Hielscher Ultra ääni tekniikka

C. Elegans -näytteiden ultraäänivalmiste

C. elegans, nematodimato, on laajalti käytetty malliorganismi biologiassa. Näytteen valmistaminen ennen analysointia edellyttää lyysiä, proteiinin ja lipidin uuttamista sekä RNA:n pirstoutumista, joka voidaan luotettavasti suorittaa sonikaatiolla. Ultraäänisolujen hajotin on luotettava, hienostunut ja helppokäyttöinen laite C. elegans -näytteiden nopeaan valmistukseen.

C. Elegans -näytteiden ultraäänivalmiste

C. eleganit ovat pyöreitä matoja, joita käytetään laajalti tutkimuslaboratorioissa genomiikan, kehitysbiologian ja sairauksien tutkimiseen. Monilla C. elegansin perimän geeneillä on toiminnallisia vastinia ihmisillä. Näin ollen nematodimato on erittäin hyödyllinen malli ihmisten sairauksille. Muita C. elegansin laajan käytön etuja ovat sen helppo ja halpa viljely bakteereja sisältävillä levyillä (esim.
Proteiini- ja rasva-analyysit ovat säännöllisiä toimenpiteitä laboratorioissa, ja ultraääninäytteiden valmistus on vakiintunut menetelmä C. elegans -nematodien lyseoimiseksi kaikissa kehitysvaiheissa (eli alkioissa, toukissa L1-L4, aikuiset). Koska C. eleganeja käytetään myös proteiinien ilmentymisjärjestelmänä kohdennettujen proteiinien yli-ilmentämiseen, tarvitaan luotettava, toistettavissa oleva lyysi- ja proteiiniuuttomenetelmä, joka antaa korkean proteiinituotoksen. Ultraäänisolujen häiriö- ja poistojärjestelmiä on saatavana anturityyppisinä homogenaattoreina ja moninäytteisinä ultraääniaineina. Hielscher Ultrasonics tarjoaa kätevän näytteen valmistelun ja kaikenlaisia näytekokoja, ja siinä on ihanteellinen ultraäänisolujen hajotin laboratoriomenettelyyn.
C. elegans is a widely used model organism in biological research. Ultrasonic lysis is a sophisticated, reliable, reproducible and rapid technique to prepare high-quality protein extracts from C. elegans.

Ultraääni C. elegans Lysis for

  • Mato homogenaattien valmistus
  • Proteiinin uuttaminen
  • Lipidien uuttaminen
  • Proteiinin kvantifiointi
  • Immunoprecipitaatio
  • Länsi-blotting
  • RNA:n uuttaminen
  • Entsymaattiset määritykset
Sonotrode MTP-24-8-96:ssa on kahdeksan ultraäänianturia mikrotitterilevyjen kaivojen sonikaatioon.

Sonotrode MTP-24-8-96:ssa on kahdeksan ultraäänianturia mikrotitterilevyjen kaivojen sonikaatioon.

Informaatio pyyntö




Huomaa, että Tietosuojakäytäntö.


Ultraääniprotokollat C. Elegansin häiriöille ja lyyseille

C. elegansin ultraäänihomgenisointi ja lyysi sekä sitä seuraava proteiini- ja lipidiuutto voidaan suorittaa vaihtelevilla menettelyillä käyttämällä erilaisia homogenisointi- ja lyysipuskureita jne. Kaikilla lyysiprotokollilla on yhteistä se, että näytteet on pidettävä jatkuvasti jäässä proteiinin hajoamisen estämiseksi. Alla esittelemme sinulle luotettavia ja nopeita ultraäänilyysi- ja uuttoprotokollia korkealaatuisten proteiini- tai lipidipitoisten C. elegans -näytteiden valmistamiseksi.

Edut Ultrasonic C. elegans Lysis

  • luotettava
  • toistettavissa
  • tarkastitemperature-ohjattu
  • luotettava prosessinohjaus
  • hellävarainen menetelmä
  • helppo levittää
  • turvallinen

Ultraääniproteiinin uuttaminen C. elegans -näytteistä

C. elegans -matojen ultraäänilyysi ja proteiiniuutto voidaan suorittaa eri protokollilla. Alla esittelemme sinulle muutamia luotettavia ja nopeita lyysiprotokollia toistettavan proteiinin uuttamisen tuloksia varten.

Sytosoliuutteen nopea esiparatointi C. elegans Worms by Sonication

Seuraavalla protokollalla voit valmistaa C. elegans -lysaatteja alle 30 minuutissa.
Kokoelma C. eleganeja
Valitse haluamasi C. elegans -madot 1,5 ml: n putkifosfaattipuskuroituun keittosuolaliuokseen (PBS) tai pese ne levyltä, jossa on 1,5 ml PBS. Sentrifugoi 1min klo 2000rpm pelletille. Pidä näytteet aina jäissä.
Pese sitten matoja kahdesti PBS: llä.
Pese matot sen jälkeen kahdesti ddH:lla2O.
Matoja sekoitetaan uudelleen vähintään 500 00:ssa homogenisointipuskuria (HB). Matonäytteet ovat nyt valmiita ultraäänilyysiin.
Proteiiniuutteen laadun parantamiseksi kannattaa ehkä vähentää bakteerien kontaminaatiota pesemällä matoja 5 minuutin 1,5 minuutin pitoisuudella PBS:ssä ja steriilissä, erittäin puhtaassa vedessä (ddH2O) tai suorittaa sakkaroosin kellumisen. Pidä matonäytteet jatkuvasti jäällä.

Ultraääni C. elegans Lysis -protokolla

  • Varmista, että valmistelet ultraäänilaitteen etukäteen niin, että ultraäänihomogenointiaine on käyttövalmis (anturi asennettu, sonikaatio-ohjelma esiasennetaan).
  • Ultrasonicator UP200Ht (200 watts, 26kHz) with microtip S26d2 for the preparation of biological samplesJos ultraäänilaite on seisassa, aseta jääkylpy näyteputkilla ultraäänianturin alle ja aseta ultraäänianturi 1,5 ml:n putkeen.

  • Jos C. elegans lysis on UP200St tai UP200Ht, ultraääni on tehtävä mikrovihjeellä (esim. 2mm anturi S26d2; katso kuva vasemmalla) 40% amplitudilla 1 sekunnin ajan 30 sekunnin taukojen välillä. 5 sonikaatiosykliä jokaista sekuntia kohti 30 sekunnin tauolla ovat ihanteellisia C. elegans -lyysiin. Jos suoritat lyysin ensimmäistä kertaa, voit tarkistaa lyysien etenemisen pienissä määräosissa näytettä jokaisen pulssin jälkeen mikroskoopilla.
  • Lyysi suoritetaan onnistuneesti, kun matoja häiritään. Ylisynkarointi johtaa ytimen rikkoutumiseen ja tulee näkyviin, kun näyte muuttuu viskoosiksi tai vaahtoaa. Näytteiden hajoamisen estämiseksi käytä tarvittaessa enemmän pulsseja. Älä lisää jokaisen ultraäänipulssisyklin aikaa korkealaatuisten proteiiniuutteiden saamiseksi.
  • Tyhjennä solulysaatti sentrifugoimalla ultraäänellä lysoituja matoja 14 000 sekunnissa 10 minuutin 4 °C:ssa.
  • Siirrä sitten supernatantti uuteen putkeen ja valmistaudu immunoprecipitaatioon tai muihin määrityksiin.

Huomautus homogenointipuskurista: Valmistele homogenointipuskuri yllä olevaa ultraäänilyysiprotokollaa varten seuraavasti:

  • 15 mM Hepes pH 7,6 – 15 ml 0,5 M
  • 10 mM KCl – 2,5 ml 2 M:aa
  • 1,5 mM MgCl2 – 0.75 ml 1 M:ää
  • 0.1 mM EDTA – 100 ul 0,5 M
  • 0.5 mM EGTA – 2,5 ml 0,1 M:aa
  • 44 mM sakkaroosia – 14,7 ml 50 %
  • Lisää heti ennen käyttöä: 1mM DTT – 1000x/ 1M
  • sekä proteaasinestäjä

C. elegansin ultraäänilyysi kvantitatiivisen affiniteettien puhdistusmäärityksille

C. elegans-alkiot (∼2 miljoonaa per replikaatti) korjattiin juuri biologisessa kolmikanta-aineessa valkaisemalla nuoria gravid-hermafrodiitteja ja sonicated jäällä (sykli: 0,5 s, amplitudi: 40–45%, 5 lyöntiä/istunto, 5 istuntoa, istuntojen välinen aika: 30 s; UP200S ultraääniprosessori mikrokärjellä S26d2 (Hielscher Ultrasonics GmbH)) lyysipuskurissa (kokonaistilavuus: ∼600 μl; 50 mm Tris-HCl, pH 7,4, 100 mm KCl, 1 mm MgCl2, 1 mm EGTA, 1 mm DTT, 10% glyseroli, proteaasinestäjäseos, 0, 1% nonidet P- 40 - korvike). Sonikoinnin jälkeen Nonidet P- 40 - korvike lisättiin 1%: iin ja lysaatit inkuboitiin pään yli hännän pyörimisellä 4 °C: ssa 30 minuutin ajan, minkä jälkeen sentrifugoitiin 20 000 × g: ssa 20 minuutin ajan 4 °C: ssa. Puhdistetun lysaatin lysaatti siedettiin häiritsemättä ylempää lipidikerrosta ja halkaistiin puoleen joko anti-GFP-agaroosimakeiksi tai tukkeutuneiksi kontrollipinnoiksi (40–50 μl). Kun pää oli pyörinyt hännän yli 4 °C:ssa 60–90 minuutin ajan, läjät pestiin kerran lyysipuskurilla, joka sisälsi 0,1 % nonidet P-40 -korviketta, sen jälkeen kaksi kertaa pesua joko puskurissa I (25 mm Tris-HCl, pH 7,4, 300 mm NaCl, 1 mm MgCl2) tai puskurissa II (1 mm Tris-HCl, pH 7,4, 150 mm NaCl, 1 mm MgCl2) tai molemmissa. GFP:MBK-2-alasvedetessä tehtiin kaksi erillistä koetta erilaisilla pesuolosuhteilla. Proteiinit eluvattiin kiertoradalla ravistamalla 50 μl 6 m ureaa/2 M thioureaa huoneenlämmössä. MBK-1::GFP-alasvedoskokeissa proteiinit eluedään kahdesti ravistamalla 50 μl 8 m guanidiniumkloridia 90 °C:ssa, minkä jälkeen etanoli saostui. Elued-proteiininäytteet sulatettiin liuoksessa.
(vrt. Chen et ai., 2016)

VialTweeter at the ultrasonic processor UP200ST

VialTweeter moninäytevalmisteyksikkö 10 koeputken samanaikaista sonikaatiota varten.

Ultraääni mato homogenisointi ja lyysi

C.elegans-lyysi- ja proteiiniuuttomenettelyssä kerättiin 30 000 asianomaisen vaiheen nemotodia näytettä kohti ja pestiin jääkylmällä S-tyvillä, keskitetään sentrifugoimalla 1500 kierrosta minuutissa 2 minuutin ajan, pestään kuusi kertaa jääkylmällä S-tyvillä jäännösbakteerien poistamiseksi ja varastoidaan sitten jäälle käyttövalmiiksi. Proteiinin uuttamiseksi gravid-aikuiset madot saivat muodostaa kompaktin pelletin viimeisen S-tyvipesun jälkeen. Tämän jälkeen matopelletit sekoitettiin 1 ml:aan jääkylmää uuttopuskuria [20 mM kaliumfosfaattia, pH 7,4, 2 mM EDTA, 1% Triton- X- 100: aa, proteaasinestäjiä (Sigma P2714)] ja proteesit välittömästi.
∼30 000 gravid-adult-matoa (vastaa ∼100 mg märkäpainoa) äänitettiin jäällä anturityyppisellä ultraääniaineella (esim. UP50H mikrovihjeellä MS2) 40%:n amplitudilla 10 syklin ajan 3 sekunnin ajan 30 sekunnin alennuksella 1 ml:ssa jääkylmää uuttopuskuria. (vrt. Baskharan et al. 2012)

Ultraääni lipidiuutto C. elegans

Lipidomiassa, metabolomiikan haarassa, biologisten järjestelmien lipidi-komplementille on ominaista ja analysoitu. C. eleganeja käytetään laajalti lipidomiikassa metabolisten lipidien vuorovaikutuksen ja niiden terveys- ja elinkaarivaikutusten tutkimiseen.
Ultraäänilyysiä ja uuttamista käytetään lipidien, kuten Sphingolipidsin, vapauttamiseen C. elegans -alkioista, toukoista ja aikuisista matoista. Ultrasonicationia käytetään mato homogenaattien valmistamiseen ja sen jälkeen lipidien poistamiseen näytteestä.
Protokolla ultraääni lipidien uuttamiseksi C. elegans
Sulata C. elegans -pelletti jäällä ja sekoitetaan 0,5 ml:lla ultravettä. 
Sonicate C. elegans -näytteet 1,5 ml:n koeputkissa pitäen näytteet jatkuvasti jäässä.
Sonikaatio voidaan suorittaa anturin ultraäänitutkinnalla, kuten Uf200 ः t, ultraääninäytteen valmisteluyksikkö VialTweeter (10 näytteen samanaikainen sonikaatio) tai UIP400MTP-työkalu (monimutkaisten levyjen, kuten 96-well-levyjen, sonikaatioon). Ultraäänilyysissä UP200Ht:n kanssa käytä mikrokärkistä S26d2.Aseta ultraäänisyklitila valmiiksi digitaaliseen valikkoon. Aseta amplitudi 10%: iin ja sonikaatiosyklitila 2 sekunnin pulssia 20 sykliä ja tauko 30 sekunnin ajan jokaisen ultraäänisykäyspurkauksen välillä.
Siirrä supernatantit lasiputkiin, joissa on kierrekorkki. 
Folch uutetaan lisäämällä 1 ml ultravettä kuhunkin lasiputkeen ja lisäämällä 6 ml kloroformi/metanoliseosta (suhde = 2:1) kuhunkin lasiputkeen.
Pyörre jokainen lasiputki 30 sekunnin ajan 4 kertaa. 
Sentrifugoi putket 1 258 x g:ssa 15 minuutin ajan (Eppendorf, 5810 R) faasin erottelun tehostamiseksi entisestään. 
Siirrä alempi hydrofobinen fraktio puhtaaseen lasiputkeen lasisen Pasteur-pipetin avulla. 
Kuivaa alempi hydrofobinen fraktio typpivirtauksen alla typpihäihdystimessä. 
Säilytä kuivattua pellettiä -80 °C:n pakastimessa, kunnes sitä käytetään.

Matolysaattien ultraäänivalmistelu

Matolysaatti: L4-vaiheen madot korjattiin ja pestiin kolme kertaa M9-puskurilla (42,26 mM Na2HKO4, 22,04 mM KH2Po4, 85,56 mM NaCl ja 0,87 mM MgSO4) kaikkien bakteerien poistamiseksi. Kun M9-puskuria oli poistettu mahdollisimman paljon, madot sekoitettiin uudelleen lyysipuskuriin: 50 mM HEPES, 50 mM KCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 5 mM fosfaattia β- glyseroli, 0, 1% (v/ v) Triton X- 100, 50 mM natriumfluoridia, 1 mM natriumortovanadaattia, 5 mM natriumpyrofosfaattia, 0, 2 mM fenyylimetaanisulfonyylifluoridia ja proteaasinestäjää. Madot jäädytettiin nestemäiseen typpeen ja sulatettiin 37 °C: ssa kolme kertaa, sitten matoja äänitettiin kuivalla jäällä ultraääni-VialTweeter-yksiköllä 10 näyteputken samanaikaista valmistelua varten. Sonikaatio suoritettiin 50%: n amplitudilla 10 syklissä 2 sekunnissa, ja sonikaatiopurkausten välillä oli 30 sekunnin tauko. Tämän jälkeen näytteet sentrifugoitiin 12000 kierrosta minuutissa 4 °C:ssa 15 minuutin ajan. Supernatantti kerättiin ja varastoitiin -70 °C:ssa. Bradfordin määrityksessä käytettiin määräosaa proteiinin kvantifiointiin.
Glutaatioiden, GSH:n ja GSSG:n kokonaismäärän määrittäminen: Glutionimääritystä varten lysaatit ja määritys tehtiin samana päivänä. Glukoosilla ruokitut ja kontrolloidut L4-toukat korjattiin ja pestiin M9-puskurilla kolme kertaa. Kun M9-puskuri oli poistettu mahdollisimman paljon, madot sekoitettiin jääkylmään metafosforihappoon (5% w/v), sitten matoja äänitettiin jäässä ultraääni-VialTweeterillä 50% amplitudilla kymmenessä sonikaatiosyklissä 2 sekunnissa 30 sekunnin tauolla jokaisen syklin välillä. Sen jälkeen sentrifugoitu 12000 kierrosta minuutissa 4 ̊C 15 minuutin ajan.
(vrt. Alcántar-Fernández et al., 2018)

C. elegans-näytteen valmistelu ennen immunoprecipitaatiota ja länsimaista blottingia

Lyhyesti sanottuna alkiouutteiden C. elegans L1 -toukkia kasvatettiin suurissa nestemäisissä S-medium-kulttuureissa aikuisuuteen. Alkiot kerättiin vakiovalkaisumenetelmällä ja ripustettiin lyysipuskuriin (50 mM Tris, pH 7,5, 100 mM KCl, 1 mM EDTA, 1 mM MgCl2, 8,7% glyseroli, 0,05% NP-40, 1􏰅 Proteaasinestäjäcocktail ja 1􏰅 fosfataasin estäjä Cocktail I ja II), jotka on nopeasti jäädytetty nestemäiseen typpeen ja jotka on lysoitettu ultraäänisoluhäiriöillä käyttäen mikrotipin kaltaista ultraäänilaitetta, kuten Uf200 ः t S26d2:lla 10 pulssia yli 10 s 30 %:n amplitudilla. Jos on valmistettava suurempi määrä näytteitä, ultraääni VialTweeter tai multiSample-Ultrasonicator UIP400MTP hyvin levyille on suositeltavaa. Sonikoinnin jälkeen uutteet esiselvästettiin sentrifugoimalla 30 000 g:ssa 20 minuutin 4 °C:ssa. Esiselväytetty uute (300 μg kokonaisproteiinia) inkuboitiin 40 μg:lla CDC-25􏰂1:n affiniteettipuhdistunutta vasta-ainetta (tämä tutkimus), joka oli ristiinkytketty proteiini A-agaroosiin, tai kontrollina käytettiin samanlaista määrää kanin immunoglobuliinia (Ig)G, joka oli ristiinsoitu proteiini A-agaroosiin, kokonaistilavuudesta 200 μl lyysipuskuria, joka sisälsi 1% NP-40: tä, jolloin proteiinien ei-spesifinen sitoutuminen matriisiin väheni. Näytteitä kierrettiin 1 tunnin ajan 4 °C:ssa, mätiä pestiin kolme kertaa lyysipuskurilla ja eluoitu 30 μl:lla glysiiniä/HCl:ää ja 200 mM NaCl:llä, pH 2,2:lla. Immunoprecipitoinnin jälkeen eluaatit laimennettiin 30 μ􏰂l:aan SDS􏰂näytepuskuria, lämmitettiin 95 °C:seen 4 minuutin jauhetuna, ja tyypillisesti 3% syötteiden kokonaismäärästä ja 30% eluaattien osalta sovellettiin SDS-PAGE:iin, jota seurasi länsimainen blotting anti-CDC-25.1 (1:400), anti-LIN-23 (1:400) 750), anti-ubiquitin (1:1000), anti-GSK3􏰁 (1:500) tai anti-􏰁β-aktiini (1:2000) vasta-aineita. Jos uutteita ei ole immunoprecipitoitu, sama määrä näistä uutteistä saatua kokonaisproteiinia sekoitettiin SDS-näytepuskuriin, kuumennettiin 95 °C:seen ja levitettiin sitten suoraan SDS-PAGE:lle ja analysoitiin länsimaisella blottingilla. (vrt. Segref et al. 2020)

Probe-tyyppinen insonifioija UP200St lyysiä varten

Ultraääni solujen hajotin UP200St mikrokärjellä S26d2 lyysiin ja proteiinin uuttamiseen

Ultraäänilyysi prescise lämpötilan säätö

The VialTweeter is a MultiSample Ultraonicator that allows for reliable sample preparation under precisely controlled temperature conditions.Tarkka ja luotettava lämpötilansäätö on ratkaisevan tärkeää biologisia näytteitä käsiteltäessä. Korkeat lämpötilat käynnistävät näytteiden termisesti indusoidun proteiinin hajoamisen.
Kuten kaikki mekaaniset näytteenvalmistustekniikat, sonikaatio luo lämpöä. Näytteiden lämpötilaa voidaan kuitenkin hallita hyvin, kun käytetään VialTweeter- näytteitä. Esittelemme sinulle erilaisia vaihtoehtoja seurata ja hallita näytteiden lämpötilaa samalla, kun valmistelet niitä VialTweeter ja VialPress analyysia varten.

  1. Näytteen lämpötilan seuranta: VialTweeter-laitetta ohjaava ultraääniprosessori UP200St on varustettu älykkäällä ohjelmistolla ja kytkettävällä lämpötila-anturilla. Liitä lämpötila-anturi UP200St-näytteeseen ja aseta lämpötila-anturin kärki yhteen näyteputkista. Digitaalisen värillisen kosketusnäytön avulla voit asettaa UP200St-valikossa tietyn lämpötila-alueen näytteen sonikaatiota varten. Ultraäänilaite pysähtyy automaattisesti, kun enimmäislämpötila on saavutettu, ja pysähtyy, kunnes näytteen lämpötila laskee asetettuun lämpötilaan ∆. Sitten sonikaatio alkaa automaattisesti uudelleen. Tämä älykäs ominaisuus estää lämmön aiheuttaman hajoamisen.
  2. VialTweeter- lohko voidaan esijäähdytetty. Laita VialTweeter-lohko (vain sonotrode ilman anturia!) jääkaappiin tai pakastimeen esijäähdyttääkseen titaanilohkon, mikä auttaa lykkäämään näytteen lämpötilan nousua. Jos mahdollista, myös itse näyte voidaan esijäähdytyä.
  3. Jäähdytä sonikoinnin aikana kuivajäällä. Käytä matalaa lokeroa, joka on täytetty kuivalla jäällä, ja aseta VialTweeter kuivalle jäälle, jotta lämpö haihtuu nopeasti.

Löydä optimaalinen ultraäänisolun hajotin lyysisovelluksellesi

Hielscher Ultrasonics on pitkäaikainen kokenut valmistaja korkean suorituskyvyn ultraäänisolujen hajottimia ja homogenisaattorit laboratorioihin, penkki-top ja teollisen mittakaavan järjestelmiä. Bakteerisoluviljelmäsi koko, tutkimus- tai tuotantotavoitteesi ja käsiteltävän solun tilavuus tunnissa tai päivässä ovat olennaisia tekijöitä oikean ultraäänisoluhäirikön löytämiseksi sovelluksellesi.
Hielscher Ultrasonics tarjoaa erilaisia ratkaisuja moninäytteiden (enintään 10 injektiopulloa) ja massanäytteiden samanaikaiseen sonikaatioon (eli mikrotiter-levyt / 96-well-levyt), klassinen anturityyppinen laboratorio ultraäänilaite, jonka tehotasot ovat 50-400 wattia täysin teollisiin ultraääniprosessoihin, joissa on jopa 16 000wattia yksikköä kohti kaupallisten solujen häiriöihin ja proteiinin uuttamiseen suuressa tuotannossa. Kaikki Hielscher-ultraäänikoneet on rakennettu 24/7/365-käyttöä varten täydellä kuormalla. Kestävyys ja luotettavuus ovat ultraäänilaitteidemme ydinominaisuuksia.
Kaikki digitaaliset ultraäänihomygenisoijat on varustettu älykkäillä ohjelmistoilla, värillisellä kosketusnäytöllä ja automaattisella dataprotokollalla, jotka tekevät ultraäänilaitteesta kätevän työvälineen laboratorio- ja tuotantolaitoksissa.
Kerro meille, millaisia soluja, mikä tilavuus, millä taajuudella ja millä kohteella sinun on käsiteltävä biologisia näytteitäsi. Suosittelemme sinulle sopivinta ultraäänisolun hajotinta prosessivaatimuksiisi.

Alla olevassa taulukossa on viitteitä ultraäänijärjestelmiemme likimääräisen prosessointikapasiteetin osalta kompakteista kädessä pidettäviin homogenisaattoriin ja MultiSample Ultrasonicators -sovelluksista teollisiin ultraääniprosessoriin kaupallisiin sovelluksiin:

erätilavuus Virtausnopeus Suositeltavat laitteet
96-well / mikrotitterilevyt n.a UIP400MTP-työkalu
10 injektiopulloa à 0, 5 - 1, 5 mL n.a VialTweeter klo UP200St
0.01 –250 mL 5-100mL/min UP50H
0.01 –500mL 10 - 200 ml / min UP100H
10 - 2000 ml 20 - 400 ml / min Uf200 ः t, UP400St
0.1 - 20L 0.2 - 4 l / min UIP2000hdT
10 - 100 litraa 2 - 10 l / min UIP4000hdT
n.a 10 - 100 l / min UIP16000
n.a suuremmat klusterin UIP16000

Ota meihin yhteyttä! / Kysy meiltä!

Kysy lisä tietoja

Käytä alla olevaa lomaketta pyytääksesi lisätietoja ultraääniprosessoreista, sovelluksista ja hinnasta. Olemme iloisia voidessamme keskustella prosessista kanssasi ja tarjota sinulle ultraäänijärjestelmä, joka täyttää vaatimuksesi!









Huomaathan, että Tietosuojakäytäntö.


Ultrasonic high-shear homogenizers are used in lab, bench-top, pilot and industrial processing.

Hielscher Ultrasonics valmistaa korkean suorituskyvyn ultraäänihomygenisoijia sovellusten sekoittamiseen, dispersiointiin, emulgointiin ja uuttamiseen laboratoriossa, pilotissa ja teollisessa mittakaavassa.

Kirjallisuus / Referenssit



Tosiasiat, jotka kannattaa tietää

Caenorhabditis elegans

C. elegans on vapaasti elävä läpinäkyvä nematodi (pyöreä mato), jonka pituus on noin 1 mm ja joka ruokkii bakteereja (esim. 20 °C:ssa C. elegans (N2) -bakteerin laboratoriokannan keskimääräinen käyttöikä on noin 2–3 viikkoa ja sukupolviaika 3–4 päivää. Kun C. eleganeja kasvatetaan suuria määriä, mikä voidaan helposti tehdä tarkasti valvotuissa laboratorio-olosuhteissa, ne voidaan helposti seuloa uusien lääkkeiden toimintaperiaatteen sekä niiden vaikutusten ja vuorovaikutuksen vuoksi monimutkaisissa molekyyliprosesseissa ihmisen taudissa. Lyhyt genomi, lyhyt elinkaari ja yksinkertainen käsittely laboratorioympäristössä tekevät C. elegansista ihanteellisen malliorganismin tutkimukseen, kuten genomiikka, proteomiikka, kehitysbiologia, tautitutkimus, lääkekehitys jne.
Caenorhabditis elegans -madot voivat olla joko miehiä tai hermafrodiittia. Hermafrodiitit ovat sekä miesten että naisten lisääntymiselimiä. Naaraspuolisia matoja ei kuitenkaan ole olemassa. Hermafrodiitit voivat joko itse lannoittaa tai myös lisääntyä urospuolisten matojen kanssa. C. elegans voi tuottaa yli 1000 munaa joka päivä.
Koska C. elegans on yksi yksinkertaisimmista organismeista, joilla on hermosto, nematodimatoa käytetään vuodesta 1963 tutkimuksen malliorganismina. Neuronit eivät ammu toimintapotentiaalia eivätkä ilmaise jänniteporttisia natriumkanavia. Hermafrodiitissa tämä järjestelmä käsittää 302 neuronia, joiden kuvio on kartoitettu kattavasti, niin kuin connectome.
Monilla C. elegans -genomin geeneillä on toiminnallisia vastinia ihmisillä, mikä tekee siitä erittäin hyödyllisen mallin ihmisten sairauksille ja sitä käytetään esimerkiksi kehitysbiologian, ikääntymisen ja pitkäikäisyyteen vaikuttavien tekijöiden tutkimukseen. Lisäksi C. elegans -mutantit tarjoavat malleja moniin ihmisen sairauksiin, kuten neurologisiin sairauksiin (esim. Alzheimerin tauti), synnynnäisiin sydänsairauksiin ja munuaissairauksiin.
Nämä tekijät tekivät C. elegansista erittäin arvokkaan mallin monille tutkimusaloille. Näin ollen C. elegans oli ensimmäinen monisoluinen organismi, jonka koko perimä sekvensoi. Perimä sisältää arviolta 20 470 proteiinia koodaavaa geeniä. Noin 35%: lla C. elegans -geeneistä on ihmisen homologeja. On hämmästyttävää, että ihmisen geenien on toistuvasti osoitettu korvaavan C. elegans -homologinsa, kun ne tuodaan C. elegansiin. Toisaalta monet C. elegans -geenit voivat toimia samalla tavalla kuin nisäkkäiden geenit.

C. elegansin elinikä on noin 3 viikkoa ja se koostuu kuudesta elämänvaiheesta: alkiogeneesistä (munavaihe), neljästä toukkien vaiheesta (L1- L4) ja aikuisvaiheesta. Nematodit kuoriutuvat munista L1-toukkina, jotka koostuvat 560 solusta. Kasvu kunkin toukkavaiheen aikana tapahtuu solujen jakautumisen ja solujen hypertrofian mukaan. Cuticular molting puhkaisee jokaisen toukkavaiheen. Jos ankarat ympäristöolosuhteet viestivät kehittyvälle madolle, että olosuhteet eivät todennäköisesti tue aikuisten hedelmällisyyttä, C. elegans voi muuttaa sen kehitystä ja muodostaa vaihtoehtoisen L3-toukkavaiheen, jossa toukat menevät dauer-vaiheeseen. Tässä tilassa eläimet ovat poikkeuksellisen stressaantumattomia ja pitkäikäisiä ja voivat selviytyä kolmesta yhdeksään kuukautta. Dauer-toukat eristäytyvät vastoinkäymisistä sulkemalla sekä buccal- että anaaliontelonsa, kutistamalla suolistoaan ja kytkemällä päälle daf-16/FOXO-riippuvaisen geneettisen ohjelman, joka johtaa muun muassa dauer-spesifisen cuticlen ilmentymiseen. (vrt. Henderson et ai., 2006)

C. elegans Dauer Larvae

Dauer-toukat ovat termi nematodin toukille, jotka siirtyivät vaihtoehtoiseen kehitysvaiheeseen. termiä "Dauer-toukat" käytetään erityisesti rabditidiperheen matoihin, mukaan lukien Caenorhabditis elegans. Sana "Dauer" on saksalaista alkuperää ja tarkoittaa "kestoa” 1.3.111 “tietyn ajan kuluessa". Dauer-toukat menevät eräänlaisiin staasiin ja voivat selviytyä ankarista olosuhteista. Jos ja kun toukka tulee dauer-vaiheeseen, se riippuu ympäristöolosuhteista. Dauer-toukkia tutkitaan laajasti biologiassa, koska laravae osoittaa poikkeuksellista kykyä selviytyä ankarista ympäristöistä ja elää pitkiä aikoja. Esimerkiksi C. elegans dauer -toukat voivat selviytyä jopa neljä kuukautta, paljon pidempään kuin niiden keskimääräinen elinikä noin kolme viikkoa normaalin lisääntymiskehityksen aikana.