Ultralyd opløsning af celler
Ultralydbehandling er et effektivt middel til at opløse cellestrukturer. Derfor anvendes sonikatorer i vid udstrækning i laboratorier til at bryde åbne celler, ekstrahere intracellulære molekyler, proteiner og organeller til forskning og analyse. I industriel skala bruges ultralydsopløsning og lysis til at isolere molekyler fra cellefabrikker eller til at fremme fordøjelsen af biomasse.
Hvad er ultralydsopløsning?
Ultralyd desintegration, også kendt som ultralyd homogenisering, er en proces, der bruger høj intensitet, lavfrekvente ultralydbølger til at nedbryde cellevægge og forstyrre molekylære strukturer i et flydende medium. Denne teknik anvendes almindeligvis i forskellige videnskabelige og industrielle applikationer til flere formål:
Celleforstyrrelse: Ultralydsopløsning anvendes i vid udstrækning i cellebiologi og molekylærbiologi til at forstyrre cellemembraner og frigive cellulært indhold såsom proteiner, nukleinsyrer og organeller. Dette er nyttigt til ekstraktion af intracellulære komponenter til analyse eller til lysering af celler i mikrobiologiske og bioteknologiske processer.
- Homogenisering: Det hjælper med ensartet blanding af komponenter i en prøve, især når man beskæftiger sig med ublandbare væsker eller når man forsøger at opnå en ensartet blanding af materialer.
- Proteinudvinding: I biologi, proteomics life science, er analysen af proteiner en meget almindelig opgave. Før proteiner kan analyseres i analyser, skal de ekstraheres fra cellens indre og isoleres. Sonikatorer er den mest anvendte metode til proteinekstraktion.
- DNA-fragmentering: DNA og RNA er forskellige typer nukleinsyrer, der lagrer og koder for genetisk information i celler. Når DNA og RNA analyseres, skal de lange tråde undertiden fragmenteres, en proces, der pålideligt og effektivt kan udføres ved sonikering.
- Forberedelse af prøve: I forskning og analyse er prøveforberedelse en almindelig procedure før forskellige analytiske teknikker. Ultralydsopløsning kan bidrage til at opløse eller sprede prøver, hvilket kan forbedre analysernes nøjagtighed og reproducerbarhed.

Sonde-type sonikator UP200St til celleopløsning, celleforstyrrelser og ekstraktion
Fordele ved ultralydsopløsning
Hvorfor bruge en sonde-type sonikator til opløsning, celleforstyrrelse og ekstraktion af intracellulære molekyler og proteiner? En sonikator eller ultralyd dismembrator tilbyder mange fordele, der gør sonikering den overlegne teknologi sammenlignet med andre desintegrationsmetoder såsom højtrykshomogenisering, kuglefræsning eller mikrofluidisering.
- Ikke-termisk: Ultralydsopløsning er en ikke-termisk metode, hvilket betyder, at den ikke er afhængig af varme for at nedbryde materialer. Dette er fordelagtigt til applikationer, hvor høje temperaturer kan nedbryde varmefølsomme prøver.
- Præcis og kontrolleret: Processen kan styres med høj præcision, hvilket giver mulighed for specifik forstyrrelse, blanding eller reduktion af partikelstørrelse.
- Hurtig og effektiv: Ultralydbehandling er generelt en hurtig og effektiv metode, hvilket gør den velegnet til applikationer med høj kapacitet.
- Reduceret kemisk brug: I mange tilfælde kan ultralydsopløsning reducere behovet for hårde kemikalier eller organiske opløsningsmidler, som kan være miljøvenlige og reducere risikoen for kemisk forurening.
- Ingen fræsemedier, ingen dyser: Alternative desintegrationsteknikker, såsom kugle / perlefræsning eller højtrykshomogenisatorer, har ulemper. Kugle-/perlefræsning kræver brug af fræsemedier (perler eller perler), som møjsommeligt skal adskilles og rengøres. Højtrykshomogenisatorer har dyser, der er tilbøjelige til tilstopning. I modsætning hertil er ultralydhomogenisatorer nemme at bruge, meget pålidelige og robuste, hvilket kræver meget lidt vedligeholdelse.
- Alsidighed: Det kan anvendes på en bred vifte af materialer, herunder bakterier, planteceller, pattedyrvæv, alger, svampe osv., Hvilket gør det til en alsidig teknik inden for forskellige områder.
Skalerbarhed: Ultralydsteknikken kan skaleres op til industrielle processer, hvilket gør den velegnet til både laboratorie- og storskala produktionsapplikationer.
Arbejdsprincippet om ultralydsopløsning og celleforstyrrelse
Ultralydbehandling genererer vekslende højtryks- og lavtryksbølger i den udsatte væske. Under lavtrykscyklussen skaber ultralydbølgerne små vakuumbobler i væsken, der kollapser voldsomt under en højtrykscyklus. Dette fænomen kaldes kavitation. Implosionen af kavitationsboblen forårsager stærke hydrodynamiske forskydningskræfter, der forårsager første sonoporation og efterfølgende effektiv forstyrrelse af cellestrukturer. Intracellulære molekyler og organeller frigives fuldstændigt i opløsningsmidlet.
Ultrasonic Nedbrydning af cellestrukturer
Forskydningskræfterne kan opløse fibrøst, cellulosemateriale i fine partikler og bryde væggene i cellestrukturen. Dette frigiver mere af det intracellulære materiale, såsom stivelse eller sukker i væsken. Derudover bliver cellevægsmaterialet brudt i små snavs.
Denne effekt kan anvendes til fermentering, fordøjelse og andre konverteringsprocesser af organisk materiale. Efter fræsning og slibning gør ultralydsbehandling mere af det intracellulære materiale, fx stivelse samt cellevæggenrester til de enzymer, der omdanner stivelse til sukkerarter. Det øger også det overfladeareal, der udsættes for enzymerne under kondensering eller saccharificering. Dette øger typisk hastigheden og udbyttet af gærfermentering og andre konverteringsprocesser, fx for at øge ethanolproduktionen fra biomasse.
Brug ultralydsopløsning – Pålideligt og effektivt i enhver skala
Hielscher sonikatorer er tilgængelige med forskellige effekt ratings og behandlingskapacitet. Uanset om du ønsker at sonikere små biologiske prøver fra et par mikroliter til et par liter eller har brug for at behandle store celle eller biomasse strømme til produktion, Hielscher ultralyd vil tilbyde dig den mest egnede ultralyd dismembrator til din biologiske anvendelse.
- lab skala for 1mL til ca. 5L fx UP400St med 22mm sonotrode
- bænkestørrelse på ca. 0,1 til 20 l / min f.eks UIP1000hdT med 34mm sonotrode og flowcell
- produktionsskala starter ved 20L / min f.eks UIP4000hdT eller UIP16000hdT
Tabellen nedenfor giver dig en indikation af den omtrentlige behandlingskapacitet af vores ultralydapparater i laboratoriestørrelse:
Anbefalede enheder | Batch Volumen | Strømningshastighed |
---|---|---|
UIP400MTP 96-brønds plade sonikator | multi-well / microtiter plader | na |
Ultralyd CupHorn | CupHorn til hætteglas eller bægerglas | na |
GDmini2 | ultralyd mikro-flow reaktor | na |
VialTweeter | 0.5 til 1,5 ml | na |
UP100H | 1 til 500 ml | 10 til 200 ml / min |
Uf200 ः t, UP200St | 10 til 1000 ml | 20 til 200 ml/min |
UP400St | 10 til 2000 ml | 20 til 400 ml / min |
ultralyd sigte shaker | na | na |
Brug venligst nedenstående formular, hvis du ønsker at modtage mere information om brug af ultralydsenheder med henblik på nedbrydning af celler. Vi hjælper gerne med dig.
Kontakt os! / Spørg Os!
Tabellen nedenfor giver dig en indikation af den omtrentlige behandlingskapacitet af vores industrielle ultralydapparater:
Batch Volumen | Strømningshastighed | Anbefalede enheder |
---|---|---|
200 ml til 5 liter | 0.05 til 1L/min | UIP500hdT |
1 til 10L | 0.1 til 2L/min. | UIP1000hdT |
5 til 20L | 0.2 til 4L / min | UIP2000hdT |
10 til 100 l | 2 til 10 l / min | UIP4000hdT |
15 til 150L | 3 til 15 liter/min | UIP6000hdT | na | 10 til 100 l / min | UIP16000 |
na | større | klynge af UIP16000 |

UP400St ultralyd homogenisator til celleopløselighed, lysis og proteinekstraktion
Litteratur / Referencer
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.

Ultralyd CupHorn til intens sonikering af lukkede rør og hætteglas til steril homogenisering af prøver.

Hielscher Ultrasonics fremstiller højtydende ultralyd homogenisatorer fra Lab til industriel størrelse.