Ultrahangos szövet homogenizátorok
- Hozzákeverésével egy biztonságos & hatékony módszer a szövethomogenizálás.
- Az ultrahangos alkalmazások közé tartozik az előkészítő szövet és szuszpenziók, a fehérjék, a DNS / RNS és az aktív vegyületek extrakciója, valamint az enzimek és élesztők aktiválása / inaktiválása.
- A szonda típusú ultrahangos homogenizátorok pontos szabályozhatósága lehetővé teszi a szövetminták megbízható előkészítését.
Szövethomogenizálás ultrahangos szondákkal
A szövethomogenizálás olyan mintaelőkészítési folyamat, amelyben állati és növényi sejteket vagy mikroorganizmusokat állítanak elő az intracelluláris anyagok, például fehérjék, DNS vagy RNS kivonása előtt. A sejtmembránt meg kell szakítani a sejttartalom felszabadításához. A sejtfal megtörése után az intracelluláris makromolekulák lebegnek a pufferoldatban, így az organellák, fehérjék és DNS / RNS elérhetővé válnak. Az ultrahangos szövethomogenizátorok és sejtzavarók nagyon hatékony eszközök a sejtek megzavarására, lízisére és kivonására.
Szonda típusú ultrahangos készülékek (pl. a 200 wattos erőteljes UP200St) megbízható szöveti homogenizátorok, és széles körben használják a minta előkészítéséhez.
Ultrahangos szövethomogenizátorok vs alternatív lízis technikák
Felteheti magának a kérdést, hogy a sejtbontás melyik technikája és melyik szövethomogenizáló berendezés a legjobb megoldás a laboratórium számára. Az alábbiakban talál néhány érvet, amelyek az ultrahangos lízis és a szövethomogenizálás mellett szólnak, mivel az ultrahangos kezelésnek számos előnye van az alternatív homogenizációs módszerekkel szemben:
- Hatékonyság: Az ultrahangos homogenizálás gyors és hatékony módszer a szövetek és sejtek megzavarására. Az ultrahangos szövethomogenizátorok az akusztikus kavitáció működési elvét alkalmazzák. Ez a módszer rendkívül hatékony, és másodpercek alatt megzavarhatja a sejteket. Mivel az intenzitási szint enyhe és intenzív között állítható be, az ultrahangos kezelés különösen hatékony a kemény vagy rostos szövetek esetében, amelyeket más módszerekkel nehéz homogenizálni.
- A keresztszennyeződés elkerülése: A Hielscher erőteljes ultrahangos szövethomogenizátorokat kínál, amelyek közvetett ultrahangos kezelésben készítik elő a mintát. Az UIP400MTP (ideális mikrotiter és multiwell-lemezekhez), valamint a VialTweeter és a CupHorn (ideális injekciós üvegekhez, csövekhez és főzőpoharakhoz) Hielscher ultrahangos cella-zavaró berendezéseket kínál érintés nélküli homogenizáláshoz, ami csökkenti a minták közötti keresztszennyeződés kockázatát. Minimalizálja továbbá a szennyeződések őrlőfelületekről vagy más homogenizáló berendezésekből történő bevezetésének kockázatát.
- Rugalmasság: Az ultrahangos homogenizálás különböző mintaméretekkel és térfogatokkal használható, a kis térfogatoktól a nagy szövetmintákig. Továbbá ultrahangos homogenizálás is alkalmas széles körű mintatípusokra, beleértve a növényi szöveteket, állati szöveteket, és mikrobiális kultúrákat. Az ultrahangos kezelés intenzitása és időtartama beállítható, hogy optimalizálja a különböző típusú szövetek zavarának szintjét.
- Reprodukálhatóság: Az ultrahangos homogenizálás következetes eredményeket biztosít, és lehetővé teszi a homogenizációs paraméterek, például a teljesítmény és az ultrahangos idő pontos szabályozását. Ez segít biztosítani a kísérleti adatok reprodukálhatóságát és pontosságát.
- Biomolekulák megőrzése: A szonda típusú ultrahangos kezelés nem termikus kezelés. Ez azt jelenti, hogy hatása nem a hőn alapul. Azonban minden mechanikai kezelés hőt termel a termodinamika második főtételének megfelelően. Ez azt jelenti, hogy a minta hosszabb szonikációs idő alatt melegebb lesz. A Hielscher legmodernebb ultrahangos készülékei hőmérséklet-érzékelőkkel és intelligens hőmérséklet-figyelő szoftverrel vannak felszerelve. A kifinomult hűtési lehetőségek lehetővé teszik a hő lebomlásának megakadályozását, és segítenek megőrizni a hőérzékeny biomolekulák, például enzimek és fehérjék aktivitását.
- Időtakarékos: A szonda típusú ultrahangos kezelés nagy hatékonysága lehetővé teszi a szövetek gyors homogenizálását, ami időt takarít meg más módszerekhez képest, amelyek a szövet szélesebb körű fizikai manipulációját igénylik.
Összefoglalva, az ultrahangos szövethomogenizálás számos előnnyel jár az alternatív homogenizációs módszerekkel szemben. Ezért az ultrahangos szövethomogenizátorok az előnyben részesített sejtzavar-technika a különböző kutatási és ipari alkalmazásokban.
Példa egy ultrahangos szondával végzett szövethomogenizálási protokollra:
Az ultrahangos készülékek megkönnyítik a szövetek homogenizálását egyszerű művelettel és gyors homogenizálási eljárással. Ugyanakkor az ultrahangos folyamatparaméterek kölcsönösen szabályozhatók és felügyelhetők, hogy az eredmények megbízhatóak és reprodukálhatók legyenek.
Anyagok:
- Szövetminta (pl. máj, agy, izom)
- Puffer (pl. PBS, Tris-HCl)
- proteázgátló koktél
- Ultrahangos homogenizátor (szonda típusú)
- Jég
- mikrocentrifuge csövek
- Pipetták
Ultrahangos szövethomogenizálási protokoll:
Megjegyzés: Az ultrahangos kezelés időtartamát és intenzitását optimalizálni kell a szövet típusától, életkorától és egészségi állapotától, valamint a specifikus downstream alkalmazásoktól függően. Fontos továbbá a puffer, a proteázgátlók és más adalékanyagok gondos kiválasztása a homogenizátum hozamának és minőségének optimalizálása érdekében.
Ultrahangos szövethomogenizátor UP200Ht 2 mm-es kürttel / szondával a sejtek megzavarására, lízisére, sejthomogeniazitására és oldására, valamint fehérje extrakcióra.
A Hielscher ultrahangos szövet homogenizátorok fő előnyei
- gyors és hatékony köszörülés, homogenizálás, lízis & sejtroncsoláshoz vagy kivonás teljesítményű ultrahangos kavitációs
- könnyű és intuitív használatát és működését (válassza az analóg vagy digitális verzió)
- könnyen tisztítható termék-érintkező felületek öblítéssel a szonotróda ultrahangos kezelés (CIP tiszta-in-place / SIP sterilizálja-in-place)
- zajvédelem doboz (a hang védelem doboz a labor eszközök teljesen készült akrilüveg teljes láthatóságot minden szögből)
- teljes ellenőrzése alatt a folyamat paramétereit keresztül digitális érintőképernyős kijelző a készülék (digitális ultrasonicators) vagy powermeter (az analóg eszközök)
- beépített hőmérséklet-szabályozás (fontos a hőre érzékeny, labilis szövetmintákban)
- szünetek a homogenizációs távon lehet egyedileg meghatározott és előre beállított digitális menüből
- Az összes digitális eszközök vannak szerelve automatikus adatrögzítés (integrált SD / USB-ComboCard), dugaszolható hőmérséklet-érzékelő és a böngésző távirányító.
- multi-sample-kezelés a VialTweeter, Cuphorn vagy a 4- vagy 8-ujj sonotrodes (például integrációs laboratóriumi robot folyamatok)
- A kis- és nagyméretű alkalmazásokat
A minta előkészítése a ultrahangos szonda UP100H.
Az alábbi táblázat jelzi ultrahangos szövethomogenizátoraink hozzávetőleges feldolgozási kapacitását a sejtek széteséséhez, líziséhez és extrakciójához:
| Kötegelt mennyiség | Áramlási sebesség | Ajánlott eszközök |
|---|---|---|
| többkútú lemezek | N/a | UIP400MTP |
| injekciós üvegek, kis főzőpohár | N/a | Ultrahangos cuphorn |
| legfeljebb 10 injekciós üveg | N/a | VialTweeter |
| 1 - 500 ml | 10-200 ml / perc | UP100H |
| 10-2000 ml | 20-400 ml / perc | Uf200 ः t, UP400St |
| 0.1-20L | 02 - 4 L / perc | UIP2000hdT |
Lépjen kapcsolatba velünk! / Kérdezz minket!
Ultrahangos cuphorn zárt csövek és injekciós üvegek intenzív szonikálására a minták steril homogenizálásához.
Keresse meg az optimális ultrahangos szövethomogenizátort az alkalmazásához
Hielscher ultrahangos szöveti homogenizers állnak rendelkezésre egy ultrahang kimeneti tartomány közötti 50W 16,000W (16 kW).
A laboratóriumi dolgozók elégedettek a Hielscher ultrahangos laboratóriumi homogenizátorok egyszerű és intuitív működésével. A konkrét követelményektől függően a Hielscher eszközök digitális vagy analóg vezérléssel rendelkeznek.
A VialTweeter egy erőteljes ultrahangos készülék, amely lehetővé teszi egyidejű ultrahangos legfeljebb 10 fiolákba vagy kémcsövek ugyanazon intenzitás. Mivel a közvetett ultrahangos kezelés, kereszt-szennyeződés és a minta veszteség teljesen elkerülhető. A tisztítása és fertőtlenítése csökkentjük minimálisra miatt az eldobható injekciós üveg. A blokk sonotrode autoklávozható.
A tartományban szonda-típusú laboratóriumi ultrasonicators, eszközöket lehet kiválasztani 50w, 100W, 200W, 250W és 400W.
Nagyobb folyamat kötetek, a próbapad tetejére ultrahangos diszruptorok kapható 500W, 1000 W, 1500W és 2000W.
És nagy mennyiség patakok, ultrasonicators a 4000W, 10000 w vagy 16, 000W vannak clusterizable, tehát alkalmas, hogy feloldják és homogenizáljuk szinte minden mennyiségben celluláris anyag.
Ultrahangos szövethomogenizátorok alkalmazása és felhasználása
Ultrahangos homogenizers általánosan használják szövet csiszolás, sejtroncsolási & lízis és homogenizálása biológiai minták előtt a kitermelés az intracelluláris anyag molekuláris tartományban. A szabályozott szonikálási a minták, az összes lépést a lízis extrakciós és homogenizálást végezhetjük ugyanazon ultrahangos sejtfeltáróval.
Az ultrahangos homogenizátorok nagy előnye a könnyen állítható teljesítménybevitel és az ultrahangos intenzitás. A Hielscher ultrahangos sejtzavarók (lizátorok) lehetővé teszik az ultrahangos intenzitás szabályozását az amplitúdó 20% -ról 100% -ra történő beállításával.
Alternatív módon a folyamatos működés, az ultrahangos homogenizáló lehet állítani, hogy ciklus üzemmódba, például A szonikáció hőre érzékeny szövetet. Az ultrahangos kezelés impulzus üzemmódban jelenti ultraszonizálót generál nagy intenzív ultrahang hullámok periodikus ciklus. Az időtartam az ultrahangos időszak és a többi időt lehet egyedileg beállítani a felhasználó.
NÁL NÉL Pulzált Sonication, Pihenőidő alatt, az ultrahanggal kezelt anyag visszatér a nyugalmi állapotba, és a mintát hűlni (a fennmaradó időben a hőleadás). Ezáltal, feldolgozási intenzitás lehet pontosan beállítani, megfelelően, hogy a szövet és a nem kívánt minta melegítési csökken.
Ultrahangos szövet homogenizáiókészülékeknek robosztus és felhasználóbarát, miközben megbízható eredmény biztosítása reprodukálhatóság miatt teljes ellenőrzése alatt minden fontos folyamat paramétereit.
Az ultrahangos szövetőrlés, a sejtzavarás, a lízis, az extrakció és a homogenizálás közös alkalmazási területei megtalálhatók a biológiai és gyógyszerészeti laboratóriumokban, a mikrobiológiában, a proteomikai és genomikai kutatásokban (pl. Fehérje felszabadulás a Western blotting és enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat ELISA előtt), de botanikai kivonatok és bioaktív vegyületek előállításában is az élelmiszer-, gyógyszer- és kozmetikai ipar számára.
Click ide specifikus eljárás ajánlásokat minta-előkészítés, szervhigításos, lízis és extrakció (például sejtek, baktériumok, spórák, hatóanyagok)!
Irodalom / Referenciák
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.
Tudni érdemes
Az ultrahangos szövethomogenizátorokat gyakran mint szonda-ultrahangos, ultrahangos csiszológép, szamár-ruptor, sonifier, sonic dismembrator, cell disrupter, ultrahang diszpergáló vagy oldószerként használják. A különböző kifejezések az egyes alkalmazásokból származnak, amelyeket az ultrahangos kezeléssel lehet teljesíteni.
Hielscher Ultrasonics gyárt nagy teljesítményű ultrahangos homogenizátorok keverésalkalmazások, diszperziós, emulgeálás és extrakciós laboratóriumi, kísérleti és ipari méretű.