Verihiutaleiden rikkaan seerumin ultraäänivalmistus
- Verihiutalerikas plasma (PRP) on veriplasma, joka on rikastettu verihiutaleilla ja jota käytetään lääketieteellisiin ja esteettisiin hoitoihin.
- Ultraäänilyysi ja ilmastointi on erittäin tehokas menetelmä verihiutaleiden rikkaan plasman valmistamiseksi.
- Hielscher Ultrasonics tarjoaa erilaisia ultraäänijärjestelmiä, jotka vastaavat verihoidon vaatimuksia (esim. puhtaan huoneen sisä- ja ulkovalmisteluun).
Verihiutaleiden rikas seerumi
Sonikaatio on luotettava ja helppo menetelmä verihiutaleiden hajottamiseksi autologisessa veren seerumissa kasvutekijöiden vapauttamiseksi. Verihiutaleista peräisin olevat fraktiot – tunnetaan myös nimellä autologinen ehdollinen seerumi (ACS) – käytetään kudosten korjaamiseen tai esteettisiin hoitoihin. Optimaalisten tulosten saavuttamiseksi PRP rikastetaan ennen injektiota.
Rikastetun plasman valmistamiseksi solujen kasvutekijöillä sonikaatio on erittäin tehokas ja tehokas menetelmä solukalvojen hajottamiseksi ja lähes täydellisten solujen kasvutekijöiden vapauttamiseksi verihiutaleista. Ultraäänilyysillä ja -käsittelyllä voidaan käyttää jopa antikoaguloitua verta.
PRP: n ilmastointi sonikaatiolla on kätevä ja kustannustehokas tapa tuottaa keskittyneitä kasvutekijöitä.
Verihiutaleiden rikkaan plasman (PRP) ultraäänilyysi
Ultraääni Lysis Vaikutukset
Veren seerumin ultraäänikäsittely johtaa verihiutaleiden homogeeniseen hajoamiseen loukkuun jääneiden kasvutekijöiden vapauttamiseksi (kasvutekijä AB (PDGF-AB), kasvutekijä AA (PDGF-AA), kasvutekijä BB (PDGF-BB), verisuonten endoteelikasvutekijä (VEGF), transformoiva kasvutekijä β (TGF-β), epidermaalinen kasvutekijä (EGF), insuliinin kaltainen kasvutekijä (IGF), epiteelisolujen kasvutekijä EKGF ja fibroblastinen kasvutekijä (FGF)). Verihiutaleet ja niiden alfa-rakeet häiriintyvät sonikaatiolla käyttämällä ilmiötä akustinen kavitaatio. Ultraäänikavitaation käyttö verihiutaleiden lyysiin vähentää toistuvan jäädytys-sulatusmenetelmän mahdollista negatiivista vaikutusta kasvutekijän aktiivisuuteen.
Protokolla ultraääni PRP-valmisteluun
Noin 16 ml tuoretta kerättyä autologista verinäytettä käännetään varovasti 8-10 kertaa putkessa niin, että veri ja antikoagulantit sekoittuvat hyvin. Tämän jälkeen näytettä sentrifugoidaan 1800 g:ssa 20 minuutin ajan huoneenlämmössä. Sentrifugoinnin jälkeen verihiutaleet ja mononukleaariset solut rakentavat plasmakerroksen pohjalle valkean kerroksen, joka tunnetaan verihiutalerikkaana plasmana (PRP). Ylempi kerros tunnetaan verihiutaleiden huonona plasmana (PPP). Mononukleaariset solut voidaan poistaa tai jättää näytteeseen. Usein mononukleaariset solut jäävät PRP-näytteeseen, jotta vältetään lisävaiheet, joihin liittyy kontaminaatioriski.
Huomautus: Autologisen PRP: n ultraäänikäsittely on suoritettava steriileissä olosuhteissa.
PRP ja PPP erotetaan ja kerätään. PPP:hen lisätään 1,5 ml 10-prosenttista kalsiumkloridiliuosta ja PRP:hen 0,5 ml 5-prosenttista etanolia. Molempia suspensioita ravistellaan varovasti ja annetaan seistä 5 minuuttia huoneenlämmössä. Lopuksi PRP-suspensioon lisätään 1 ml PPP: tä ja sen annetaan seistä, kunnes fibriinihyytymä muodostuu.
Ultraäänihoito: Koska muodostunut verihiutalegeeli toimii vapautuneiden kasvutekijöiden säiliönä, fibriinigeeli on hajotettava käytettävissä olevien kasvutekijöiden vapauttamiseksi. Ultraäänilyysin ja kasvutekijän vapautumisen parametrit ovat seuraavat: Sonikoitu UP200Ht tai UP200St (200W, 26kHz) sonotrode S26d2: lla näyte putkessa. Verinäytteen ylikuumenemisen välttämiseksi sonikaatio voidaan suorittaa pulssisykleissä (esim. 10 sekuntia päällä, 30 sekuntia pois). Näyte asetetaan jäälle jäähdytystä varten, jotta lämpötila pysyy optimaalisesti välillä 2 – 5°C. Sonikoinnin jälkeen näyte sentrifugoidaan 16000 g: ssa 5 minuutin ajan huoneenlämpötilassa. Supernatantti kerätään talteen ja sitä voidaan säilyttää -70 °C:ssa.
PRP-fraktion verihiutalepitoisuus rikastui 1,7 – 4,5 kertaa sonikoidussa menetelmässä verrattuna kirjallisuuteen keskimääräinen verihiutaleiden määrä kokoveressä.
PRP on yhdistetty rasvaperäiseen kantasoluhoitoon (Ultraäänellä vapautuneet autologiset kantasolut rasvakudoksesta, sekoitettuna PRP:hen ja injektoituna takaisin potilaan kudokseen korjausta varten).
Ultraäänilaitteet
Hielscher Ultrasonics on hienostuneen ja luotettavan ultraäänitekniikan asiantuntija. Ultraäänilaitteitamme käytetään maailmanlaajuisesti lyysiin, uuttamiseen ja näytteen valmistukseen – suoraan ja epäsuorasti. Autoklaavissa sekä Kertakäyttöinen Lisävarusteet varmistavat kontaminaatiovapaa autologisten verinäytteiden käsittely. Suurinta osaa järjestelmistämme voidaan käyttää ultraäänilyysiin Kantasoluja ja PRP, mikä tekee ultraäänilaitteistamme taloudellisesti entistä tehokkaampia.
Tässä alla olevassa taulukossa luetellaan ultraäänilaitteet, jotka soveltuvat verihiutaleiden rikkaan plasman valmistukseen, ja niiden suositeltu näytemäärä. Saatavilla on myös suurempia ultraäänilaitteita ja räätälöityjä järjestelmiä.
| Laite | Teho [W] | Taajuus [kHz] | Tyyppi | Tilavuus [ml] | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| VialTweeter | 200 | 26 | itsenäinen | 0.5 | – | 1.5 |
| UP50H | 50 | 30 | kädessä pidettävä tai jalustalle asennettu | 0.01 | – | 250 |
| UP100H | 100 | 30 | kädessä pidettävä tai jalustalle asennettu | 0.01 | – | 500 |
| UP200Ht | 200 | 26 | kädessä pidettävä tai jalustalle asennettu | 0.1 | – | 1000 |
| UP200St | 200 | 26 | jalustalle asennettu | 0.1 | – | 1000 |
| UP400St | 400 | 24 | jalustalle asennettu | 5.0 | – | 2000 |
| UP200St-SonoStep | 200 | 26 | itsenäinen | 30 | – | 500 |
| GDmini2 | 200 | 26 | kontaminaatiovapaa virtauskenno | |||
Ota yhteyttä jo tänään! Autamme mielellämme löytämään optimaalisen ultraäänilaitteen!
Ota yhteyttä! / Kysy meiltä!
GDmini2 UP200St-TD-anturissa (200 wattia)
Kirjallisuus/viitteet
- Fortunato, T. M.; Beltrami, Ch.; Emanueli, C.; De Bank, P.A:; Pula, G. (2016): Verihiutaleiden lysaattigeeli ja endoteeliprogenitorit stimuloivat mikrovaskulaarisen verkon muodostumista in vitro: kudostekniikan vaikutukset. Sci. Rep. 6, 2016.
- Hamid, MSA; Yusof, Ashril; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): Verihiutalerikas plasma (PRP) akuuttiin lihasvammaan: systemaattinen katsaus. PLOS ONE osa 9, numero 2, 2014.
Faktoja, jotka kannattaa tietää
verihiutaleita sisältävä plasma
Verihiutalerikas plasma sisältää kasvutekijää AB (PDGF-AB), verihiutaleperäistä kasvutekijää AA (PDGF-AA), verihiutaleista peräisin olevaa kasvutekijää BB (PDGF-BB), verisuonten endoteelikasvutekijää (VEGF), transformoivaa kasvutekijää β (TGF-β), epidermaalista kasvutekijää (EGF), insuliinin kaltaista kasvutekijää (IGF), epiteelisolujen kasvutekijää EKGF ja fibroblastista kasvutekijää (FGF), jotka ovat tärkeitä solujen kasvua ja uudistumista stimuloivia aineita.
Autologinen ilmastoitu seerumi (ACS)
Autologinen ehdollinen plasma (ACP) on verihiutalerikas plasma, joka uutetaan autologisesta verestä ja jota käytetään tukemaan uudistumista erilaisissa ortopedisissa olosuhteissa ja kirurgisissa toimenpiteissä. Ilmastoitu seerumi valmistetaan erottamalla plasma muista veren komponenteista (kuten punasoluista) ja väkevöimällä se. ACP on verihiutalerikas plasma (PRP). PRP on yleinen termi plasmatyypille, joka sisältää huomattavasti korkeamman trombosyyttipitoisuuden verrattuna kokovereen. Se uutetaan kokoverestä. AKT: n pääkomponentteja ovat trombosyytit (verihiutaleet) ja useat kasvutekijät, joilla on tärkeä rooli paranemisprosessissa. Toisin kuin muut verihiutalerikkaat plasmaformulaatiot, ACP: lle on ominaista alhainen valkosolujen, kuten neutrofiilien granulosyyttien, pitoisuus, jotka voivat olla haitallisia paranemisprosessille, kun niitä esiintyy suurina pitoisuuksina.
verihiutaleita sisältävät plasmainjektiot
Verihiutaleita sisältävää plasmaa käytetään injektiona regeneratiivisessa lääketieteessä sekä kosmeettisissa toimenpiteissä. PRP: n käyttö lupaa merkittävästi nopeuttaa lihasten paranemista ja lihasten palautumista. Lisäksi sitä käytetään menestyksekkäästi tulehduksen, niveltulehduksen, kivun, haavojen, hitaasti paranevien avoimien haavojen ja vakavien ihon palovammojen hoitoon. PRP sisältää runsaasti kasvutekijöitä, jotka stimuloivat ja suojaavat parantavia soluja ao, että vaurioitunut kudos korjataan.
Kosmeettisissa treamenteissa PRP: n on osoitettu stimuloivan tehokkaasti hiusten kasvua, ihon uudistumista (tunnetaan myös nimellä vampyyrihoito).
Verihiutaleperäiset kasvutekijät (PDGF)
Termi verihiutaleista peräisin oleva kasvutekijä (PDGF) viittaa tekijöihin PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C ja PDGF-D. Se on neljän ligandin (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C ja PDGF-D) ja kahden reseptorin, PDGFR-alfa ja PDGFR-beeta, signalointiverkosto.
Kasvutekijät eli proteiinit säätelevät solujen kasvua ja jakautumista. Nisäkässeerumin pääasiallisena mitogeeninä, joka vapautuu verihiutaleista hyytymien muodostumisen aikana, sillä on merkittävä rooli verisuonten muodostumisessa (angiogeneesissä), verisuonten kasvussa jo olemassa olevasta verisuonikudoksesta.