Vérlemezkékben gazdag szérum ultrahangos előkészítése
- A vérlemezkékben gazdag plazma (PRP) vérlemezkékkel dúsított vérplazma, amelyet orvosi és esztétikai kezelésekhez használnak.
- Az ultrahangos lízis és kondicionálás nagyon hatékony módszer a vérlemezkékben gazdag plazma előállítására.
- A Hielscher Ultrasonics különböző ultrahangos rendszereket kínál, amelyek megfelelnek a vérkezelés követelményeinek (pl. A tiszta helyiség belső és külső előkészítéséhez).
vérlemezkékben gazdag szérum
Sonication egy megbízható és egyszerű módszer lizálni a vérlemezkék autológ vérszérum annak érdekében, hogy felszabadítsa a növekedési faktorok. A vérlemezke-eredetű frakciók – autológ kondicionált szérumként (ACS) is ismert – szövetjavításra vagy esztétikai kezelésekre használják. Az optimális eredmény elérése érdekében a PRP-t az injekció beadása előtt dúsítják.
Annak érdekében, hogy dúsított plazmát állítsanak elő sejtnövekedési faktorokkal, szonikáció nagyon hatékony és hatékony módszer a sejtmembránok lizálására és szinte a teljes sejtnövekedési faktorok felszabadítására a vérlemezkékből. Ultrahangos lízissel és kondicionálással még antikoagulált vér is használható.
A PRP kondicionálása szonikálással kényelmes és költséghatékony módja a koncentrált növekedési faktorok előállításának.
Ultrahangos lízis hatások
A vérszérum ultrahangos kezelése a vérlemezkék homogén lízisét eredményezi annak érdekében, hogy felszabadítsa a csapdába esett növekedési faktorokat (növekedési faktor AB (PDGF-AB), növekedési faktor AA (PDGF-AA), növekedési faktor BB (PDGF-BB), vaszkuláris endoteliális növekedési faktor (VEGF), transzformáló növekedési faktor β (TGF-β), epidermális növekedési faktor (EGF), inzulinszerű növekedési faktor (IGF), epiteliális sejtek növekedési faktor EKGF és fibroblasztikus növekedési faktor (FGF)). A vérlemezkéket és alfa-granulátumaikat szonikálással megzavarják, a Akusztikus kavitáció. Az ultrahangos kavitáció alkalmazása a vérlemezke-lízishez csökkenti az ismételt fagyasztás-olvadás módszer növekedési faktor aktivitására gyakorolt lehetséges negatív hatást.
Protokoll ultrahangos PRP előkészítéshez
Kb. 16 ml frissen gyűjtött autológ vérmintát óvatosan 8-10-szer invertálnak egy csőben, hogy a vér és az antikoagulánsok jól összekeveredjenek. Ezután a mintát szobahőmérsékleten 1800 g-n 20 percig centrifugáljuk. A centrifugálás után a vérlemezkék és a mononukleáris sejtek fehéres réteget képeznek a plazmaréteg alján, amelyet vérlemezkékben gazdag plazmának (PRP) neveznek. A felső réteg vérlemezke-szegény plazma (PPP) néven ismert. A mononukleáris cellák eltávolíthatók vagy a mintában maradhatnak. Gyakran előfordul, hogy a mononukleáris sejtek a PRP mintában maradnak, hogy elkerüljék a szennyeződés kockázatát hordozó további lépéseket.
Megjegyzés: Az autológ PRP ultrahangos kezelését steril körülmények között kell elvégezni.
A PRP-t és a PPP-t elkülönítik és gyűjtik. A PPP-hez 1,5 ml 10%-os kalcium-klorid oldatot, míg a PRP-hez 0,5 ml 5%-os etanolt adunk. Mindkét szuszpenziót óvatosan rázzuk, és szobahőmérsékleten 5 percig állni hagyjuk. Végül 1 ml PPP-t adunk a PRP szuszpenzióhoz, és hagyjuk állni, amíg fibrinrög képződik.
Ultrahangos kezelés: Mivel a képződött vérlemezkegél a felszabaduló növekedési faktorok tartályaként működik, a fibringélt meg kell szakítani a rendelkezésre álló növekedési faktorok felszabadítása érdekében. Az ultrahangos lízis és a növekedési faktor felszabadulásának paraméterei a következők: Sonicate egy UP200Ht vagy UP200St (200W, 26kHz) sonotrode S26d2 a minta a csőben. A vérminta túlmelegedésének elkerülése érdekében az ultrahangos kezelést pulzáló ciklusokban lehet elvégezni (pl. 10 mp. be, 30 mp. ki). A mintát jégre kell helyezni hűtés céljából, hogy a hőmérséklet optimálisan 2 között maradjon – 5°C. Ultrahangos kezelés után a mintát centrifugáljuk 16000 g-on 5 percig. szobahőmérsékleten. A felülúszót összegyűjtik és -70 °C-on tárolhatják.
A vérlemezke-koncentráció a PRP-frakcióban 1,7-re dúsult – 4,5-szeres az ultrahangos módszerben, összehasonlítva az irodalommal átlagos vérlemezkeszám a teljes vérben.
A PRP-t zsírból származó őssejtterápiával (ultrahanggal felszabadult autológ őssejtek zsírszövetből, PRP-vel keverve, és javítás céljából visszafecskendezve a beteg szövetébe).
Ultrahangos berendezések
A Hielscher Ultrasonics a kifinomult és megbízható ultrahangos technológia szakértője. Ultrahangos készülékeinket világszerte használják lízishez, extrakcióhoz és mintaelőkészítéshez – közvetlen és közvetett. Autoklávozható valamint Egyszer használatos A tartozékok biztosítják a szennyeződésmentes autológ vérminták kezelése. A legtöbb rendszerünk használható ultrahangos lízisre Őssejtek és PRP, amely gazdaságilag még hatékonyabbá teszi ultrahangos készülékeinket.
Az alábbi táblázat felsorolja ultrahangos készülékeinket, amelyek alkalmasak vérlemezkékben gazdag plazma előállítására, illetve azok ajánlott mintatérfogatát. Nagyobb ultrahangos készülékek és testreszabott rendszerek is rendelkezésre állnak.
Eszköz | Teljesítmény [W] | Frekvencia [kHz] | Típus | Térfogat [mL] | ||
---|---|---|---|---|---|---|
VialMagassugárzó | 200 | 26 | Önálló | 0.5 | – | 1.5 |
UP50H | 50 | 30 | kézi vagy álló | 0.01 | – | 250 |
UP100H | 100 | 30 | kézi vagy álló | 0.01 | – | 500 |
UP200Ht | 200 | 26 | kézi vagy álló | 0.1 | – | 1000 |
UP200St | 200 | 26 | állványra szerelve | 0.1 | – | 1000 |
UP400ST | 400 | 24 | állványra szerelve | 5.0 | – | 2000 |
UP200St-SonoStep | 200 | 26 | Önálló | 30 | – | 500 |
GDmini2 | 200 | 26 | szennyeződésmentes áramlási cella |
Kérjük, vegye fel velünk a kapcsolatot még ma! Örömmel segítünk megtalálni az optimális ultrahangos készüléket!
Kapcsolat! / Kérdezzen tőlünk!
Irodalom/Hivatkozások
- Fortunato, T. M.; Beltrami, Ch.; Emanueli, C.; De Bank, P.A:; Pula, G. (2016): A vérlemezke-lizátum gél és az endothel progenitorok stimulálják a mikrovaszkuláris hálózat kialakulását in vitro: tissue engineering implications. Sci. Rep. 6, 2016.
- Hamid, MSA; Yusof, Ashril; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): Vérlemezkékben gazdag plazma (PRP) akut izomsérüléshez: szisztematikus áttekintés. PLOS ONE 9. kötet, 2. szám, 2014.
Tények, amelyeket érdemes tudni
Vérlemezkékben gazdag plazma
A vérlemezkékben gazdag plazma növekedési faktor AB (PDGF-AB), vérlemezke-eredetű növekedési faktor AA (PDGF-AA), vérlemezke-eredetű növekedési faktor BB (PDGF-BB), vaszkuláris endoteliális növekedési faktor (VEGF), transzformáló növekedési faktor β (TGF-β), epidermális növekedési faktor (EGF), inzulinszerű növekedési faktor (IGF), epiteliális sejtek növekedési faktora EKGF és fibroblasztikus növekedési faktor (FGF), amelyek fontos stimulánsok a sejtek növekedéséhez és megújulásához.
Autológ kondicionált szérum (ACS)
Az autológ kondicionált plazma (ACP) egy vérlemezkékben gazdag plazma, amelyet autológ vérből vonnak ki, és amelyet különböző ortopédiai állapotok és sebészeti eljárások regenerálódásának támogatására használnak. A kondicionált szérumot úgy állítják elő, hogy a plazmát elválasztják a vér többi komponensétől (például eritrocitáktól), és koncentrálják. Az ACP vérlemezkékben gazdag plazma (PRP). A PRP egy általános kifejezés egy olyan plazmatípusra, amely szignifikánsan nagyobb koncentrációban tartalmaz trombocitákat, mint a teljes vér. Teljes vérből nyerik ki. Az ACP fő összetevői közé tartoznak a trombociták (vérlemezkék) és számos növekedési faktor, amelyek fontos szerepet játszanak a gyógyulási folyamatban. Más vérlemezkékben gazdag plazmakészítményekkel ellentétben az ACP-t a fehérvérsejtek, például a neutrofil granulociták alacsony koncentrációja jellemzi, amelyek nagy koncentrációban károsak lehetnek a gyógyulási folyamatra.
vérlemezkékben gazdag plazmainjekciók
A vérlemezkékben gazdag plazmát injekcióként használják a regeneratív gyógyászatban, valamint a kozmetikai eljárásokban. A PRP alkalmazása az izomgyógyulás és az izomhelyreállítás jelentős felgyorsítását ígéri. Ezenkívül sikeresen alkalmazzák gyulladás, ízületi gyulladás, fájdalom, sebek, lassan gyógyuló nyílt sebek és súlyos bőrégések kezelésére. A PRP magas szintű növekedési faktorokat tartalmaz, amelyek stimulálják és védik a gyógyító sejteket, amíg a sérült szövet helyreáll.
A kozmetikai kezelések esetében a PRP hatékonynak bizonyult a hajnövekedés serkentésében, a bőr megújulásában (más néven vámpírkezelés).
Vérlemezke-eredetű növekedési faktorok (PDGF)
A vérlemezke-eredetű növekedési faktor (PDGF) kifejezés a PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C és PDGF-D faktorokra utal. Ez egy négy ligandumból (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C és PDGF-D) és két receptorból, PDGFR-alfa és PDGFR-béta jelátviteli hálózata.
A növekedési faktorok vagy fehérjék szabályozzák a sejtek növekedését és osztódását. Az emlősök szérumában található fő mitogénként, amely a vérrögképződés során szabadul fel a vérlemezkékből, jelentős szerepet játszik az erek kialakulásában (angiogenezis), az erek növekedésében a már meglévő véredényszövetből.