Technologia ultradźwiękowa firmy Hielscher

Ultrasonograficzne przygotowanie próbek C. Elegans

C. elegans, robak nicieniowaty, jest szeroko stosowanym modelem organizmu w biologii. Przygotowanie próbki przed analizą wymaga analizy, ekstrakcji białka i lipidów oraz fragmentacji RNA, którą można wiarygodnie wykonać za pomocą sondy. Ultradźwiękowe dysruptory komórkowe są niezawodnymi, zaawansowanymi i łatwymi w użyciu urządzeniami do szybkiego przygotowania próbek C. elegans.

Ultrasonograficzne przygotowanie próbek C. Elegans

C. elegans to glisty, które są szeroko stosowane w laboratoriach badawczych do badania genomiki, biologii rozwojowej i chorób. Wiele genów w genomie C. elegans ma funkcjonalne odpowiedniki u ludzi. W związku z tym nicień jest niezwykle użytecznym modelem w leczeniu ludzkich chorób. Inne zalety szerokiego zastosowania C. elegans to łatwa i tania hodowla na płytkach zawierających bakterie (np. E. coli), przezroczystość, wygodna obsługa, a także możliwość zamrażania i przechowywania robaków przez dłuższy czas.
Analiza białkowa i lipidowa to regularne zabiegi w laboratoriach, a przygotowanie próbki ultradźwiękowej jest ustaloną metodą lyserowania nicienia C. elegans w każdym stadium rozwojowym (tj. zarodki, larwy L1-L4, osobniki dorosłe). Ponieważ C. elegans jest również używana jako system ekspresji białka do nadmiernej ekspresji białek docelowych, wymagana jest niezawodna, powtarzalna metoda lizania i ekstrakcji białka, która daje wysoką wydajność białka. Ultrasonograficzne systemy rozbijania i ekstrakcji komórek są dostępne jako homogenizatory typu sonda oraz jako wielopróbkowe ultrasonografy. Hielscher Ultrasonics jest idealnym aparatem zakłócającym komórki ultradźwiękowe do zastosowań laboratoryjnych, umożliwiającym wygodne przygotowanie próbek o dowolnej wielkości.
C. elegans is a widely used model organism in biological research. Ultrasonic lysis is a sophisticated, reliable, reproducible and rapid technique to prepare high-quality protein extracts from C. elegans.

Ultrasonic C. elegans Lysis dla

  • Przygotowanie homogenatów ślimakowych
  • ekstrakcja białka
  • Ekstrakcja lipidów
  • Kwantyfikacja białek
  • Immunoprecypitacja
  • western blot
  • Ekstrakcja RNA
  • Badania enzymatyczne
Sonotroda MTP-24-8-96 posiada osiem sond ultradźwiękowych do sondowania dołków płytek mikrotitracyjnych.

Sonotroda MTP-24-8-96 posiada osiem sond ultradźwiękowych do sondowania dołków płytek mikrotitracyjnych.

Zapytanie o informacje




Zwróć uwagę na nasze Polityka prywatności.


Protokoły ultradźwiękowe dla C. Elegans Disruption and Lysis

Ultrasonograficzna homogenizacja i liza C. elegans, a następnie ekstrakcja białka i lipidów mogą być wykonywane przy użyciu różnych procedur z wykorzystaniem różnych buforów homogenizacyjnych i lizujących itp. Wszystkie protokoły lizy mają tę samą wspólną cechę, że próbki muszą być stale przechowywane na lodzie, aby zapobiec degradacji białka. Poniżej przedstawiamy Państwu kilka niezawodnych i szybkich protokołów analizy ultradźwiękowej i ekstrakcji w celu przygotowania wysokiej jakości próbek C. elegans zawierających białko lub lipidy.

Zalety Ultrasonic C. elegans Lysis

  • niezawodny
  • odtwarzalny
  • sterowany precyzyjną temperaturą
  • niezawodna kontrola procesu
  • delikatna metoda
  • łatwy do zastosowania
  • bezpieczny

Ultradźwiękowa ekstrakcja białek z C. elegans Próbki

Ultradźwiękowa liza i ekstrakcja białka robaków C. elegans może być wykonywana przy użyciu różnych protokołów. Poniżej przedstawiamy Państwu kilka niezawodnych i szybkich protokołów ekstrakcji białek, które zapewniają powtarzalne wyniki ekstrakcji.

Szybkie przygotowanie ekstraktu cytosolowego z C. elegans Worms by Sonication

Za pomocą poniższego protokołu można przygotować lizaty C. elegans w mniej niż 30 minut.
Kolekcja C. elegans
Wybrać pożądane robaki C. elegans do 1,5 ml buforowanego fosforanem roztworu soli fizjologicznej (PBS) lub umyć je z płytki za pomocą 1,5 ml PBS. Odwirowywać przez 1 minutę przy 2000rpml na pelet. Próbki przechowywać przez cały czas na lodzie.
Następnie umyć robaki dwa razy PBS.
Następnie należy dwukrotnie umyć robaki za pomocą ddH2O.
Ponownie zawiesić robaki w co najmniej 500ul buforu homogenizującego (HB). Próbki robaków są teraz gotowe do analizy ultradźwiękowej.
W celu uzyskania wyższej jakości ekstraktu białkowego można zmniejszyć zanieczyszczenie bakteryjne, przemywając robaki przez 5min każdy w PBS i sterylnej, ultra czystej wodzie (ddH2O) lub wykonać unoszenie się sacharozy. Próbki ślimaków należy stale przechowywać na lodzie.

Ultrasonic C. elegans Protokół Liza

  • Upewnij się, że przygotowujesz ultrasonograf z góry tak, aby homogenizator ultradźwiękowy był gotowy do użycia (zamontowana sonda, wstępnie ustawiony program sondy).
  • Ultrasonicator UP200Ht (200 watts, 26kHz) with microtip S26d2 for the preparation of biological samplesJeśli ultrasonograf jest zamontowany na statywie, umieścić wannę z lodem wraz z probówkami z próbkami pod sondą ultradźwiękową i włożyć sondę ultradźwiękową do probówki o pojemności 1,5 ml.

  • W przypadku lizy C. elegans przy użyciu UP200St lub UP200Ht, USG powinno być wykonywane przy użyciu mikrokapsułki (np. 2 mm sonda S26d2; patrz zdjęcie po lewej) przy 40 % amplitudzie przez 1 sek. z 30-sekundowymi przerwami. 5 cykli sonicznych na 1 sekundę z 30-sekundowymi przerwami jest idealnym rozwiązaniem w przypadku lizy C. elegans. Jeśli lizę wykonuje się po raz pierwszy, można sprawdzić postęp lizy w małych podwielokrotnościach próbki po każdym impulsie za pomocą mikroskopu.
  • Liza jest zakończona sukcesem, gdy robaki zostaną zakłócone. Nadmierna sytacja powoduje pęknięcie jąder i staje się widoczna, gdy próbka staje się lepka lub pieniąca. Aby zapobiec degradacji próbki, w razie potrzeby należy użyć więcej impulsów. Nie należy wydłużać czasu każdego cyklu impulsu ultradźwiękowego, aby uzyskać wysokiej jakości ekstrakty białkowe.
  • Klarowny lizat komórek poprzez odwirowanie ultradźwiękowo lizowanych robaków przy 14 000 obr/min przez 10 minut w temperaturze 4ºC.
  • Następnie przenieść supernatant do świeżej probówki i przygotować się do testu immunoprecypitacji lub innych testów.

Uwaga na bufor homogenizacyjny: Przygotować bufor homogenizacyjny do powyższego protokołu analizy ultradźwiękowej w następujący sposób:

  • 15 mM Hepes pH 7,6 – 15 ml 0,5 M
  • 10 mM KCl – 2,5 ml 2 M
  • 1,5 mM MgCl2 – 0.75 ml 1 M
  • 0.1 mM EDTA – 100 ul 0,5 M
  • 0.5 mM EGTA – 2,5 ml 0,1 M
  • 44 mM Sacharoza – 14,7 ml 50 %.
  • Dodaj tuż przed użyciem: 1mM DTT – 1000x z 1M
  • plus inhibitor proteazy

Analiza ultradźwiękowa C. elegans dla ilościowych testów oczyszczania powinowactwa

C. zarodki elegans (ok. 2 mln na każdą replikę) zostały świeżo zebrane w biologicznym trójpowłoku poprzez wybielanie młodych obupłciowców i sonikowanie na lodzie (cykl): 0,5 s, amplituda: 40-45%, 5 uderzeń/sesja, 5 sesji, odstępy pomiędzy sesjami: 30 s; Procesor ultradźwiękowy UP200S z mikrokapsułką S26d2 (Hielscher Ultrasonics GmbH) w buforze do lizy (całkowita objętość: ∼600 μl; 50 mm Tris-HCl, pH 7.4, 100 mm KCl, 1 mm MgCl2, 1 mm EGTA, 1 mm DTTT, 10% gliceryna, mieszanina inhibitorów proteaz, 0.1% Nonidet P-40 Substitute). Po sonikacji, Nonidet P-40 Substitute dodawano do 1%, a lizaty inkubowano z głowicą nad ogonem przez 30 min. w temperaturze 4°C, a następnie odwirowywano w temperaturze 20.000 × g przez 20 min. w temperaturze 4°C. Oczyszczony lizat został następnie odessany bez naruszania górnej warstwy lipidowej i podzielony o połowę na kulki agarozy z anty-GFP lub zablokowane kulki kontrolne (40-50 μl). Po rotacji głowy nad ogonem w temperaturze 4°C przez 60-90 min, kulki przemyto raz buforem do lizy zawierającym 0,1% Nonidet P-40 Substitute, a następnie dwukrotnie przemyto je albo w buforze I (25 mm Tris-HCl, pH 7,4, 300 mm NaCl, 1 mm MgCl2), albo w buforze II (1 mm Tris-HCl, pH 7,4, 150 mm NaCl, 1 mm MgCl2), albo w obu tych przypadkach. W przypadku pull-downów GFP:MBK-2 przeprowadzono dwa oddzielne doświadczenia z zastosowaniem różnych warunków płukania. Białka eluowano metodą wstrząsania orbitalnego w 50 μl 6 m mocznika/2 M tiomocznika w temperaturze pokojowej. Dla doświadczeń pull-down'owych MBK-1::GFP białka były dwukrotnie eluowane przez wytrząsanie w 50 μl 8 m chlorku guanidyny w temperaturze 90°C, a następnie wytrącanie etanolu. Wymyte próbki białek były następnie trawione w roztworze.
(por. Chen i in., 2016)

VialTweeter at the ultrasonic processor UP200ST

VialTweeter urządzenie do przygotowania wielu próbek do jednoczesnej sonikacji 10 probówek.

Ultrasonograficzna homogenizacja i analiza ślimaków

W przypadku procedury lizy C.elegans i ekstrakcji białek, 30 000 nicieni z odpowiedniego etapu zostało zebranych na jedną próbkę i umytych w lodowatej bazie S, zagęszczonej przez odwirowanie przy 1500 obr/min przez 2 minuty, sześć razy umytych lodowatą bazą S w celu usunięcia pozostałości bakterii, a następnie przechowywanych w lodzie do momentu uzyskania gotowości do użycia. W celu ekstrakcji białek, po ostatnim płukaniu podstawy S, dopuszczono do utworzenia zwartego granulatu przez robaki z rodzaju Gravid-adult. Granulki ślimaków zostały następnie ponownie zawieszone w 1 ml lodowatego Buforu Ekstrakcyjnego [20 mM fosforanu potasu, pH 7,4, 2mM EDTA, 1% Triton-X-100, inhibitory proteazy (Sigma P2714)] i natychmiast przetworzone.
∼30,000 grafitowych ślimaków dorosłych (co odpowiada ∼100 mg mokrej masy), zostały poddane sondowaniu na lodzie przy pomocy sondy ultradźwiękowej (np. UP50H z mikrokapsułką MS2) pod 40 % amplitudą przez 10 cykli po 3 sekundach, 30 sekund po zakończeniu, w 1 ml lodowatego buforu do ekstrakcji. (por. Baskharan i in. 2012)

Ultradźwiękowa ekstrakcja lipidów z C. elegans

W lipidomice, gałęzi metabolomiki, scharakteryzowano i przeanalizowano lipidowe uzupełnienie układów biologicznych. C. elegans są szeroko stosowane w lipidomice do badania interakcji lipidów metabolicznych i ich wpływu na zdrowie i długość życia.
Ultradźwiękowa liza i ekstrakcja służy do uwalniania lipidów, takich jak sfingolipidy z zarodków C. elegans, larw i dorosłych robaków. Ultradźwiękowa lizę i ekstrakcję stosuje się do przygotowania homogenatów robaków, a następnie do ekstrakcji lipidów z próbki.
Protokół do Ultradźwiękowej Ekstrakcji Lipidów od C. elegans
Odmrozić peletki C. elegans na lodzie i ponownie zawiesić w 0,5 ml ultrawaterze. Umieścić próbki C. elegans w probówkach o pojemności 1,5 ml, utrzymując je stale na lodzie.
Sygnalizacja może być wykonana przy użyciu sondy-ultrasonografu, np. UP200Htzespół przygotowujący próbkę ultradźwiękową VialTweeter (jednoczesna sonizacja 10 próbek) lub UIP400MTP (do sondowania płyt wielokanałowych, takich jak płyty 96-kanałowe).Do analizy ultrasonograficznej za pomocą UP200Ht należy użyć mikrokapsułki S26d2. Ustawić wstępnie tryb cyklu ultradźwiękowego w menu cyfrowym. Ustawić amplitudę na 10% i tryb cyklu dźwiękowego 2 s impulsów 20 cykli z przerwą 30 s pomiędzy każdym impulsem pulsacji ultradźwiękowej.
Przenieść supernatant do szklanych rurek z nakrętką. Do każdej szklanej probówki dodać 1 ml wody ultrawodnej, a następnie 6 ml mieszaniny chloroformu/metanolu (stosunek = 2:1) do każdej szklanej probówki.
Wiruj każdą szklaną rurkę przez 30 sekund przez 4 razy. Odwirować probówki przy 1,258 x g przez 15 minut (Eppendorf, 5810 R) w celu dalszego wzmocnienia fazy rozdzielania. Przenieść dolną frakcję hydrofobową do czystej szklanej probówki za pomocą szklanej pipety Pasteura. Suszyć dolną frakcję hydrofobową pod wpływem przepływu azotu w wyparce azotu. Suszony granulat należy przechowywać w zamrażarce w temperaturze -80 °C do momentu użycia.

Ultradźwiękowe przygotowanie lizatów ślimakobójczych

Robal lizat: Robaki stadium L4 zostały zebrane i trzykrotnie wypłukane za pomocą bufora M9 (42,26 mM Na2HPO4, 22,04 mM KH2PO485,56 mM NaCl, i 0,87 mM MgSO4) w celu usunięcia wszystkich bakterii. Po usunięciu jak największej ilości buforu M9, robaki zostały ponownie zawieszone w buforze do lizy: 50 mM HEPES, 50 mM KCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 5 mM fosforan β-glicerol, 0,1% (v/v) Tryton X-100, 50 mM fluorek sodu, 1 mM ortowanian sodu, 5 mM pirofosforan sodu, 0,2 mM fluorek fenylorometanosulfonowy i inhibitor proteaz. Robaki zamrażano w ciekłym azocie i trzykrotnie rozmrażano w temperaturze 37°C, a następnie sonikowano na suchym lodzie za pomocą ultradźwiękowego urządzenia VialTweeter w celu jednoczesnego przygotowania 10 probówek z próbkami. Sonikację prowadzono przy 50% amplitudzie w 10 cyklach po 2 sekundy z 30-sekundową przerwą między kolejnymi wybuchami sonikacyjnymi. Następnie próbki odwirowywano z prędkością 12000 obr/min w temperaturze 4°C przez 15 min. Supernatant zebrano i przechowywano w temperaturze -70°C. Następnie próbkę odwirowano z prędkością 12000 obrotów na minutę w temperaturze 4°C przez 15 min. Podwielokrotność użyto do ilościowego oznaczania białka metodą Bradforda.
Oznaczanie glutationu całkowitego, GSH i GSSG: Do oznaczenia ilościowego glutationu wykonano lizaty i oznaczono tego samego dnia. Larwy glutationu karmione glukozą i kontrolne L4 zostały zebrane i trzykrotnie wypłukane buforem M9. Po usunięciu jak największej ilości buforu M9, robaki zawieszano ponownie w lodowatym kwasie metafosforowym (5% w/v), a następnie sonikowano w lodzie za pomocą ultradźwiękowego VialTweeter'a przy 50% amplitudzie w dziesięciu cyklach sonikcyjnych trwających 2 sek. z 30-sekundową przerwą pomiędzy każdym cyklem. Następnie odwirowywano z prędkością 12000 obrotów na minutę przy 4 ̊C przez 15 min.
(por. Alcántar-Fernández et al., 2018)

C. elegans Przygotowanie próbek przed Immunoprecypitacją i Western Blotting

Krótko mówiąc, w przypadku ekstraktów z zarodków, larwy C. elegans L1 były hodowane w dużych, płynnych kulturach S-medium do wieku dorosłego. Zarodki pobierano standardową metodą wybielającą i zawieszano w buforze do lizania (50 mM Tris, pH 7,5, 100 mM KCl, 1 mM EDTA, 1 mM MgCl2, 8,7% glicerolu, 0,05% NP-40, 1 Protease Inhibitor Cocktail oraz 1 Phosphatase Inhibitor Cocktail I i II), szybko zamrażano w ciekłym azocie i łuszczono metodą ultradźwiękową przy użyciu ultrasonografu z mikrokapsułkami, np. UP200Ht z S26d2 dla 10 impulsów powyżej 10 s przy 30% amplitudzie. W przypadku konieczności przygotowania większej liczby próbek, należy przygotować ultradźwięki. VialTweeter lub MultiSample-Ultrasonicator UIP400MTP dla płyt studziennych są zalecane. Po przeprowadzeniu sondy ekstrakty były wstępnie oczyszczane przez wirowanie w temperaturze 30 000g przez 20 min w temperaturze 4°C. Wstępnie oczyszczony ekstrakt (300µg całkowitego białka) inkubowano 40µg oczyszczonego przeciwciała anty-CDC-25.1 powinowactwa (to badanie) usieciowanego do białka A-agarozy, lub jako kontrola, użyto podobnej ilości króliczej immunoglobuliny (Ig)G usieciowanej do białka A-agarozy w całkowitej objętości 200µl buforu do lizy zawierającego 1% NP-40, którego włączenie zmniejszyło niespecyficzne wiązanie białek do matrycy. Próbki obracano przez 1 h w temperaturze 4°C, kulki trzykrotnie płukano buforem do lizy, a następnie eluowano 30µl glicyny/HCl i 200 mM NaCl o pH 2,2. Po immunoprecypitacji, eluaty były rozcieńczane w 30µl buforu do próbek SDS, podgrzewane do temperatury 95°C przez 4 minuty, i zazwyczaj 3% całości na wejściu i 30% eluatów było aplikowane do SDS-PAGE, a następnie do Western blotting z przeciwciałami anty-CDC-25.1 (1:400), anty-LIN-23 (1:750), antyubiquitin (1:1000), anty-GSK3 (1:500), lub anty-β-actin (1:2000). W przypadku gdy ekstrakty nie były poddawane immunoprecypitacji, taką samą ilość całkowitego białka uzyskanego z tych ekstraktów zawiesinowano w buforze próbki SDS, podgrzano do temperatury 95°C, a następnie bezpośrednio nałożono na SDS-PAGE i poddano analizie metodą Western blotting. (por. Segref et al. 2020)

Sonda typu insonifier UP200St lizy

Ultradźwiękowy dezruptor komórkowy UP200St z mikrokapsułką S26d2 do lizy i ekstrakcji białka

Analiza ultradźwiękowa pod dokładną kontrolą temperatury (Prescise Temperature Control)

The VialTweeter is a MultiSample Ultraonicator that allows for reliable sample preparation under precisely controlled temperature conditions.Precyzyjna i niezawodna kontrola temperatury ma kluczowe znaczenie przy postępowaniu z próbkami biologicznymi. Wysokie temperatury inicjują termicznie indukowaną degradację białka w próbkach.
Jak wszystkie mechaniczne techniki przygotowywania próbek, sondowanie wytwarza ciepło. Jednakże, temperatura próbek może być dobrze kontrolowana przy użyciu VialTweeter. Przedstawiamy Państwu różne opcje monitorowania i kontroli temperatury próbek podczas ich przygotowania za pomocą VialTweeter i VialPress do analizy.

  1. Monitorowanie temperatury próbki: Procesor ultradźwiękowy UP200St, który napędza VialTweeter, jest wyposażony w inteligentne oprogramowanie i wtykany czujnik temperatury. Podłączyć czujnik temperatury do UP200St i włożyć końcówkę czujnika temperatury do jednej z probówek z próbką. Za pomocą kolorowego, cyfrowego wyświetlacza dotykowego można ustawić w menu UP200St określony zakres temperatur dla sondy próbki. Po osiągnięciu maksymalnej temperatury ultradźwiękowiec automatycznie zatrzyma się i wstrzyma się, aż temperatura próbki spadnie do niższej wartości ustawionej temperatury ∆. Następnie sonikacja rozpocznie się ponownie automatycznie. Ta inteligentna funkcja zapobiega degradacji powodowanej przez ciepło.
  2. Blok VialTweeter może być wstępnie schłodzony. Włóż blok VialTweeter (tylko sonotroda bez przetwornika!) do lodówki lub zamrażarki, aby wstępnie schłodzić tytanowy blok pomaga opóźnić wzrost temperatury w próbce. Jeśli to możliwe, sama próbka może być również wstępnie schłodzona.
  3. Do chłodzenia podczas sonowania używać suchego lodu. Użyć płytkiej tacy wypełnionej suchym lodem i umieścić głośnik VialTweeter na suchym lodzie, aby ciepło mogło się szybko rozproszyć.

Znajdź optymalny dezruptor komórek ultradźwiękowych do aplikacji Liza

Firma Hielscher Ultrasonics jest wieloletnim doświadczonym producentem wysokowydajnych ultradźwiękowych dezruptorów komórek i homogenizatorów do laboratoriów, systemów stacjonarnych i przemysłowych. Wielkość hodowli komórek bakteryjnych, cel badań lub produkcji oraz objętość komórek do przetworzenia w ciągu godziny lub dnia są kluczowymi czynnikami w znalezieniu właściwego dezruptora ultradźwiękowego dla danego zastosowania.
Hielscher Ultrasonics oferuje różne rozwiązania w zakresie jednoczesnej sondowania wielu próbek (do 10 fiolek), jak również próbek masowych (tj. płyt mikromiareczkowych / płytek 96-dołkowych), klasyczny laboratoryjny ultrasonograf typu sonda o różnych poziomach mocy od 50 do 400 watów do w pełni przemysłowych procesorów ultradźwiękowych o mocy do 16.000 watów na jednostkę do komercyjnego rozbijania komórek i ekstrakcji białka w dużej produkcji. Wszystkie ultradźwięki Hielscher są przystosowane do pracy w trybie 24/7/365 przy pełnym obciążeniu. Solidność i niezawodność to główne cechy naszych urządzeń ultradźwiękowych.
Wszystkie cyfrowe homogenizatory ultradźwiękowe wyposażone są w inteligentne oprogramowanie, kolorowy wyświetlacz dotykowy i automatyczne protokołowanie danych, dzięki czemu urządzenie ultradźwiękowe staje się wygodnym narzędziem pracy w laboratoriach i zakładach produkcyjnych.
Daj nam znać, jaki rodzaj komórek, jaka objętość, z jaką częstotliwością i z jakim celem musisz przetwarzać swoje próbki biologiczne. Polecamy Państwu najbardziej odpowiedni dla Państwa procesowych wymagań dezruptor komórek ultradźwiękowych.

Poniższa tabela przedstawia przybliżoną wydajność przetwarzania naszych systemów ultradźwiękowych, od kompaktowych ręcznych homogenizatorów i MultiSample Ultrasonicators do przemysłowych procesorów ultradźwiękowych do zastosowań komercyjnych:

Wielkość partii natężenie przepływu Polecane urządzenia
Płytki 96-dołkowe / mikrotitrowe b.d. UIP400MTP
10 fiolek o pojemności od 0,5 do 1,5 ml b.d. VialTweeter na UP200St
0.01 do 250mL 5 do 100mL/min UP50H
0.01 do 500mL 10-200mL/min UP100H
10 do 2000mL 20-400mL/min UP200Ht, UP400St
0.1 do 20L 0.2 do 4L/min UIP2000hdT
10-100L 2 do 10L/min UIP4000hdT
b.d. 10-100L/min UIP16000
b.d. większe klaster UIP16000

Skontaktuj się z nami! / Zapytaj nas!

Poproś o więcej informacji

Prosimy o skorzystanie z poniższego formularza w celu uzyskania dodatkowych informacji na temat procesorów ultradźwiękowych, zastosowań i ceny. Chętnie omówimy z Państwem proces i zaproponujemy Państwu system ultradźwiękowy spełniający Państwa wymagania!









Proszę zwrócić uwagę na nasze Polityka prywatności.


Ultrasonic high-shear homogenizers are used in lab, bench-top, pilot and industrial processing.

Hielscher Ultrasonics produkuje wysokowydajne homogenizatory ultradźwiękowe do zastosowań mieszania, dyspergowania, emulgowania i ekstrakcji na skalę laboratoryjną, pilotażową i przemysłową.

Literatura / materiały źródłowe



Fakty Warto wiedzieć

Caenorhabditis elegans

C. elegans to wolno żyjący przezroczysty nicień (glista) o długości około 1 mm, który żywi się bakteriami (np. coli) i ma stosunkowo krótki cykl życia. W temperaturze 20 °C średni czas życia laboratoryjnego szczepu C. elegans (N2) wynosi około 2-3 tygodni, a czas pokoleniowy od 3 do 4 dni. Kiedy C. elegans uprawiana jest w dużych ilościach, co można łatwo wykonać w precyzyjnie kontrolowanych warunkach laboratoryjnych, można ją łatwo przebadać pod kątem zasady działania nowych leków, jak również ich działania i interakcji w złożonych procesach molekularnych w chorobach człowieka. Krótki genom, krótki cykl życia i prosta obsługa w warunkach laboratoryjnych sprawiają, że C. elegans jest idealnym modelem organizmu do badań takich jak genomika, proteomika, biologia rozwojowa, badania nad chorobami, rozwój leków itp.
Robaki Caenorhabditis elegans mogą być albo męskie, albo obupłciowe. Hermafrodyty mają zarówno męskie jak i żeńskie organy rozrodcze. Jednakże, żeńskie robaki nie istnieją. Hermaphrodites mogą się samozapładniać lub rozmnażać z samcami robaków. C. elegans może produkować ponad 1000 jaj dziennie.
Ponieważ C. elegans jest jednym z najprostszych organizmów z układem nerwowym, robak nicieni jest od 1963 roku wykorzystywany jako modelowy organizm do badań. Neurony nie wystrzeliwują potencjałów działania i nie wyrażają żadnych napięciowych kanałów sodowych. W hermafrodycie układ ten składa się z 302 neuronów, których wzór został kompleksowo odwzorowany, w tzw. connectome.
Wiele genów w genomie C. elegans ma funkcjonalne odpowiedniki u ludzi, co sprawia, że jest on niezwykle użytecznym modelem w chorobach człowieka i jest wykorzystywany na przykład do badania biologii rozwojowej, starzenia się i czynników wpływających na długość życia. Ponadto mutanty C. elegans stanowią wzór dla wielu chorób ludzkich, w tym zaburzeń neurologicznych (np. choroby Alzheimera), wrodzonych chorób serca i nerek.
Te czynniki sprawiły, że C. elegans stał się bardzo cennym modelem dla wielu dziedzin badawczych. W konsekwencji, C. elegans był pierwszym wielokomórkowym organizmem, który miał sekwencjonowany cały swój genom. Genom ten zawiera około 20.470 genów kodujących białka. Około 35% genów C. elegans posiada ludzkie homologi. Co ciekawe, wielokrotnie wykazano, że geny ludzkie zastępują homologi C. elegans po wprowadzeniu ich do C. elegans. Z drugiej strony, wiele genów C. elegans może funkcjonować podobnie do genów ssaków.

Żywotność C. elegans wynosi ok. 3 tygodnie i składa się z sześciu stadiów rozwojowych: embriogenezy (stadium jaja), czterech stadiów larwalnych (L1 do L4) i stadium dorosłego. Nicienie wykluwają się z jaj jako larwy L1 składające się z 560 komórek. Wzrost w każdym stadium larwalnym następuje w wyniku podziału komórek i przerostu komórkowego. Roztopienie się komórek w komórkach przerywa każde stadium larwalne. Jeśli trudne warunki środowiskowe sygnalizują rozwijającemu się robakowi, że jest mało prawdopodobne, aby warunki te wspierały płodność dorosłych, C. elegans może zmienić jego rozwój i stworzyć alternatywne stadium larwalne L3, w którym larwy przechodzą w stadium dauera. W tym stanie zwierzęta są wyjątkowo odporne na stres i żyją długo i mogą przetrwać od trzech do dziewięciu miesięcy. Larwy dauera izolują się od przeciwności losu, uszczelniając zarówno jamy policzkowe, jak i odbytu, obkurczając jelito i uruchamiając program genetyczny zależny od daf-16/FOXO, który m.in. prowadzi do ekspresji specyficznej dla dauera skórki. (por. Henderson i in., 2006)

C. elegans Dauer Larvae

Larwy Dauer to termin oznaczający larwy nicieni, które weszły w alternatywne stadium rozwojowe. Termin "larwy Dauer" jest szczególnie używany w odniesieniu do robaków z rodziny rhabditids, w tym Caenorhabditis elegans. Słowo "Dauer" jest pochodzenia niemieckiego i oznacza "czas trwania".” w rozumieniu “okres czasu". Larwy Dauer'a przechodzą pewien rodzaj zastoju i mogą przetrwać w trudnych warunkach. Jeśli i kiedy larwa wejdzie w stadium dauera, jest to zależne od warunków środowiskowych. Larwy Dauer są szeroko badane w biologii, ponieważ larwy wykazują niezwykłą zdolność do przetrwania w trudnych warunkach i życia przez dłuższy okres czasu. Na przykład, larwy C. elegans dauer mogą przetrwać do czterech miesięcy, znacznie dłużej niż ich średnia długość życia wynosząca około trzech tygodni podczas normalnego rozwoju reprodukcyjnego.