Ultrahangos szövethomogenizátorok
- Az ultrahangos kezelés biztonságos & a szövetek homogenizálásának hatékony módszere.
- Az ultrahangos alkalmazások közé tartozik a készítmény szövet és szuszpenziók, a fehérjék, DNS / RNS és aktív vegyületek extrakciója, valamint az enzimek és élesztők aktiválása / inaktiválása.
- A szonda típusú ultrahangos homogenizátorok pontos szabályozhatósága lehetővé teszi a szövetminták megbízható előkészítését.
Szövethomogenizálás ultrahangos szondákkal
A szövethomogenizálás olyan mintaelőkészítési folyamat, amelyben állati és növényi sejteket vagy mikroorganizmusokat állítanak elő az intracelluláris anyagok, például fehérjék, DNS vagy RNS kivonása előtt. A sejtmembránt meg kell szakítani a sejttartalom felszabadításához. A sejtfal áttörése után az intracelluláris makromolekulák lebegnek a pufferoldatban, így az organellák, fehérjék és DNS / RNS elérhetővé válnak. Az ultrahangos szövethomogenizátorok és sejtzavarók nagyon hatékony eszközök a sejtek megzavarására, lízisére és kivonására.
Szonda típusú ultrahangos készülékek (pl. a 200 wattos erőteljes UP200St) megbízható szövethomogenizátorok, amelyeket széles körben használnak a minták előkészítéséhez.
Ultrahangos szövethomogenizátorok vs alternatív lízis technikák
Felteheti magának a kérdést, hogy a sejtbontás melyik technikája és melyik szövethomogenizáló berendezés a legjobb megoldás a laboratórium számára. Az alábbiakban talál néhány érvet, amelyek az ultrahangos lízisre és a szövethomogenizálásra szólnak, mivel az ultrahangos kezelésnek számos előnye van az alternatív homogenizációs módszerekkel szemben:
- Hatékonyság: Az ultrahangos homogenizálás gyors és hatékony módszer a szövetek és sejtek megzavarására. Az ultrahangos szövethomogenizátorok az akusztikus kavitáció működési elvét alkalmazzák. Ez a módszer rendkívül hatékony, és másodpercek alatt megzavarhatja a sejteket. Mivel az intenzitási szint enyhe és intenzív között állítható be, az ultrahangos kezelés különösen hatékony a kemény vagy rostos szövetek esetében, amelyeket más módszerekkel nehéz homogenizálni.
- A keresztszennyeződés elkerülése: A Hielscher erőteljes ultrahangos szövethomogenizátorokat kínál, amelyek közvetett ultrahangos kezelésben készítik elő a mintát. A UIP400MTP (ideális mikrotiterhez és multiwell-lemezekhez), valamint a VialTweeter és a CupHorn (ideális injekciós üvegekhez, csövekhez és főzőpoharakhoz) A Hielscher ultrahangos cella-megszakító berendezéseket kínál érintés nélküli homogenizáláshoz, ami csökkenti a minták közötti keresztszennyeződés kockázatát. Minimalizálja továbbá a szennyeződések őrlőfelületekről vagy más homogenizáló berendezésekből történő bevezetésének kockázatát.
- Hajlékonyság: Az ultrahangos homogenizálás különböző mintaméretekkel és térfogatokkal használható, a kis térfogatoktól a nagy szövetmintákig. Továbbá, ultrahangos homogenizálás is alkalmas széles körű mintatípusok, beleértve a növényi szövetek, állati szövetek, és mikrobiális kultúrák. Az ultrahangos kezelés intenzitása és időtartama beállítható, hogy optimalizálja a különböző típusú szövetek zavarának szintjét.
- Reprodukálhatóság: Az ultrahangos homogenizálás következetes eredményeket biztosít, és lehetővé teszi a homogenizációs paraméterek, például a teljesítmény és az ultrahangos idő pontos szabályozását. Ez segít biztosítani a kísérleti adatok reprodukálhatóságát és pontosságát.
- Biomolekulák megőrzése: A szonda típusú ultrahangos kezelés nem termikus kezelés. Ez azt jelenti, hogy hatása nem a hőn alapul. Azonban minden mechanikai kezelés hőt termel a termodinamika második főtételének megfelelően. Ez azt jelenti, hogy a minta hosszabb ultrahangos idő alatt melegebbé válik. A Hielscher legmodernebb ultrahangos készülékei hőmérséklet-érzékelőkkel és intelligens hőmérséklet-figyelő szoftverrel vannak felszerelve. A kifinomult hűtési lehetőségek lehetővé teszik a hő lebomlásának megakadályozását, és segítenek megőrizni a hőérzékeny biomolekulák, például enzimek és fehérjék aktivitását.
- Időtakarékos: A szonda típusú ultrahangos kezelés nagy hatékonysága lehetővé teszi a szövetek gyors homogenizálását, ami időt takarít meg más módszerekhez képest, amelyek a szövet szélesebb körű fizikai manipulációját igénylik.
Az ultrahangos szövethomogenizálás számos előnnyel jár az alternatív homogenizációs módszerekkel szemben. Ezért az ultrahangos szövethomogenizátorok az előnyben részesített sejtzavar-technika a különböző kutatási és ipari alkalmazásokban.
Példa egy ultrahangos szondával végzett szövethomogenizálási protokollra:
Az ultrahangos készülékek megkönnyítik a szövetek homogenizálását egyszerű művelettel és gyors homogenizálási eljárással. Ugyanakkor az ultrahangos folyamatparaméterek kölcsönösen szabályozhatók és felügyelhetők, hogy az eredmények megbízhatóak és reprodukálhatók legyenek.
Anyagok:
- Szövetminta (pl. máj, agy, izom)
- Puffer (pl. PBS, Tris-HCl)
- proteázgátló koktél
- Ultrahangos homogenizátor (szonda típusú)
- Jég
- mikrocentrifuga csövek
- Pipetták
Ultrahangos szövethomogenizálási protokoll:
Megjegyzés: Az ultrahangos kezelés időtartamát és intenzitását optimalizálni kell a szövet típusától, életkorától és egészségi állapotától, valamint a specifikus downstream alkalmazásoktól függően. Fontos továbbá a puffer, a proteázgátlók és más adalékanyagok gondos kiválasztása a homogenizátum hozamának és minőségének optimalizálása érdekében.
Ultrahangos szövethomogenizátor UP200Ht 2 mm-es kürttel / szondával a sejtek megzavarására, lízisére, sejthomogeniazitására és oldására, valamint fehérje extrakcióra.
A Hielscher ultrahangos szövethomogenizátorok fő előnyei
- gyors és hatékony őrlés, homogenizálás, lízis & sejtbontás vagy extrakció erős ultrahangos kavitációval
- Egyszerű és intuitív használat és kezelés (válassza az analóg vagy digitális verziót)
- a termékkel érintkező felületek könnyű tisztítása a szonotród öblítésével szonikálás alatt (CIP tisztítás a helyszínen / SIP sterilizálás a helyén)
- hangvédő doboz (a laboratóriumi eszközök hangvédő doboza teljesen akrilüvegből készül, hogy bármilyen szögből teljes láthatóságot biztosítson)
- A folyamatparaméterek teljes ellenőrzése digitális érintőképernyőn keresztül a készüléken (digitális ultrahangos készülékek) vagy teljesítménymérőn (analóg eszközökhöz)
- integrált hőmérséklet-szabályozás (hőérzékeny, labilis szövetmintáknál fontos)
- A homogenizálási menet szünetei egyedileg definiálhatók és előre beállíthatók a digitális menüben
- minden digitális eszköz automatikus adatrögzítéssel (integrált SD/USB-ComboCard kártyán), dugaszolható hőmérséklet-érzékelővel és böngésző távirányítóval van felszerelve.
- Többmintás kezelés a VialMagassugárzó, Cuphorn vagy 4 vagy 8 ujjas sonotrodes használatával (pl. laboratóriumi robotfolyamatokba történő integráláshoz)
- kis léptékű és nagyméretű alkalmazásokhoz
A minta előkészítése a ultrahangos szonda UP100H.
Az alábbi táblázat jelzi ultrahangos szövethomogenizátoraink hozzávetőleges feldolgozási kapacitását a sejtek széteséséhez, líziséhez és extrakciójához:
| Kötegelt mennyiség | Áramlási sebesség | Ajánlott eszközök |
|---|---|---|
| többlyukú lemezek | N/a | UIP400MTP |
| injekciós üvegek, kis főzőpohár | N/a | Ultrahangos CupHorn |
| legfeljebb 10 injekciós üveg | N/a | VialMagassugárzó |
| 1–500 ml | 10–200 ml/perc | UP100H |
| 10 és 2000 ml között | 20–400 ml/perc | UP200Ht, UP400ST |
| 0.1-től 20L-ig | 0.2-től 4 liter/percig | UIP2000hdT |
Kapcsolat! / Kérdezzen tőlünk!
Ultrahangos CupHorn Zárt csövek és injekciós üvegek intenzív ultrahangos kezelésére a minták steril homogenizálásához.
Keresse meg az optimális ultrahangos szövethomogenizátort az alkalmazásához
A Hielscher ultrahangos szövethomogenizátorok ultrahangos kimeneti tartományban kaphatók 50W és 16,000W (16kW) között.
A laboratóriumi dolgozók elégedettek a Hielscher ultrahangos laboratóriumi homogenizátorok egyszerű és intuitív működésével. A konkrét követelményektől függően a Hielscher eszközök digitális vagy analóg vezérléssel rendelkeznek.
- A VialTweeter egy erős ultrahangos homogenizátor, amely lehetővé teszi akár 10 injekciós üveg vagy kémcső egyidejű ultrahangos kezelését azonos intenzitással. A közvetett szonikálás miatt a keresztszennyeződés és a mintaveszteség teljesen elkerülhető. A tisztítás és fertőtlenítés minimálisra csökken az eldobható injekciós üvegek használata miatt. A blokk sonotrode autoklávozható.
- A UIP400MTP lemez-szonikátor ideális, ha mikrotiteres és többlyukú lemezekkel, például 96 lyukú lemezekkel dolgozik. Egyszerűen helyezze a többlyukú lemezt vagy a Petri-csészét a UIP400MTP és minden minta egyenletesen szonikált. A UIP400MTP Plate-Sonicator segítségével a nagy áteresztőképességű mintafeldolgozás egyszerű és hatékony lesz!
- A szonda típusú laboratóriumi ultrahangos készülékek tartományában a homogenizátorok 50 watt, 100 watt, 200 watt és 400 watt teljesítményűek.
UP50H (50W)
UP100H (100W)
UP200Ht / UP200St (200W)
UP400St (400W)
Ultrahangos szövethomogenizátorok alkalmazása és felhasználása
Az ultrahangos homogenizátorokat általában szöveti őrléshez, sejtzavarokhoz használják & A biológiai minták lízise és homogenizálása az intracelluláris anyag molekuláris tartományban történő extrahálása előtt. A minták ellenőrzött szonikálásával a lízistől az extrakcióig és homogenizálásig minden lépés ugyanazzal az ultrahangos sejtrombolóval végezhető el.
Az ultrahangos homogenizátorok nagy előnye a könnyen állítható teljesítménybevitel és az ultrahangos intenzitás. A Hielscher ultrahangos sejtzavarók (lizátorok) lehetővé teszik az ultrahangos intenzitás szabályozását az amplitúdó 20% -ról 100% -ra történő beállításával.
Alternatív megoldásként a folyamatos működés, az ultrahangos homogenizátor beállítható ciklus üzemmódba, pl. a hőérzékeny szövet szonikálásához. Sonication impulzus üzemmódban azt jelenti, hogy az ultrahangos generál nagy intenzív ultrahangos hullámok időszakos ciklusokban. Az ultrahangos időszak és a pihenőidő időtartamát a felhasználó egyedileg beállíthatja.
nél pulzáló szonikáció, a pihenőidő alatt az ultrahanggal kezelt anyag visszatérhet nyugalmi állapotába, és a minta lehűlhet (a pihenőidőt hőelvezetésre használva). Ezáltal a feldolgozási intenzitás pontosan beállítható a szövetnek megfelelően, és csökken a minta nem kívánt melegítése.
Az ultrahangos szövethomogenizátorok robusztusak és felhasználóbarátak, miközben megbízható eredményeket produkálnak, biztosítva a reprodukálhatóságot az összes fontos folyamatparaméter teljes ellenőrzése miatt.
Az ultrahangos szövetőrlés, a sejtzavarás, a lízis, az extrakció és a homogenizálás közös alkalmazási területei megtalálhatók a biológiai és gyógyszerészeti laboratóriumokban, a mikrobiológiában, a proteomikai és genomikai kutatásokban (pl. Fehérje felszabadulás a Western blotting és enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat ELISA előtt), de botanikai kivonatok és bioaktív vegyületek előállításában is az élelmiszer-, gyógyszer- és kozmetikai ipar számára.
- Kattintson ide a mintaelőkészítésre, szövethomogenizálásra, lízisre és extrakcióra (pl. sejtek, baktériumok, spórák, hatóanyagok) vonatkozó konkrét folyamatjavaslatokért!
- Olvassa el itt, hogy az ultrahangos készülékek miért nélkülözhetetlen eszközök a proteomikai kutatáshoz!
- Ismerje meg, hogyan megkönnyíti az ultrahangos kezelés a genomikai kutatási munkát!
Irodalom / Hivatkozások
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.
Tények, amelyeket érdemes tudni
Az ultrahangos szövethomogenizátorokat gyakran szonda sonicatornak, sonic lysernek, ultrahangos diszruptornak, ultrahangos darálónak, sono-ruptornak, sonifiernek, hangos diszmembratornak, sejtrombolónak, ultrahangos diszpergálónak vagy oldónak nevezik. A különböző kifejezések a különböző alkalmazásokból erednek, amelyeket szonikálással lehet teljesíteni.
A Hielscher Ultrasonics nagy teljesítményű ultrahangos homogenizátorokat gyárt keverési alkalmazásokhoz, diszperzióhoz, emulgeáláshoz és extrakcióhoz laboratóriumi, kísérleti és ipari méretekben.