Verihiutalerikkaan seerumin valmistus ultraäänellä

• Verihiutalerikas plasma (PRP) on veriplasmaa, jota on rikastettu verihiutaleilla ja jota käytetään lääketieteellisissä ja esteettisissä hoidoissa.
• Ultraäänihajotus ja -konditionointi ovat erittäin tehokas menetelmä verihiutalerikkaan plasman valmistamiseen.
• Hielscher Ultrasonics tarjoaa erilaisia ultraäänijärjestelmiä, jotka vastaavat veren käsittelyn vaatimuksia (esim. valmistukseen puhdastilassa ja sen ulkopuolella).

Verihiutalerikas seerumi

Ultraäänikäsittely on luotettava ja helppo menetelmä autologisen veriseerumin verihiutaleiden hajottamiseen kasvutekijöiden vapauttamiseksi. Verihiutaleista peräisin olevia fraktioita – jotka tunnetaan myös autologisena konditionoituna seerumina (ACS) – käytetään kudosten korjaamiseen tai esteettisiin hoitoihin. Optimaalisten tulosten saavuttamiseksi PRP:tä rikastetaan ennen injektiota.
Solujen kasvutekijöillä rikastetun plasman valmistuksessa ultraäänikäsittely on erittäin tehokas ja tehokkaasti toimiva menetelmä solukalvojen hajottamiseen ja lähes kaikkien solujen kasvutekijöiden vapauttamiseen verihiutaleista. Ultraäänihajotuksen ja -konditionoinnin avulla voidaan käyttää jopa antikoaguloitua verta.
PRP:n konditionointi ultraäänikäsittelyllä on kätevä ja kustannustehokas tapa saada konsentroituja kasvutekijöitä.

Verihiutalerikkaan plasman (PRP) hajotus ultraäänellä

Ultraäänihajotuksen vaikutukset

Veriseerumin ultraäänikäsittely hajottaa verihiutaleet tasaisesti ja vapauttaa niiden sisään jääneet kasvutekijät (kasvutekijä AB (PDGF-AB), kasvutekijä AA (PDGF-AA), kasvutekijä BB (PDGF-BB), verisuonten endoteelikasvutekijä (VEGF), transformoiva kasvutekijä β (TGF-β), epidermaalinen kasvutekijä (EGF), insuliinin kaltainen kasvutekijä (IGF), epiteelisolujen kasvutekijä ECGF ja fibroblastikasvutekijä (FGF)). Verihiutaleet ja niiden alfagranulat hajotetaan ultraäänikäsittelyllä hyödyntämällä ilmiötä nimeltä akustinen kavitaatio. Ultraäänikavitaation käyttö verihiutaleiden hajottamiseen vähentää toistuvaan jäädytys-sulatusmenetelmään liittyvää mahdollista kielteistä vaikutusta kasvutekijöiden aktiivisuuteen.

Menettelyohje PRP:n valmistamiseen ultraäänellä

Noin 16 mL:n vastikään otettu autologinen verinäyte käännetään putkessa varovasti ylösalaisin 8–10 kertaa, jotta veri ja antikoagulantit sekoittuvat hyvin. Tämän jälkeen näytettä sentrifugoidaan 1800 g:n voimalla 20 min huoneenlämmössä. Sentrifugoinnin jälkeen verihiutaleet ja mononukleaariset solut muodostavat plasmakerroksen alaosaan vaalean kerroksen, joka tunnetaan verihiutalerikkaana plasmana (PRP). Ylempi kerros tunnetaan verihiutaleköyhänä plasmana (PPP). Mononukleaariset solut voidaan poistaa tai jättää näytteeseen. Mononukleaariset solut jätetään usein PRP-näytteeseen, jotta vältetään ylimääräiset vaiheet, joihin liittyy kontaminaation riski.
Huomautus: Autologisen PRP:n ultraäänikäsittely on tehtävä steriileissä olosuhteissa.
PRP ja PPP erotetaan ja kerätään. PPP:hen lisätään 1,5 mL 10 %:n kalsiumkloridiliuosta ja PRP:hen 0,5 mL 5 %:n etanolia. Molempia suspensioita sekoitetaan varovasti ja niiden annetaan seistä 5 min huoneenlämmössä. Lopuksi PRP-suspensioon lisätään 1 mL PPP:tä ja suspension annetaan seistä, kunnes fibriinihyytymä muodostuu.
Ultraäänikäsittely: Koska muodostunut verihiutalegeeli toimii vapautuneiden kasvutekijöiden varastona, fibriinigeeli on hajotettava saatavilla olevien kasvutekijöiden vapauttamiseksi. Ultraäänihajotuksen ja kasvutekijöiden vapauttamisen parametrit ovat seuraavat: Käsittele putkessa oleva näyte ultraäänellä käyttäen laitetta UP200Ht tai UP200St (200 W, 26 kHz) ja sonotrodia S26d2. Verinäytteen ylikuumenemisen välttämiseksi ultraäänikäsittely voidaan suorittaa pulssijaksoina (esim. 10 s päällä, 30 s pois päältä). Näyte tulisi asettaa jäälle jäähdytystä varten, jotta lämpötila pysyy optimaalisesti välillä 2–5 °C. Ultraäänikäsittelyn jälkeen näytettä sentrifugoidaan 16 000 g:n voimalla 5 min huoneenlämmössä. Supernatantti kerätään, ja sitä voidaan säilyttää -70 °C:ssa.
PRP-fraktion verihiutalepitoisuus rikastui ultraäänikäsittelymenetelmällä 1,7–4,5-kertaiseksi verrattuna kirjallisuudessa ilmoitettuun kokoveren keskimääräiseen verihiutalemäärään.

PRP:tä on yhdistetty rasvakudoksesta peräisin olevilla kantasoluilla annettavaan hoitoon (rasvakudoksesta ultraäänellä vapautetut autologiset kantasolut sekoitetaan PRP:hen ja injektoidaan takaisin potilaan kudokseen sen korjaamiseksi).

Ultraäänilaitteet

Hielscher Ultrasonics on edistyneen ja luotettavan ultraääniteknologian asiantuntija. Ultraäänilaitteitamme käytetään maailmanlaajuisesti hajotukseen, uuttoon ja näytteiden valmistukseen – suoraan ja epäsuorasti. Autoklavoitavat sekä kertakäyttöiset lisävarusteet varmistavat kontaminaatiottoman autologisten verinäytteiden käsittelyn. Useimpia järjestelmiämme voidaan käyttää ultraäänellä tapahtuvaan kantasolujen ja PRP:n hajotukseen, mikä tekee ultraäänilaitteistamme taloudellisesti entistäkin tehokkaampia.
Alla olevassa taulukossa luetellaan verihiutalerikkaan plasman valmistamiseen soveltuvat ultraäänilaitteemme ja kunkin laitteen suositeltu näytetilavuus. Saatavilla on myös suurempia ultraäänilaitteita ja räätälöityjä järjestelmiä.

Ota meihin yhteyttä jo tänään! Autamme mielellämme löytämään optimaalisen ultraäänilaitteen!