Ultraäänikudoksen homogenisaattorit
- Ultrasonication on turvallinen & tehokas menetelmä kudosten homogenoimiseksi.
- Ultraäänisovelluksiin kuuluvat valmistuskudos ja suspensiot, proteiinien, DNA / RNA: n ja aktiivisten yhdisteiden uuttaminen sekä entsyymien ja hiivojen aktivointi / inaktivointi.
- Koetintyyppisten ultraäänihomogenisaattoreiden tarkka hallittavuus mahdollistaa kudosnäytteiden luotettavan valmistuksen.
Kudosten homogenisointi ultraääniantureilla
Kudoksen homogenisointi on näytteenvalmistusprosessi, jossa eläin- ja kasvisolut tai mikro-organismit valmistetaan ennen solunsisäisen aineen, kuten proteiinien, DNA: n tai RNA: n, uuttamista. Solukalvo on repeytyttävä solun sisällön vapauttamiseksi. Soluseinän rikkomisen jälkeen solunsisäiset makromolekyylit kelluvat puskuriliuoksessa niin, että organellit, proteiinit ja DNA / RNA tulevat saataville. Ultraäänikudoshomogenisaattorit ja solujen häiritsijät ovat erittäin tehokkaita työkaluja solujen häiriöihin, lyysiin ja uuttamiseen.
Koetintyyppiset ultraäänilaitteet (esim. 200 watin tehokas UP200St) ovat luotettavia kudoshomogenisaattoreita ja niitä käytetään laajalti näytteen valmistuksessa.
Ultraäänikudoshomogenisaattorit vs. vaihtoehtoiset lyysitekniikat
Voit kysyä itseltäsi, mikä solujen hajoamistekniikka ja mikä kudosten homogenisointilaite on paras vaihtoehto laboratoriollesi. Alla on muutamia argumentteja, jotka puhuvat ultraäänilyysin ja kudosten homogenisoinnin puolesta, koska ultraäänellä on useita etuja vaihtoehtoisiin homogenisointimenetelmiin verrattuna:
- Tehokkuus: Ultraäänihomogenisointi on nopea ja tehokas menetelmä kudosten ja solujen häiritsemiseksi. Ultraäänikudoshomogenisaattorit käyttävät akustisen kavitaation toimintaperiaatetta. Tämä menetelmä on erittäin tehokas ja voi häiritä soluja muutamassa sekunnissa. Koska intensiteettitasoa voidaan säätää lievästä voimakkaaseen, sonikaatio on erityisen tehokas koville tai kuituisille kudoksille, joita on vaikea homogenisoida muilla menetelmillä.
- Vältä ristikontaminaatiota: Hielscher tarjoaa tehokkaita ultraäänikudoshomogenisaattoreita, jotka valmistavat näytteen epäsuorassa sonikaatiohoidossa. Hielscher tarjoaa UIP400MTP (ihanteellinen mikrotitteri- ja monikuoppalevyille) sekä VialTweeter ja CupHorn (ihanteellinen injektiopulloille, putkille ja dekantterilasille) Hielscher tarjoaa ultraäänisolujen häiriölaitteita kosketuksettomaan homogenisointiin, mikä vähentää näytteiden välisen ristikontaminaation riskiä. Se minimoi myös epäpuhtauksien pääsyn riskin hiontapinnoista tai muista homogenisointilaitteista.
- Joustavuus: Ultraäänihomogenisointia voidaan käyttää erilaisilla näytekokoilla ja tilavuuksilla, pienistä määristä suuriin kudosnäytteisiin. Lisäksi ultraäänihomogenisointi soveltuu myös monenlaisiin näytetyyppeihin, mukaan lukien kasvikudokset, eläinkudokset ja mikrobiviljelmät. Ultrasonicationin voimakkuutta ja kestoa voidaan säätää optimoimaan häiriöiden taso erityyppisille kudoksille.
- Toistettavuus: Ultraäänihomogenisointi tarjoaa johdonmukaisia tuloksia ja mahdollistaa homogenointiparametrien, kuten tehontuoton ja sonikaatioajan, tarkan hallinnan. Tämä auttaa varmistamaan kokeellisten tietojen toistettavuuden ja tarkkuuden.
- Biomolekyylien säilyttäminen: Koetintyyppinen ultrasonication on ei-lämpökäsittely. Tämä tarkoittaa, että sen vaikutus ei perustu lämpöön. Jokainen mekaaninen käsittely tuottaa kuitenkin lämpöä termodynamiikan toisen lain mukaisesti. Tämä tarkoittaa, että näyte lämpenee pidempien sonikaatioaikojen aikana. Hielscherin huipputekniset ultraäänilaitteet on varustettu lämpötila-antureilla ja älykkäällä lämpötilan seurantaohjelmistolla. Kehittyneet jäähdytysvaihtoehdot mahdollistavat lämmön hajoamisen estämisen ja auttavat säilyttämään lämpöherkkien biomolekyylien, kuten entsyymien ja proteiinien, aktiivisuuden.
- Aikaa säästävä: Koetintyyppisen ultrasonicationin korkea hyötysuhde mahdollistaa nopean kudoksen homogenisoinnin, mikä säästää aikaa verrattuna muihin menetelmiin, jotka vaativat kudoksen laajempaa fyysistä manipulointia.
Ultraäänikudoksen homogenisointi tarjoaa useita etuja vaihtoehtoisiin homogenointimenetelmiin verrattuna. Siksi ultraäänikudoshomogenisaattorit ovat edullinen solujen häiriötekniikka erilaisissa tutkimus- ja teollisissa sovelluksissa.
Esimerkki kudosten homogenointiprotokollasta, jossa käytetään ultraäänianturia:
Ultrasonicators helpottaa kudosten homogenisointia yksinkertaisella toiminnalla ja nopealla homogenointimenettelyllä. Samalla ultraääniprosessiparametreja voidaan ohjata ja seurata vastavuoroisesti niin, että tulokset ovat luotettavia ja toistettavissa.
Materiaalit:
- Kudosnäyte (esim. maksa, aivot, lihas)
- Puskuri (esim. PBS, Tris-HCl)
- Proteaasi-inhibiittori cocktail
- Ultraäänihomogenisaattori (koettimen tyyppi)
- Jää
- Mikrosentrifugiputket
- Pipetit
Ultraäänikudoksen homogenisoinnin protokolla:
Huomautus: Sonikoinnin kesto ja intensiteetti on ehkä optimoitava kudostyypin, iän ja terveydentilan sekä erityisten loppupään sovellusten mukaan. On myös tärkeää valita huolellisesti puskuri, proteaasi-inhibiittorit ja muut lisäaineet homogenaatin saannon ja laadun optimoimiseksi.
Ultraäänikudoksen homogenisaattori UP200Ht 2 mm: n sarvella / anturilla solujen häiriöihin, lyysiin, solujen homogeniatsioon ja liukoisuuteen sekä proteiinien uuttamiseen.
Hielscherin ultraäänikudoshomogenisaattoreiden tärkeimmät edut
- nopea ja tehokas jauhatus, homogenointi, lyysi & solujen häiriöt tai uuttaminen voimakkaalla ultraäänikavitaatiolla
- helppo ja intuitiivinen käyttö ja käyttö (valitse analoginen tai digitaalinen versio)
- tuotteen kosketuspintojen helppo puhdistaa huuhtelemalla sonotrode sonikaatiossa (CIP clean-in-place / SIP steriloida paikallaan)
- äänisuojakotelo (laboratoriolaitteiden äänisuojakotelo on valmistettu kokonaan akryylilasista täyden näkyvyyden takaamiseksi mistä tahansa kulmasta)
- prosessiparametrien täydellinen hallinta laitteen digitaalisen kosketusnäytön (digitaaliset ultraäänilaitteet) tai tehomittarin (analogiset laitteet) kautta
- integroitu lämpötilan säätö (tärkeää lämpöherkille, labiileille kudosnäytteille)
- Homogenointiajon tauot voidaan määrittää yksilöllisesti ja esiasettaa digitaaliseen valikkoon
- kaikki digitaaliset laitteet on varustettu automaattisella tietojen tallennuksella (integroidulla SD/USB-ComboCard-kortilla), kytkettävällä lämpötila-anturilla ja selaimen kaukosäätimellä.
- Usean näytteen käsittely VialTweeter, CupHorn tai käyttämällä 4- tai 8-sormisia sonotrodeja (esim. integroitavaksi laboratoriorobottiprosesseihin)
- Pienimuotoisiin ja suuriin sovelluksiin
Näytteen valmistelu ultraäänianturi UP100H.
Alla oleva taulukko antaa sinulle viitteitä ultraäänikudoshomogenisaattoreidemme likimääräisestä käsittelykapasiteetista solujen hajoamiseen, lyysiin ja uuttamiseen:
| Erän tilavuus | Virtausnopeus | Suositellut laitteet |
|---|---|---|
| monikuoppaiset levyt | N/a | UIP400MTP |
| injektiopullot, pieni dekantterilasi | N/a | Ultraääni CupHorn |
| Jopa 10 injektiopulloa | N/a | VialTweeter |
| 1 - 500 ml | 10 - 200 ml / min | UP100H |
| 10 - 2000ml | 20–400 ml/min | UP200Ht, UP400St |
| 0.1 - 20L | 0.2–4 l/min | UIP2000hdT |
Ota yhteyttä! / Kysy meiltä!
Ultraääni CupHorn suljettujen putkien ja injektiopullojen voimakkaaseen sonikointiin näytteiden steriiliä homogenointia varten.
Etsi optimaalinen ultraäänikudoshomogenisaattori sovellukseesi
Hielscherin ultraäänikudoshomogenisaattoreita on saatavana ultraäänilähtöalueella välillä 50W - 16,000W (16kW).
Laboratoriotyöntekijät ovat tyytyväisiä Hielscherin ultraäänilaboratoriohomogenisaattoreiden yksinkertaiseen ja intuitiiviseen toimintaan. Erityisvaatimuksista riippuen Hielscher-laitteissa on digitaalinen tai analoginen ohjaus.
- The VialTweeter on tehokas ultraäänihomogenisaattori, joka mahdollistaa jopa 10 injektiopullon tai koeputken samanaikaisen sonikoinnin samalla intensiteetillä. Epäsuoran sonikoinnin vuoksi ristikontaminaatio ja näytteen menetys vältetään kokonaan. Puhdistus ja desinfiointi vähenevät minimiin kertakäyttöisten injektiopullojen käytön vuoksi. Lohko sonotrode on autoklaavissa.
- UIP400MTP levy-sonikaattori on ihanteellinen, kun työskentelet mikrotiitteri- ja monikuoppalevyjen, kuten 96-kuoppalevyjen, kanssa. Aseta multiwell-levy tai petrimalja UIP400MTP ja kaikki näytteet sonikoidaan tasaisesti. UIP400MTP Plate-Sonicatorin avulla korkean suorituskyvyn näytteenkäsittely on yksinkertaista ja tehokasta!
- Koetintyyppisten laboratorioultraäänilaitteiden valikoimasta homogenisaattorit voidaan valita 50 watilla, 100 watilla, 200 watilla ja 400 watilla.
UP50H (50W)
UP100H (100W)
UP200Ht / UP200St (200W)
UP400St (400W)
Ultraäänikudoshomogenisaattoreiden käyttö ja käyttö
Ultraäänihomogenisaattoreita käytetään yleisesti kudosten jauhamiseen, solujen häiriöihin & biologisten näytteiden lyysi ja homogenisointi ennen solunsisäisen aineen uuttamista molekyylialueella. Näytteiden kontrolloidulla sonikaatiolla kaikki vaiheet lyysistä uuttamiseen ja homogenointiin voidaan suorittaa käyttämällä samaa ultraäänisolujen häiritsijää.
Ultraäänihomogenisaattoreiden suuri etu on helposti säädettävä tehonsyöttö ja sonikaatiointensiteetti. Hielscherin ultraäänisolujen häiritsijät (lyserit) mahdollistavat sonikaatiointensiteetin hallinnan säätämällä amplitudia 20%: sta 100%: iin.
Vaihtoehtoisesti jatkuvalle toiminnalle ultraäänihomogenisaattori voidaan asettaa syklitilaan, esimerkiksi lämpöherkän kudoksen sonikaatioon. Sonikaatio pulssitilassa tarkoittaa, että ultraäänilaite tuottaa voimakkaita ultraääniaaltoja jaksoittain. Käyttäjä voi asettaa yksilöllisesti sonikaatiojakson keston ja lepoajan.
At pulssi sonikaatio, lepoaikana sonikoitu materiaali voi palata lepotilaansa ja näyte voi jäähtyä (käyttämällä lepoaikaa lämmöntuottoon). Näin käsittelyn intensiteetti voidaan asettaa tarkasti kudoksen mukaan ja ei-toivottu näytteen kuumennus vähenee.
Ultraäänikudoshomogenisaattorit ovat vankkoja ja käyttäjäystävällisiä ja tuottavat samalla luotettavia tuloksia, jotka takaavat toistettavuuden, koska kaikki tärkeät prosessiparametrit ovat täysin hallinnassa.
Ultraäänikudoksen jauhamisen, solujen häiriöiden, lyysin, uuttamisen ja homogenoinnin yleisiä sovellusalueita löytyy biologisista ja farmaseuttisista laboratorioista, mikrobiologiasta, proteomiikasta ja genomitutkimuksesta (esim. proteiinien vapautuminen ennen länsimaista blottausta ja entsyymiin liittyvä immunosorbenttimääritys ELISA), mutta myös kasvitieteellisten uutteiden ja bioaktiivisten yhdisteiden tuotannossa elintarvike-, lääke- ja kosmetiikkateollisuudelle.
- Klikkaa tästä saadaksesi erityisiä prosessisuosituksia näytteen valmistelusta, kudosten homogenoinnista, lyysistä ja uuttamisesta (esim. solut, bakteerit, itiöt, aktiiviset yhdisteet)!
- Lue täältä, miksi sonikaattorit ovat välttämätön työkalu proteomiikkatutkimukseen!
- Opi, miten sonikaatio helpottaa genomitutkimusta!
Kirjallisuus / Viitteet
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.
Faktoja, jotka kannattaa tietää
Ultraäänikudoshomogenisaattoreita kutsutaan usein koettimen sonikaattoriksi, sonic lyseriksi, ultraäänihäiritsijäksi, ultraäänihiomakoneeksi, sono-ruptoriksi, sonifieriksi, sonic dismembratoriksi, solujen häiritsijäksi, ultraäänidispergointiaineeksi tai dissolveriksi. Eri termit johtuvat erilaisista sovelluksista, jotka voidaan täyttää sonikaatiolla.
Hielscher Ultrasonics valmistaa korkean suorituskyvyn ultraäänihomogenisaattoreita sekoitussovelluksiin, dispersioon, emulgointiin ja uuttamiseen laboratorio-, pilotti- ja teollisessa mittakaavassa.