Jak korzystać z ultradźwiękowych homogenizatorów tkanek firmy Hielscher?
Przed oczyszczeniem lub scharakteryzowaniem makrocząsteczek wewnątrzkomórkowych, takich jak białka, organelle, enzymy lub związki czynne, konieczne jest zastosowanie skutecznej metody lizy tkanek i dezintegracji komórek. Ultradźwięki są wysoce skuteczną techniką przygotowania komórek, szybko uwalniającą materiały wewnątrzkomórkowe do roztworu buforowego. Mechaniczne siły ścinające generowane podczas ultradźwiękowej homogenizacji tkanek mogą być precyzyjnie dostosowane do określonych materiałów. Pozwala to na delikatne przygotowanie tkanek miękkich lub ścinanie DNA/RNA przy łagodniejszej sonikacji, a także intensywną kawitację ultradźwiękową w celu destrukcyjnego rozbicia komórek (np. w przypadku nannochloropsis, drożdży).
Poniżej znajduje się wybór tkanek, komórek i innej materii biologicznej z zalecanymi protokołami sonikacji i wytycznymi dotyczącymi skutecznego przygotowywania próbek za pomocą ultradźwiękowego homogenizatora tkanek lub kruszarki komórek.
Ultra-sonicator laboratoryjny UP200Ht (200W, 26kHz) do zadań związanych z przygotowaniem próbek
Jak przygotować lizaty, homogenaty i ekstrakty z materiałów biologicznych?
W kolejności alfabetycznej:
Acetobacter suboxydans
Actinomyces
Aplikacja ultradźwiękowa:
Rozbicie i ekstrakcja białka w ciągu 3-5 minut.
Zalecane urządzenie:
UP50H
Rozbicie i ekstrakcja białka w ciągu 3-5 minut.
Zalecane urządzenie:
UP50H
Aktywność ALP i LDH
Aplikacja ultradźwiękowa:
Oznaczanie aktywności ALP i LDH oraz zawartości białka
Zamrożone próbki komórek rozmrażano przez 20 minut na lodzie, a następnie poddawano lizie za pomocą PBS zawierającego 1% Triton X-100 przez 50 minut na lodzie. Podczas lizy komórek każda próbka była poddawana sonikacji przez 1 minutę przy 80 W za pomocą procesora ultradźwiękowego UP100H (Hielscher Ultrasonics).
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Bernhardt, A. et al. (2008): Zmineralizowany kolagen - sztuczna, zewnątrzkomórkowa macierz kostna - poprawia osteogenne różnicowanie komórek zrębu szpiku kostnego.
Oznaczanie aktywności ALP i LDH oraz zawartości białka
Zamrożone próbki komórek rozmrażano przez 20 minut na lodzie, a następnie poddawano lizie za pomocą PBS zawierającego 1% Triton X-100 przez 50 minut na lodzie. Podczas lizy komórek każda próbka była poddawana sonikacji przez 1 minutę przy 80 W za pomocą procesora ultradźwiękowego UP100H (Hielscher Ultrasonics).
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Bernhardt, A. et al. (2008): Zmineralizowany kolagen - sztuczna, zewnątrzkomórkowa macierz kostna - poprawia osteogenne różnicowanie komórek zrębu szpiku kostnego.
Amorficzny fosforan trójwapniowy (ATCP)
Aplikacja ultradźwiękowa:
Nanocząstki ATCP, które są wyjątkowo reaktywnym prekursorem do tworzenia hydroksyapatytu, zdyspergowano w chloroformie zawierającym 5% (w/w) Tween20 w odniesieniu do PLGA przy użyciu urządzenia ultradźwiękowego Hielscher UP400S o mocy 320 W przez 5 minut, stosując przerwy pulsacyjne (50%), aby umożliwić relaksację cząstek.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Dokument referencyjny/badawczy:
Mohn, Dirk; Ege, Duygu; Feldman, Kirifl; Schneider, Oliver D.; Imfeld, Thomas; Boccaccini, Aldo R. (2014): Sferyczne wypełniacze nanocząsteczkowe z fosforanu wapnia umożliwiają przetwarzanie polimerów w urządzeniach do stabilizacji kości o wysokiej bioaktywności. The Free Library 01 maja 2010. 21 stycznia 2014 r.
Nanocząstki ATCP, które są wyjątkowo reaktywnym prekursorem do tworzenia hydroksyapatytu, zdyspergowano w chloroformie zawierającym 5% (w/w) Tween20 w odniesieniu do PLGA przy użyciu urządzenia ultradźwiękowego Hielscher UP400S o mocy 320 W przez 5 minut, stosując przerwy pulsacyjne (50%), aby umożliwić relaksację cząstek.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Dokument referencyjny/badawczy:
Mohn, Dirk; Ege, Duygu; Feldman, Kirifl; Schneider, Oliver D.; Imfeld, Thomas; Boccaccini, Aldo R. (2014): Sferyczne wypełniacze nanocząsteczkowe z fosforanu wapnia umożliwiają przetwarzanie polimerów w urządzeniach do stabilizacji kości o wysokiej bioaktywności. The Free Library 01 maja 2010. 21 stycznia 2014 r.
antocyjany
Aplikacja ultradźwiękowa:
Antocyjany: di-glukozydy, mono-glukozydy, acylowane monoglukozydy i acylowane di-glukozydy peonidyny, malwidyny, cyjanidyny, petunidyny i delfinidyny: Ekstrakcja ze skórki winogron w 40 sekund; pH 5,0; stosunek materiału do rozpuszczalnika ekstrakcyjnego 1:6.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Antocyjany: di-glukozydy, mono-glukozydy, acylowane monoglukozydy i acylowane di-glukozydy peonidyny, malwidyny, cyjanidyny, petunidyny i delfinidyny: Ekstrakcja ze skórki winogron w 40 sekund; pH 5,0; stosunek materiału do rozpuszczalnika ekstrakcyjnego 1:6.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Antrachinony
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja antrachinonów z korzeni Morinda citrifolia
Zalecane urządzenie:
UP400S
Ekstrakcja antrachinonów z korzeni Morinda citrifolia
Zalecane urządzenie:
UP400S
Pestki moreli
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa obróbka wstępna przed ekstrakcją oleju z nasion Jatropha curcas L. w celu poprawy ekstrakcji.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Ultradźwiękowa obróbka wstępna przed ekstrakcją oleju z nasion Jatropha curcas L. w celu poprawy ekstrakcji.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Artemisia selengensis Turcz
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja rutyny (1,0 g zmielonej próbki w 30 ml metanolu) w temperaturze 25°C w ciągu 5-10 minut.
Zalecane urządzenie:
UP50H
Ekstrakcja rutyny (1,0 g zmielonej próbki w 30 ml metanolu) w temperaturze 25°C w ciągu 5-10 minut.
Zalecane urządzenie:
UP50H
Aspergillus flavus
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa inaktywacja Aspergillus flavus w pożywce Sabourauda
Zalecane urządzenie:
UP200S
Ultradźwiękowa inaktywacja Aspergillus flavus w pożywce Sabourauda
Zalecane urządzenie:
UP200S
B. sphaericus / Bacillus sphaericus
Zarodniki Bacillus anthracis sterne 34F2
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowe usuwanie zarodników Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 i Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Zastosowanie 150 ppm podchlorynu sodu wraz z ultradźwiękami doprowadziło do inaktywacji zarodników.
Zalecane urządzenie:
UP200S przy 100% amplitudzie
Dokument referencyjny/badawczy:
Pamarthi, S.R. et al.: Skuteczność ultradźwięków w odolejaniu zarodników Bacillus spp osadzonych w złożonych matrycach żywnościowych przymocowanych do różnych powierzchni kontaktowych.
Ultradźwiękowe usuwanie zarodników Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 i Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Zastosowanie 150 ppm podchlorynu sodu wraz z ultradźwiękami doprowadziło do inaktywacji zarodników.
Zalecane urządzenie:
UP200S przy 100% amplitudzie
Dokument referencyjny/badawczy:
Pamarthi, S.R. et al.: Skuteczność ultradźwięków w odolejaniu zarodników Bacillus spp osadzonych w złożonych matrycach żywnościowych przymocowanych do różnych powierzchni kontaktowych.
Zarodniki Bacillus cereus ATCC 21281
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowe usuwanie zarodników Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 i Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Zastosowanie 150 ppm podchlorynu sodu wraz z ultradźwiękami doprowadziło do inaktywacji zarodników.
Zalecane urządzenie:
UP200S przy 100% amplitudzie
Dokument referencyjny/badawczy:
Pamarthi, S.R. et al.: Skuteczność ultradźwięków w odolejaniu zarodników Bacillus spp osadzonych w złożonych matrycach żywnościowych przymocowanych do różnych powierzchni kontaktowych.
Ultradźwiękowe usuwanie zarodników Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 i Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Zastosowanie 150 ppm podchlorynu sodu wraz z ultradźwiękami doprowadziło do inaktywacji zarodników.
Zalecane urządzenie:
UP200S przy 100% amplitudzie
Dokument referencyjny/badawczy:
Pamarthi, S.R. et al.: Skuteczność ultradźwięków w odolejaniu zarodników Bacillus spp osadzonych w złożonych matrycach żywnościowych przymocowanych do różnych powierzchni kontaktowych.
Bacillus subtilis
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwięki o wysokiej mocy i niskiej częstotliwości w małych objętościach zawiesiny bakteryjnej powodują ciągłe zmniejszanie liczby komórek bakteryjnych, tj. dominuje szybkość zabijania. W większych objętościach sonikacja powoduje początkowy wzrost liczby komórek sugerujący odkładanie się bakterii, ale ten początkowy wzrost następnie spada, gdy odkładanie się kończy, a współczynnik zabijania staje się ważniejszy.
Zalecane urządzenie:
UP200St
Dokument referencyjny/badawczy:
Joyce, E.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P.; Mason, T. J. (2003): Rozwój i ocena ultradźwięków do leczenia zawiesin bakteryjnych. Badanie częstotliwości, mocy i czasu sonikacji na hodowanych gatunkach Bacillus. Ultrason. Sonochem. 10/2003. pp. 315-318.
Ultradźwięki o wysokiej mocy i niskiej częstotliwości w małych objętościach zawiesiny bakteryjnej powodują ciągłe zmniejszanie liczby komórek bakteryjnych, tj. dominuje szybkość zabijania. W większych objętościach sonikacja powoduje początkowy wzrost liczby komórek sugerujący odkładanie się bakterii, ale ten początkowy wzrost następnie spada, gdy odkładanie się kończy, a współczynnik zabijania staje się ważniejszy.
Zalecane urządzenie:
UP200St
Dokument referencyjny/badawczy:
Joyce, E.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P.; Mason, T. J. (2003): Rozwój i ocena ultradźwięków do leczenia zawiesin bakteryjnych. Badanie częstotliwości, mocy i czasu sonikacji na hodowanych gatunkach Bacillus. Ultrason. Sonochem. 10/2003. pp. 315-318.
Barley's Alpha-amylase
Aplikacja ultradźwiękowa:
Stymulowanie lub hamowanie aktywności alfa-amylazy jęczmienia: Próbkę (10 g nasion jęczmienia) rozproszono w 80 ml wody wodociągowej przy bezpośredniej sonikacji przy intensywności ultradźwięków 20, 60 i 100% amplitudy, cyklu 50% i przy dodatkowym mieszaniu. Sonotroda była zanurzona około 9 mm w roztworze. Roztwór przetwarzano w stałej temperaturze 30 ° C przez 5, 10 i 15 minut.
Zalecane urządzenie:
UP200Samplitudy: 20, 60 i 100%; cykl 50%; Sonotroda S3, 30C°.
Dokument referencyjny/badawczy:
Yaldagard et al. (2008): Wpływ mocy ultradźwiękowej na aktywność alfa-amylazy jęczmienia z obróbki nasion po siewie
Stymulowanie lub hamowanie aktywności alfa-amylazy jęczmienia: Próbkę (10 g nasion jęczmienia) rozproszono w 80 ml wody wodociągowej przy bezpośredniej sonikacji przy intensywności ultradźwięków 20, 60 i 100% amplitudy, cyklu 50% i przy dodatkowym mieszaniu. Sonotroda była zanurzona około 9 mm w roztworze. Roztwór przetwarzano w stałej temperaturze 30 ° C przez 5, 10 i 15 minut.
Zalecane urządzenie:
UP200Samplitudy: 20, 60 i 100%; cykl 50%; Sonotroda S3, 30C°.
Dokument referencyjny/badawczy:
Yaldagard et al. (2008): Wpływ mocy ultradźwiękowej na aktywność alfa-amylazy jęczmienia z obróbki nasion po siewie
Pąkle nauplii
Aplikacja ultradźwiękowa:
Rozbicie komórek / zabijanie mezozooplanktonu: przez sonikację w następujących warunkach czterech prędkości przepływu (200, 400, 520 i 800 lh-1) i czterech amplitud (25, 50, 75 i 100%) osiągnięto wskaźnik zabijania między 61 a 97%.
Zalecane urządzenie:
UIP2000hd
Dokument referencyjny/badawczy:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, światło ultrafioletowe, ultradźwięki i nadtlenek wodoru jako metody oczyszczania wód balastowych – Eksperymenty z mezozooplanktonem w wodzie słonawej o niskim zasoleniu.
Rozbicie komórek / zabijanie mezozooplanktonu: przez sonikację w następujących warunkach czterech prędkości przepływu (200, 400, 520 i 800 lh-1) i czterech amplitud (25, 50, 75 i 100%) osiągnięto wskaźnik zabijania między 61 a 97%.
Zalecane urządzenie:
UIP2000hd
Dokument referencyjny/badawczy:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, światło ultrafioletowe, ultradźwięki i nadtlenek wodoru jako metody oczyszczania wód balastowych – Eksperymenty z mezozooplanktonem w wodzie słonawej o niskim zasoleniu.
Szczepy Bifidobacteria: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. Lactis (BB-12), B. longum (BB-46)
Aplikacja ultradźwiękowa:
Niszczenie komórek bakterii i uwalnianie ß-galaktozydazy ze szczepów Bifidobacteria: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. Lactis (BB-12), B. longum (BB-46): 100 mL pasteryzowanego mleka zmieszanego z kulturą bakterii poddano działaniu ultradźwięków. Kawitacja powoduje zniszczenie komórek bakteryjnych i jednocześnie uwalnianie ß-galaktozydazy.
Zalecane urządzenie:
UIP1000hdamplituda: 10%, moc: 80 W, amplituda: 100%, moc: 200 W; Sonotroda BS2d34; 15-30 min.
Dokument referencyjny/badawczy:
Hung et al. (2009): Wspomagana ultradźwiękami fermentacja jogurtu z probiotykami.
Niszczenie komórek bakterii i uwalnianie ß-galaktozydazy ze szczepów Bifidobacteria: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. Lactis (BB-12), B. longum (BB-46): 100 mL pasteryzowanego mleka zmieszanego z kulturą bakterii poddano działaniu ultradźwięków. Kawitacja powoduje zniszczenie komórek bakteryjnych i jednocześnie uwalnianie ß-galaktozydazy.
Zalecane urządzenie:
UIP1000hdamplituda: 10%, moc: 80 W, amplituda: 100%, moc: 200 W; Sonotroda BS2d34; 15-30 min.
Dokument referencyjny/badawczy:
Hung et al. (2009): Wspomagana ultradźwiękami fermentacja jogurtu z probiotykami.
Komórki BL21(DE3) pAtHNL (komórki Arabidopsis thaliana)
Aplikacja ultradźwiękowa:
Rozpad komórek: 15 g komórek BL21-(DE3)_pAtHNL zawieszono powoli w 50 mM buforze fosforanu potasu (pH 7,5) w temperaturze 0 stopni Celsjusza.
Zalecane urządzenie:
UP200S + sonotroda S14D: przy 70 W/cm2 (4 x 5 min), chłodzona w łaźni lodowej
Dokument referencyjny/badawczy:
Okrob, D. et al (2009): Hydroxynitrile Lyase from Arabidopsis thaliana: Identification of Reaction Parameters for Enantiopure Cyanohydrin Synthesis by Pure and Immobilized Catalyst. Adv. Synth. Catal. 2011, 353, 2399 - 2408.
Rozpad komórek: 15 g komórek BL21-(DE3)_pAtHNL zawieszono powoli w 50 mM buforze fosforanu potasu (pH 7,5) w temperaturze 0 stopni Celsjusza.
Zalecane urządzenie:
UP200S + sonotroda S14D: przy 70 W/cm2 (4 x 5 min), chłodzona w łaźni lodowej
Dokument referencyjny/badawczy:
Okrob, D. et al (2009): Hydroxynitrile Lyase from Arabidopsis thaliana: Identification of Reaction Parameters for Enantiopure Cyanohydrin Synthesis by Pure and Immobilized Catalyst. Adv. Synth. Catal. 2011, 353, 2399 - 2408.
Krwinki (czerwone i białe)
Boldine z liści Boldo (Peumus boldus Molina)
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ważnym związkiem aktywnym w boldo jest boldina ((S)-2,9-dihydroksy-1,10-dimetoksiaporfina), która jest obok katechiny ((2S,3R)-2-(3,4-dihydroksyfenylo)-3,4-dihydro-1(2H)-benzopiran-3,5,7-triol) głównym składnikiem frakcji alkaloidów i flawonoidów w liściach boldo. Boldina jest silnym środkiem przeciwutleniającym, który ulega peroksydacyjnym uszkodzeniom wywołanym przez wolne rodniki i działa jako skuteczny zmiatacz rodników hydroksylowych.
Procedura ekstrakcji: W typowej procedurze ekstrakcji próbki liści boldo ekstrahowano 1 litrem wody destylowanej pod ciśnieniem atmosferycznym za pomocą ultradźwiękowca UIP1000hd w trybie wsadowym i przepływowym. Czas ekstrakcji wynosi od 10 do 40 minut, przy intensywności ultradźwięków od 10 do 23 W/cm.2i zakresie temperatur od 10 do 70°C. Najlepsze wyniki osiągnięto w następujących warunkach: natężenie ultradźwięków 23 W/cm2 przez 40 minut w temperaturze 36°C
Wyniki: Wyniki analizy pokazują, że sonikacja o dużej mocy zwiększa uwalnianie analitu z roślinnego materiału matrycy Boldo w znacznie lepszym tempie w porównaniu z metodą konwencjonalną: równa wydajność została uwolniona przez sonikację w ciągu 30 minut, podczas gdy konwencjonalny czas ekstrakcji wynosił 2 godziny.
Chemat (2013) i współpracownicy wykazali, że ekstrakcja wspomagana ultradźwiękami poprawia wydajność ekstrakcji roślin przy jednoczesnym skróceniu czasu ekstrakcji przy zwiększonym stężeniu ekstraktów (taka sama ilość rozpuszczalnika i materiału roślinnego). Analiza wykazała, że zoptymalizowane warunki to: moc sonikacji 23 W/cm2 z UIP1000hd przez 40 min. i temperaturze 36°C. Zoptymalizowane parametry ekstrakcji ultradźwiękowej zapewniają lepszą ekstrakcję w porównaniu do konwencjonalnej maceracji pod względem czasu procesu (30 min. zamiast 120 min.), wyższej wydajności, wyższej efektywności energetycznej, lepszej czystości, wyższego bezpieczeństwa i lepszej jakości produktu.
Zalecane urządzenie:
UIP1000hd z sonotrodą BS2d34 i komorą przepływową
Dokument referencyjny/badawczy:
Petigny, L.; Périno-Issartier, S.; Wajsman, J.; Chemat, F. (2013): Wsadowa i ciągła ekstrakcja wspomagana ultradźwiękami liści Boldo (Peumus boldus Mol.). International Journal of Molecular Science 14, 2013. 5750-5764.
Ważnym związkiem aktywnym w boldo jest boldina ((S)-2,9-dihydroksy-1,10-dimetoksiaporfina), która jest obok katechiny ((2S,3R)-2-(3,4-dihydroksyfenylo)-3,4-dihydro-1(2H)-benzopiran-3,5,7-triol) głównym składnikiem frakcji alkaloidów i flawonoidów w liściach boldo. Boldina jest silnym środkiem przeciwutleniającym, który ulega peroksydacyjnym uszkodzeniom wywołanym przez wolne rodniki i działa jako skuteczny zmiatacz rodników hydroksylowych.
Procedura ekstrakcji: W typowej procedurze ekstrakcji próbki liści boldo ekstrahowano 1 litrem wody destylowanej pod ciśnieniem atmosferycznym za pomocą ultradźwiękowca UIP1000hd w trybie wsadowym i przepływowym. Czas ekstrakcji wynosi od 10 do 40 minut, przy intensywności ultradźwięków od 10 do 23 W/cm.2i zakresie temperatur od 10 do 70°C. Najlepsze wyniki osiągnięto w następujących warunkach: natężenie ultradźwięków 23 W/cm2 przez 40 minut w temperaturze 36°C
Wyniki: Wyniki analizy pokazują, że sonikacja o dużej mocy zwiększa uwalnianie analitu z roślinnego materiału matrycy Boldo w znacznie lepszym tempie w porównaniu z metodą konwencjonalną: równa wydajność została uwolniona przez sonikację w ciągu 30 minut, podczas gdy konwencjonalny czas ekstrakcji wynosił 2 godziny.
Chemat (2013) i współpracownicy wykazali, że ekstrakcja wspomagana ultradźwiękami poprawia wydajność ekstrakcji roślin przy jednoczesnym skróceniu czasu ekstrakcji przy zwiększonym stężeniu ekstraktów (taka sama ilość rozpuszczalnika i materiału roślinnego). Analiza wykazała, że zoptymalizowane warunki to: moc sonikacji 23 W/cm2 z UIP1000hd przez 40 min. i temperaturze 36°C. Zoptymalizowane parametry ekstrakcji ultradźwiękowej zapewniają lepszą ekstrakcję w porównaniu do konwencjonalnej maceracji pod względem czasu procesu (30 min. zamiast 120 min.), wyższej wydajności, wyższej efektywności energetycznej, lepszej czystości, wyższego bezpieczeństwa i lepszej jakości produktu.
Zalecane urządzenie:
UIP1000hd z sonotrodą BS2d34 i komorą przepływową
Dokument referencyjny/badawczy:
Petigny, L.; Périno-Issartier, S.; Wajsman, J.; Chemat, F. (2013): Wsadowa i ciągła ekstrakcja wspomagana ultradźwiękami liści Boldo (Peumus boldus Mol.). International Journal of Molecular Science 14, 2013. 5750-5764.
Albumina surowicy bydlęcej (BSA)
Aplikacja ultradźwiękowa:
Mikrokapsułkowanie w poli(kwasie mlekowym-co-glikolowym) w 40 sek.
Zalecane urządzenie:
GDmini
Dokument referencyjny/badawczy:
Freitas et al. (2005): Przepływowa emulsyfikacja ultradźwiękowa w połączeniu ze statycznym mikromieszaniem do aseptycznej produkcji mikrosfer metodą ekstrakcji rozpuszczalnikowej.
Mikrokapsułkowanie w poli(kwasie mlekowym-co-glikolowym) w 40 sek.
Zalecane urządzenie:
GDmini
Dokument referencyjny/badawczy:
Freitas et al. (2005): Przepływowa emulsyfikacja ultradźwiękowa w połączeniu ze statycznym mikromieszaniem do aseptycznej produkcji mikrosfer metodą ekstrakcji rozpuszczalnikowej.
Pień mózgu + nadnercza
Aplikacja ultradźwiękowa:
Dyspersja i analiza nukleotydów; wielkość próbki: 10 mg próbki w 10 ml płynu.
Zalecane urządzenie:
UP50H
Dyspersja i analiza nukleotydów; wielkość próbki: 10 mg próbki w 10 ml płynu.
Zalecane urządzenie:
UP50H
Candida albicans
Węglowodany, polisacharydy i inne związki funkcjonalne
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja węglowodanów, polisacharydów i innych związków funkcjonalnych
Zalecane urządzenie:
UP200St
Ekstrakcja węglowodanów, polisacharydów i innych związków funkcjonalnych
Zalecane urządzenie:
UP200St
Kwas karnozowy z rozmarynu
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja kwasu karnozowego, aktywnego związku, z rozmarynu.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Ekstrakcja kwasu karnozowego, aktywnego związku, z rozmarynu.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Kapsaicynoidy
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja kapsaicynoidów (kapsaicyny, nordihydrokapsaicyny) z papryczek chili: Kapsaicynoidy z Capsicum frutescens paprykę otrzymano za pomocą ekstrakcji ultradźwiękowej w następujących warunkach: rozpuszczalnik: 95% (v/v) etanol, stosunek rozpuszczalnik/masowy 10 ml/g, 40 min. czas ekstrakcji sonikacyjnej, temperatura ekstrakcji 45°C. Wydajność ekstrahenta: 85% kapsaicynoidów
Zalecane urządzenie:
UP400S
Ekstrakcja kapsaicynoidów (kapsaicyny, nordihydrokapsaicyny) z papryczek chili: Kapsaicynoidy z Capsicum frutescens paprykę otrzymano za pomocą ekstrakcji ultradźwiękowej w następujących warunkach: rozpuszczalnik: 95% (v/v) etanol, stosunek rozpuszczalnik/masowy 10 ml/g, 40 min. czas ekstrakcji sonikacyjnej, temperatura ekstrakcji 45°C. Wydajność ekstrahenta: 85% kapsaicynoidów
Zalecane urządzenie:
UP400S
Karotenoidy, beta-karotenoidy
cDNA
Aplikacja ultradźwiękowa:
Poli-A RNA oczyszczono za pomocą zestawu do oczyszczania mRNA Dynabeads (Invitrogen) zgodnie z instrukcjami producenta i traktowano przez 30 minut w temperaturze 37°C DNazą TURBO (Ambion; 0,2 jednostki/1 μg RNA). Synteza pierwszej i drugiej nici przebiegała zgodnie z protokołem producenta. Około 500ng dwuniciowego cDNA pofragmentowano przez sonikację za pomocą Hielscher's UTR200. DNA parcelowano w 2% żelu agarozowym o wysokiej rozdzielczości i wycinano fragmenty o wielkości 230-270 bp.
Zalecane urządzenie:
UTR200 lub TD_CupHorn
Dokument referencyjny/badawczy:
Delft, J. van; Gaj, St.; Lienhard,M.; Albrecht, M. W.; Kirpiy, A.; Brauers, K.; Claessen, S.; Lizarraga, D.; Lehrach, H.; Herwig, R.; Kleinjans, J. (2012): RNA-Seq dostarcza nowych informacji na temat odpowiedzi transkryptomu indukowanej przez rakotwórczy benzo[a]piren. Toxicological Sciences 130/2, 2012. 427-439.
Poli-A RNA oczyszczono za pomocą zestawu do oczyszczania mRNA Dynabeads (Invitrogen) zgodnie z instrukcjami producenta i traktowano przez 30 minut w temperaturze 37°C DNazą TURBO (Ambion; 0,2 jednostki/1 μg RNA). Synteza pierwszej i drugiej nici przebiegała zgodnie z protokołem producenta. Około 500ng dwuniciowego cDNA pofragmentowano przez sonikację za pomocą Hielscher's UTR200. DNA parcelowano w 2% żelu agarozowym o wysokiej rozdzielczości i wycinano fragmenty o wielkości 230-270 bp.
Zalecane urządzenie:
UTR200 lub TD_CupHorn
Dokument referencyjny/badawczy:
Delft, J. van; Gaj, St.; Lienhard,M.; Albrecht, M. W.; Kirpiy, A.; Brauers, K.; Claessen, S.; Lizarraga, D.; Lehrach, H.; Herwig, R.; Kleinjans, J. (2012): RNA-Seq dostarcza nowych informacji na temat odpowiedzi transkryptomu indukowanej przez rakotwórczy benzo[a]piren. Toxicological Sciences 130/2, 2012. 427-439.
Caryophanon latum
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja glukozaminy, kwasu muraminowego, alaniny, kwasu glutaminowego i lizyny z caryophanon datum.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Ekstrakcja glukozaminy, kwasu muraminowego, alaniny, kwasu glutaminowego i lizyny z caryophanon datum.
Zalecane urządzenie:
UP100H
celuloza
Aplikacja ultradźwiękowa:
Homogenizacja / przygotowanie izotopowo jednorodnej celulozy.
Zalecane urządzenie:
UP200Sw kąpieli lodowej
Dokument referencyjny/badawczy:
Laumer et al. (2009): Nowatorskie podejście do homogenizacji celulozy w celu wykorzystania mikroilości do analiz stabilnych izotopów.
Homogenizacja / przygotowanie izotopowo jednorodnej celulozy.
Zalecane urządzenie:
UP200Sw kąpieli lodowej
Dokument referencyjny/badawczy:
Laumer et al. (2009): Nowatorskie podejście do homogenizacji celulozy w celu wykorzystania mikroilości do analiz stabilnych izotopów.
Nanokryształy celulozy (CNC) przygotowane z celulozy eukaliptusowej CNC
Aplikacja ultradźwiękowa:
Nanokryształy celulozy (CNC) przygotowane z celulozy eukaliptusowej CNC zostały zmodyfikowane przez reakcję z chlorkiem metyloadipoylu, CNCm, lub z mieszaniną kwasu octowego i siarkowego, CNCa. W związku z tym liofilizowane CNC, CNCm i CNCa zdyspergowano w czystych rozpuszczalnikach (EA, THF lub DMF) w ilości 0,1% wagowych, mieszając magnetycznie przez noc w temperaturze (24 ± 1) C, a następnie przez 20 minut w kąpieli sonikacyjnej przy użyciu UP100H Hielscher Ultrasonics (Niemcy), wyposażonej w sonotrodę o mocy 130 W/cm2, w temperaturze 24 ± 1 ° C. Następnie do dyspersji CNC dodano CAB, tak aby końcowe stężenie polimeru wynosiło 0,9% wagowych.
Zalecane urządzenie:
UP100H; w temperaturze 24°C przez 20 min.
Dokument referencyjny/badawczy:
Blachechen, L. S. et al (2013): Interplay of colloidal stability of cellulose nanocrystals and their dispersibility in cellulose acetate butyrate matrix. Cellulose 2013.
Nanokryształy celulozy (CNC) przygotowane z celulozy eukaliptusowej CNC zostały zmodyfikowane przez reakcję z chlorkiem metyloadipoylu, CNCm, lub z mieszaniną kwasu octowego i siarkowego, CNCa. W związku z tym liofilizowane CNC, CNCm i CNCa zdyspergowano w czystych rozpuszczalnikach (EA, THF lub DMF) w ilości 0,1% wagowych, mieszając magnetycznie przez noc w temperaturze (24 ± 1) C, a następnie przez 20 minut w kąpieli sonikacyjnej przy użyciu UP100H Hielscher Ultrasonics (Niemcy), wyposażonej w sonotrodę o mocy 130 W/cm2, w temperaturze 24 ± 1 ° C. Następnie do dyspersji CNC dodano CAB, tak aby końcowe stężenie polimeru wynosiło 0,9% wagowych.
Zalecane urządzenie:
UP100H; w temperaturze 24°C przez 20 min.
Dokument referencyjny/badawczy:
Blachechen, L. S. et al (2013): Interplay of colloidal stability of cellulose nanocrystals and their dispersibility in cellulose acetate butyrate matrix. Cellulose 2013.
Celuloza z wytłoków trzciny cukrowej
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja celulozy z wytłoków trzciny cukrowej
Zalecane urządzenie:
UP200St
Ekstrakcja celulozy z wytłoków trzciny cukrowej
Zalecane urządzenie:
UP200St
Test ChIP
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwięki są stosowane do lizy komórek w celu uwolnienia chromatyny. Łagodna (pulsacyjna) sonikacja jest stosowana do fragmentacji chromatyny. Ponadto ultradźwięki przyspieszają szybkość wiązania przeciwciał z białkami docelowymi, a tym samym skracają czas immunoprecypitacji.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Basselet, P. et al. (2008): Przetwarzanie próbek do analizy opartej na macierzy DNA enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC).
Lauri, A. (2005): Molekularna analiza rozwoju płatków za pomocą X-ChIP i technologii dwuhybrydowej. Dissertation University of Cologne 2005.
Ultradźwięki są stosowane do lizy komórek w celu uwolnienia chromatyny. Łagodna (pulsacyjna) sonikacja jest stosowana do fragmentacji chromatyny. Ponadto ultradźwięki przyspieszają szybkość wiązania przeciwciał z białkami docelowymi, a tym samym skracają czas immunoprecypitacji.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Basselet, P. et al. (2008): Przetwarzanie próbek do analizy opartej na macierzy DNA enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC).
Lauri, A. (2005): Molekularna analiza rozwoju płatków za pomocą X-ChIP i technologii dwuhybrydowej. Dissertation University of Cologne 2005.
chromatyna
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ścinanie chromatyny
Zalecane urządzenie:
UP400S; przy 30% amplitudzie i 0,5 cyklu; na lodzie.
Dokument referencyjny/badawczy:
Oh et al. (2003): Acetyl-CoA Carboxylase Gene Is Regulated by Sterol Regulatory Element-binding Protein-1 in Liver.
Ścinanie chromatyny
Zalecane urządzenie:
UP400S; przy 30% amplitudzie i 0,5 cyklu; na lodzie.
Dokument referencyjny/badawczy:
Oh et al. (2003): Acetyl-CoA Carboxylase Gene Is Regulated by Sterol Regulatory Element-binding Protein-1 in Liver.
Ekstrakcja chromatyny
Aplikacja ultradźwiękowa:
Lizat komórek MEL DS19 poddano działaniu ultradźwięków w 10 rundach po 20 s każda przy 70% maksymalnej mocy wyjściowej przy użyciu procesora ultradźwiękowego Hielscher 200W UP200H
Zalecane urządzenie:
UP200H70% maksymalnej mocy wyjściowej; tryb impulsowy: 10 cykli po 20 sek.
Dokument referencyjny/badawczy:
Kang, H. Ch. et al (2010): PIAS1 reguluje lokalizację CP2c i tworzenie aktywnego kompleksu promotora w ekspresji a-globiny specyficznej dla komórek erytroidalnych. Nucleic Acids Res. 38/16, 2010. pp. 5456-5471.
Lizat komórek MEL DS19 poddano działaniu ultradźwięków w 10 rundach po 20 s każda przy 70% maksymalnej mocy wyjściowej przy użyciu procesora ultradźwiękowego Hielscher 200W UP200H
Zalecane urządzenie:
UP200H70% maksymalnej mocy wyjściowej; tryb impulsowy: 10 cykli po 20 sek.
Dokument referencyjny/badawczy:
Kang, H. Ch. et al (2010): PIAS1 reguluje lokalizację CP2c i tworzenie aktywnego kompleksu promotora w ekspresji a-globiny specyficznej dla komórek erytroidalnych. Nucleic Acids Res. 38/16, 2010. pp. 5456-5471.
chromatografia
Aplikacja ultradźwiękowa:
Sonikacja adsorbentu w rozpuszczalniku eliminuje aglomeraty w ciągu kilku sekund i przygotowuje jednolitą, łatwo upakowaną kolumnę. Odpowiednie do przygotowania adsorbentu (np. żelu krzemionkowego) przed chromatografią kolumnową.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Sonikacja adsorbentu w rozpuszczalniku eliminuje aglomeraty w ciągu kilku sekund i przygotowuje jednolitą, łatwo upakowaną kolumnę. Odpowiednie do przygotowania adsorbentu (np. żelu krzemionkowego) przed chromatografią kolumnową.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Cladocerans
Aplikacja ultradźwiękowa:
Uszkodzenie komórek mezozooplanktonu
Zalecane urządzenie:
UP2000hd z komorą przepływową
Dokument referencyjny/badawczy:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, światło ultrafioletowe, ultradźwięki i nadtlenek wodoru jako metody oczyszczania wód balastowych – Eksperymenty z mezozooplanktonem w wodzie słonawej o niskim zasoleniu.
Uszkodzenie komórek mezozooplanktonu
Zalecane urządzenie:
UP2000hd z komorą przepływową
Dokument referencyjny/badawczy:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, światło ultrafioletowe, ultradźwięki i nadtlenek wodoru jako metody oczyszczania wód balastowych – Eksperymenty z mezozooplanktonem w wodzie słonawej o niskim zasoleniu.
Dorosłe widłonogi i widłonogi
Aplikacja ultradźwiękowa:
Rozerwanie komórek mezozooplanktonu: przez sonikację w następujących warunkach czterech prędkości przepływu (200, 400, 520 i 800 lh-1) i czterech amplitud (25, 50, 75 i 100%) osiągnięto wskaźnik zabijania między 87 a 99%.
Zalecane urządzenie:
UIP2000hd z komorą przepływową
Dokument referencyjny/badawczy:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, światło ultrafioletowe, ultradźwięki i nadtlenek wodoru jako metody oczyszczania wód balastowych – Eksperymenty z mezozooplanktonem w wodzie słonawej o niskim zasoleniu.
Rozerwanie komórek mezozooplanktonu: przez sonikację w następujących warunkach czterech prędkości przepływu (200, 400, 520 i 800 lh-1) i czterech amplitud (25, 50, 75 i 100%) osiągnięto wskaźnik zabijania między 87 a 99%.
Zalecane urządzenie:
UIP2000hd z komorą przepływową
Dokument referencyjny/badawczy:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, światło ultrafioletowe, ultradźwięki i nadtlenek wodoru jako metody oczyszczania wód balastowych – Eksperymenty z mezozooplanktonem w wodzie słonawej o niskim zasoleniu.
Nauplii widłonogów
Aplikacja ultradźwiękowa:
Rozerwanie komórek mezozooplanktonu: przez sonikację w następujących warunkach czterech prędkości przepływu (200, 400, 520 i 800 lh-1) i czterech amplitud (25, 50, 75 i 100%) osiągnięto wskaźnik zabijania między 87 a 99%.
Zalecane urządzenie:
UIP2000hd z komorą przepływową
Dokument referencyjny/badawczy:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, światło ultrafioletowe, ultradźwięki i nadtlenek wodoru jako metody oczyszczania wód balastowych – Eksperymenty z mezozooplanktonem w wodzie słonawej o niskim zasoleniu.
Rozerwanie komórek mezozooplanktonu: przez sonikację w następujących warunkach czterech prędkości przepływu (200, 400, 520 i 800 lh-1) i czterech amplitud (25, 50, 75 i 100%) osiągnięto wskaźnik zabijania między 87 a 99%.
Zalecane urządzenie:
UIP2000hd z komorą przepływową
Dokument referencyjny/badawczy:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, światło ultrafioletowe, ultradźwięki i nadtlenek wodoru jako metody oczyszczania wód balastowych – Eksperymenty z mezozooplanktonem w wodzie słonawej o niskim zasoleniu.
Komórki COS7
Aplikacja ultradźwiękowa:
Liza w 400 μl buforu
Zalecane urządzenie:
UP200S7 cykli
Dokument referencyjny/badawczy:
Zaim (2005): Analyse von Nesprin-2 Defizienten Mäusen.
Liza w 400 μl buforu
Zalecane urządzenie:
UP200S7 cykli
Dokument referencyjny/badawczy:
Zaim (2005): Analyse von Nesprin-2 Defizienten Mäusen.
Cryptosporidium parvaum
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa inaktywacja Cryptosporidium parvaum (pierwotniaków) w wodzie.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Dokument referencyjny/badawczy:
Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktywacja Saccharomyces cerevisiae przez promieniowanie ultradźwiękowe. Ultrasonics Sonochemistry 11/2004. pp. 61-65.
Ultradźwiękowa inaktywacja Cryptosporidium parvaum (pierwotniaków) w wodzie.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Dokument referencyjny/badawczy:
Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktywacja Saccharomyces cerevisiae przez promieniowanie ultradźwiękowe. Ultrasonics Sonochemistry 11/2004. pp. 61-65.
kubosomy
Aplikacja ultradźwiękowa:
kubosomy – puste lub domieszkowane cząsteczkami fluoroforu – przygotowano przez zdyspergowanie odpowiedniej ilości monooleiny w roztworze Pluronic F108 przy użyciu ultrasonografu UP100H. Aby uzyskać fluorescencyjne kubosomy, fluorofor zdyspergowano w stopionej monooleinie przez delikatną sonifikację przed dyspersją w Pluronic F108. Tę samą procedurę zastosowano, gdy fluorescencyjne kubosomy były również obciążone kwercetyną.
Próbka: wielkość próbki: 4 ml – ok. 96,4% mas. wody, 3,3% mas. monooleiny, 0,3% mas. Pluronic F108. Zawartość procentowa fluoroforu wynosiła 2,5 × 10-3 i 2,8 × 10-3% wag. Ilość dodanej kwercetyny: 6,4 × 10-6 wt%.
Sonikacja: UP100Hamplituda 90%, cykl impulsu 0,9, przez 10 min.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Murgia, S.; Bonacchi,S.; Falchi, A. M.; Lampis, S.; Lippolis, V.; Meli, V.; Monduzzi, M.; Prodi, L.; Schmidt, J.; Talmon, Y.; Caltagirone, C. (2013): Fluorescencyjne kubosomy zawierające leki: Wszechstronne nanocząstki do potencjalnych zastosowań teranostycznych. Langmuir 29, 2013. 6673-6679.
kubosomy – puste lub domieszkowane cząsteczkami fluoroforu – przygotowano przez zdyspergowanie odpowiedniej ilości monooleiny w roztworze Pluronic F108 przy użyciu ultrasonografu UP100H. Aby uzyskać fluorescencyjne kubosomy, fluorofor zdyspergowano w stopionej monooleinie przez delikatną sonifikację przed dyspersją w Pluronic F108. Tę samą procedurę zastosowano, gdy fluorescencyjne kubosomy były również obciążone kwercetyną.
Próbka: wielkość próbki: 4 ml – ok. 96,4% mas. wody, 3,3% mas. monooleiny, 0,3% mas. Pluronic F108. Zawartość procentowa fluoroforu wynosiła 2,5 × 10-3 i 2,8 × 10-3% wag. Ilość dodanej kwercetyny: 6,4 × 10-6 wt%.
Sonikacja: UP100Hamplituda 90%, cykl impulsu 0,9, przez 10 min.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Murgia, S.; Bonacchi,S.; Falchi, A. M.; Lampis, S.; Lippolis, V.; Meli, V.; Monduzzi, M.; Prodi, L.; Schmidt, J.; Talmon, Y.; Caltagirone, C. (2013): Fluorescencyjne kubosomy zawierające leki: Wszechstronne nanocząstki do potencjalnych zastosowań teranostycznych. Langmuir 29, 2013. 6673-6679.
Dekkera bruxellensis
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa inaktywacja Dekkera bruxellensis w wodzie
Zalecane urządzenie:
UIP1500hd
Dokument referencyjny/badawczy:
Borthwick, K. A. J.; Coakley, W. T.; McDonnell, M. B.; Nowotny, H.; Benes, E.; Grfschl, .M (2005): Opracowanie nowego kompaktowego sonikatora do rozbijania komórek. J. Microbio. Meths. 60/2005. pp. 207-216. / Lörincz, A. (2004): Ultradźwiękowe rozbicie komórek drożdży w zawiesinach na bazie wody. Biosys. Eng. 89/ 2004. pp. 297-308. / Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktywacja Saccharomyces cerevisiae przez promieniowanie ultradźwiękowe. Ultrason. Sonochem. 11/2004. pp. 61-65.
Ultradźwiękowa inaktywacja Dekkera bruxellensis w wodzie
Zalecane urządzenie:
UIP1500hd
Dokument referencyjny/badawczy:
Borthwick, K. A. J.; Coakley, W. T.; McDonnell, M. B.; Nowotny, H.; Benes, E.; Grfschl, .M (2005): Opracowanie nowego kompaktowego sonikatora do rozbijania komórek. J. Microbio. Meths. 60/2005. pp. 207-216. / Lörincz, A. (2004): Ultradźwiękowe rozbicie komórek drożdży w zawiesinach na bazie wody. Biosys. Eng. 89/ 2004. pp. 297-308. / Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktywacja Saccharomyces cerevisiae przez promieniowanie ultradźwiękowe. Ultrason. Sonochem. 11/2004. pp. 61-65.
Dekkera/ Brettanomyces bruxellensis
Aplikacja ultradźwiękowa:
Dezaktywacja w ciągu 90-120 sekund.
Zalecane urządzenie:
UIP1500hd
Dokument referencyjny/badawczy:
patrz wyżej
Dezaktywacja w ciągu 90-120 sekund.
Zalecane urządzenie:
UIP1500hd
Dokument referencyjny/badawczy:
patrz wyżej
DNA
Aplikacja ultradźwiękowa:
Fragmentacja DNA: 2 min. sonikacja 100 μl z UP100H lub 4 min. sonikacja 100 μl z UTR200.
Zalecane urządzenie:
UP100H, UTR200 lub VialTweeter
Dokument referencyjny/badawczy:
Larguinho M. et al. (2010): Opracowanie szybkiej i skutecznej strategii fragmentacji DNA opartej na ultradźwiękach.
Fragmentacja DNA: 2 min. sonikacja 100 μl z UP100H lub 4 min. sonikacja 100 μl z UTR200.
Zalecane urządzenie:
UP100H, UTR200 lub VialTweeter
Dokument referencyjny/badawczy:
Larguinho M. et al. (2010): Opracowanie szybkiej i skutecznej strategii fragmentacji DNA opartej na ultradźwiękach.
Komórki S2 Drosophila melanogaster
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja białek komórkowych z komórek Drosophila melanogaster S2: Zamrożone komórki S2 (1.56108) poddano lizie w 1 ml lodowatego buforu do homogenizacji (100 mM Tris-HCl pH 7,5, 1% SDS) i pozostawiono na lodzie przez 10 minut. Lizę komórek zakończono ultradźwiękami na lodzie (6615 impulsów, 0,5 s impulsu; 75% intensywności) za pomocą procesora ultradźwiękowego Hielscher UP200S.
Zalecane urządzenie:
UP200S (200 W), tryb impulsowy o intensywności 75%: 6615 impulsów, impuls 0,5 s.
Dokument referencyjny/badawczy:
Schwientek, T. et al. (2007): A serial lectin approach to the mucin-type O-glycoproteome of Drosophila melanogaster S2 cells. Proteomics 7, 2007. pp. 3264-3277.
Ekstrakcja białek komórkowych z komórek Drosophila melanogaster S2: Zamrożone komórki S2 (1.56108) poddano lizie w 1 ml lodowatego buforu do homogenizacji (100 mM Tris-HCl pH 7,5, 1% SDS) i pozostawiono na lodzie przez 10 minut. Lizę komórek zakończono ultradźwiękami na lodzie (6615 impulsów, 0,5 s impulsu; 75% intensywności) za pomocą procesora ultradźwiękowego Hielscher UP200S.
Zalecane urządzenie:
UP200S (200 W), tryb impulsowy o intensywności 75%: 6615 impulsów, impuls 0,5 s.
Dokument referencyjny/badawczy:
Schwientek, T. et al. (2007): A serial lectin approach to the mucin-type O-glycoproteome of Drosophila melanogaster S2 cells. Proteomics 7, 2007. pp. 3264-3277.
Pochodne E. coli
Aplikacja ultradźwiękowa:
Rozpad komórek pochodnych E. coli: Zamrożone osady odpowiadające objętości próbki Vculture = 4/OD mL zawieszono ponownie w 580 μL 10 mM buforu fosforanu potasu pH 7, 1 mM EDTA. Dodano 20 μL lizozymu (stężenie 1 g L-1) i inkubowano zawiesinę komórek na lodzie przez około 30 minut. Następnie komórki przerwano przez ciągłe ultradźwięki za pomocą ultrasonografu (UP 200S Ultraschallprozessor, Dr. Hielscher GmbH, Teltow) na lodzie, przy amplitudzie 50% przez 20 sekund. Rozpuszczalne i nierozpuszczalne frakcje komórek oddzielono przez wirowanie przy 13000 obr/min przez 20 min. Nierozpuszczalne białka przemyto dwukrotnie 10 mM buforem fosforanu potasu pH 7, 1 mM EDTA i przechowywano w temperaturze -20°C.
Zalecane urządzenie:
UP200S z amplitudą 50%
Dokument referencyjny/badawczy:
HA (2005): Optymalizacja produkcji aktywnych białek rekombinowanych, badanie wpływu małych białek szoku cieplnego Escherichia coli, IbpA i IbpB, na reaktywację ciał inkluzyjnych in vivo.
Rozpad komórek pochodnych E. coli: Zamrożone osady odpowiadające objętości próbki Vculture = 4/OD mL zawieszono ponownie w 580 μL 10 mM buforu fosforanu potasu pH 7, 1 mM EDTA. Dodano 20 μL lizozymu (stężenie 1 g L-1) i inkubowano zawiesinę komórek na lodzie przez około 30 minut. Następnie komórki przerwano przez ciągłe ultradźwięki za pomocą ultrasonografu (UP 200S Ultraschallprozessor, Dr. Hielscher GmbH, Teltow) na lodzie, przy amplitudzie 50% przez 20 sekund. Rozpuszczalne i nierozpuszczalne frakcje komórek oddzielono przez wirowanie przy 13000 obr/min przez 20 min. Nierozpuszczalne białka przemyto dwukrotnie 10 mM buforem fosforanu potasu pH 7, 1 mM EDTA i przechowywano w temperaturze -20°C.
Zalecane urządzenie:
UP200S z amplitudą 50%
Dokument referencyjny/badawczy:
HA (2005): Optymalizacja produkcji aktywnych białek rekombinowanych, badanie wpływu małych białek szoku cieplnego Escherichia coli, IbpA i IbpB, na reaktywację ciał inkluzyjnych in vivo.
Antygen Echinococcus granulosus
Aplikacja ultradźwiękowa:
Liza i dezintegracja komórek: Homogenizowana próbka rozpuszczalnego białka dojrzałego E. granulosus, przygotowana przez zamrażanie-rozmrażanie w ciekłym azocie i 42◦C, została poddana sonikacji przy 110V, 170W przez 3×15 sekund na lodzie. Następnie próbkę wirowano przez 15 minut przy 10000g. Stężenie białka mierzono metodą Bradford i przechowywano w temperaturze -20◦C.
Zalecane urządzenie:
UP200S; 170W, chłodzenie na lodzie; 3 x 15 sek.
Dokument referencyjny/badawczy:
Tabar et al. (2010): Serodiagnosis of Sheep Hydatidosis with Hydatid Fluid, Protoscolex and Whole Body of Echinococcus granulosus Antigen.
Liza i dezintegracja komórek: Homogenizowana próbka rozpuszczalnego białka dojrzałego E. granulosus, przygotowana przez zamrażanie-rozmrażanie w ciekłym azocie i 42◦C, została poddana sonikacji przy 110V, 170W przez 3×15 sekund na lodzie. Następnie próbkę wirowano przez 15 minut przy 10000g. Stężenie białka mierzono metodą Bradford i przechowywano w temperaturze -20◦C.
Zalecane urządzenie:
UP200S; 170W, chłodzenie na lodzie; 3 x 15 sek.
Dokument referencyjny/badawczy:
Tabar et al. (2010): Serodiagnosis of Sheep Hydatidosis with Hydatid Fluid, Protoscolex and Whole Body of Echinococcus granulosus Antigen.
Escherchia coli Gr-
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa inaktywacja Escherchia coli Gr- w mleku i sokach.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Zastosowanie obróbki termicznej wspomaganej ultradźwiękami do konserwacji i zachowania jakości płynnej żywności. J Food Prot 66/2003. pp. 1642-1649.
Ultradźwiękowa inaktywacja Escherchia coli Gr- w mleku i sokach.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Zastosowanie obróbki termicznej wspomaganej ultradźwiękami do konserwacji i zachowania jakości płynnej żywności. J Food Prot 66/2003. pp. 1642-1649.
Escherchia coli Gr- w soli fizjologicznej
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa inaktywacja Escherchia coli Gr- w soli fizjologicznej.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Duckhouse, H.; Mason, T. J.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P. (2004): Wpływ sonikacji na dezynfekcję mikrobiologiczną przy użyciu podchlorynu. Ultrason. Sonochem. 11/ 2004. pp. 173-176.
Ultradźwiękowa inaktywacja Escherchia coli Gr- w soli fizjologicznej.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Duckhouse, H.; Mason, T. J.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P. (2004): Wpływ sonikacji na dezynfekcję mikrobiologiczną przy użyciu podchlorynu. Ultrason. Sonochem. 11/ 2004. pp. 173-176.
Escherchia coli Gr- w wodzie
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa inaktywacja Escherchia coli Gr- w wodzie.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Furuta, M.; Yamaguchi, M.; Tsukamoto, T.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Hasiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktywacja Escherichia coli przez promieniowanie ultradźwiękowe. Ultrason. Sonochem. 11/2004. pp. 57-60.
Ultradźwiękowa inaktywacja Escherchia coli Gr- w wodzie.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Furuta, M.; Yamaguchi, M.; Tsukamoto, T.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Hasiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktywacja Escherichia coli przez promieniowanie ultradźwiękowe. Ultrason. Sonochem. 11/2004. pp. 57-60.
Jaskra, nerw wzrokowy głowy
Aplikacja ultradźwiękowa:
Fragmentacja RNA główek nerwów wzrokowych (z oczu szczurów): Głowica nerwu wzrokowego (ONH) została zamrożona na suchym lodzie i przechowywana w temperaturze 80°C przed ekstrakcją. RNA izolowano przez sonikację zamrożonych główek nerwowych w buforze ekstrakcyjnym zestawu przy użyciu sondy MS 0,5 (UP50H), a następnie, zgodnie z instrukcjami dostarczonymi przez zestaw Arcturus, łącznie z obróbką DNazą w celu usunięcia DNA. Oczyszczone RNA oznaczono ilościowo.
Zalecane urządzenie:
UP50H z sondą MS0.5
Dokument referencyjny/badawczy:
Johnson et al. (2007): Global Changes in Optic Nerve Head Gene Expression after Exposure to Elevated Intraocular Pressure in a Rat Glaucoma Model.
Fragmentacja RNA główek nerwów wzrokowych (z oczu szczurów): Głowica nerwu wzrokowego (ONH) została zamrożona na suchym lodzie i przechowywana w temperaturze 80°C przed ekstrakcją. RNA izolowano przez sonikację zamrożonych główek nerwowych w buforze ekstrakcyjnym zestawu przy użyciu sondy MS 0,5 (UP50H), a następnie, zgodnie z instrukcjami dostarczonymi przez zestaw Arcturus, łącznie z obróbką DNazą w celu usunięcia DNA. Oczyszczone RNA oznaczono ilościowo.
Zalecane urządzenie:
UP50H z sondą MS0.5
Dokument referencyjny/badawczy:
Johnson et al. (2007): Global Changes in Optic Nerve Head Gene Expression after Exposure to Elevated Intraocular Pressure in a Rat Glaucoma Model.
Glikozaminoglikan siarczan chondroityny (CS)
Aplikacja ultradźwiękowa:
Oznaczanie CS za pomocą testu błękitu dimetylometylenowego
Resuspensja komórek: Pelety CS w probówkach do mikrowirówki zawieszono ponownie w 0,5 ml roztworu papainy o stężeniu 0,1 mg/ml w zrównoważonym roztworze soli Hanka (HBSS) przy użyciu impulsów z tuby ultradźwiękowej (UP 100H, Hielscher Ultrasonics GmbH, Niemcy) w cyklu 1 i 100% amplitudzie przez 3 sekundy. Następnie trawienie odbywało się w temperaturze 60 °C przez 24 godziny.
W przypadku testu immunoenzymatycznego (ELISA) komórki zawieszono następnie w wodzie destylowanej i dejonizowanej w stężeniu 106 komórek/ml i przechowywano w zamrażarce w temperaturze -70°C przez noc w celu ułatwienia lizy komórek. Następnie komórki homogenizowano za pomocą ultradźwięków przez 40 sekund przy użyciu ultradźwiękowego homogenizatora tkankowego Hielscher UP100H.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Vandrovcova et al. (2011): Influence of Collagen and Chondroitin Sulfate (CS) Coatings on Poly-(Lactide-co-Glycolide) (PLGA) on MG 63 Osteoblast-Like Cells. Physiol. Res. 60; 2011. 797-813.
Oznaczanie CS za pomocą testu błękitu dimetylometylenowego
Resuspensja komórek: Pelety CS w probówkach do mikrowirówki zawieszono ponownie w 0,5 ml roztworu papainy o stężeniu 0,1 mg/ml w zrównoważonym roztworze soli Hanka (HBSS) przy użyciu impulsów z tuby ultradźwiękowej (UP 100H, Hielscher Ultrasonics GmbH, Niemcy) w cyklu 1 i 100% amplitudzie przez 3 sekundy. Następnie trawienie odbywało się w temperaturze 60 °C przez 24 godziny.
W przypadku testu immunoenzymatycznego (ELISA) komórki zawieszono następnie w wodzie destylowanej i dejonizowanej w stężeniu 106 komórek/ml i przechowywano w zamrażarce w temperaturze -70°C przez noc w celu ułatwienia lizy komórek. Następnie komórki homogenizowano za pomocą ultradźwięków przez 40 sekund przy użyciu ultradźwiękowego homogenizatora tkankowego Hielscher UP100H.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Vandrovcova et al. (2011): Influence of Collagen and Chondroitin Sulfate (CS) Coatings on Poly-(Lactide-co-Glycolide) (PLGA) on MG 63 Osteoblast-Like Cells. Physiol. Res. 60; 2011. 797-813.
Komórki HaCaT
Aplikacja ultradźwiękowa:
Liza komórek HaCaT do immunoprecypitacji chromatyny (ChIP): Komórki HaCaT utrwalono 1% formaldehydem przez 10 minut w temperaturze 37uC. Utrwalone komórki poddano lizie w buforze RIPA i sonikowano na lodzie za pomocą urządzenia ultradźwiękowego o mocy 100 W przy amplitudzie = 1 i cyklu pracy = 100% w 12 jednominutowych (12 x 1 min.) impulsach.
Zalecane urządzenie:
UP100Hprzez 12 minut na lodzie,
Dokument referencyjny/badawczy:
Zhang et al. (2007): Basonuclin Regulates a Subset of Ribosomal RNA Genes in HaCaT Cells.
Liza komórek HaCaT do immunoprecypitacji chromatyny (ChIP): Komórki HaCaT utrwalono 1% formaldehydem przez 10 minut w temperaturze 37uC. Utrwalone komórki poddano lizie w buforze RIPA i sonikowano na lodzie za pomocą urządzenia ultradźwiękowego o mocy 100 W przy amplitudzie = 1 i cyklu pracy = 100% w 12 jednominutowych (12 x 1 min.) impulsach.
Zalecane urządzenie:
UP100Hprzez 12 minut na lodzie,
Dokument referencyjny/badawczy:
Zhang et al. (2007): Basonuclin Regulates a Subset of Ribosomal RNA Genes in HaCaT Cells.
Heparyna: Depolimeryzacja heparyny
Aplikacja ultradźwiękowa:
Metoda ultradźwiękowa umożliwia wytwarzanie heparyny o niskiej masie cząsteczkowej (LMWH). W związku z tym heparyna ulega rodnikowej depolimeryzacji katalizowanej nadtlenkiem wodoru. Reakcja jest bardzo szybka i trwa mniej niż 1 godzinę, podczas gdy fizykochemiczny proces depolimeryzacji opiera się na łagodnych warunkach reakcji, nie wymaga ostrych lub toksycznych odczynników i zapewnia produkt wolny od artefaktów chemicznych. Tak więc proces ultradźwiękowy dobrze nadaje się do produkcji LMWH na dużą skalę, ale także analogów wytwarzanych z naturalnych siarczanowanych polisacharydów.
Procedura ultradźwiękowa:
W celu fizykochemicznej depolimeryzacji niefrakcjonowanej heparyny za pomocą depolimeryzacji rodnikowej wspomaganej ultradźwiękami, heparynę rozpuszczono w wodzie do końcowego stężenia 25 mg/ml (5 ml). Mieszaninę reakcyjną poddano działaniu ultradźwięków za pomocą ultrasonografu z sondą UP50H. Ultradźwiękowiec był wyposażony w sondę (mikrokońcówka MS3) o średnicy 3 mm, która zapewniała amplitudę 180 μm. Procesor generował mechaniczne drgania wzdłużne o częstotliwości 30 kHz, które były wytwarzane przez wzbudzenie elektryczne. Mieszaninę reakcyjną utrzymywano w temperaturze 60°C w reaktorze Radleys®, a fale ultradźwiękowe stosowano jako 0,5-sekundowy impuls, aby zapobiec nagrzewaniu się mieszaniny. Podwielokrotność zerotime (250 μl) usunięto z roztworu przed rozpoczęciem reakcji przez jednoczesne dodanie nadtlenku wodoru i zastosowanie fal ultradźwiękowych. Nadtlenek wodoru dodano w celu uzyskania końcowego stosunku nadtlenku wodoru do heparyny (w/w) wynoszącego 0,15 (3,75 mg/ml).
Zalecane urządzenie:
UP50H z sonotrodą MS3
Dokument referencyjny/badawczy:
Achour, Oussama; Bridiau, Nicolas; Godhbani, Azza; Le Joubioux, Florian; Bordenave Juchereau, Stephanie; Sannier, Fredéric; Piot, Jean-Marie; Fruitier Arnaudin, Ingrid; Maugard, Thierry (2013): Wspomagane ultradźwiękami przygotowanie heparyny drobnocząsteczkowej (LMWH) o działaniu przeciwzakrzepowym. Carbohydrate Polymers 97; 2013. 684-689.
Metoda ultradźwiękowa umożliwia wytwarzanie heparyny o niskiej masie cząsteczkowej (LMWH). W związku z tym heparyna ulega rodnikowej depolimeryzacji katalizowanej nadtlenkiem wodoru. Reakcja jest bardzo szybka i trwa mniej niż 1 godzinę, podczas gdy fizykochemiczny proces depolimeryzacji opiera się na łagodnych warunkach reakcji, nie wymaga ostrych lub toksycznych odczynników i zapewnia produkt wolny od artefaktów chemicznych. Tak więc proces ultradźwiękowy dobrze nadaje się do produkcji LMWH na dużą skalę, ale także analogów wytwarzanych z naturalnych siarczanowanych polisacharydów.
Procedura ultradźwiękowa:
W celu fizykochemicznej depolimeryzacji niefrakcjonowanej heparyny za pomocą depolimeryzacji rodnikowej wspomaganej ultradźwiękami, heparynę rozpuszczono w wodzie do końcowego stężenia 25 mg/ml (5 ml). Mieszaninę reakcyjną poddano działaniu ultradźwięków za pomocą ultrasonografu z sondą UP50H. Ultradźwiękowiec był wyposażony w sondę (mikrokońcówka MS3) o średnicy 3 mm, która zapewniała amplitudę 180 μm. Procesor generował mechaniczne drgania wzdłużne o częstotliwości 30 kHz, które były wytwarzane przez wzbudzenie elektryczne. Mieszaninę reakcyjną utrzymywano w temperaturze 60°C w reaktorze Radleys®, a fale ultradźwiękowe stosowano jako 0,5-sekundowy impuls, aby zapobiec nagrzewaniu się mieszaniny. Podwielokrotność zerotime (250 μl) usunięto z roztworu przed rozpoczęciem reakcji przez jednoczesne dodanie nadtlenku wodoru i zastosowanie fal ultradźwiękowych. Nadtlenek wodoru dodano w celu uzyskania końcowego stosunku nadtlenku wodoru do heparyny (w/w) wynoszącego 0,15 (3,75 mg/ml).
Zalecane urządzenie:
UP50H z sonotrodą MS3
Dokument referencyjny/badawczy:
Achour, Oussama; Bridiau, Nicolas; Godhbani, Azza; Le Joubioux, Florian; Bordenave Juchereau, Stephanie; Sannier, Fredéric; Piot, Jean-Marie; Fruitier Arnaudin, Ingrid; Maugard, Thierry (2013): Wspomagane ultradźwiękami przygotowanie heparyny drobnocząsteczkowej (LMWH) o działaniu przeciwzakrzepowym. Carbohydrate Polymers 97; 2013. 684-689.
chmiel
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja związków aktywnych / ekstraktów ziołowych w wodzie i etanolu.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Ekstrakcja związków aktywnych / ekstraktów ziołowych w wodzie i etanolu.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Lactobacillus (liza/izolacja DNA różnych szczepów Lactobacillus)
Aplikacja ultradźwiękowa:
Szczepy Lactobacillus: L. pontis, L. sanfranciscensis, L. farciminis, L. panis, L. oris, L. vaginalis i L. reuteri, L. sp.
Procedura: Do izolacji DNA pojedynczych kolonii opracowano protokół lizy ultradźwiękowej. Jedną kolonię (o średnicy od 2 do 3 mm) zawieszono w 100 μl buforu lizującego (20 mM EDTA, 10 mM Tris [pH 7,9], 1% Triton X-100, 500 mM guanidyny-HCl, 250 mM NaCl). Komórki lizowano przez 1 minutę ultradźwiękami za pomocą ultrasonografu z sondą UP50H. Po dodaniu 150 μl zimnego etanolu (-20°C), mieszaninę odwirowano na kolumnie wirówkowej zestawu tkankowego QIAamp i ostatecznie eluowano 60 μl buforu (10 mM Tris [pH 7,5]).
Aby uzyskać narzędzie do szybkiej i niezawodnej identyfikacji pojedynczych czystych kultur, test PCR połączono z szybką procedurą izolacji DNA. Czasochłonne procedury lizy enzymatycznej i zmienna podatność bakterii na lizozym zostały przezwyciężone dzięki ultradźwiękowej obróbce komórek, a następnie oczyszczeniu i zatężeniu poprzez związanie DNA z matrycą krzemionkową. Materiał komórkowy pojedynczej kolonii okazał się wystarczający do przeprowadzenia PCR.
Zalecane urządzenie:
UP50H
Dokument referencyjny/badawczy:
Müller, M. R. A. (2000): Characterization of the Microbial Ecosystem of Cereal Fermentations using Molecular Biological Methods. Dissertation University of Cologne, 2000.
Szczepy Lactobacillus: L. pontis, L. sanfranciscensis, L. farciminis, L. panis, L. oris, L. vaginalis i L. reuteri, L. sp.
Procedura: Do izolacji DNA pojedynczych kolonii opracowano protokół lizy ultradźwiękowej. Jedną kolonię (o średnicy od 2 do 3 mm) zawieszono w 100 μl buforu lizującego (20 mM EDTA, 10 mM Tris [pH 7,9], 1% Triton X-100, 500 mM guanidyny-HCl, 250 mM NaCl). Komórki lizowano przez 1 minutę ultradźwiękami za pomocą ultrasonografu z sondą UP50H. Po dodaniu 150 μl zimnego etanolu (-20°C), mieszaninę odwirowano na kolumnie wirówkowej zestawu tkankowego QIAamp i ostatecznie eluowano 60 μl buforu (10 mM Tris [pH 7,5]).
Aby uzyskać narzędzie do szybkiej i niezawodnej identyfikacji pojedynczych czystych kultur, test PCR połączono z szybką procedurą izolacji DNA. Czasochłonne procedury lizy enzymatycznej i zmienna podatność bakterii na lizozym zostały przezwyciężone dzięki ultradźwiękowej obróbce komórek, a następnie oczyszczeniu i zatężeniu poprzez związanie DNA z matrycą krzemionkową. Materiał komórkowy pojedynczej kolonii okazał się wystarczający do przeprowadzenia PCR.
Zalecane urządzenie:
UP50H
Dokument referencyjny/badawczy:
Müller, M. R. A. (2000): Characterization of the Microbial Ecosystem of Cereal Fermentations using Molecular Biological Methods. Dissertation University of Cologne, 2000.
Lactobacillus acidophilus Gr+
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa inaktywacja Lactobacillus acidophilus Gr+ w mleku i sokach.
Zalecane urządzenie:
UIP500hd
Dokument referencyjny/badawczy:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Zastosowanie obróbki termicznej wspomaganej ultradźwiękami do konserwacji i zachowania jakości płynnej żywności. J Food Prot 66/2003. pp. 1642-1649.
Ultradźwiękowa inaktywacja Lactobacillus acidophilus Gr+ w mleku i sokach.
Zalecane urządzenie:
UIP500hd
Dokument referencyjny/badawczy:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Zastosowanie obróbki termicznej wspomaganej ultradźwiękami do konserwacji i zachowania jakości płynnej żywności. J Food Prot 66/2003. pp. 1642-1649.
Legionella pneumophila Gr+ w rozcieńczonym podłożu
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa inaktywacja Legionella pneumophila Gr+ w rozcieńczonej pożywce.
Zalecane urządzenie:
UIP500hd
Dokument referencyjny/badawczy:
Dadjour, M. F.; Ogino, C.; Matsumura, S.; Nakamura, S.; Shimizu N. (2006): Dezynfekcja Legionella pneumophila przez obróbkę ultradźwiękową z TiO2. Water Res 40/2006. pp.1137-1142.
Ultradźwiękowa inaktywacja Legionella pneumophila Gr+ w rozcieńczonej pożywce.
Zalecane urządzenie:
UIP500hd
Dokument referencyjny/badawczy:
Dadjour, M. F.; Ogino, C.; Matsumura, S.; Nakamura, S.; Shimizu N. (2006): Dezynfekcja Legionella pneumophila przez obróbkę ultradźwiękową z TiO2. Water Res 40/2006. pp.1137-1142.
Leuconostoc mesenteroides
Aplikacja ultradźwiękowa:
Aktywność lizozymu leukocytów w białaczce szpikowej: zawiesinę komórek poddano sonikacji przez 15 minut, a próbki oznaczono pod kątem aktywności lizozymu. Określono stężenie lizozymu w leukocytach ug./10 komórek.
Zalecane urządzenie:
UP50H
Aktywność lizozymu leukocytów w białaczce szpikowej: zawiesinę komórek poddano sonikacji przez 15 minut, a próbki oznaczono pod kątem aktywności lizozymu. Określono stężenie lizozymu w leukocytach ug./10 komórek.
Zalecane urządzenie:
UP50H
Aktywność izozymów leukocytarnych w białaczce szpikowej
Aplikacja ultradźwiękowa:
Przygotowanie próbek: zawiesinę komórek poddano obróbce ultradźwiękowej, a próbki oznaczono pod kątem aktywności lizozymu. Określono stężenie lizozymu w leukocytach ug/106.
Zalecane urządzenie:
UP200St
Przygotowanie próbek: zawiesinę komórek poddano obróbce ultradźwiękowej, a próbki oznaczono pod kątem aktywności lizozymu. Określono stężenie lizozymu w leukocytach ug/106.
Zalecane urządzenie:
UP200St
liposomy
Aplikacja ultradźwiękowa:
Formacja SUV-ów
Kliknij tutaj, aby dowiedzieć się więcej o ultradźwiękowym przygotowaniu liposomów!
Zalecane urządzenie:
UP50H3 cykle po 5 min; w łaźni lodowej.
Formacja SUV-ów
Kliknij tutaj, aby dowiedzieć się więcej o ultradźwiękowym przygotowaniu liposomów!
Zalecane urządzenie:
UP50H3 cykle po 5 min; w łaźni lodowej.
Malachitowa zieleń
Aplikacja ultradźwiękowa:
Sonofotokatalityczna degradacja zieleni malachitowej (silnego środka bakteriobójczego): Sama degradacja fotokatalityczna jest znacznie szybsza niż degradacja sonolityczna, wydajność można poprawić poprzez połączenie tych dwóch procesów. Zieleń malachitowa, silny środek bakteriobójczy, jest bardzo ekotoksyczna dla bakterii morskich, ale jest przekształcana w związki organiczne, które są mniej toksyczne lub nie są toksyczne.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Sonofotokatalityczna degradacja zieleni malachitowej (silnego środka bakteriobójczego): Sama degradacja fotokatalityczna jest znacznie szybsza niż degradacja sonolityczna, wydajność można poprawić poprzez połączenie tych dwóch procesów. Zieleń malachitowa, silny środek bakteriobójczy, jest bardzo ekotoksyczna dla bakterii morskich, ale jest przekształcana w związki organiczne, które są mniej toksyczne lub nie są toksyczne.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Acylacja mangiferyny
Aplikacja ultradźwiękowa:
Mangiferyna (1,3,6,7-tetrahydroksy-2-[3,4,5-trihydroksy-6-(hydroksymetylo)oksan-2-ylo]ksanten-9-on; wzór: C19H18O11) jest polifenolem o strukturze C-glikozyloksantonu, który można znaleźć w wielu gatunkach roślin. Mangiferyna wykazuje różne działania farmakologiczne. Regioselektywna acylacja mangiferyny może być bardzo skutecznie katalizowana przez lipazę pod wpływem ultradźwięków. W porównaniu z konwencjonalnymi metodami, kataliza wspomagana ultradźwiękami wyróżnia się krótszym czasem reakcji i wyższą wydajnością. Optymalne warunki dla ultradźwiękowej acylacji mangiferyny stwierdzono w następujący sposób:
lipaza: PCL, donor acylu: octan winylu; rozpuszczalnik reakcji: DMSO, temperatura reakcji: 45 st. C, moc ultradźwięków: 200 W; stosunek substratów: donor acylu/mangiferyna 6/1, obciążenie enzymem: 6 mg/ml
Regioselektywna wydajność acylowania wynosiła do 84%.
Zalecane urządzenie:
UP200St lub UP200Ht
Dokument referencyjny/badawczy:
cp.: Wang, Z.; Wang, R.; Tian, J.; Zhao, B; Wei, X.F.; Su, Y.L.; Li, C.Y.; Cao, S.G.; Wang, L. (2010): Wpływ ultradźwięków na katalizowaną lipazą regioselektywną acylację mangiferyny w niewodnych rozpuszczalnikach. J. Asian Nat Prod. Res. 12/1, 2010. 56-63.
Mangiferyna (1,3,6,7-tetrahydroksy-2-[3,4,5-trihydroksy-6-(hydroksymetylo)oksan-2-ylo]ksanten-9-on; wzór: C19H18O11) jest polifenolem o strukturze C-glikozyloksantonu, który można znaleźć w wielu gatunkach roślin. Mangiferyna wykazuje różne działania farmakologiczne. Regioselektywna acylacja mangiferyny może być bardzo skutecznie katalizowana przez lipazę pod wpływem ultradźwięków. W porównaniu z konwencjonalnymi metodami, kataliza wspomagana ultradźwiękami wyróżnia się krótszym czasem reakcji i wyższą wydajnością. Optymalne warunki dla ultradźwiękowej acylacji mangiferyny stwierdzono w następujący sposób:
lipaza: PCL, donor acylu: octan winylu; rozpuszczalnik reakcji: DMSO, temperatura reakcji: 45 st. C, moc ultradźwięków: 200 W; stosunek substratów: donor acylu/mangiferyna 6/1, obciążenie enzymem: 6 mg/ml
Regioselektywna wydajność acylowania wynosiła do 84%.
Zalecane urządzenie:
UP200St lub UP200Ht
Dokument referencyjny/badawczy:
cp.: Wang, Z.; Wang, R.; Tian, J.; Zhao, B; Wei, X.F.; Su, Y.L.; Li, C.Y.; Cao, S.G.; Wang, L. (2010): Wpływ ultradźwięków na katalizowaną lipazą regioselektywną acylację mangiferyny w niewodnych rozpuszczalnikach. J. Asian Nat Prod. Res. 12/1, 2010. 56-63.
Ekstrakcja cząsteczek
Aplikacja ultradźwiękowa:
Protokół ekstrakcji z gipsu, reolitu, bazaltu, popiołu edfell i szkła obsydianowego:
Próbka regolitu lub pokruszonej skały o masie 1 g jest poddawana ekstrakcji cieczowej pod wpływem promieniowania ultradźwiękowego w celu ekstrakcji i solubilizacji cząsteczek docelowych. Dlatego 3 ml MeOH P80 dodano do 1 g próbki analogowej w szklanej probówce i poddano działaniu ultradźwięków przez 20 minut za pomocą urządzenia typu sondy ultradźwiękowej UP50H ustawiony na 40% amplitudy. Mieszaninę pozostawiono na 10 minut, a mętny supernatant, który utworzył się nad osadzoną próbką analogu, zdekantowano do probówek wirówkowych o pojemności 1,5 ml. Aby zminimalizować utratę wyekstrahowanych składników poprzez adsorpcję na powierzchniach hydrofobowych polimerowych probówek wirówkowych, probówki zostały najpierw zablokowane 0,5% (w/v) BSA w 100 mM HEPES pH 7,4. Supernatanty klarowano przez wirowanie przy 17000 G przez 10 minut i przechowywano w temperaturze 2-8°C w szklanych fiolkach do czasu przeprowadzenia testu immunologicznego.
Zalecane urządzenie:
UP50H
Dokument referencyjny/badawczy:
Rix, C.(2012): Detecting Life on Mars and the Life Marker Chip: Antibody Assays for Detecting Organic Molecules in Liquid Extracts of Martian Samples. Dissertation Cranfield University 2012.
Protokół ekstrakcji z gipsu, reolitu, bazaltu, popiołu edfell i szkła obsydianowego:
Próbka regolitu lub pokruszonej skały o masie 1 g jest poddawana ekstrakcji cieczowej pod wpływem promieniowania ultradźwiękowego w celu ekstrakcji i solubilizacji cząsteczek docelowych. Dlatego 3 ml MeOH P80 dodano do 1 g próbki analogowej w szklanej probówce i poddano działaniu ultradźwięków przez 20 minut za pomocą urządzenia typu sondy ultradźwiękowej UP50H ustawiony na 40% amplitudy. Mieszaninę pozostawiono na 10 minut, a mętny supernatant, który utworzył się nad osadzoną próbką analogu, zdekantowano do probówek wirówkowych o pojemności 1,5 ml. Aby zminimalizować utratę wyekstrahowanych składników poprzez adsorpcję na powierzchniach hydrofobowych polimerowych probówek wirówkowych, probówki zostały najpierw zablokowane 0,5% (w/v) BSA w 100 mM HEPES pH 7,4. Supernatanty klarowano przez wirowanie przy 17000 G przez 10 minut i przechowywano w temperaturze 2-8°C w szklanych fiolkach do czasu przeprowadzenia testu immunologicznego.
Zalecane urządzenie:
UP50H
Dokument referencyjny/badawczy:
Rix, C.(2012): Detecting Life on Mars and the Life Marker Chip: Antibody Assays for Detecting Organic Molecules in Liquid Extracts of Martian Samples. Dissertation Cranfield University 2012.
Osad z wątroby myszy
Aplikacja ultradźwiękowa:
Osad przemyto i poddano działaniu ultradźwięków przez 5 minut, dodając kolejne 0,5 ml LB2 i odwirowano przy 12 000 g przez kolejne 20 minut, a następnie zebrano dwie frakcje supernatantu. Na koniec osady rozpuszczono w 0,5 ml buforu zawierającego 40 mM zasady tris, 5 M mocznika, 2 M tiomocznika, 4% CHAPS, 100 mM DTT, 0,5% (v/v) biolitu 3-10 (LB3) i poddano sonikacji oraz wirowaniu przy 12 000 g przez 20 min.
Zalecane urządzenie:
UP200S; przez 5 min.
Dokument referencyjny/badawczy:
Gazzana et al. (2009): An update on mouse liver proteome.
Osad przemyto i poddano działaniu ultradźwięków przez 5 minut, dodając kolejne 0,5 ml LB2 i odwirowano przy 12 000 g przez kolejne 20 minut, a następnie zebrano dwie frakcje supernatantu. Na koniec osady rozpuszczono w 0,5 ml buforu zawierającego 40 mM zasady tris, 5 M mocznika, 2 M tiomocznika, 4% CHAPS, 100 mM DTT, 0,5% (v/v) biolitu 3-10 (LB3) i poddano sonikacji oraz wirowaniu przy 12 000 g przez 20 min.
Zalecane urządzenie:
UP200S; przez 5 min.
Dokument referencyjny/badawczy:
Gazzana et al. (2009): An update on mouse liver proteome.
Zawiesina wątroby myszy
Aplikacja ultradźwiękowa:
Homogenizacja próbki w celu uzyskania lizatu komórkowego.
Zalecane urządzenie:
UP200S; przez 3 x 20 sek.
Dokument referencyjny/badawczy:
Gazzana et al. (2009): An update on mouse liver proteome.
Homogenizacja próbki w celu uzyskania lizatu komórkowego.
Zalecane urządzenie:
UP200S; przez 3 x 20 sek.
Dokument referencyjny/badawczy:
Gazzana et al. (2009): An update on mouse liver proteome.
Penicillium digitatum
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa inaktywacja Penicillium digitatum (patogen roślinny) w pożywce Sabourauda.
Zalecane urządzenie:
UP200St
Dokument referencyjny/badawczy:
López-Malo, A.; Palou, E.; Jiménez-Fernández, M.; Alzamora, S. M.; Guerrero, S. (2005): Wieloczynnikowa inaktywacja grzybów łącząca termosonikację i środki przeciwdrobnoustrojowe. J. Food Eng. 67/2005. pp. 87-93.
Ultradźwiękowa inaktywacja Penicillium digitatum (patogen roślinny) w pożywce Sabourauda.
Zalecane urządzenie:
UP200St
Dokument referencyjny/badawczy:
López-Malo, A.; Palou, E.; Jiménez-Fernández, M.; Alzamora, S. M.; Guerrero, S. (2005): Wieloczynnikowa inaktywacja grzybów łącząca termosonikację i środki przeciwdrobnoustrojowe. J. Food Eng. 67/2005. pp. 87-93.
Fikocyjanina ze spiruliny platensis (Arthrospira platensis)
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja fikocyjaniny z komórek Spirulina platensis (Arthrospira platensis).
Zalecane urządzenie:
UP400S
Ekstrakcja fikocyjaniny z komórek Spirulina platensis (Arthrospira platensis).
Zalecane urządzenie:
UP400S
Komórki i tkanki roślinne
Aplikacja ultradźwiękowa:
30% upakowane komórki roślinne (W/V) i woda destylowana są rozbijane przez sonikację przez 1-15 min; dezintegracja tkanki roślinnej: 1 g wysuszonej tkanki zawieszonej w alkoholu ulega dezintegracji podczas sonikacji trwającej około 5 min.
Zalecane urządzenie:
UP100H
30% upakowane komórki roślinne (W/V) i woda destylowana są rozbijane przez sonikację przez 1-15 min; dezintegracja tkanki roślinnej: 1 g wysuszonej tkanki zawieszonej w alkoholu ulega dezintegracji podczas sonikacji trwającej około 5 min.
Zalecane urządzenie:
UP100H
płytki krwi
Aplikacja ultradźwiękowa:
Przygotowanie lizatu płytek krwi: Rozpad w ciągu 1-5 min.
Zalecane urządzenie:
UP200Ht
Przygotowanie lizatu płytek krwi: Rozpad w ciągu 1-5 min.
Zalecane urządzenie:
UP200Ht
Pleurotus tuberregium
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja polisacharydów z jadalnego grzyba Pleurotus tuberregium
Zalecane urządzenie:
UP400S
Ekstrakcja polisacharydów z jadalnego grzyba Pleurotus tuberregium
Zalecane urządzenie:
UP400S
Poli(kwas mlekowy-co-glikolowy) (PLGA)
Aplikacja ultradźwiękowa:
Przygotowanie albuminy surowicy bydlęcej (BSA) obciążonej poli (kwasem mlekowym-co-glikolowym) (PLGA) przez sonikację w 40 sek.
Zalecane urządzenie:
Dmini; przez 40 sekund.
Dokument referencyjny/badawczy:
Freitas et al. (2005): Przepływowa emulsyfikacja ultradźwiękowa w połączeniu ze statycznym mikromieszaniem do aseptycznej produkcji mikrosfer metodą ekstrakcji rozpuszczalnikowej.
Przygotowanie albuminy surowicy bydlęcej (BSA) obciążonej poli (kwasem mlekowym-co-glikolowym) (PLGA) przez sonikację w 40 sek.
Zalecane urządzenie:
Dmini; przez 40 sekund.
Dokument referencyjny/badawczy:
Freitas et al. (2005): Przepływowa emulsyfikacja ultradźwiękowa w połączeniu ze statycznym mikromieszaniem do aseptycznej produkcji mikrosfer metodą ekstrakcji rozpuszczalnikowej.
Polifenole z jabłek
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa ekstrakcja polifenoli z jabłek. Rozpuszczalnik: wodny. Zwiększona wydajność o 6%; intensywność sonikacji: 20-75Ws/ml; temperatura procesu: podgrzana do 80 stopni Celsjusza.
Zalecane urządzenie:
UIP2000hd
Dokument referencyjny/badawczy:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultradźwiękowy odzysk i modyfikacja składników żywności. W: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. Nowy Jork: Springer, 2011. pp. 345-368.
Ultradźwiękowa ekstrakcja polifenoli z jabłek. Rozpuszczalnik: wodny. Zwiększona wydajność o 6%; intensywność sonikacji: 20-75Ws/ml; temperatura procesu: podgrzana do 80 stopni Celsjusza.
Zalecane urządzenie:
UIP2000hd
Dokument referencyjny/badawczy:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultradźwiękowy odzysk i modyfikacja składników żywności. W: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. Nowy Jork: Springer, 2011. pp. 345-368.
Polifenole z czarnej herbaty
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa ekstrakcja polifenoli z czarnej herbaty. Rozpuszczalnik: wodny. Zwiększona wydajność o 6-18%; intensywność sonikacji: 8-10Ws/ml; ciśnienie otoczenia, temperatura procesu: podgrzana do 90 stopni Celsjusza.
Zalecane urządzenie:
UIP2000hd
Dokument referencyjny/badawczy:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultradźwiękowy odzysk i modyfikacja składników żywności. W: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. Nowy Jork: Springer, 2011. pp. 345-368.
Ultradźwiękowa ekstrakcja polifenoli z czarnej herbaty. Rozpuszczalnik: wodny. Zwiększona wydajność o 6-18%; intensywność sonikacji: 8-10Ws/ml; ciśnienie otoczenia, temperatura procesu: podgrzana do 90 stopni Celsjusza.
Zalecane urządzenie:
UIP2000hd
Dokument referencyjny/badawczy:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultradźwiękowy odzysk i modyfikacja składników żywności. W: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. Nowy Jork: Springer, 2011. pp. 345-368.
Polifenole z wytłoków z czerwonych winogron
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa ekstrakcja polifenoli z wytłoków z czerwonych winogron. Rozpuszczalnik: wodny. Zwiększona wydajność o 11-35%; intensywność sonikacji: 20-75Ws/ml; ciśnienie otoczenia.
Zalecane urządzenie:
UIP2000hd
Dokument referencyjny/badawczy:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultradźwiękowy odzysk i modyfikacja składników żywności. W: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. Nowy Jork: Springer, 2011. pp. 345-368.
Ultradźwiękowa ekstrakcja polifenoli z wytłoków z czerwonych winogron. Rozpuszczalnik: wodny. Zwiększona wydajność o 11-35%; intensywność sonikacji: 20-75Ws/ml; ciśnienie otoczenia.
Zalecane urządzenie:
UIP2000hd
Dokument referencyjny/badawczy:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultradźwiękowy odzysk i modyfikacja składników żywności. W: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. Nowy Jork: Springer, 2011. pp. 345-368.
Polifenole, aminokwasy i kofeina z zielonej herbaty
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja związków aktywnych z zielonej herbaty w wodzie
Zalecane urządzenie:
UP400S
Ekstrakcja związków aktywnych z zielonej herbaty w wodzie
Zalecane urządzenie:
UP400S
Wieprzowina: Solenie schabu wieprzowego
Aplikacja ultradźwiękowa:
W przypadku solenia wspomaganego ultradźwiękami, polędwiczki wieprzowe (Longissimus dorsi) zanurzono w solance chlorku sodu (40 g L-1) i poddano działaniu ultradźwięków o niskiej częstotliwości (20 kHz) i niskiej intensywności (2-4 W/cm-2) w temperaturze 5°C. Zbadano wpływ utwardzania wspomaganego ultradźwiękami na mikrostrukturę tkanki wieprzowej, denaturację białka, zdolność wiązania wody (WBC), zdolność zatrzymywania wody (WHC), współczynnik dyfuzji chlorku sodu (D) i profil tekstury mięsa (TPA). Wyniki wykazały, że obróbka ultradźwiękowa spowodowała korzystne zmiany mikrostrukturalne w tkance mięsnej. Zdolność zatrzymywania wody i właściwości teksturalne uległy poprawie dzięki obróbce ultradźwiękowej w porównaniu zarówno z próbkami bębnowymi, jak i statycznie solonymi. Jednak te pozytywne efekty były wysoce zależne od intensywności ultradźwięków. Wyższe natężenia i/lub dłuższe czasy obróbki powodowały denaturację białek. Model stałego współczynnika dyfuzji był w stanie dokładnie opisać kinetykę dyfuzji NaCl podczas solenia. Obróbka ultradźwiękowa znacznie zwiększyła dyfuzję soli w porównaniu do próbek solonych w warunkach statycznych, a współczynnik dyfuzji wzrastał wykładniczo wraz ze wzrostem intensywności ultradźwięków.
Zalecane urządzenie:
UP200Ht z sonotrodą S26d40
Dokument referencyjny/badawczy:
Siro, I.; Ven, Cs.; Balla, Cs.; Jonas, G.; Zeke, I.; Friedrich, L. (2009): Zastosowanie techniki peklowania wspomaganego ultradźwiękami do poprawy dyfuzji chlorku sodu w mięsie wieprzowym. Journal of Food Engineering 91/2, 2009. 353-362.
W przypadku solenia wspomaganego ultradźwiękami, polędwiczki wieprzowe (Longissimus dorsi) zanurzono w solance chlorku sodu (40 g L-1) i poddano działaniu ultradźwięków o niskiej częstotliwości (20 kHz) i niskiej intensywności (2-4 W/cm-2) w temperaturze 5°C. Zbadano wpływ utwardzania wspomaganego ultradźwiękami na mikrostrukturę tkanki wieprzowej, denaturację białka, zdolność wiązania wody (WBC), zdolność zatrzymywania wody (WHC), współczynnik dyfuzji chlorku sodu (D) i profil tekstury mięsa (TPA). Wyniki wykazały, że obróbka ultradźwiękowa spowodowała korzystne zmiany mikrostrukturalne w tkance mięsnej. Zdolność zatrzymywania wody i właściwości teksturalne uległy poprawie dzięki obróbce ultradźwiękowej w porównaniu zarówno z próbkami bębnowymi, jak i statycznie solonymi. Jednak te pozytywne efekty były wysoce zależne od intensywności ultradźwięków. Wyższe natężenia i/lub dłuższe czasy obróbki powodowały denaturację białek. Model stałego współczynnika dyfuzji był w stanie dokładnie opisać kinetykę dyfuzji NaCl podczas solenia. Obróbka ultradźwiękowa znacznie zwiększyła dyfuzję soli w porównaniu do próbek solonych w warunkach statycznych, a współczynnik dyfuzji wzrastał wykładniczo wraz ze wzrostem intensywności ultradźwięków.
Zalecane urządzenie:
UP200Ht z sonotrodą S26d40
Dokument referencyjny/badawczy:
Siro, I.; Ven, Cs.; Balla, Cs.; Jonas, G.; Zeke, I.; Friedrich, L. (2009): Zastosowanie techniki peklowania wspomaganego ultradźwiękami do poprawy dyfuzji chlorku sodu w mięsie wieprzowym. Journal of Food Engineering 91/2, 2009. 353-362.
Porphyra yezoensis
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa degradacja polisacharydów z Porphyra yezoensis: 50 ml 1,0 g/100 ml roztworu polisacharydów Porphyra yezoensis (sucha masa) poddano działaniu ultradźwięków przez 4 godziny za pomocą UP400S.
Zalecane urządzenie:
UP400S; ultradźwięki pulsacyjne (cykle: 2 s włączone/ 2 s wyłączone) w temperaturze 20°C.
Ultradźwiękowa degradacja polisacharydów z Porphyra yezoensis: 50 ml 1,0 g/100 ml roztworu polisacharydów Porphyra yezoensis (sucha masa) poddano działaniu ultradźwięków przez 4 godziny za pomocą UP400S.
Zalecane urządzenie:
UP400S; ultradźwięki pulsacyjne (cykle: 2 s włączone/ 2 s wyłączone) w temperaturze 20°C.
proszki
Aplikacja ultradźwiękowa:
Mielenie, deaglomeracja i dyspersja do małych, względnie jednorodnych rozmiarów cząstek.
Zalecane urządzenie:
UP200St
Mielenie, deaglomeracja i dyspersja do małych, względnie jednorodnych rozmiarów cząstek.
Zalecane urządzenie:
UP200St
Kości szczura
Wątroba szczura
Aplikacja ultradźwiękowa:
Przerwanie i homogenizacja tkanki za pomocą UP400S.
Zalecane urządzenie:
UP400S3 razy przez 30 sekund; na lodzie.
Dokument referencyjny/badawczy:
Oh et al. (2003): Gen karboksylazy acetylo-CoA jest regulowany przez białko-1 wiążące element regulujący sterol w wątrobie. Journal of Biological Chemistry 2003.
Przerwanie i homogenizacja tkanki za pomocą UP400S.
Zalecane urządzenie:
UP400S3 razy przez 30 sekund; na lodzie.
Dokument referencyjny/badawczy:
Oh et al. (2003): Gen karboksylazy acetylo-CoA jest regulowany przez białko-1 wiążące element regulujący sterol w wątrobie. Journal of Biological Chemistry 2003.
Skóra szczura
Rawolfia Serpentina
rebaudiozyd A
Aplikacja ultradźwiękowa:
Próbki 10 g suchych i zmielonych liści stewii ekstrahowano w 100 ml wody przy ciągłym mieszaniu (za pomocą mieszadła magnetycznego). Wartość pH kontrolowano za pomocą fosforanu sodu 0,01 M pH 7. Próbkę umieszczono w szklanej zlewce o pojemności 150 ml i poddano działaniu ultradźwięków za pomocą sondy ultradźwiękowej (UIP500hd, 20kHz, 500W). Końcówkę sonotrody zanurzono na około 1,5 cm w zawiesinie liści stewii. Urządzenie ultradźwiękowe ustawiono na moc wyjściową 350 W. Łagodna obróbka ultradźwiękowa 350 W przez 5-10 min. przy stałej temperaturze procesu 30°C dała wydajność rebaudiozydu A 30-34 g na 100 g próbki. Po sonikacji roztwór ekstraktu odwirowano i przefiltrowano przez mikroporowatą membranę 0,45 μm; filtrat pobrano do analizy zawartości całkowitego rebaudiozydu A. Wydajność ekstrakcji całkowitej zawartości rebaudiozydu A analizowano metodą HPLC.
Dzięki bezrozpuszczalnikowej ekstrakcji wspomaganej ultradźwiękami uzyskano wysoką wydajność rebaudiozydu A w porównaniu z tradycyjnymi metodami ekstrakcji, takimi jak ekstrakcja termiczna lub maceracja.
Zalecane urządzenie:
UIP500hd
Próbki 10 g suchych i zmielonych liści stewii ekstrahowano w 100 ml wody przy ciągłym mieszaniu (za pomocą mieszadła magnetycznego). Wartość pH kontrolowano za pomocą fosforanu sodu 0,01 M pH 7. Próbkę umieszczono w szklanej zlewce o pojemności 150 ml i poddano działaniu ultradźwięków za pomocą sondy ultradźwiękowej (UIP500hd, 20kHz, 500W). Końcówkę sonotrody zanurzono na około 1,5 cm w zawiesinie liści stewii. Urządzenie ultradźwiękowe ustawiono na moc wyjściową 350 W. Łagodna obróbka ultradźwiękowa 350 W przez 5-10 min. przy stałej temperaturze procesu 30°C dała wydajność rebaudiozydu A 30-34 g na 100 g próbki. Po sonikacji roztwór ekstraktu odwirowano i przefiltrowano przez mikroporowatą membranę 0,45 μm; filtrat pobrano do analizy zawartości całkowitego rebaudiozydu A. Wydajność ekstrakcji całkowitej zawartości rebaudiozydu A analizowano metodą HPLC.
Dzięki bezrozpuszczalnikowej ekstrakcji wspomaganej ultradźwiękami uzyskano wysoką wydajność rebaudiozydu A w porównaniu z tradycyjnymi metodami ekstrakcji, takimi jak ekstrakcja termiczna lub maceracja.
Zalecane urządzenie:
UIP500hd
skrobia ryżowa
Aplikacja ultradźwiękowa:
Zakłócenie, izolacja skrobi i zerwanie niekowalencyjnych wiązań między białkiem a skrobią w zawiesinie mąki ryżowej (33%) w 20 – 40 min.
Zalecane urządzenie:
UP500hd; 20 – 40 min.
Zakłócenie, izolacja skrobi i zerwanie niekowalencyjnych wiązań między białkiem a skrobią w zawiesinie mąki ryżowej (33%) w 20 – 40 min.
Zalecane urządzenie:
UP500hd; 20 – 40 min.
Wrotki
Aplikacja ultradźwiękowa:
Rozerwanie komórek mezozooplanktonu: przez sonikację w następujących warunkach czterech prędkości przepływu (200, 400, 520 i 800lh-1) i czterech amplitud (25, 50, 75 i 100%) osiągnięto wskaźnik zabijania między 58 a 85%.
Zalecane urządzenie:
UP2000 z komorą przepływową
Dokument referencyjny/badawczy:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, światło ultrafioletowe, ultradźwięki i nadtlenek wodoru jako metody oczyszczania wód balastowych – Eksperymenty z mezozooplanktonem w słonawej wodzie o niskim zasoleniu. Journal of Marine Environmental Engineering, 8(1), 35-55.
Rozerwanie komórek mezozooplanktonu: przez sonikację w następujących warunkach czterech prędkości przepływu (200, 400, 520 i 800lh-1) i czterech amplitud (25, 50, 75 i 100%) osiągnięto wskaźnik zabijania między 58 a 85%.
Zalecane urządzenie:
UP2000 z komorą przepływową
Dokument referencyjny/badawczy:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, światło ultrafioletowe, ultradźwięki i nadtlenek wodoru jako metody oczyszczania wód balastowych – Eksperymenty z mezozooplanktonem w słonawej wodzie o niskim zasoleniu. Journal of Marine Environmental Engineering, 8(1), 35-55.
S. fragilis
saccharomyces cerevisiae
Aplikacja ultradźwiękowa:
zakłócenie
Zalecane urządzenie:
UP400S
Dokument referencyjny/badawczy:
Guerrero, S.; López-Malo, A.; Alzamora, S. M. (2001): Wpływ ultradźwięków na przeżywalność Saccharomyces cerevisiae: wpływ temperatury, pH i amplitudy. Innov. Food Sci. Emerg Technol. 2/2001. pp. 31-39.
zakłócenie
Zalecane urządzenie:
UP400S
Dokument referencyjny/badawczy:
Guerrero, S.; López-Malo, A.; Alzamora, S. M. (2001): Wpływ ultradźwięków na przeżywalność Saccharomyces cerevisiae: wpływ temperatury, pH i amplitudy. Innov. Food Sci. Emerg Technol. 2/2001. pp. 31-39.
saccharomyces cerevisiae
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa inaktywacja Saccharomyces cerevisiae w pożywce Sabourauda i soli fizjologicznej.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Dokument referencyjny/badawczy:
Yap, A.; Jiranek, V.; Grbin, P.; Barnes, M.; Bates, D. (2007): Badania nad zastosowaniem ultradźwięków o dużej mocy do czyszczenia i dezynfekcji beczek i desek. Austr. NZ Wine Indust. J. 22(3)/ 2007. pp. 96-104.
Ultradźwiękowa inaktywacja Saccharomyces cerevisiae w pożywce Sabourauda i soli fizjologicznej.
Zalecane urządzenie:
UP400S
Dokument referencyjny/badawczy:
Yap, A.; Jiranek, V.; Grbin, P.; Barnes, M.; Bates, D. (2007): Badania nad zastosowaniem ultradźwięków o dużej mocy do czyszczenia i dezynfekcji beczek i desek. Austr. NZ Wine Indust. J. 22(3)/ 2007. pp. 96-104.
Szafran, krokus sativus
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja związków aktywnych (aromatów i barwników).
Kliknij tutaj, aby przeczytać więcej o ekstrakcji z szafranu!
Zalecane urządzenie:
UP50H
Dokument referencyjny/badawczy:
Kadkhodaee et al. (2007): Ekstrakcja ultradźwiękowa związków aktywnych z szafranu. Acta Hortic. 739, 2007. 417-425.
Ekstrakcja związków aktywnych (aromatów i barwników).
Kliknij tutaj, aby przeczytać więcej o ekstrakcji z szafranu!
Zalecane urządzenie:
UP50H
Dokument referencyjny/badawczy:
Kadkhodaee et al. (2007): Ekstrakcja ultradźwiękowa związków aktywnych z szafranu. Acta Hortic. 739, 2007. 417-425.
Salmonella Senftenberg 775W Gr-
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa inaktywacja Salmonella Senftenberg 775W Gr- w buforze cytrynianowo-fosforanowym McIlvaine lub bulionie odżywczym.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Álvarez, I.; Manas, P.; Virto, R.; Condón, S. (2006): Inaktywacja Salmonella Senftenberg 775W falami ultradźwiękowymi pod ciśnieniem przy różnych aktywnościach wody. Int. J. Food Microbiol. 108/2006. pp. 218-225.
Ultradźwiękowa inaktywacja Salmonella Senftenberg 775W Gr- w buforze cytrynianowo-fosforanowym McIlvaine lub bulionie odżywczym.
Zalecane urządzenie:
UP100H
Dokument referencyjny/badawczy:
Álvarez, I.; Manas, P.; Virto, R.; Condón, S. (2006): Inaktywacja Salmonella Senftenberg 775W falami ultradźwiękowymi pod ciśnieniem przy różnych aktywnościach wody. Int. J. Food Microbiol. 108/2006. pp. 218-225.
Salvia miltiorrhiza bunge
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja związków biologicznie czynnych: Danshensu sodu i czterech tanshinonów (dihydrotanshione I, tanshinone I, cryptotanshinone i tanshinone IIA).
Zalecane urządzenie:
UP100H
Ekstrakcja związków biologicznie czynnych: Danshensu sodu i czterech tanshinonów (dihydrotanshione I, tanshinone I, cryptotanshinone i tanshinone IIA).
Zalecane urządzenie:
UP100H
Salvia Officinalis
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja związków aktywnych z szałwii lekarskiej (Salvia Officinalis) w czasie krótszym niż 2 godziny.
Zalecane urządzenie:
UP50H
Ekstrakcja związków aktywnych z szałwii lekarskiej (Salvia Officinalis) w czasie krótszym niż 2 godziny.
Zalecane urządzenie:
UP50H
surowica
Torbielowate wątroby, płuca i krew owiec (antygeny Echinococcus granulosus)
Aplikacja ultradźwiękowa:
Torbielowate wątroby owiec, płuca i dodatnia krew (antygeny Echinococcus granulosus u jagniąt): Próbka była następnie poddawana sonikacji przez 2 × 15 s na lodzie, aż nie były widoczne żadne nienaruszone protoskoleksy.
Zalecane urządzenie:
UP200S2 x 15 sek.
Dokument referencyjny/badawczy:
Tabar et al. (2009): Odpowiedź przeciwciał przeciwko płynowi hydatidowemu, protoskoleksowi i całemu ciału antygenów Echinococcus granulosus u jagniąt. Journal of Veterinary Research, tom 10, wydanie 3; 2009. 283-288.
Torbielowate wątroby owiec, płuca i dodatnia krew (antygeny Echinococcus granulosus u jagniąt): Próbka była następnie poddawana sonikacji przez 2 × 15 s na lodzie, aż nie były widoczne żadne nienaruszone protoskoleksy.
Zalecane urządzenie:
UP200S2 x 15 sek.
Dokument referencyjny/badawczy:
Tabar et al. (2009): Odpowiedź przeciwciał przeciwko płynowi hydatidowemu, protoskoleksowi i całemu ciału antygenów Echinococcus granulosus u jagniąt. Journal of Veterinary Research, tom 10, wydanie 3; 2009. 283-288.
Trioleinian sorbitantu, etanol (jako rozpuszczalnik) i proszek Bi-2212
Aplikacja ultradźwiękowa:
Zdeaglomerować zawiesinę zawierającą dyspergator Sorbitant Trioleate, etanol (jako rozpuszczalnik) i proszek Bi-2212.
Zalecane urządzenie:
UP200S; przez 3 min.
Dokument referencyjny/badawczy:
Mora et al. (2009): Wytwarzanie powłok nadprzewodzących na strukturalnych płytkach ceramicznych.
Zdeaglomerować zawiesinę zawierającą dyspergator Sorbitant Trioleate, etanol (jako rozpuszczalnik) i proszek Bi-2212.
Zalecane urządzenie:
UP200S; przez 3 min.
Dokument referencyjny/badawczy:
Mora et al. (2009): Wytwarzanie powłok nadprzewodzących na strukturalnych płytkach ceramicznych.
Izoflawony sojowe
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcja ultradźwiękowa izoflawonów sojowych w wodzie i rozpuszczalniku. Zwiększona wydajność ekstrakcji nawet o 15%.
Zalecane urządzenie:
UP200St
Dokument referencyjny/badawczy:
Rostagno et al. (2003), przywołane przez Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultradźwiękowy odzysk i modyfikacja składników żywności. W: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Ekstrakcja ultradźwiękowa izoflawonów sojowych w wodzie i rozpuszczalniku. Zwiększona wydajność ekstrakcji nawet o 15%.
Zalecane urządzenie:
UP200St
Dokument referencyjny/badawczy:
Rostagno et al. (2003), przywołane przez Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultradźwiękowy odzysk i modyfikacja składników żywności. W: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
białko sojowe
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ultradźwiękowa ekstrakcja białka sojowego w wodzie i alkaliach (wodorotlenek sodu). Zwiększona wydajność o 53%. Sonikacja inline okazała się bardziej wydajna jako ekstrakcja wsadowa (sonikacja inline dała o 23% wyższą wydajność niż sonikacja wsadowa).
Zalecane urządzenie:
UIP1000hd dla partii / zlewki i z reaktorem przepływowym do sonikacji inline.
Dokument referencyjny/badawczy:
Moulton i Wang (1982), przywołane przez Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultradźwiękowy odzysk i modyfikacja składników żywności. W: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Ultradźwiękowa ekstrakcja białka sojowego w wodzie i alkaliach (wodorotlenek sodu). Zwiększona wydajność o 53%. Sonikacja inline okazała się bardziej wydajna jako ekstrakcja wsadowa (sonikacja inline dała o 23% wyższą wydajność niż sonikacja wsadowa).
Zalecane urządzenie:
UIP1000hd dla partii / zlewki i z reaktorem przepływowym do sonikacji inline.
Dokument referencyjny/badawczy:
Moulton i Wang (1982), przywołane przez Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultradźwiękowy odzysk i modyfikacja składników żywności. W: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasound Technologies for Food and Bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Główki plemników (ludzkie)
Ogony plemników (ludzkie)
Stevia rebaudiana Bert.
Aplikacja ultradźwiękowa:
Ekstrakcję ultradźwiękową glikozydu stewiozydowego z próbek 10 g suchych liści Stevia rebaudiana o czterech rozmiarach cząstek (0,315 mm, 2 mm, 6,3 mm i pokruszonych suchych liści) zmieszano z różnymi rozpuszczalnikami: wodą destylowaną i mieszaninami woda/etanol (55% i 70%) o różnych stosunkach masy próbki do objętości rozpuszczalnika: 1/10, 1/8, 1/5 (w/v), a następnie poddano działaniu ultradźwięków w temperaturze pokojowej. Czas sonikacji: < 5 min. Zalecane urządzenie:
UP200St
Ekstrakcję ultradźwiękową glikozydu stewiozydowego z próbek 10 g suchych liści Stevia rebaudiana o czterech rozmiarach cząstek (0,315 mm, 2 mm, 6,3 mm i pokruszonych suchych liści) zmieszano z różnymi rozpuszczalnikami: wodą destylowaną i mieszaninami woda/etanol (55% i 70%) o różnych stosunkach masy próbki do objętości rozpuszczalnika: 1/10, 1/8, 1/5 (w/v), a następnie poddano działaniu ultradźwięków w temperaturze pokojowej. Czas sonikacji: < 5 min. Zalecane urządzenie:
UP200St
Skontaktuj się z nami! / Zapytaj nas!
Ten samouczek wyjaśnia, jaki typ sonikatora jest najlepszy do zadań związanych z przygotowywaniem próbek, takich jak liza, rozbijanie komórek, izolacja białek, fragmentacja DNA i RNA w laboratoriach, analiza i badania. Wybierz idealny typ sonikatora do swojego zastosowania, objętości próbki, liczby próbek i przepustowości. Hielscher Ultrasonics ma idealny homogenizator ultradźwiękowy dla Ciebie!
Jak znaleźć idealny sonikator do rozbijania komórek i ekstrakcji białek w nauce i analizie?
Wysokowydajne ultradźwięki dla każdego rozmiaru
Hielscher Ultrasonics cell disruptors i homogenizatory tkanek są dostępne w dowolnym rozmiarze dla dowolnej objętości. Niezależnie od tego, czy chodzi o sonikację małych próbek, próbek masowych, takich jak 96-dołkowe płytki, średniej wielkości objętości czy ładunki ciężarówek na godzinę, nasze portfolio oferuje idealny ultrasonograf do danego zastosowania. Kompaktowe, ręczne homogenizatory ultradźwiękowe są optymalne dla laboratoriów i badań, podczas gdy nasza seria przemysłowa obejmuje wszystko od 0,5 kW do 16 kW na procesor ultradźwiękowy. Dzięki możliwości instalacji jako klastry, ultradźwięki Hielscher mogą przetwarzać praktycznie każdą objętość. Wytrzymałość sprzętu ultradźwiękowego firmy Hielscher pozwala na pracę w trybie 24/7 przy dużych obciążeniach i w wymagających środowiskach.
Zaawansowane i inteligentne oprogramowanie pozwala na najwyższą kontrolę procesu i wygodę operatora. Wszystkie dane sonikacji są automatycznie zapisywane na wbudowanej karcie SD. Inne inteligentne funkcje obejmują wstępne ustawianie i zapisywanie parametrów sonikacji, połączenie LAN i zdalne sterowanie przez przeglądarkę.
Poniższa tabela przedstawia przybliżoną wydajność przetwarzania naszych sonikatorów laboratoryjnych do homogenizacji tkanek i innych zadań związanych z przygotowywaniem próbek:
| Polecane urządzenia | Wielkość partii | natężenie przepływu |
|---|---|---|
| Sonikator do płytek 96-dołkowych UIP400MTP | Płytki wielodołkowe / mikrotitracyjne | b.d. |
| Ultradźwiękowy CupHorn | CupHorn do fiolek lub zlewek | b.d. |
| GDmini2 | ultradźwiękowy reaktor mikroprzepływowy | b.d. |
| VialTweeter | 0.5-1,5 mL | b.d. |
| UP100H | 1 do 500mL | 10-200mL/min |
| UP200Ht, UP200St | 10 do 1000 ml | 20 do 200 ml/min |
| UP400St | 10 do 2000mL | 20-400mL/min |
| Ultradźwiękowy wytrząsacz sitowy | b.d. | b.d. |
ultrasonicator UP200Ht z 2 mm mikrotipem S26d2 do sonikacji małych próbek