Hielscher Ultra ääni tekniikka

Ultraääni kantasolujen eristäminen

  • Ultrasonic kavitaatio on erittäin tehokas mekaaninen menetelmä kantasolujen eristämiseksi ihmisen rasvakudoksesta.
  • Ultrasonisesti eristetty stromal vaskulaarinen fraktio (SVF) osoittaa suurta regeneratiivista potentiaalia lääketieteellisiin sovelluksiin.
  • Hielscher Ultrasonics tarjoaa erilaisia ​​vaihtoehtoja suoralle ja epäsuoralle sonikoinnille kantasolujen korjuussa.

 

Kantasolujen ultraäänieristys

Ihmiseltä poistetusta rasvakudoksesta (rasvaimun välityksellä) käsitellään ultraäänikäsittelyllä kudoksen poistamiseksi kantasoluista ja muista kasvusoluista. Tämä erotettu osa soluista tunnetaan stromaalisena verisuonifraktiokennona (SVF).
Kudosseosten ultraäänitutkimusmenetelmä rasvakudoksesta perustuu yksinomaan ultraäänikudotun kavitaation toimintaperiaatteeseen, joka on mekaaninen leikkaus. Kavitaation leikkausvoimat häiritsevät rasvakudosta, niin että kantasolut vapautuvat rasvakudoksen rakenteesta. Ultraääni-kantasolujen eristäminen on entsyymivapaa menettely, joka estää kollagenaasin, trypsiinin tai dispasionin käytön.
Erotettujen kantasolujen, mesenkymaalisten kantasolujen, endoteeliprekursoreiden ja muiden kasvosolutyyppien erottamiseksi sonikoidut rasvakudokset sentrifugoidaan.
Erotut kantasolut kerätään ja analysoidaan niiden laadun mukaan lukien solujen määrä, elinkyky, endotoksiini ja gramma tahri ennen kuin niitä käytetään välittömästi autologiseen elinsiirtoon tai säilytetään kryopohjaisessa varastoinnissa.

Miksi välttää entsyymejä?

Koska kantasolujen eristämisen entsymaattinen pilkkominen liittyy korkeisiin kustannuksiin ja mahdollisiin turvallisuusriskeihin sekä tehottomuuteen [Oberbauer et ai. 2015], ei-entsymaattiset eristämismenetelmät, kuten ultraääni kavitaatio, ovat edullisia. Ultraäänieristysvaihe korvaa entsymaattisen pilkkomisen erottamalla solut ja soluaggregaatit mekaanisesti rasvakudoksesta.

GDmini2 UP200St-TD-muuntimessa (200 wattia) kontaminoitumatonta sonikointia varten

GDmini2 UP200St-TD-anturissa (200 wattia)

Informaatio pyyntö




Huomaa, että Tietosuojakäytäntö.


Sonication edut
VialTweeter, johon on asennettu VialPress

  • nopea
  • tehokas
  • toistettavissa
  • turvallinen
  • Entsyymi-Free
  • kustannustehokas
  • steriili Vaihtoehdot
Ultraääni kavitaatio on luotettava menetelmä kantasolujen eristämiseksi rasvakudoksesta. © Oberbauer et ai. 2015

Adipose-johdetut kantasolut

Kantasolujen tuotto

Julkaistu SVF-eristysmenetelmä käyttäen ultraäänikavitaatiotuottoa 1,67-2,24 x 10: ssä7 solut, joiden elin kelpoisuus on 97.1 – 98.9% [Victor, S., 2014]. Solujen saanto on noin 2 – 4 miljoonaa solua/Gram-rasva kudosta saatiin kypsien rasva solujen Ultra ääni lyysillä dissosialisessa rasva kudoksessa [kirkas et al., 2014].
Ultronaalisesti valmistetuilla soluilla on yhtä suuri adipogeeninen ja osteogeeninen erilaistumispotentiaali verrattuna tavalliseen entsymaattiseen eristämismenetelmään [Oberbauer et ai. 2015].

Ultrasysteemit kantasolujen eristämiseen

Korkeimman turvallisuuden ja parhaan laadun takaamiseksi luotettava ultraäänilaitteisto, joka mahdollistaa tarkan kontrollin kantasolujen käsittelyssä, on keskeinen tekijä potilaiden onnistuneelle hoidolle. Hielscher Ultrasonics tarjoaa erilaisia ​​vaihtoehtoja autologiseen ultraäänikavitaation erotusprosessiin, jotta voidaan eristää ja korjata varsi- ja endoteeliprekurssisoluja.

Suora sonication

UP200St (200W) ultraäänianturi-laite, jossa äänikoteloKantasolun eristämisprosessin suoralla sonikoinnilla ultraääni-sarvi (sonotrode, ultraääni kärki / koetin) upotetaan rasvakudokseen. Sonotrode-järjestelmän kautta ultraääniaallot kytketään suoraan autologiseen rasvaan siten, että ultraäänikavitaatio vapauttaa kantasolut ja stromasolut jäljelle jääneestä kudoksesta. Hielscherin ultraäänimittajat Uf200 ः t ja UP200St s sonotrode S26d14 ovat yleisesti käytettyjä autologisen kantasoluhoidon järjestelmiä. SVF-eristäminen suoralla sonikoinnilla on enimmäkseen sopiva käytettäväksi puhtaissa tiloissa.

välilliset sonication

Koska kantasoluja käytetään autologisiin sovellutuksiin, prosessin steriiliys on erittäin tärkeä. Siksi Hielscher on kehittänyt useita epäsuoran sonication vaihtoehtoja, kuten GDmini2, VialTweeter ja muut räätälöidyt järjestelmät. Epäsuoralla sonikoimalla ultraääni-aallot kytketään seinäsäiliön läpi rasvakudokseen. Stromal vaskulaarinen fraktio (SVF) erotetaan rasvakudoksesta ultraäänikavitaatiolla samoin kuin suoralla sonikoinnilla.
VialTweeter estää sonotrode S26d11x10 UP200St: lle (Klikkaa nähdäksesi suurempana!)Epäsuora sonikointiprosessi tarjoaa edun solujen käsittelyyn suljetussa astiassa alle saastumattomia olosuhteita koska ristikontaminaation riski upottamalla ultraääni-sarvi (sonotrode) eliminoituu. Solujen eristäminen suoritetaan suljetussa järjestelmässä, joka varmistaa steriilit prosessiolosuhteet.

Hielscherin digitaalisia ultraäänilaitteita voidaan tarkasti ohjata kosketusnäytön tai selaimen hallinnan avulla. Sonikaatiomenetelmät voidaan esiasettaa intuitiivisen valikon avulla. Ultraäänilaitteet on varustettu automaattisella datan tallennuksella (kaikki sonication proces data tallennetaan integroidulla SD-kortilla). Ultraääni tehonsyöttö voidaan tarkasti säätää solun eristysprotokollaan.

Ota meihin yhteyttä! / Kysy meiltä!

Käytä alla olevaa lomaketta, jos haluat lisätietoja ylimääräisestä homogenoinnista. Olemme iloisia voidessamme tarjota sinulle ultrasonic-järjestelmän, joka vastaa tarpeitasi.









Huomaathan, että Tietosuojakäytäntö.


Kirjallisuus / Viitteet

  • Oberbauer, Eleni; Steffenhagen, Carolin; Wurzer, Christoph; Gabriel, kristillinen; Redl, Heinz; Wolbank, Susanne (2015): entsyymi-entsymaattiset eristys järjestelmät rasva kudokseen johdettuihin soluihin: nykyinen nykytila. Solujen uusiutuminen (2015) 4:7.


Tosiasiat, jotka kannattaa tietää

kantasoluja

Kantasolut ovat monisoluisen organismin erottelemattomia soluja, joilla on kyky tuottaa loputtomasti enemmän samantyyppisiä soluja. Niille on ominaista huomattava potentiaali kehittää monia eri solutyyppejä elimistöön elämän alku- ja kasvuvaiheessa. Kantasolujen erityispiirre on niiden kyky uudistaa itsensä solujen jaon ja kyvynsä muuttua kudos- tai elinkohtaisiksi soluiksi, joilla on erityistoimintoja. Pluripotentit kantasolut voivat erottaa mistä tahansa kolmesta sukusolusta: endoderma (sisempi mahalaukun vuoraus, ruoansulatuskanava, keuhkot), mesodermi (lihas, luu, veri, urogenitaalinen kouru) tai ektoderma (epidermaaliset kudokset ja hermosto).
Joissakin elimissä, kuten suolessa ja luuytimessä, kantasolut jakavat säännöllisesti korjaamaan ja korvaamaan kuluneita tai vaurioituneita kudoksia. Muissa elimissä, kuten haimassa ja sydämessä, kantasolut jakautuvat vain erityisolosuhteissa.
Monokylaaliset stromal / kantasolut (MSC), jotka tarjoavat runsaasti terapeuttisia käyttötarkoituksia regeneratiivisessa ja estetiikassa, ovat pääasiassa luuytimessä, mutta ne voidaan eristää muista kudoksista (esim. Rusto, rasva, lihassolut) liian. Mekymkimaalisia kantasoluja pidetään prototyyppisiksi aikuisiksi kantasoluiksi, joille on ominaista itsensä uusimisen kyky.
Kantasolujen tutkimusta ja hoitoja käytetään kasvattamaan kudoksia ja elimiä elinsiirtoa varten (kudosteknologia). Muita kantasolujen käyttöön liittyviä lääketieteellisiä kenttiä ovat aivosairauksien (esim. Parkinsonin ja Alzheimerin taudin) hoitoon, solujen puutteelliseen hoitoon, veritauteihin (esim. Leukemia), nivelten ja ruston rappeutumiseen (esim. Nivelrikko) sekä kosmeettisiin hoitoihin (esim. anti-aging hoitoja). Yleensä kantasoluilla on kooltaan n. Halkaisijaltaan 15-25 mikronia.
Mesenchymal kantasolut (MSC) ovat monipotentiaalisia stromasoluja, joilla on kyky erilaistua erilaisiin solutyyppeihin, mukaan lukien osteoblastit (luussolut), kondrosyytit (rustosolut), myosyytit (lihassolut) ja adiposyytit (rasvasolut).

Stromal vaskulaarinen fraktio (SVF)

Stromal vaskulaarinen fraktio (SVF) on osa lipoaspiraattia, joka voidaan uuttaa liposuctionin kautta rasvakudoksesta ihmiskehossa. Lipoaspiraatti koostuu heterogeenisesta soluseoksesta ja sillä on kantasolujen suuri määrä, joka tunnetaan rasvahapoista peräisin olevina kantasoluina (ASC tai ADSC), jotka osoittavat samankaltaisuutta luuytimen kantasolujen kanssa, kuten niiden kyvyn erottaa multilineaasisoluihin.
SVF: n heterogeeninen populaatio sisältää endoteelisolut, erytrosyytit, fibroblastit, lymfosyytit, monosyytit / makrofagit ja perivyytit muun muassa samoin kuin tärkeä osa rasvahapoista peräisin olevia kantasoluja.

Adipose-johdettu Stromal / Stem Cells (ASC)

Adipoosista peräisin olevat stromal / kantasolut (ASC / ADSC) vapauttavat korkeita bioaktiivisten kasvutekijöiden, kuten epidermaalisen kasvutekijän (EGF), verisuonten endoteelisen kasvutekijän (VEGF), perusbibroblastin kasvutekijän (bFGF), keratinosyyttikasvutekijän (KGF) (PDGF), hepatosyyttikasvutekijä (HGF), transformoiva kasvutekijä-beeta (TGF-β), insuliinin kasvutekijä (IGF) ja aivopohjainen neurotrofinen tekijä (BDNF). ACS ei vapauta kasvutekijöitä, vaan ne myös erittävät sytokiinejä, kuten fms-tyyppisen tyrosiinikinaasin 3 (Flt-3) ligandin, granulosyyttikasvutekoa stimuloivan tekijän (G-CSF), granulosyytti makrofagikasvutekoa stimuloivan tekijän (GM-CSF), makrofagin (IL-6), IL-7: n, IL-8: n, IL-11: n ja IL-12: n, leukemiaa inhiboivan tekijän (LIF) ja tuumorinekroositekijä-alfa-interferon (TNF-α).

Kantasolutyyppien uuttaminen

Autologiset aikuisten StemCells ihmisiltä voidaan poimia seuraavista lähteistä:

  • Luuydin, joka vaatii uuttoa sadonkorjuu, eli poraus luuhun.
  • Rasvakudos (lipidisolut), joka vaatii uuttamista rasvaimella.
  • Veri, joka edellyttää ekstraktiota afereesin kautta, jolloin luovuttajan veri kulkee a “dialyysi” jossa kantasolut uutetaan, kun taas muut veren komponentit palautetaan takaisin luovuttajalle.