Ultralyd væv homogenisatorer

• Ultralydbehandling er en sikker & effektiv metode til vævshomogenisering.
• Ultralydsapplikationer inkluderer præparatvæv og suspensioner, ekstraktion af proteiner, DNA / RNA og aktive forbindelser samt aktivering / inaktivering af enzymer og gær.
• Den præcise kontrollerbarhed af ultralydshomogenisatorer af sondetype giver mulighed for en pålidelig forberedelse af vævsprøver.

Vævshomogenisering ved hjælp af ultralydssonder

Vævshomogenisering er en prøveforberedelsesproces, hvor dyre- og planteceller eller mikroorganismer fremstilles før ekstraktion af intracellulært stof såsom proteiner, DNA eller RNA. Cellemembranen skal sprænges for at frigive celleindholdet. Efter at have brudt cellevæggen flyder de intracellulære makromolekyler i bufferopløsningen, så organeller, proteiner og DNA/RNA bliver tilgængelige. Ultralydsvævshomogenisatorer og celleforstyrrende midler er meget effektive værktøjer til celleforstyrrelse, lysis og ekstraktion.

Ultralydsvævshomogenisatorer vs alternative lysisteknikker

Du spørger måske dig selv, hvilken teknik til celleforstyrrelse og hvilket vævshomogeniseringsudstyr der er den bedste løsning for dit laboratorium. Nedenfor kan du finde et par argumenter, der taler for ultralydslyse og vævshomogenisering, da ultralydbehandling har flere fordele i forhold til alternative homogeniseringsmetoder:

• Effektivitet: Ultralydshomogenisering er en hurtig og effektiv metode til at forstyrre væv og celler. Ultralydsvævshomogenisatorer bruger arbejdsprincippet for akustisk kavitation. Denne metode er yderst effektiv og kan forstyrre celler i løbet af få sekunder. Da intensitetsniveauet kan justeres fra mild til intens, er sonikering særlig effektiv til hårde eller fibrøse væv, der er vanskelige at homogenisere ved hjælp af andre metoder.



• Undgå krydskontaminering: Hielscher tilbyder kraftfulde ultralydsvævshomogenisatorer, der forbereder prøven i en indirekte sonikeringsbehandling. Med UIP400MTP (ideel til mikrotiter- og multiwell-plader) samt VialTweeter og CupHorn (ideel til hætteglas, rør og bægre) tilbyder Hielscher ultralydscelleafbrydelsesudstyr til berøringsfri homogenisering, hvilket reducerer risikoen for krydskontaminering mellem prøver. Det minimerer også risikoen for at indføre forurenende stoffer fra slibeoverflader eller andet homogeniseringsudstyr.
• Fleksibilitet: Ultralydshomogenisering kan anvendes med en række forskellige prøvestørrelser og volumener, fra små mængder til store vævsprøver. Desuden ultralydshomogenisering også velegnet til en bred vifte af prøvetyper, herunder plantevæv, dyrevæv og mikrobielle kulturer. Intensiteten og varigheden af ultralydbehandlingen kan justeres for at optimere niveauet af forstyrrelse for forskellige typer væv.
• Reproducerbarhed: Ultralydshomogenisering giver konsistente resultater og giver mulighed for præcis kontrol af homogeniseringsparametre, såsom udgangseffekt og sonikeringstid. Dette hjælper med at sikre reproducerbarhed og nøjagtighed af eksperimentelle data.
• Bevarelse af biomolekyler: Sonde-type ultralydbehandling er en ikke-termisk behandling. Det betyder, at dens påvirkning ikke er baseret på varme. Imidlertid genererer enhver mekanisk behandling varme i overensstemmelse med termodynamikkens anden lov. Dette betyder, at prøven bliver varmere over længere sonikeringstider. Hielscher state-of-the-art ultralydapparater er udstyret med temperatursensorer og smart temperaturovervågningssoftware. Sofistikerede kølemuligheder gør det muligt at forhindre varmenedbrydning og hjælper med at bevare aktiviteten af varmefølsomme biomolekyler, såsom enzymer og proteiner.
• Tidsbesparende: Den høje effektivitet af sonde-type ultralydbehandling giver mulighed for hurtig vævshomogenisering, hvilket sparer tid sammenlignet med andre metoder, der kræver mere omfattende fysisk manipulation af vævet.

Ultralydsvævshomogenisering giver flere fordele i forhold til alternative homogeniseringsmetoder. Derfor er ultralydsvævshomogenisatorer den foretrukne celleforstyrrelsesteknik i forskellige forsknings- og industrielle applikationer.

Eksempel på en vævshomogeniseringsprotokol ved hjælp af en ultralydssonde:

Ultralydapparater letter vævshomogenisering ved enkel betjening og en hurtig homogeniseringsprocedure. Samtidig kan ultralydsprocesparametrene kontrolleres og overvåges gensidigt, så resultaterne er pålidelige og reproducerbare.
 
Materialer:

• Vævsprøve (f.eks. lever, hjerne, muskel)
• Buffer (f.eks. PBS, Tris-HCl)
• proteasehæmmer cocktail
• Ultralydshomogenisator (sonde-type)
• Is
• mikrocentrifugerør
• Pipetter

Protokol for ultralydsvævshomogenisering:

Bemærk: Varigheden og intensiteten af sonikering skal muligvis optimeres afhængigt af vævstype, alder og sundhedstilstand samt de specifikke downstream-applikationer. Det er også vigtigt omhyggeligt at vælge bufferen, proteasehæmmere og andre tilsætningsstoffer for at optimere udbyttet og kvaliteten af homogenatet.

Store fordele ved Hielscher ultralydsvævshomogenisatorer

• hurtig og effektiv formaling, homogenisering, lysis & celleafbrydelse eller ekstraktion ved kraftig ultralydskavitation
• Nem og intuitiv brug og betjening (vælg den analoge eller digitale version)
• nem rengøring af produktkontaktoverflader ved at skylle sonotroden under sonikering (CIP clean-in-place / SIP steriliser på stedet)
• Lydbeskyttelsesboks (lydbeskyttelsesboksen til laboratorieenhederne er helt lavet af akrylglas for fuld synlighed fra alle vinkler)
• fuld kontrol over procesparametrene via digitalt touch-display på enheden (digitale ultralydapparater) eller powermeter (til analoge enheder)
• integreret temperaturkontrol (vigtig for varmefølsomme, labile vævsprøver)
• Pauser i homogeniseringskørslen kan defineres individuelt og forudindstilles i den digitale menu
• alle digitale enheder er udstyret med automatisk dataoptagelse (på et integreret SD/USB-ComboCard), stikbar temperatursensor og browserfjernbetjening.
• behandling med flere prøver med VialTweeter, Cuphorn eller ved brug af 4- eller 8-finger sonotroder (f.eks. til integration i laboratorierobotprocesser)
• Til små og store applikationer

Nedenstående tabel giver dig en indikation af den omtrentlige behandlingskapacitet for vores ultralydsvævshomogenisatorer til celleopløsning, lysis og ekstraktion:

Find den optimale ultralydsvævshomogenisator til din applikation

Hielscher ultralydsvævshomogenisatorer fås med et ultralydsudgangsområde mellem 50W og 16.000W (16kW).
Laboratoriearbejdere er glade for den enkle og intuitive betjening af Hielscher ultralydslaboratoriehomogenisatorer. Afhængigt af de specifikke krav leveres Hielscher-enheder med digital eller analog styring.

1. The VialTweeter er en kraftfuld ultralydshomogenisator, der tillader samtidig sonikering af op til 10 hætteglas eller reagensglas med samme intensitet. På grund af den indirekte sonikering undgås krydskontaminering og prøvetab fuldstændigt. Rengøring og desinficering reduceres til et minimum på grund af brugen af engangshætteglas. Blokken sonotroder er autoklaverbar.
2. Den UIP400MTP plade-soniker er ideel, når du arbejder med mikrotiter- og multi-brøndplader såsom 96-brønds plader. Du skal blot placere din multiwell plade eller din petriskål i UIP400MTP og alle prøver bliver ensartet sonikeret. Med UIP400MTP Plate-Sonicator bliver prøvebehandling med høj gennemstrømning enkel og effektiv!
3. I rækken af sonde-type laboratorie-ultralydapparater kan homogenisatorer vælges med 50 watt, 100 watt, 200 watt og 400 watt.
   UP50H (50W)
   UP100H (100W)
   UP200Ht / UP200St (200W)
   UP400St (400W)

Anvendelse og anvendelse af ultralydsvævshomogenisatorer

Ultralydshomogenisatorer bruges almindeligvis til vævsslibning, celleforstyrrelse & Lysering og homogenisering af biologiske prøver forud for ekstraktion af intracellulært stof i molekylområdet. Ved kontrolleret sonikering af prøverne kan alle trin fra lysis til ekstraktion og homogenisering udføres ved hjælp af den samme ultralydscelleforstyrrer.
Den store fordel ved ultralydshomogenisatorer ligger i den let justerbare strømindgang og sonikeringsintensitet. Hielscher ultralydscelleforstyrrende (lysere) gør det muligt at kontrollere sonikeringsintensiteten ved at justere amplituden fra 20% til 100%.
Alternativt til den kontinuerlige drift kan ultralydshomogenisatoren indstilles til cyklustilstand, f.eks. til sonikering af varmefølsomt væv. Sonikering i pulstilstand betyder, at ultralydsapparatet genererer høje intense ultralydsbølger i periodiske cyklusser. Varigheden af sonikeringsperioden og hviletiden kan indstilles individuelt af brugeren.
ved Pulserende sonikering, i hvileperioden, kan det sonikerede materiale vende tilbage til sin hviletilstand, og prøven kan køle ned (ved hjælp af hviletiden til varmeafledning). Derved kan behandlingsintensiteten indstilles nøjagtigt i overensstemmelse med vævet, og uønsket prøveopvarmning reduceres.
Ultralydsvævshomogenisatorer er robuste og brugervenlige, samtidig med at de producerer pålidelige resultater, der sikrer reproducerbarhed på grund af fuld kontrol over alle vigtige procesparametre.
Almindelige anvendelsesområder for ultralydsvævsslibning, celleforstyrrelse, lysis, ekstraktion og homogenisering findes i biologiske og farmaceutiske laboratorier, mikrobiologi, proteomisk og genomisk forskning (f.eks. Proteinfrigivelse før Western blotting og enzymbundet immunosorbentanalyse ELISA), men også i produktionen af botaniske ekstrakter og bioaktive forbindelser til fødevare-, farmaceutiske og kosmetiske industrier.

• Klik her for specifikke procesanbefalinger vedrørende prøveforberedelse, vævshomogenisering, lysis og ekstraktion (f.eks. celler, bakterier, sporer, aktive forbindelser)!
• Læs her, hvorfor sonikere er et uundværligt værktøj til proteomisk forskning!
• Lær, hvordan sonikering letter genomisk forskningsarbejde!

Litteratur / Referencer