
推奨されるデバイス:
UP400Sの
参考文献/研究論文:
モーン、ダーク;エゲ、ドゥイグ;フェルドマン、キリフル;シュナイダー、オリバーD。;インフェルド、トーマス;ボッカチーニ、アルドR.(2014): 球状リン酸カルシウムナノ粒子フィラーは、高い生理活性を持つ骨固定デバイスのポリマー加工を可能にします。 無料図書館 2010年5月1日。2014年1月21日。
アントシアニン
アントシアニン:ピオニジン、マルビジン、シアニジン、ペチュニジン、デルフィニジンのジグルコシド、モノグルコシド、アシル化モノグルコシド、アシル化ジグルコシド:ブドウの皮から40秒で抽出。pH 5.0;材料/抽出溶媒の比率は1:6です。
推奨されるデバイス:
UP100Hの
アントラキノン
アプリコットの種
Artemisia selengensis Turcz
アスペルギルス・フラバス
B. sphaericus / バチルス・スファエリクス
炭疽菌船尾34F2胞子
炭疽菌船尾34F2、セレウス菌ATCC 21281、およびバチルス・チューリンゲンシスATCC33680胞子の超音波除去。150ppmの次亜塩素酸ナトリウムと超音波の使用は、胞子の不活性化につながりました。
推奨されるデバイス:
UP200Sの 100%の振幅で
参考文献/研究論文:
Pamarthi, S.R. et al.: さまざまな接触面に付着した複雑な食品マトリックスに埋め込まれたBacillus spp胞子の脱汚における超音波の有効性。
セレウス菌ATCC 21281胞子
炭疽菌船尾34F2、セレウス菌ATCC 21281、およびバチルス・チューリンゲンシスATCC33680胞子の超音波除去。150ppmの次亜塩素酸ナトリウムと超音波の使用は、胞子の不活性化につながりました。
推奨されるデバイス:
UP200Sの 100%の振幅で
参考文献/研究論文:
Pamarthi, S.R. et al.: さまざまな接触面に付着した複雑な食品マトリックスに埋め込まれたBacillus spp胞子の脱汚における超音波の有効性。
枯草
低容量の細菌懸濁液中の高出力、低周波超音波は、細菌細胞数の連続的な減少、すなわち死滅率が優勢である。大量では、超音波処理は細胞数の最初の増加をもたらし、細菌の凝集を示唆するが、この初期上昇は、凝集が終了し、死滅率がより重要になるにつれて低下する。
推奨されるデバイス:
UP200セント
参考文献/研究論文:
ジョイス、E。;ファル、S.S.;ロリマー、JP;メイソン、TJ(2003):細菌懸濁液の治療のための超音波の開発と評価。培養バチルス種の周波数、出力、および超音波処理時間の研究。ウルトラソン。ソノケム。2003年10月. pp. 315-318.
Barley's Alpha-amylase
大麦のα-アミラーゼの活性を刺激または阻害する:サンプル(10gのオオムギ種子)を、超音波強度20,60および100%の振幅、50%のサイクルで直接超音波処理し、さらに攪拌しながら80mlの水道水に分散させた。ソノトロードを溶液に約9mm浸漬しました。溶液を30°Cの一定温度で5分、10分、15分で処理しました。
推奨されるデバイス:
UP200Sの、振幅:20、60、100%。50%のサイクル。ソノトロードS3、30°C。
参考文献/研究論文:
Yaldagard et al. (2008): [種子の播種後治療からのオオムギα-アミラーゼの活性に対する超音波パワーの影響]
フジツボノープリウス
中動物プランクトンの細胞破壊/死滅:4つの流速(200、400、520、800 LH-1)と4つの振幅(25、50、75、100%)の以下の条件下での超音波処理により、61〜97%の死滅率が達成されました。
推奨されるデバイス:
UIP2000HDの
参考文献/研究論文:
Viitaslo et al. (2005): [バラスト水処理としてのオゾン、紫外線、超音波および過酸化水素] – 低塩分濃度の汽水域でのメソ動物プランクトンの実験。
ビフィズス菌株:B.ブレーブATCC 15700、B.アニマルリス亜種。ラクティス (BB-12)、B. longum (BB-46)
ビフィズス菌株からのβ-ガラクトシダーゼの細菌細胞破壊と放出:B. breve ATCC 15700, B. animalisサブsp。ラクティス(BB-12)、B.ロンガム(BB-46):バクテリア培養物をブレンドした100mLの低温殺菌牛乳を超音波で適用しました。キャビテーションは細菌細胞の破壊を引き起こすと同時に、β-ガラクトシダーゼの放出を引き起こします。
推奨されるデバイス:
UIP1000HDの:振幅:10%、電力:80W、振幅:100%、電力:200W;ソノトロードBS2d34;15-30分
参考文献/研究論文:
Hung et al. (2009): [プロバイオティクスによる超音波支援ヨーグルト発酵]
BL21(DE3) pAtHNL細胞(シロイヌナズナ細胞)
細胞破壊:15 g BL21-(DE3)_pAtHNL細胞を50 mMリン酸カリウム緩衝液(pH 7.5)に0°Cでゆっくりと懸濁しました。
推奨されるデバイス:
UP200Sの + ソノトロード S14D: 70W/cm2 (4 x 5 分)、氷浴で冷却
参考文献/研究論文:
Okrob, D. et al (2009): [シロイヌナズナ由来のヒドロキシニトリルリアーゼ:純粋および固定化触媒によるエナンチオピュアシアノヒドリン合成の反応パラメータの同定]Adv. シンセサイザー。カタール。2011, 353, 2399 – 2408.
血球(赤と白)
ボルドの葉のボルディン(Peumus boldus モリーナ)
ボルドの重要な活性化合物はボルジン((S)-2,9-ジヒドロキシ-1,10-ジメトキシアポルフィン)であり、これはカテキン((2S,3R)-2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-3,4-ジヒドロ-1(2H)-ベンゾピラン-3,5,7-トリオール)のほかにボルドの葉のアルカロイドおよびフラボノイド画分の主成分です。ボルディンは、過酸化フリーラジカルを介した損傷を受け、効率的なヒドロキシルラジカルスカベンジャーとして作用する強力な抗酸化剤です。
抽出手順: 典型的な抽出手順では、ボルドの葉のサンプルを、超音波装置を使用して大気圧で1Lの蒸留水で抽出した UIP1000HDの バッチモードとフロースルーモード。抽出時間は10〜40分の範囲で、超音波強度は10〜23W / cmです2、および10 〜 70°Cの温度範囲。 最良の結果は、次の条件下で達成されました:超音波強度23W / cm2 36°Cの温度で40分間
業績: 分析結果は、高出力超音波処理が従来の方法と比較して、ボルドの植物マトリックス材料の分析物放出を有意に良好な速度で増加させることを示しています:従来の抽出時間は2時間であったのに対し、30分で超音波処理によって等しい収率が放出されました。
Chemat(2013)と共同研究者は、超音波支援抽出が植物抽出の効率を向上させる一方で、抽出物の濃度が高い(同量の溶媒と植物材料)抽出時間を短縮することを示しました。分析により、最適化された条件は、超音波処理力23 W / cmであることが明らかになりました。2 で UIP1000HDの 40分間、温度36°C。 超音波抽出の最適化されたパラメータは、処理時間(120分ではなく30分)、より高い収率、より高いエネルギー効率、改善された清浄度、より高い安全性、およびより良い製品品質の点で、従来のマセラシオンと比較してより良い抽出を提供します。
推奨されるデバイス:
UIP1000HDの ソノトロードBS2d34とフローセル付き
参考文献/研究論文:
ペティニー、L。;ペリノ・イサルティエ、S。;Wajsman、J。;ケマット、F.(2013): ボルドの葉(Peumus boldus Mol.)のバッチおよび連続超音波支援抽出。 分子科学の国際ジャーナル14、2013年。5750-5764.
ウシ血清アルブミン(BSA)
ポリ(ラクティック-コグリコール酸)へのマイクロカプセル化を40秒で完了します。
推奨されるデバイス:
ドミニ
参考文献/研究論文:
Freitas et al. (2005): [溶媒抽出によるミクロスフェアの無菌生産のための静的マイクロミキシングと組み合わせたフロースルー超音波乳化。
脳幹+副腎
カンジダ
炭水化物、多糖類、その他の機能性化合物
ローズマリーからのカルノシン酸
カプサイシノイド
唐辛子からのカプサイシノイド(カプサイシン、ノルジヒドロカプサイシン)の抽出:カプサイシノイド トウガラシのフルテッセンス ピーマンは、以下の条件下で超音波抽出によって得られた:溶媒:95%(V / V)エタノール、10ml / gの溶媒/質量比、40分超音波処理抽出時間、45°C抽出温度。抽出剤収率:カプサイシノイドの85%
推奨されるデバイス:
UP400Sの
カロテノイド、ベータカロテノイド
cDNAの
Poly-A RNAは、製造元の指示に従ってDynabeads mRNA精製キット(Invitrogen)で精製し、TURBO DNase(Ambion;0.2ユニット/1 μgのRNA)で37°Cで30分間処理しました。1本鎖および2本鎖の合成は、メーカーのプロトコルに従って行われました。約500ngの二本鎖cDNAをヒールシャーの超音波処理により断片化した UTR200.DNA を 2% 高分解能アガロースゲルでパーセシングし、230 〜 270 bp のフラグメントを切断しました。
推奨されるデバイス:
UTR200 又は TD_CupHorn
参考文献/研究論文:
デルフト、J.ヴァン;ガジ、セント。リエンハルト、M。;アルブレヒト、MW;カーピー、A。;ブラウアーズ、K。;クラーセン、S。;リザラガ、D。;レーラック、H。;ハーウィグ、R。;クラインジャンス、J.(2012): RNA-Seqは、発がん性物質であるベンゾ[a]ピレンによって誘発されるトランスクリプトーム応答に関する新たな知見を提供します。 毒物学科学 130/2, 2012.427–439.
カリオファノン・ラトゥム
セルロース
同位体的に均質なセルロースの均質化/調製。
推奨されるデバイス:
UP200Sの;氷風呂で
参考文献/研究論文:
Laumer et al. (2009): [安定同位体分析に微量を使用するセルロースの均質化のための新しいアプローチ]
ユーカリセルロースCNCから調製されたセルロースナノ結晶(CNC)
ユーカリセルロースCNCから調製したセルロースナノ結晶(CNC)は、塩化メチルアジポイル(CNCm)との反応、または酢酸と硫酸の混合物(CNCa)との反応によって修飾されました。したがって、凍結乾燥CNC、CNCmおよびCNCaを0.1 wt%で純粋な溶媒(EA、THFまたはDMF)に再分散させ、(24 ± 1)Cで一晩磁気攪拌し、続いて130 W / cm2のソノトロードを装備したUP100H Hielscher Ultrasonics(ドイツ)を使用して24 ± 1°Cで超音波処理槽で20分間。その後、CNC分散液にCABを添加し、最終ポリマー濃度は0.9wt%とした。
推奨されるデバイス:
UP100Hの;24°Cで20分間。
参考文献/研究論文:
Blachechen, L. S. et al (2013): [セルロースナノ結晶のコロイド安定性とセルロースアセテート酪酸マトリックスへのそれらの分散性の相互作用]セルロース 2013.
サトウキビバガスからのセルロース
ChIPアッセイ
超音波処理は、クロマチンを放出するための細胞溶解に使用されます。マイルド(パルス)超音波処理は、クロマチンを断片化するために使用されます。さらに、超音波は、標的タンパク質への抗体結合の速度を加速し、それによって免疫沈降時間を短縮する。
推奨されるデバイス:
UP100Hの
参考文献/研究論文:
Basselet, P. et al. (2008): [腸管出血性大腸菌(EHEC)のDNAチップアレイを用いた解析のためのサンプル処理]
Lauri、A.(2005):X-ChIPとツーハイブリッド技術による花びらの発達の分子解析。論文:ケルン大学、2005年。
クロマチン
クロマチンの剪断
推奨されるデバイス:
UP400Sの;30%の振幅と0.5サイクルで。氷の上。
参考文献/研究論文:
Oh et al. (2003): [アセチルCoAカルボキシラーゼ遺伝子は肝臓のステロール調節要素結合タンパク質-1によって調節される]
クロマチン抽出
MEL DS19細胞のライセートを、Hielscher 200W超音波プロセッサUP200Hを用いて、最大出力の70%でそれぞれ20秒の10ラウンドで超音波処理した
推奨されるデバイス:
UP200Hの; 最大出力の70%。パルスモード:各20秒×10サイクル
参考文献/研究論文:
Kang, H. Ch. et al (2010): [PIAS1は赤血球特異的α-グロビン発現におけるCP2c局在および活性プロモーター複合体形成を調節する]核酸Res. 38/ 16, 2010.5456–5471ページ。
クロマトグラフィー
溶媒中の吸着剤の超音波処理は、数秒以内に凝集物を除去し、均一で容易に充填されたカラムを調製する。カラムクロマトグラフィーの前の吸着剤調製(シリカゲルなど)に関連します。
推奨されるデバイス:
UP400Sの
クラドセランズ
中動物プランクトンの細胞破壊
推奨されるデバイス:
UP2000ハイド フローセル付き
参考文献/研究論文:
Viitaslo et al. (2005): [バラスト水処理としてのオゾン、紫外線、超音波および過酸化水素] – 低塩分濃度の汽水域でのメソ動物プランクトンの実験。
カイアシ類の成虫とカイアシ類
中動物プランクトンの細胞破壊:4つの流速(200、400、520、800 LH-1)と4つの振幅(25、50、75、100%)の以下の条件下での超音波処理により、87〜99%の殺傷率が達成されました。
推奨されるデバイス:
UIP2000HDの フローセル付き
参考文献/研究論文:
Viitaslo et al. (2005): [バラスト水処理としてのオゾン、紫外線、超音波および過酸化水素] – 低塩分濃度の汽水域でのメソ動物プランクトンの実験。
カイアシ類ノープリウス
中動物プランクトンの細胞破壊:4つの流速(200、400、520、800 LH-1)と4つの振幅(25、50、75、100%)の以下の条件下での超音波処理により、87〜99%の殺傷率が達成されました。
推奨されるデバイス:
UIP2000HDの フローセル付き
参考文献/研究論文:
Viitaslo et al. (2005): [バラスト水処理としてのオゾン、紫外線、超音波および過酸化水素] – 低塩分濃度の汽水域でのメソ動物プランクトンの実験。
COS7細胞
400 μlバッファー中での溶解
推奨されるデバイス:
UP200Sの;7サイクル
参考文献/研究論文:
Zaim (2005): フォンNesprin-2 Defizienten Mäusenを分析する。
クリプトスポリジウム・パルバウム
水中でのクリプトスポリジウムパルバウム(原生動物)の超音波不活性化。
推奨されるデバイス:
UP400Sの
参考文献/研究論文:
塚本 I.;イム、B。;スタバラッシュ、CE; 古田 雅之;橋場 和彦;前田、Y.(2004):超音波照射による出芽酵母の不活性化。超音波ソノケミストリー11/2004。61〜65ページ。
キュボソーム
キュボソーム – 空または蛍光色素分子をドープ – 超音波装置UP100Hを使用してプルロニックF108の溶液に適量のモノオレインを分散させることによって調製した。蛍光キュボソームを得るために、フルオロフォアを溶融モノオレインに穏やかなソニフィケーションによって分散させてから、プルロニックF108に分散させた。蛍光キュボソームにケルセチンを充填した場合も、同じ手順が踏襲されました。
サンプル:サンプルサイズ:4mL – 水の約96.4重量%、モノオレインの3.3重量%、プルロンF108の0.3重量%。蛍光色素の割合は、10-3 × 2.5 および 10-3 × 2.8 でした。ケルセチン添加量:6.4 × 10-6 wt%.
超音波: UP100Hの、振幅90%、パルスサイクル0.9、10分間。
推奨されるデバイス:
UP100Hの
参考文献/研究論文:
ムルギア、S。;ボナッキ、S。;ファルキ、AM;ランピス、S。;リッポリス、V。;メリ、V。;モンドゥッツィ、M。;プロディ、L。;シュミット、J。;タルモン、Y。;Caltagirone、C.(2013):薬物充填蛍光キュボソーム:潜在的なセラノスティックアプリケーションのための汎用性の高いナノ粒子。ラングミュア29、2013。6673-6679.
デッケラ・ブリュクセレンシス
水中でのDekkera bruxellensisの超音波不活性化
推奨されるデバイス:
UIP1500HDの
参考文献/研究論文:
ボースウィック、KAJ;コークリー、WT;マクドネル、MB;ノヴォトニー、H。;ベネス、E。;Grfschl、.M(2005):細胞破壊のための新しいコンパクトソニケーターの開発。J.マイクロバイオ。覚せい剤。60/2005. pp. 207–216./ Lörincz、A.(2004):水性懸濁液中の酵母の超音波細胞破壊。バイオシス。エンジニアリング89/2004。297〜308ページ。/ 塚本 I.;イム、B。;スタバラッシュ、CE;古田 雅之;橋場 和彦;前田、Y.(2004):超音波照射による出芽酵母の不活性化。ウルトラソン。ソノケム。2004年11月61-65ページ。
デッケラ/ブレタノマイセス・ブラクセレンシス
デオキシリボ核酸
ショウジョウバエ melanogaster S2 細胞
Drosophila melanogasterのS2細胞からの細胞タンパク質の抽出:凍結S2細胞(1.56108)を1 mLの氷冷均質化バッファー(100 mM Tris-HCl pH 7.5、1% SDS)に溶解し、氷上に10分間放置しました。細胞溶解は、ヒールシャーUP200S超音波プロセッサを用いて氷上での超音波処理(6615バースト、0.5秒パルス、75%強度)によって完了した。
推奨されるデバイス:
UP200Sの (200W)、75%強度パルスモード:6615バースト、0.5秒パルス。
参考文献/研究論文:
Schwientek, T. et al. (2007): [ショウジョウバエメラノガスターS2細胞のムチン型O-グリコプロテオームへの連続レクチンアプローチ]プロテオミクス7、2007。3264-3277ページ。
大腸菌は派生します
大腸菌誘導体の細胞破壊:Vculture = 4/OD mLのサンプル量に対応する凍結ペレットを、580μL 10 mMリン酸カリウム緩衝液pH 7、1 mM EDTAに再懸濁しました。20 μLのリゾチーム(L-1の濃度1 g)を添加し、細胞懸濁液を氷上で約30分間インキュベートしました。その後、細胞を超音波装置(UP 200S Ultraschallprozessor、Dr. Hielscher GmbH、Teltow)で氷上で連続超音波処理することにより、50%の振幅で20秒間破壊した。可溶性細胞画分と不溶性細胞画分を、13000rpmで20分間遠心分離することにより分離しました。不溶性タンパク質を10 mMリン酸カリウム緩衝液pH 7、1 mM EDTAで2回洗浄し、-20°Cで保存しました。
推奨されるデバイス:
UP200Sの 振幅50%
参考文献/研究論文:
HA (2005): [活性組換えタンパク質産生の最適化、大腸菌、IbpAおよびIbpBの小さな熱ショックタンパク質が封入体のin vivo再活性化に及ぼす影響の調査]
エキノコックス・グラニュロサス抗原
細胞の溶解および崩壊:成熟したE.granulosusの可溶性タンパク質の均質化されたサンプルを、液体窒素および42°Cで凍結融解することによって調製し、110V、170Wで3個超音波処理した×氷上で15秒。その後、サンプルを10000gで15分間遠心分離しました。タンパク質の濃縮はブラッドフォード法で測定され、-20°Cで保存されました。
推奨されるデバイス:
UP200Sの;170W、氷上で冷却。3 x 15秒
参考文献/研究論文:
Tabar et al. (2010): [ヒツジのヒツジヒドリドーシスの血清診断とヒツジのヒドロス液、プロトスコレックスおよび全身のエキノコッカス・グラニュロサス抗原]
大腸菌Gr-
牛乳やジュース中の大腸菌Gr-の超音波不活性化。
推奨されるデバイス:
UP100Hの
参考文献/研究論文:
ゼンカー、M。;ハインツ、V。;Knorr、D.(2003):液体食品の保存と品質保持のための超音波支援熱処理の応用。Jフード製品66/2003。1642–1649ページ。
生理食塩水中の大腸菌Gr
生理食塩水中の大腸菌Gr-の超音波不活性化。
推奨されるデバイス:
UP100Hの
参考文献/研究論文:
ダックハウス、H。;メイソン、TJ;ファル、S.S.;Lorimer、JP(2004):次亜塩素酸塩を使用した微生物消毒に対する超音波処理の効果。ウルトラソン。ソノケム。11/ 2004.173〜176ページ。
大腸菌Gr-水中
水中の大腸菌Gr-の超音波不活性化。
推奨されるデバイス:
UP100Hの
参考文献/研究論文:
古田 雅之;山口 正彦;塚本 智之;イム、B。;スタバラッシュ、CE;ハシバ、K。;前田、Y.(2004):超音波照射による大腸菌の不活性化。ウルトラソン。ソノケム。2004年11月57-60ページ。
緑内障、視神経乳頭
視神経乳頭のRNA断片化(ラットの眼から):視神経乳頭(ONH)をドライアイスで凍結し、80°Cで保存した後、抽出しました。RNAは、MS 0.5プローブ(UP50H)を使用してキット抽出バッファー中の凍結神経頭を超音波処理することにより単離し、次に、Arcturusキットによって提供される指示の後に、DNAを除去するためのDNase処理を含むことによって単離されました。精製されたRNAを定量しました。
推奨されるデバイス:
UP50Hの ゾンデ付き MS0.5
参考文献/研究論文:
Johnson et al. (2007): [ラット緑内障モデルにおける眼圧上昇ばく露後の視神経頭遺伝子発現の全体的な変化]
グリコサミノグリカンコンドロイチン硫酸(CS)
ジメチルメチレンブルーアッセイによるCSの測定
細胞の再懸濁:マイクロ遠心チューブ内のCSペレットを、超音波ホーン(UP 100H、Hielscher Ultrasonics GmbH、ドイツ)からのパルスを使用して、ハンク平衡塩溶液(HBSS)の0.5 ml / mlパパイン溶液0.5 mlに再懸濁しましたサイクル1および100%振幅で3秒間。その後、60°Cで24時間消化しました。
酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)では、細胞を蒸留水および脱イオン水に106細胞/mlの濃度で懸濁し、細胞溶解を促進するために–70°Cの冷凍庫で一晩保存しました。次いで、細胞を超音波処理により40秒間均質化した。
推奨されるデバイス:
UP100Hの
参考文献/研究論文:
Vandrovcova et al. (2011): [MG 63骨芽細胞様細胞に対するコラーゲンおよびコンドロイチン硫酸(CS)コーティングのポリ-(ラクチド-co-グリコリド)(PLGA)への影響]Physiol. Res. 60;2011. 797-813.
HaCaT細胞
クロマチン免疫沈降(ChIP)のためのHaCaT細胞の溶解:HaCaT細胞を1%ホルムアルデヒドで37uCで10分間固定しました。固定細胞をRIPAバッファー中で溶解し、100W超音波装置を用いて100W超音波装置を用いて、振幅= 1およびデューティサイクル= 100%で12回の1分間(12×1分)パルスで超音波処理した。
推奨されるデバイス:
UP100Hの;氷上で12分間、
参考文献/研究論文:
Zhang et al. (2007): [バソヌクリンはHaCaT細胞のリボソームRNA遺伝子のサブセットを調節する]
ヘパリン:ヘパリンの解重合
超音波法により、低分子量ヘパリン(LMWH)を製造することができます。したがって、ヘパリンは過酸化水素触媒によるラジカル解重合を受けます。反応は非常に速く、1時間未満で完了しますが、物理化学的解重合プロセスは穏やかな反応条件に依存し、刺激の強い試薬や有毒な試薬を必要とせず、化学アーチファクトのない製品を提供します。したがって、超音波プロセスは、LMWHの大規模生産だけでなく、天然の硫酸化多糖類から製造された類似体にも適しています。
超音波処置:
超音波支援ラジカル解重合による未分画ヘパリンの物理化学的解重合のために、ヘパリンを水に溶解して最終濃度25mg / mL(5mL)にしました。反応混合物をプローブ型超音波装置を用いて超音波処理した UP50Hの.超音波装置は、直径3mmのプローブ(マイクロチップMS3)を装備し、これは180μmの振幅を提供した。プロセッサは、電気励起によって生成される30kHzの周波数の機械的な縦方向の振動を生成しました。反応混合物をRadleys®反応器で60°Cに維持し、混合気の加熱を防ぐために超音波を0.5秒パルスとして印加しました。反応開始前に、過酸化水素の添加と超音波の印加を同時に行うことにより、ゼロタイムアリコート(250μl)を溶液から除去しました。過酸化水素を添加して、最終過酸化水素/ヘパリン(w/w)比0.15(3.75 mg/mL)を得ました。
推奨されるデバイス:
UP50Hの ソノトロード付き MS3
参考文献/研究論文:
アクール、ウサマ; ブリディアウ、ニコラス;ゴドバニ、アッザ;ル・ジュビュー、フロリアン;Bordenave Juchereau、ステファニー;サニエ、フレデリック;ピオット、ジャン・マリー;フルーティーなアルノーディン、イングリッド;マウガード、ティエリー(2013): 抗凝固活性を有する低分子量ヘパリン(LMWH)の超音波支援調製。 炭水化物ポリマー97;2013. 684–689.
ホップ
ラクトバチルス菌(各種ラクトバチルス菌株の溶解/DNA単離)
ラクトバチルス菌株:L. pontis、L. sanfranciscensis、L. farciminis、L. panis、L. oris、L. vaginalisおよびL. reuteri、L. sp.
手順:単一コロニーのDNA単離のために、超音波溶解プロトコルが開発されました。1つのコロニー(直径2〜3 mm)を100 μLの溶解バッファー(20 mM EDTA、10 mM Tris [pH 7.9]、1% Triton X-100、500 mM guanidine-HCl、250 mM NaCl)に懸濁しました。細胞をプローブ型超音波装置による1分間の超音波処理により溶解した UP50Hの.150μlの冷エタノール(-20°C)を添加した後、混合物をQIAampティッシュキットのスピンカラムで遠心分離し、最後に60μlのバッファー(10 mM Tris [pH 7,5])で溶出しました。
単一の純粋培養物を迅速かつ確実に同定するためのツールを得るために、PCRアッセイと迅速なDNA単離手順を組み合わせました。時間のかかる酵素溶解手順およびリゾチームに対する細菌の可変感受性は、細胞の超音波処理によって克服され、その後の精製およびDNAをシリカマトリックスに結合させることによる濃縮が行われた。単一コロニーの細胞材料は、PCRに十分であることがわかりました。
推奨されるデバイス:
UP50Hの
参考文献/研究論文:
Müller、MRA(2000):分子生物学的方法を使用した穀物発酵の微生物生態系の特性評価。ケルン大学論文、2000年。
ラクトバチルス・アシドフィルス Gr+
牛乳やジュース中のLactobacillus acidophilus Gr+の超音波不活性化。
推奨されるデバイス:
UIP500HDの
参考文献/研究論文:
ゼンカー、M。;ハインツ、V。;Knorr、D.(2003):液体食品の保存と品質保持のための超音波支援熱処理の応用。Jフード製品66/2003。1642–1649ページ。
レジオネラ・ニューモフィラGr+希釈培地
希釈培地中のレジオネラ・ニューモフィラGr+の超音波不活性化。
推奨されるデバイス:
UIP500HDの
参考文献/研究論文:
お父さん、MF;荻野、C。;松村 S.;中村 S.;清水直樹(2006):TiO2による超音波処理によるレジオネラ・ニューモフィラの消毒。ウォーターレス40/2006。1137〜1142ページ。
Leuconostoc mesenteroides
骨髄性白血病における白血球リゾズーム活性:細胞懸濁液を15分間超音波処理し、サンプルをリゾチーム活性についてアッセイしました。白血球ug./10細胞のリゾチーム濃度を決定した。
推奨されるデバイス:
UP50Hの
骨髄性白血病における白血球アイソザイム活性
リポソーム
マラカイトグリーン
マラカイトグリーン(強力な殺菌剤)のソノフォトキャリティック分解:光触媒による分解は、単独ではソノリシス分解よりもかなり速く、2つのプロセスを結合することで効率を向上させることができます。強力な殺菌剤であるマラカイトグリーンは、海洋細菌に対して非常に生態毒性がありますが、毒性が低いか毒性のない有機物に変換されます。
推奨されるデバイス:
UP400Sの
マンギフェリンアシル化
マンギフェリン (1,3,6,7-テトラヒドロキシ-2-[3,4,5-トリヒドロキシ-6-(ヒドロキシメチル)オキサン-2-イル]キサンテン-9-オン; 化学式: C19H18O11)は、多くの植物種に見られるC-グリコシルキサントン構造のポリフェノールです。マンギフェリンは様々な薬理活性を示します。マンギフェリンの位置選択的アシル化は、超音波下でリパーゼによって非常に効率的に触媒することができる。従来の方法と比較して、超音波支援触媒作用は、反応時間が短く、収率が高いという利点によって優れています。超音波マンギフェリンアシル化の最適条件は、以下のように見出された。
リパーゼ:PCL、アシルドナー:酢酸ビニル;反応溶媒:DMSO、反応温度:45°C、超音波出力:200W;基質比:アシルドナー/マンギフェリン6/1、酵素負荷量:6 mg / ml
位置選択的アシル化収率は最大84%でした。
推奨されるデバイス:
UP200セント 又は UP200HTの
参考文献/研究論文:
cp.:王、Z.;ワン、R。;ティアン、J。;趙、B;ウェイ、X.F.;スー、Y.L.;李、CY;曹操、SG;王、L.(2010): 非水性溶媒中のマンギフェリンのリパーゼ触媒位置選択的アシル化に対する超音波の影響.J. Asian Nat Prod. Res. 12/1, 2010.56-63.
分子抽出
石膏、レオライト、玄武岩、エドフェルアッシュ、黒曜石ガラスからの抽出のための抽出プロトコル:
レゴリスまたは砕石の1gサンプルを超音波照射下で液体抽出し、標的分子を抽出して可溶化します。そこで、ガラス試験管中の1gアナログ試料に3mlのMeOH P80を添加し、超音波プローブ型装置で20分間超音波処理した UP50Hの 40%の振幅に設定します。混合物を10分間静置し、沈殿したアナログサンプルの上に形成された濁った上清を1.5 mLの遠心チューブにデカントしました。疎水性ポリマー遠心チューブの表面への吸着による抽出された成分の損失を最小限に抑えるために、チューブは最初に100 mM HEPES pH 7.4の0.5%(w / v)BSAでブロックされました。上清を17000 Gで10分間遠心分離して清澄化し、イムノアッセイで試験するまでガラスバイアルに2〜8°Cで保存しました。
推奨されるデバイス:
UP50Hの
参考文献/研究論文:
Rix、C.(2012):火星の生命と生命マーカーチップの検出:火星のサンプルの液体抽出物中の有機分子を検出するための抗体アッセイ。論文、クランフィールド大学、2012年。
マウス肝臓ペレット
ペレットを洗浄し、さらに0.5mLのLB2で5分間超音波処理し、さらに20分間12,000gで遠心分離し、得られた2つの画分の上清を回収した。最後に、ペレットを40 mMトリス塩基、5 M尿素、2 Mチオ尿素、4% CHAPS、100 mM DTT、0.5%(v / v)ビオライト3-10(LB3)を含む0.5 mLの緩衝液に溶解し、超音波処理し、12,000 gで20分間遠心分離しました。
推奨されるデバイス:
UP200Sの;5分間
参考文献/研究論文:
Gazzana et al. (2009): [マウス肝臓プロテオームに関する最新情報]
マウス肝臓懸濁液
サンプルの均質化により細胞溶解物を作製します。
推奨されるデバイス:
UP200Sの;3 x 20秒間
参考文献/研究論文:
Gazzana et al. (2009): [マウス肝臓プロテオームに関する最新情報]
ペニシリウム・デジタタム
Sabouraud成長培地中のPenicillium digitatum(植物病原体)の超音波不活性化。
推奨されるデバイス:
UP200セント
参考文献/研究論文:
ロペス・マロ、A。;パロウ、E。;ヒメネス・フェルナンデス、M。;アルザモラ、SM;ゲレロ、S.(2005):サーモソニケーションと抗菌薬を組み合わせた多因子性真菌不活性化。J.フードエンジニアリング67/2005。87〜93ページ。
Spirulina platensis(Arthrospira platensis)由来のフィコシアニン
植物細胞と植物組織
30%充填された植物細胞(W / V)および蒸留水を1〜15分間の超音波処理により破壊する。植物組織の崩壊:アルコールに懸濁した乾燥組織1gを約5分間の超音波処理中に崩壊させる。
推奨されるデバイス:
UP100Hの
血小板
ヒラタケ tuberregium
ポリ(乳酸-co-グリコール酸)(PLGA)
ウシ血清アルブミン(BSA)を担持したポリ(乳酸-co-グリコール酸)(PLGA)の40秒の超音波処理による調製。
推奨されるデバイス:
ドミニ;40秒間。
参考文献/研究論文:
Freitas et al. (2005): [溶媒抽出によるミクロスフェアの無菌生産のための静的マイクロミキシングと組み合わせたフロースルー超音波乳化。
リンゴ由来のポリフェノール
リンゴからのポリフェノールの超音波抽出。溶媒:水性。歩留まりが6%増加しました。超音波処理強度:20-75Ws / ml;プロセス温度:80°Cに加熱。
推奨されるデバイス:
UIP2000HDの
参考文献/研究論文:
ヴィルフ、K。;マナセ、R。;モーソン、R。;Ashokkumar、M.(2011):食品成分の超音波回収と改質。で:Feng / Barbosa-Cánovas / Weiss(2011):食品およびバイオプロセッシングのための超音波技術。ニューヨーク:Springer、2011年。345-368ページ。
紅茶由来のポリフェノール
紅茶からのポリフェノールの超音波抽出。溶媒:水性。収量が6〜18%増加しました。超音波処理強度:8-10Ws / ml;周囲圧力、プロセス温度:90°Cまで加熱
推奨されるデバイス:
UIP2000HDの
参考文献/研究論文:
ヴィルフ、K。;マナセ、R。;モーソン、R。;Ashokkumar、M.(2011):食品成分の超音波回収と改質。で:Feng / Barbosa-Cánovas / Weiss(2011):食品およびバイオプロセッシングのための超音波技術。ニューヨーク:Springer、2011年。345-368ページ。
赤ブドウマルクからのポリフェノール
赤ブドウマルクからのポリフェノールの超音波抽出。溶媒:水性。収量が11〜35%増加しました。超音波処理強度:20-75Ws / ml;周囲圧力。
推奨されるデバイス:
UIP2000HDの
参考文献/研究論文:
ヴィルフ、K。;マナセ、R。;モーソン、R。;Ashokkumar、M.(2011):食品成分の超音波回収と改質。で:Feng / Barbosa-Cánovas / Weiss(2011):食品およびバイオプロセッシングのための超音波技術。ニューヨーク:Springer、2011年。345-368ページ。
緑茶由来のポリフェノール、アミノ酸、カフェイン
豚肉:豚ロース肉のブライニング
超音波補助ブライニングのために、豚ロース肉(Longissimus dorsi)を塩化ナトリウム塩水(40g L−1)に浸し、低周波超音波(20kHz)で低強度(2〜4W / cm−2)で5°Cで処理した。ブタ組織の微細構造、タンパク質変性、水結合能力(WBC)、保水能力(WHC)、塩化ナトリウム拡散係数(D)および肉のテクスチャープロファイル(TPA)に対する超音波補助硬化の効果を調査した。結果は、超音波処理が肉組織に好ましい微細構造変化を引き起こしたことを示した。超音波処理により、タンブルおよび静的な塩水処理サンプルの両方と比較して、保水能力およびテクスチャ特性が改善されました。しかし、これらの正の効果は超音波強度に大きく依存していました。強度が高く、処理時間が長くなると、タンパク質が変性しました。一定の拡散係数モデルは、ブライニング中のNaCl拡散速度を正確に記述することができました。超音波処理は、静的条件下で塩水処理されたサンプルと比較して塩の拡散を有意に増強し、拡散係数は超音波強度の増加とともに指数関数的に増加しました。
推奨されるデバイス:
UP200HTの ソノトロード付き S26d40
参考文献/研究論文:
シロ、I。;ヴェン、Cs。;バラ、Cs。;ジョナス、G。;ジーク、I。;フリードリッヒ、L.(2009): 豚肉中の塩化ナトリウムの拡散を改善するための超音波支援硬化技術の応用。 食品工学ジャーナル 91/2、2009年。353–362.
ポルフィラ・イェゾエンシス
Porphyra yezoensisからの多糖類の超音波分解:50mLの1.0g / 100mLポルフィラyezoensis多糖類(乾燥重量)溶液をUP400Sで4時間超音波処理した。
推奨されるデバイス:
UP400Sの;パルス超音波(サイクル:20°Cで2秒オン/2秒オフ)。
粉末
ネズミの骨
ネズミの肝臓
UP400Sによる破壊と組織の均質化。
推奨されるデバイス:
UP400Sの;30秒間に3回。氷の上。
参考文献/研究論文:
Oh et al. (2003): アセチルCoAカルボキシラーゼ遺伝子は、肝臓のステロール調節要素結合タンパク質-1によって制御されています。 生物化学ジャーナル2003。
ラットスキン
ラルフィア・セルペンティナ
レバウディオサイドA
10gの乾燥ステビア葉および粉砕ステビア葉のサンプルを、連続攪拌(マグネチックスターラーを使用)下で100mLの水で抽出しました。pH 値は 0.01 M pH 7 リン酸ナトリウムで制御しました。サンプルを150mLのガラスビーカーに入れ、プローブ型超音波装置(UIP500HDの、20kHz、500W)。ソノトロードの先端をステビアの葉のスラリーに約1.5cm浸しました。超音波装置は350Wの出力に設定されました。30°Cの一定のプロセス温度で5〜10分間350Wの穏やかな超音波処理により、100gサンプルあたり30〜34gのレバウジオシドA収率が得られました。超音波処理後、抽出溶液を遠心分離し、0.45μmの微多孔質膜を通して濾過した。濾液は、総レバウジオシドA含有量分析のために採取されました。総レバウジオシドA含有量の抽出収率をHPLCで分析しました。
無溶媒超音波支援抽出により、熱抽出または浸軟などの従来の抽出方法と比較して、高収率のレバウジオシドAが得られました。
推奨されるデバイス:
UIP500HDの
米でんぷん
ワムシ
中動物プランクトンの細胞破壊:4つの流速(200、400、520および800LH-1)および4つの振幅(25、50、75および100%)の以下の条件下での超音波処理により、58〜85%の殺傷率が達成された。
推奨されるデバイス:
UP2000 フローセル付き
参考文献/研究論文:
Viitaslo et al. (2005): [バラスト水処理としてのオゾン、紫外線、超音波および過酸化水素] – 低塩分汽水域でのメソ動物プランクトンの実験。海洋環境工学ジャーナル, 8(1), 35-55.
S.フラジリス
出芽酵母
茶茶
推奨されるデバイス:
UP400Sの
参考文献/研究論文:
ゲレロ、S、;ロペス・マロ、A。;アルザモラ、SM(2001): 出芽酵母の生存に及ぼす超音波の影響:温度、pH、振幅の影響.イノヴ食品科学 Emerg Technol. 2001年2月。31〜39ページ。
出芽酵母
Sabouraud成長培地および生理食塩水中の出芽酵母の超音波不活性化。
推奨されるデバイス:
UP400Sの
参考文献/研究論文:
ヤップ、A。;ジラネク、V。;グルビン、P。;バーンズ、M。;ベイツ、D.(2007):バレルと厚板の洗浄と消毒のための高出力超音波の応用に関する研究。オーストラリアNZワインインダスト。J. 22(3)/ 2007.96〜104ページ。
サフラン、crocus sativus
活性化合物(香料および着色剤)の抽出。
サフランからの抽出の詳細については、ここをクリックしてください!
推奨されるデバイス:
UP50Hの
参考文献/研究論文:
Kadkhodaee et al. (2007): サフランからの活性化合物の超音波抽出。 アクタホーティック。739, 2007.417-425.
サルモネラ・ゼンフテンベルグ775W Gr-
サルモネラ菌Senftenberg 775W Gr-の超音波不活性化 McIlvaineクエン酸塩-リン酸緩衝液または栄養ブロス中。
推奨されるデバイス:
UP100Hの
参考文献/研究論文:
アルバレス、I。;マナス、P。;ヴィルト、R。;コンドン、S.(2006): サルモネラ菌Senftenberg 775Wの圧力下超音波による不活化.J.フードマイクロバイオール。108/2006. pp. 218–225.
サルビア・ミルティオルリザ・バンジ
生物学的活性化合物の抽出:ナトリウムDanshensuと4つのタンシノン(ジヒドロタンシオンI、タンシノンI、クリプトタンシノンおよびタンシノンIIA)。
推奨されるデバイス:
UP100Hの
サルビア・オフィシナリス
血清
ヒツジの嚢胞性肝臓、肺、陽性の血液(Echinococcus granulosus antigens)
ヒツジの嚢胞性肝臓、肺および陽性血液(子羊のEchinococcus granulosus抗原):その後、サンプルを氷上で2〜15秒間超音波処理×、無傷のプロトスコリックが見られなくなるまで超音波処理しました。
推奨されるデバイス:
UP200Sの;2 x 15秒
参考文献/研究論文:
Tabar et al. (2009): 子羊のヒダチド液、プロトスコレックス、および全身のEchinococcus granulosus抗原に対する抗体反応。 Journal of Veterinary Research、第10巻、第3号。2009. 283-288.
ソルビタントトリオレイン酸、エタノール(溶媒として)、Bi-2212粉末
分散剤ソルビタントトリオレイン酸、エタノール(溶媒として)、およびBi-2212粉末を含むスラリーを解凝集します。
推奨されるデバイス:
UP200Sの;3分間
参考文献/研究論文:
Mora et al. (2009): [構造用セラミックタイル上の超伝導コーティングの製造]
大豆イソフラボン
水および溶媒中の大豆イソフラボンの超音波抽出。抽出効率が最大15%向上しました。
推奨されるデバイス:
UP200セント
参考文献/研究論文:
Rostagno et al. (2003), referenced by Vilkhu, K.;マナセ、R。;モーソン、R。;アショクマール、M.(2011): 食品成分の超音波回収と改質。 で:Feng / Barbosa-Cánovas / Weiss(2011):食品およびバイオプロセッシングのための超音波技術。ニューヨーク:Springer、2011年。345-368ページ。
大豆たんぱく質
水とアルカリ(水酸化ナトリウム)中の大豆タンパク質の超音波抽出。歩留まりが53%向上しました。インライン超音波処理は、バッチ抽出としてより効率的であることがわかった(インライン超音波処理はバッチ超音波処理よりも23%高い収率をもたらした)。
推奨されるデバイス:
UIP1000HDの バッチ/ビーカー用およびインライン超音波処理用のフローセルリアクター付き。
参考文献/研究論文:
Moulton and Wang (1982), referenced by Vilkhu, K.;マナセ、R。;モーソン、R。;アショクマール、M.(2011): 食品成分の超音波回収と改質.で:Feng / Barbosa-Cánovas / Weiss(2011):食品およびバイオプロセッシングのための超音波技術。ニューヨーク:Springer、2011年。345-368ページ。
精子頭部(ヒト)
精子の尾(人間)
ステビアrebaudianaバート。
4つの粒子サイズ(0.315ミリメートル、2ミリメートル、6.3ミリメートルおよび粉砕乾燥葉)を持つステビアレバウディアナからの乾燥葉の10グラムのサンプルからのステビオシド配糖体の超音波抽出は、異なる溶媒と混合された:蒸留水と水/エタノール混合物(55%および70%)は、溶媒体積比が異なるサンプル重量を持つ:1 / 10、1 / 8、1 / 5(w / v)その後、室温で超音波に曝露した。超音波処理時間: < 5 min. 推奨されるデバイス:
UP200セント
お 問い合わせ!/ お問い合わせください!
あらゆるサイズのための高性能超音波装置
ヒールシャー超音波細胞かく乱細胞および組織ホモジナイザーは、任意のサイズで任意の容量で利用できます。あなたが小さなサンプルサイズ、96ウェルプレートのような質量サンプル、中規模のボリュームまたは時間あたりのトラックロードを超音波処理する必要があるかどうか、私たちのポートフォリオはあなたのアプリケーションのための理想的な超音波装置を提供します。コンパクトなハンドヘルド超音波ホモジナイザーは、実験室や研究に最適ですが、当社の産業用シリーズは、超音波プロセッサあたり0,5kWから16kWまでのすべてをカバーしています。クラスターとしてインストールされる能力で、ヒールシャー超音波装置を使用すると、事実上任意のボリュームを処理できます。ヒールシャーの超音波装置の堅牢性は、ヘビーデューティと要求の厳しい環境での24 / 7操作を可能にします。
洗練されたスマートなソフトウェアにより、最高のプロセス制御とオペレーターの利便性を実現します。すべての超音波処理データは、内蔵SDカードに自動的に記録されます。その他のスマート機能には、超音波処理パラメータの事前設定と保存、LAN接続、およびブラウザのリモートコントロールが含まれます。
以下の表は、組織の均質化およびその他のサンプル調製タスクのためのラボサイズのソニケーターのおおよその処理能力を示しています。
推奨デバイス | バッチボリューム | 流量 |
---|---|---|
UIP400MTP 96ウェルプレートソニケーター | マルチウェル/マイクロタイタープレート | N.A. |
超音波カップホーン | バイアルまたはビーカー用のCupHorn | N.A. |
GDmini2の | 超音波マイクロフローリアクター | N.A. |
バイアルツイーター | 0.5〜1.5mL | N.A. |
UP100Hの | 1〜500mL | 10〜200mL/分 |
UP200HTの, UP200セント | 10〜1000mL | 20〜200mL/分 |
UP400セント | 10〜2000mL | 20〜400mL/分 |
超音波ふるいシェーカー | N.A. | N.A. |