多血小板血清の超音波調製
- 多血小板血漿(PRP)は、血小板が豊富に濃縮された血漿であり、医療およびエステチック治療に使用されます。
- 超音波溶解およびコンディショニングは、多血小板血漿を調製するための非常に効果的な方法です。
- ヒールシャー超音波は、血液治療の要件に一致する様々な超音波システムを提供しています(例えば、クリーンルームの内部および外部の準備のために)。
多血小板美容液
超音波処理は、成長因子を放出するために自家血清中の血小板を溶解するための信頼性が高く簡単な方法です。血小板由来画分は – 自家コンディショニングセラム(ACS)とも呼ばれます – 組織の修復や審美的な治療に使用されます。最適な結果を得るために、PRPは注入前に濃縮されます。
細胞増殖因子で濃縮血漿を調製するために、超音波処理は、細胞膜を溶解し、血小板からほぼ完全な細胞増殖因子を放出するための非常に効果的かつ効率的な方法である。超音波溶解とコンディショニングにより、抗凝固血液も使用できます。
超音波処理によるPRPのコンディショニングは、濃縮された成長因子を収量するための便利で費用対効果の高い方法です。
多血小板血漿(PRP)の超音波溶解
超音波溶解効果
血清の超音波治療は、閉じ込められた成長因子(成長因子AB(PDGF-AB)、成長因子AA(PDGF-AA)、成長因子BB(PDGF-BB)、血管内皮増殖因子(VEGF)、トランスフォーミング成長因子β(TGF-β)、上皮成長因子(EGF)、インスリン様成長因子(IGF)、上皮細胞成長因子ECGFおよび線維芽細胞性成長因子(FGF))を放出するために、血小板の均質な溶解をもたらす。血小板およびそれらのα顆粒は、の現象を使用して、超音波処理によって破壊される。 音響キャビテーション.血小板溶解に超音波キャビテーションを使用すると、反復凍結融解法の成長因子活性に対する悪影響の可能性が減少します。
超音波PRP調製のためのプロトコル
約16mLの新鮮な採取された自家血液サンプルをチューブ内で8〜10回穏やかに反転させ、血液と抗凝固剤がよく混合されるようにします。その後、サンプルを室温で1800gで20分間遠心分離します。遠心分離後、血小板細胞と単核細胞は、血漿層の下部に白っぽい層を形成します。これは多血小板血漿(PRP)として知られています。上層は、血小板乏血漿(PPP)として知られています。単核細胞は除去することも、サンプルに残すこともできます。多くの場合、単核細胞はPRPサンプルに留まり、汚染のリスクを伴う追加のステップを回避します。
注:自家PRPの超音波処理は、無菌条件下で実施する必要があります。
PRP と PPP は分離され、収集されます。PPPには1.5mLの10%塩化カルシウム溶液を添加し、PRPには0.5mLの5%エタノールを添加します。両方の懸濁液を穏やかに攪拌し、室温で5分間放置します。最後に、1mL PPPをPRP懸濁液に加え、フィブリン塊が形成されるまで放置します。
超音波処理: 形成された血小板ゲルは放出された成長因子の貯蔵庫として機能するため、利用可能な成長因子を放出するためには、フィブリンゲルを破壊する必要があります。超音波溶解および成長因子放出のためのパラメータは、以下の通りである:超音波処理 UP200HTの 又は UP200セント (200W、26kHz)ソノトロードS26d2でサンプルをチューブに入れます。血液サンプルの過熱を避けるために、超音波処理はパルスサイクルで行うことができます(例:10秒オン、30秒オフ)。サンプルは、温度が2の間で最適に保たれるように、冷却のために氷の上に置く必要があります – 5°Cです。 超音波処理後、サンプルを室温で5分間16000gで遠心分離する。上清は収集され、-70°Cで保存できます。
PRP画分の血小板濃度は1.7に富んでいました – 全血中の文献平均血小板数と比較すると、超音波処理法では4.5倍である。
PRPは、脂肪由来幹細胞療法(脂肪組織から超音波放出された自家幹細胞、PRPと混合し、修復のために患者の組織に注入します)。
超音波装置
ヒールシャー超音波は、洗練された信頼性の高い超音波技術の専門家です。当社の超音波装置は、溶解、抽出、サンプル調製に世界中で使用されています – 直接的および間接的に。 オートクレーブ また、 使い捨て アクセサリーは、 コンタミネーションフリー 自家血液サンプルの治療。当社のシステムのほとんどは、の超音波溶解に使用できます。 幹細胞 PRPは、超音波装置を経済的にさらに効率的にします。
以下の表は、多血小板血漿の調製に適した当社の超音波装置と、それらの推奨サンプル量をそれぞれ示しています。より大きな超音波装置とカスタマイズされたシステムも利用可能です。
| デバイス | パワー [W] | 周波数 [kHz] | 種類 | 内容量 [mL] | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| バイアルツイーター | 200 | 26 | スタンドアロン | 0.5 | – | 1.5 |
| UP50Hの | 50 | 30 | ハンドヘルドまたはスタンドマウント | 0.01 | – | 250 |
| UP100Hの | 100 | 30 | ハンドヘルドまたはスタンドマウント | 0.01 | – | 500 |
| UP200HTの | 200 | 26 | ハンドヘルドまたはスタンドマウント | 0.1 | – | 1000 |
| UP200セント | 200 | 26 | スタンドマウント | 0.1 | – | 1000 |
| UP400セント | 400 | 24 | スタンドマウント | 5.0 | – | 2000 |
| UP200St-ソノステップ | 200 | 26 | スタンドアロン | 30 | – | 500 |
| GDmini2の | 200 | 26 | コンタミネーションフリーフローセル | |||
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UP200St-TDトランスデューサーのGDmini2(200ワット)
文献/参考文献
- フォルトゥナート、T. M.;ベルトラミ、Ch.;エマニュエリ、C。;デバンク、PA:;Pula、G.(2016):血小板溶解物ゲルと内皮前駆細胞はin vitroで微小血管ネットワーク形成を刺激する:組織工学的意味。Sci. Rep. 6, 2016.
- ハミド、MSA;ユソフ、アシュリル;Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): [急性筋損傷に対する多血小板血漿(PRP):系統的レビュー]PLOS ONE第9巻、第2号、2014年。
知っておく価値のある事実
多血小板血漿
多血小板血漿には、成長因子AB(PDGF-AB)、血小板由来成長因子AA(PDGF-AA)、血小板由来成長因子BB(PDGF-BB)、血管内皮増殖因子(VEGF)、トランスフォーミング成長因子β(TGF-β)、上皮成長因子(EGF)、インスリン様成長因子(IGF)、上皮細胞成長因子ECGF、線維芽細胞性成長因子(FGF)が含まれており、これらは細胞の成長と再生に重要な刺激剤です。
自家コンディショニングセラム(ACS)
自家馴染血漿(ACP)は、自家血液から抽出された多血小板血漿で、さまざまな整形外科疾患や外科的処置での再生をサポートするために使用されます。コンディショニング血清は、血漿を他の血液成分(赤血球など)から分離し、濃縮することによって調製されます。ACPは多血小板血漿(PRP)です。PRPは、全血と比較して有意に高濃度の血小板を含む血漿の一種の総称です。全血から抽出されます。ACPの主成分には、血小板(血小板)と、治癒過程で重要な役割を果たすいくつかの成長因子が含まれます。他の多血小板血漿製剤とは異なり、ACPは好中球顆粒球などの白血球の濃度が低いという特徴があり、高濃度で存在すると治癒過程に悪影響を与える可能性があります。
多血小板血漿注射。
多血小板血漿は、再生医療や美容整形の注射剤として使用されています。PRPの適用は、筋肉の治癒と筋肉の回復の大幅な加速を約束します。さらに、炎症、関節炎、痛み、創傷、治癒の遅い開放創、重度の皮膚火傷の治療にも使用されています。PRPには高レベルの成長因子が含まれており、損傷した組織が修復される治癒細胞を刺激して保護します。
化粧品治療では、PRPは髪の成長、肌の再生(吸血鬼治療とも呼ばれます)を刺激するのに効果的であることが示されています。
血小板由来成長因子(PDGF)
血小板由来成長因子(PDGF)という用語は、PDGF-A、PDGF-B、PDGF-C、およびPDGF-Dの因子を指します。これは、4つのリガンド(PDGF-A、PDGF-B、PDGF-C、PDGF-D)と、PDGFR-αとPDGFR-βの2つの受容体からなるシグナル伝達ネットワークです。
成長因子、またはタンパク質は、細胞の成長と分裂を調節します。哺乳類の血清に含まれる主要なマイトジェンであり、血栓形成時に血小板から放出され、既存の血管組織から血管が成長する血管形成(血管新生)に重要な役割を果たしています。