Ultrahangos szövethomogenizátorok

Az ultrahangos kezelés biztonságos & a szövetek homogenizálásának hatékony módszere.
Az ultrahangos alkalmazások közé tartozik a készítmény szövet és szuszpenziók, a fehérjék, DNS / RNS és aktív vegyületek extrakciója, valamint az enzimek és élesztők aktiválása / inaktiválása.
A szonda típusú ultrahangos homogenizátorok pontos szabályozhatósága lehetővé teszi a szövetminták megbízható előkészítését.

Szövethomogenizálás ultrahangos szondákkal

A szövethomogenizálás olyan mintaelőkészítési folyamat, amelyben állati és növényi sejteket vagy mikroorganizmusokat állítanak elő az intracelluláris anyagok, például fehérjék, DNS vagy RNS kivonása előtt. A sejtmembránt meg kell szakítani a sejttartalom felszabadításához. A sejtfal áttörése után az intracelluláris makromolekulák lebegnek a pufferoldatban, így az organellák, fehérjék és DNS / RNS elérhetővé válnak. Az ultrahangos szövethomogenizátorok és sejtzavarók nagyon hatékony eszközök a sejtek megzavarására, lízisére és kivonására.

Ultrahangos szövethomogenizátorok vs alternatív lízis technikák

Felteheti magának a kérdést, hogy a sejtbontás melyik technikája és melyik szövethomogenizáló berendezés a legjobb megoldás a laboratórium számára. Az alábbiakban talál néhány érvet, amelyek az ultrahangos lízisre és a szövethomogenizálásra szólnak, mivel az ultrahangos kezelésnek számos előnye van az alternatív homogenizációs módszerekkel szemben:

Hatékonyság: Az ultrahangos homogenizálás gyors és hatékony módszer a szövetek és sejtek megzavarására. Az ultrahangos szövethomogenizátorok az akusztikus kavitáció működési elvét alkalmazzák. Ez a módszer rendkívül hatékony, és másodpercek alatt megzavarhatja a sejteket. Mivel az intenzitási szint enyhe és intenzív között állítható be, az ultrahangos kezelés különösen hatékony a kemény vagy rostos szövetek esetében, amelyeket más módszerekkel nehéz homogenizálni.

A keresztszennyeződés elkerülése: A Hielscher erőteljes ultrahangos szövethomogenizátorokat kínál, amelyek közvetett ultrahangos kezelésben készítik elő a mintát. A UIP400MTP (ideális mikrotiterhez és multiwell-lemezekhez), valamint a VialTweeter és a CupHorn (ideális injekciós üvegekhez, csövekhez és főzőpoharakhoz) A Hielscher ultrahangos cella-megszakító berendezéseket kínál érintés nélküli homogenizáláshoz, ami csökkenti a minták közötti keresztszennyeződés kockázatát. Minimalizálja továbbá a szennyeződések őrlőfelületekről vagy más homogenizáló berendezésekből történő bevezetésének kockázatát.
Hajlékonyság: Az ultrahangos homogenizálás különböző mintaméretekkel és térfogatokkal használható, a kis térfogatoktól a nagy szövetmintákig. Továbbá, ultrahangos homogenizálás is alkalmas széles körű mintatípusok, beleértve a növényi szövetek, állati szövetek, és mikrobiális kultúrák. Az ultrahangos kezelés intenzitása és időtartama beállítható, hogy optimalizálja a különböző típusú szövetek zavarának szintjét.
Reprodukálhatóság: Az ultrahangos homogenizálás következetes eredményeket biztosít, és lehetővé teszi a homogenizációs paraméterek, például a teljesítmény és az ultrahangos idő pontos szabályozását. Ez segít biztosítani a kísérleti adatok reprodukálhatóságát és pontosságát.
Biomolekulák megőrzése: A szonda típusú ultrahangos kezelés nem termikus kezelés. Ez azt jelenti, hogy hatása nem a hőn alapul. Azonban minden mechanikai kezelés hőt termel a termodinamika második főtételének megfelelően. Ez azt jelenti, hogy a minta hosszabb ultrahangos idő alatt melegebbé válik. A Hielscher legmodernebb ultrahangos készülékei hőmérséklet-érzékelőkkel és intelligens hőmérséklet-figyelő szoftverrel vannak felszerelve. A kifinomult hűtési lehetőségek lehetővé teszik a hő lebomlásának megakadályozását, és segítenek megőrizni a hőérzékeny biomolekulák, például enzimek és fehérjék aktivitását.
Időtakarékos: A szonda típusú ultrahangos kezelés nagy hatékonysága lehetővé teszi a szövetek gyors homogenizálását, ami időt takarít meg más módszerekhez képest, amelyek a szövet szélesebb körű fizikai manipulációját igénylik.

Az ultrahangos szövethomogenizálás számos előnnyel jár az alternatív homogenizációs módszerekkel szemben. Ezért az ultrahangos szövethomogenizátorok az előnyben részesített sejtzavar-technika a különböző kutatási és ipari alkalmazásokban.

Ez a bemutató elmagyarázza, hogy milyen típusú szonikátor a legjobb a mintaelőkészítési feladatokhoz, például lízishez, sejtzavarokhoz, fehérjeizoláláshoz, DNS és RNS fragmentációhoz laboratóriumokban, elemzésben és kutatásban. Válassza ki az ideális szonikátor típust az alkalmazáshoz, a minta térfogatához, a minta számához és az áteresztőképességhez. A Hielscher Ultrasonics ideális ultrahangos homogenizátorral rendelkezik az Ön számára!

Példa egy ultrahangos szondával végzett szövethomogenizálási protokollra:

Az ultrahangos készülékek megkönnyítik a szövetek homogenizálását egyszerű művelettel és gyors homogenizálási eljárással. Ugyanakkor az ultrahangos folyamatparaméterek kölcsönösen szabályozhatók és felügyelhetők, hogy az eredmények megbízhatóak és reprodukálhatók legyenek.

Anyagok:

Szövetminta (pl. máj, agy, izom)
Puffer (pl. PBS, Tris-HCl)
proteázgátló koktél
Ultrahangos homogenizátor (szonda típusú)
Jég
mikrocentrifuga csövek
Pipetták

Ultrahangos szövethomogenizálási protokoll:

Gyűjtsük össze a szövetmintát, és helyezzük egy mikrocentrifugacsőbe, amely jéghideg puffert tartalmaz proteázgátló koktéllal (1:10 arányban).

Homogenizálja a szövetet ultrahangos homogenizátorral, amely sonotrode-val van ellátva. A hegy méretét a minta méretének megfelelően kell kiválasztani. A mikrocentrifugacsövek térfogatához egy mikrotip lenne megfelelő. Merítse a szondát a szövetmintát tartalmazó mikrocentrifugacsőbe, és ultrahangos kezelést végezzen a mintát rövid impulzusok (például 10-20 másodperces impulzusok 1-2 másodperces intervallumokkal) alkalmazásával maximális teljesítmény mellett, miközben a mintát jégen tartja a hő okozta károsodás megelőzése érdekében.

Ultrahangos kezelés után centrifugáljuk a homogenizátumot 4 ° C-on 10-15 percig 10 000 x g-on, hogy eltávolítsuk a maradék törmeléket és összegyűjtsük a felülúszót.

A felülúszót további felhasználásig -80°C-on kell tárolni.

Szükség esetén határozzuk meg a fehérjekoncentrációt megfelelő vizsgálattal, például Bradford- vagy BCA-fehérjevizsgálattal.

Megjegyzés: Az ultrahangos kezelés időtartamát és intenzitását optimalizálni kell a szövet típusától, életkorától és egészségi állapotától, valamint a specifikus downstream alkalmazásoktól függően. Fontos továbbá a puffer, a proteázgátlók és más adalékanyagok gondos kiválasztása a homogenizátum hozamának és minőségének optimalizálása érdekében.

A videó bemutatja az ultrahangos mintaelőkészítő rendszert UIP400MTP, amely lehetővé teszi bármely standard többlyukú lemez megbízható mintaelőkészítését nagy intenzitású ultrahanggal. A UIP400MTP tipikus alkalmazásai közé tartozik a sejtlízis, a DNS, az RNS és a kromatin nyírása, valamint a fehérje extrakció.

A Hielscher ultrahangos szövethomogenizátorok fő előnyei

gyors és hatékony őrlés, homogenizálás, lízis & sejtbontás vagy extrakció erős ultrahangos kavitációval
Egyszerű és intuitív használat és kezelés (válassza az analóg vagy digitális verziót)
a termékkel érintkező felületek könnyű tisztítása a szonotród öblítésével szonikálás alatt (CIP tisztítás a helyszínen / SIP sterilizálás a helyén)
hangvédő doboz (a laboratóriumi eszközök hangvédő doboza teljesen akrilüvegből készül, hogy bármilyen szögből teljes láthatóságot biztosítson)
A folyamatparaméterek teljes ellenőrzése digitális érintőképernyőn keresztül a készüléken (digitális ultrahangos készülékek) vagy teljesítménymérőn (analóg eszközökhöz)
integrált hőmérséklet-szabályozás (hőérzékeny, labilis szövetmintáknál fontos)
A homogenizálási menet szünetei egyedileg definiálhatók és előre beállíthatók a digitális menüben
minden digitális eszköz automatikus adatrögzítéssel (integrált SD/USB-ComboCard kártyán), dugaszolható hőmérséklet-érzékelővel és böngésző távirányítóval van felszerelve.
Többmintás kezelés a VialMagassugárzó, Cuphorn vagy 4 vagy 8 ujjas sonotrodes használatával (pl. laboratóriumi robotfolyamatokba történő integráláshoz)
kis léptékű és nagyméretű alkalmazásokhoz

Az alábbi táblázat jelzi ultrahangos szövethomogenizátoraink hozzávetőleges feldolgozási kapacitását a sejtek széteséséhez, líziséhez és extrakciójához:

Kötegelt mennyiség	Áramlási sebesség	Ajánlott eszközök
többlyukú lemezek	N/a	UIP400MTP
injekciós üvegek, kis főzőpohár	N/a	Ultrahangos CupHorn
legfeljebb 10 injekciós üveg	N/a	VialMagassugárzó
1–500 ml	10–200 ml/perc	UP100H
10 és 2000 ml között	20–400 ml/perc	UP200Ht, UP400ST
0.1-től 20L-ig	0.2-től 4 liter/percig	UIP2000hdT

Kapcsolat! / Kérdezzen tőlünk!

Az ultrahangos készülékek UP200Ht és UP200St egyaránt erőteljes 200W homogenizáló modellek a minta előkészítéséhez, emulgeáláshoz, diszpergáláshoz, extrakcióhoz és kémia.

Kapcsolódó témakörök

Keresse meg az optimális ultrahangos szövethomogenizátort az alkalmazásához

A Hielscher ultrahangos szövethomogenizátorok ultrahangos kimeneti tartományban kaphatók 50W és 16,000W (16kW) között.
A laboratóriumi dolgozók elégedettek a Hielscher ultrahangos laboratóriumi homogenizátorok egyszerű és intuitív működésével. A konkrét követelményektől függően a Hielscher eszközök digitális vagy analóg vezérléssel rendelkeznek.

A VialTweeter egy erős ultrahangos homogenizátor, amely lehetővé teszi akár 10 injekciós üveg vagy kémcső egyidejű ultrahangos kezelését azonos intenzitással. A közvetett szonikálás miatt a keresztszennyeződés és a mintaveszteség teljesen elkerülhető. A tisztítás és fertőtlenítés minimálisra csökken az eldobható injekciós üvegek használata miatt. A blokk sonotrode autoklávozható.
A UIP400MTP lemez-szonikátor ideális, ha mikrotiteres és többlyukú lemezekkel, például 96 lyukú lemezekkel dolgozik. Egyszerűen helyezze a többlyukú lemezt vagy a Petri-csészét a UIP400MTP és minden minta egyenletesen szonikált. A UIP400MTP Plate-Sonicator segítségével a nagy áteresztőképességű mintafeldolgozás egyszerű és hatékony lesz!
A szonda típusú laboratóriumi ultrahangos készülékek tartományában a homogenizátorok 50 watt, 100 watt, 200 watt és 400 watt teljesítményűek.
UP50H (50W)
UP100H (100W)
UP200Ht / UP200St (200W)
UP400St (400W)

Ultrahangos szövethomogenizátorok alkalmazása és felhasználása

Az ultrahangos homogenizátorokat általában szöveti őrléshez, sejtzavarokhoz használják & A biológiai minták lízise és homogenizálása az intracelluláris anyag molekuláris tartományban történő extrahálása előtt. A minták ellenőrzött szonikálásával a lízistől az extrakcióig és homogenizálásig minden lépés ugyanazzal az ultrahangos sejtrombolóval végezhető el.
Az ultrahangos homogenizátorok nagy előnye a könnyen állítható teljesítménybevitel és az ultrahangos intenzitás. A Hielscher ultrahangos sejtzavarók (lizátorok) lehetővé teszik az ultrahangos intenzitás szabályozását az amplitúdó 20% -ról 100% -ra történő beállításával.
Alternatív megoldásként a folyamatos működés, az ultrahangos homogenizátor beállítható ciklus üzemmódba, pl. a hőérzékeny szövet szonikálásához. Sonication impulzus üzemmódban azt jelenti, hogy az ultrahangos generál nagy intenzív ultrahangos hullámok időszakos ciklusokban. Az ultrahangos időszak és a pihenőidő időtartamát a felhasználó egyedileg beállíthatja.
nél pulzáló szonikáció, a pihenőidő alatt az ultrahanggal kezelt anyag visszatérhet nyugalmi állapotába, és a minta lehűlhet (a pihenőidőt hőelvezetésre használva). Ezáltal a feldolgozási intenzitás pontosan beállítható a szövetnek megfelelően, és csökken a minta nem kívánt melegítése.
Az ultrahangos szövethomogenizátorok robusztusak és felhasználóbarátak, miközben megbízható eredményeket produkálnak, biztosítva a reprodukálhatóságot az összes fontos folyamatparaméter teljes ellenőrzése miatt.
Az ultrahangos szövetőrlés, a sejtzavarás, a lízis, az extrakció és a homogenizálás közös alkalmazási területei megtalálhatók a biológiai és gyógyszerészeti laboratóriumokban, a mikrobiológiában, a proteomikai és genomikai kutatásokban (pl. Fehérje felszabadulás a Western blotting és enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat ELISA előtt), de botanikai kivonatok és bioaktív vegyületek előállításában is az élelmiszer-, gyógyszer- és kozmetikai ipar számára.

Irodalom / Hivatkozások

Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.

Tények, amelyeket érdemes tudni

Az ultrahangos szövethomogenizátorokat gyakran szonda sonicatornak, sonic lysernek, ultrahangos diszruptornak, ultrahangos darálónak, sono-ruptornak, sonifiernek, hangos diszmembratornak, sejtrombolónak, ultrahangos diszpergálónak vagy oldónak nevezik. A különböző kifejezések a különböző alkalmazásokból erednek, amelyeket szonikálással lehet teljesíteni.