Sådan bruger du Hielschers ultralydshomogenisatorer til væv
Før oprensning eller karakterisering af intracellulære makromolekyler såsom proteiner, organeller, enzymer eller aktive forbindelser er det afgørende at anvende en effektiv metode til vævslyse og celledisintegration. Sonikering er en yderst effektiv teknik til cellepræparation, som hurtigt frigiver intracellulært materiale til en bufferopløsning. De mekaniske forskydningskræfter, der dannes under ultralydshomogenisering af væv, kan justeres præcist til bestemte materialer. Dette muliggør skånsom præparation af blødt væv eller forskydningsbetinget fragmentering af DNA/RNA med mildere sonikering samt intens ultralydskavitation til destruktiv celleopbrydning (f.eks. af nannochloropsis og gær).
Nedenfor findes et udvalg af væv, celler og andet biologisk materiale med anbefalede sonikeringsprotokoller og retningslinjer til effektiv præparation af dine prøver med en ultralydshomogenisator til væv eller en celleknuser.
Ultralydsapparat til laboratoriet UP200Ht (200W, 26kHz) til prøvepræparation
Sådan fremstiller du lysater, homogenater og ekstrakter fra biologiske materialer
I alfabetisk rækkefølge:
Acetobacter suboxydans
Actinomyces
ALP- og LDH-aktivitet
Bestemmelse af ALP- og LDH-aktivitet samt proteinindhold
Frosne celleprøver blev optøet i 20 min på is, efterfulgt af cellelyse med PBS indeholdende 1% Triton X-100 i 50 min på is. Under cellelysen blev hver prøve sonikeret i 1 min ved 80 W med en ultralydsprocessor UP100H (Hielscher Ultrasonics).
Anbefalet apparat:
UP100H
Reference/videnskabelig artikel:
Bernhardt, A. et al. (2008): Mineraliseret kollagen – en kunstig, ekstracellulær knoglematrix – forbedrer den osteogene differentiering af stromaceller fra knoglemarven.
Amorft tricalciumfosfat (ATCP)
ATCP-nanopartikler, som er en usædvanligt reaktiv precursor for dannelsen af hydroxyapatit, blev dispergeret i chloroform indeholdende 5 % (w/w) Tween20 i forhold til PLGA ved hjælp af Hielschers ultralydsapparat UP400S ved 320W i 5 min. med pulserede intervaller (50%) for at muliggøre relaksation af partiklerne.
Anbefalet apparat:
UP400S
Reference/videnskabelig artikel:
Mohn, Dirk; Ege, Duygu; Feldman, Kirifl; Schneider, Oliver D.; Imfeld, Thomas; Boccaccini, Aldo R. (2014): Sfæriske fyldstoffer af calciumfosfatnanopartikler muliggør polymerforarbejdning af knoglefikseringsudstyr med høj bioaktivitet. The Free Library 01 maj 2010. 21 januar 2014.
Anthocyaniner
Anthocyaniner: diglucosider, monoglucosid, acylerede monoglucosider og acylerede diglucosider af peonidin, malvidin, cyanidin, petunidin og delphinidin: Ekstraktion fra drueskind på 40 sek.; pH 5,0; forhold mellem materiale og ekstraktionsmiddel på 1:6.
Anbefalet apparat:
UP100H
Anthraquinoner
Ekstraktion af anthraquinoner fra rødderne af Morinda citrifolia
Anbefalet apparat:
UP400S
Abrikoskerner
Forbehandling med ultralyd før ekstraktion af olie fra frøene af Jatropha curcas L. for at forbedre ekstraktionen.
Anbefalet apparat:
UP400S
Artemisia selengensis Turcz
Ekstraktion af rutin (1,0g formalet prøve i 30 mL methanol) ved 25°C på 5–10 min.
Anbefalet apparat:
UP50H
Aspergillus flavus
Inaktivering af Aspergillus flavus med ultralyd i Sabouraud-vækstmedium
Anbefalet apparat:
UP200S
B. sphaericus / Bacillus sphaericus
Sporer af Bacillus anthracis sterne 34F2
Fjernelse af sporer af Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 og Bacillus thuringiensis ATCC 33680 med ultralyd. Anvendelsen af 150 ppm natriumhypochlorit sammen med ultralyd førte til inaktivering af sporerne.
Anbefalet apparat:
UP200S ved 100% amplitude
Reference/videnskabelig artikel:
Pamarthi, S.R. et al.: Effektiviteten af ultralyd til fjernelse af smuds med Bacillus spp-sporer indlejret i komplekse fødevarematricer, der sidder fast på forskellige kontaktflader.
Sporer af Bacillus cereus ATCC 21281
Fjernelse af sporer af Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 og Bacillus thuringiensis ATCC 33680 med ultralyd. Anvendelsen af 150 ppm natriumhypochlorit sammen med ultralyd førte til inaktivering af sporerne.
Anbefalet apparat:
UP200S ved 100% amplitude
Reference/ forskningsartikel:
Pamarthi, S.R. et al.: Effektiviteten af ultralyd til fjernelse af Bacillus spp-sporer indlejret i komplekse fødevarematricer på forskellige kontaktflader.
Bacillus subtilis
Ultralyd med høj effekt og lav frekvens i små volumener af bakteriesuspension medfører en kontinuerlig reduktion i antallet af bakterieceller, dvs. at drabshastigheden dominerer. I større volumener medfører sonikering en indledende stigning i celletallet, hvilket tyder på opløsning af bakterieklumper, men efter denne indledende stigning falder celletallet, efterhånden som opløsningen af klumperne afsluttes, og drabshastigheden får større betydning.
Anbefalet udstyr:
UP200St
Reference/ forskningsartikel:
Joyce, E.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P.; Mason, T. J. (2003): Udvikling og evaluering af ultralyd til behandling af bakteriesuspensioner. En undersøgelse af frekvens, effekt og sonikeringstid ved dyrkede Bacillus-arter. Ultrason. Sonochem. 10/2003. s. 315–318.
Alfa-amylase fra byg
Stimulering eller hæmning af aktiviteten af alfa-amylase fra byg: Prøven (10 g bygfrø) blev dispergeret i 80 ml postevand ved direkte sonikering med en ultralydsintensitet på 20, 60 og 100% amplitude, en cyklus på 50% og yderligere omrøring. Sonotroden blev nedsænket ca. 9 mm i opløsningen. Opløsningen blev behandlet ved en konstant temperatur på 30C° i 5, 10 og 15 min.
Anbefalet udstyr:
UP200S, amplituder: 20, 60 og 100%; cyklus på 50%; sonotrode S3, 30C°.
Reference/ forskningsartikel:
Yaldagard et al. (2008): Effekten af ultralydseffekt på aktiviteten af alfa-amylase fra byg ved behandling af frø efter såning
Naupliuslarver af rurer
Celledisruption/ drab af mesozooplankton: Ved sonikering under følgende betingelser med fire flowhastigheder (200, 400, 520 og 800 lh-1) og fire amplituder (25, 50, 75 og 100 %) blev der opnået en drabsprocent på mellem 61 og 97 %.
Anbefalet udstyr:
UIP2000hd
Reference/ forskningsartikel:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraviolet lys, ultralyd og hydrogenperoxid som behandlinger af ballastvand – forsøg med mesozooplankton i brakvand med lavt saltindhold.
Bifidobakteriestammer: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. lactis (BB-12), B. longum (BB-46)
Destruktion af bakterieceller og frigivelse af ß-galactosidase fra Bifidobacteria-stammer: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. Lactis (BB-12), B. longum (BB-46): 100 mL pasteuriseret mælk blandet med bakteriekultur blev behandlet med ultralyd. Kavitation medfører destruktion af bakteriecellerne og samtidig frigivelse af ß-galactosidase.
Anbefalet udstyr:
UIP1000hd: amplitude: 10%, effekt: 80W, amplitude: 100%, effekt: 200W; sonotrode BS2d34; 15–30 min.
Reference/ forskningsartikel:
Hung et al. (2009): Ultralydsassisteret yoghurtfermentering med probiotika.
BL21(DE3) pAtHNL-celler (Arabidopsis thaliana-celler)
Celledisruption: 15 g BL21-(DE3)_pAtHNL-celler blev langsomt suspenderet i 50 mM kaliumfosfatbuffer (pH 7,5) ved 0 degC.
Anbefalet udstyr:
UP200S + sonotrode S14D: ved 70W/cm2 (4 x 5 min), afkølet i et isbad
Reference/ forskningsartikel:
Okrob, D. et al (2009): Hydroxynitrillyase fra Arabidopsis thaliana: Identifikation af reaktionsparametre for syntese af enantiomerrene cyanohydriner med ren og immobiliseret katalysator. Adv. Synth. Catal. 2011, 353, 2399 – 2408.
Blodceller (røde og hvide)
Boldin fra boldoblade (Peumus boldus Molina)
Et vigtigt aktivt stof i boldo er boldin ((S)-2,9-dihydroxy-1,10-dimethoxiaporphine), som sammen med catechin ((2S,3R)-2-(3,4-dihydroxy-phenyl)-3,4-dihydro-1(2H)-benzopyran-3,5,7-triol) udgør hovedkomponenterne i alkaloid- og flavonoidfraktionen i boldoblade. Boldin er en stærk antioxidant, der udsættes for peroxidativ skade medieret af frie radikaler og fungerer som en effektiv hydroxylradikalfanger.
Ekstraktionsprocedure: Ved en typisk ekstraktionsprocedure blev prøver af boldoblade ekstraheret med 1L destilleret vand ved atmosfærisk tryk ved hjælp af ultralydsapparatet UIP1000hd i batch- og gennemstrømningstilstand. Ekstraktionstiden varierer mellem 10 og 40 min. med en ultralydsintensitet på 10 til 23 W/cm2, og et temperaturområde på 10 til 70°C. De bedste resultater blev opnået under følgende betingelser: ultralydsintensitet på 23 W/cm2 i 40 min. ved en temperatur på 36°C
Resultater: Analyseresultaterne viser, at sonikering med høj effekt øger frigivelsen af analytter fra boldos plantematricemateriale med væsentligt højere hastigheder sammenlignet med den konventionelle metode: Det samme udbytte blev frigivet ved sonikering på 30 min., mens den konventionelle ekstraktionstid var 2h.
Chemat (2013) og kolleger har vist, at ultralydsassisteret ekstraktion forbedrer effektiviteten af planteekstraktionen, samtidig med at ekstraktionstiden reduceres, og ekstrakternes koncentration øges (samme mængde opløsningsmiddel og plantemateriale). Analysen viste, at de optimerede betingelser var: sonikeringseffekt på 23 W/cm2 med UIP1000hd i 40 min. og ved en temperatur på 36°C. De optimerede parametre for ultralydsekstraktionen giver en bedre ekstraktion sammenlignet med konventionel maceration med hensyn til procestid (30 min. i stedet for 120 min.), højere udbytte, højere energieffektivitet, forbedret renhed, højere sikkerhed og bedre produktkvalitet.
Anbefalet udstyr:
UIP1000hd med sonotrode BS2d34 og flowcelle
Reference/ forskningsartikel:
Petigny, L.; Périno-Issartier, S.; Wajsman, J.; Chemat, F. (2013): Batchbaseret og kontinuerlig ultralydsassisteret ekstraktion af boldoblade (Peumus boldus Mol.). International Journal of Molecular Science 14, 2013. 5750–5764.
Bovint serumalbumin (BSA)
Mikroindkapsling i poly(mælkesyre-co-glykolsyre) på 40 sek.
Anbefalet udstyr:
GDmini
Reference/videnskabelig artikel:
Freitas et al. (2005): Ultralydsemulgering i gennemstrømning kombineret med statisk mikroblanding til aseptisk fremstilling af mikrosfærer ved opløsningsmiddelekstraktion.
Hjernestamme + binyre
Dispergering og nukleotidanalyse; prøvestørrelse: prøver på 10 mg i 10 ml væske.
Anbefalet udstyr:
UP50H
Candida albicans
Kulhydrater, polysakkarider og andre funktionelle forbindelser
Ekstraktion af kulhydrater, polysakkarider og andre funktionelle forbindelser
Anbefalet udstyr:
UP200St
Carnosinsyre fra rosmarin
Ekstraktion af carnosinsyre, en aktiv forbindelse, fra rosmarin.
Anbefalet udstyr:
UP400S
Capsaicinoider
Ekstraktion af capsaicinoider (capsaicin, nordihydrocapsaicin) fra chilipebre: Capsaicinoider fra Capsicum frutescens -pebre blev udvundet ved ultralydsekstraktion under følgende betingelser: opløsningsmiddel: 95% (v/v) ethanol, forhold mellem opløsningsmiddel og masse på 10 ml/g, ekstraktionstid med sonikering på 40 min., ekstraktionstemperatur på 45°C. Ekstraktionsudbytte: 85% af capsaicinoiderne
Anbefalet udstyr:
UP400S
Karotenoider, betakarotenoider
cDNA
Poly-A-RNA blev oprenset med Dynabeads mRNA-oprensningskittet (Invitrogen) i henhold til producentens anvisninger og blev behandlet i 30 min ved 37°C med TURBO DNase (Ambion; 0,2 enheder/1 μg RNA). Syntesen af første og anden streng fulgte producentens protokol. Omkring 500ng dobbeltstrenget cDNA blev fragmenteret ved sonikering med Hielschers UTR200. DNA blev separeret i 2% agarosegel med høj opløsning, og fragmenter på 230–270 bp blev skåret ud.
Anbefalet udstyr:
UTR200 eller TD_CupHorn
Reference/videnskabelig artikel:
Delft, J. van; Gaj, St.; Lienhard,M.; Albrecht, M. W.; Kirpiy, A.; Brauers, K.; Claessen, S.; Lizarraga, D.; Lehrach, H.; Herwig, R.; Kleinjans, J. (2012): RNA-Seq giver ny indsigt i transkriptomresponser induceret af det kræftfremkaldende stof benzo[a]pyren. Toxicological Sciences 130/2, 2012. 427–439.
Caryophanon latum
Ekstraktion af glucosamin, muraminsyre, alanin, glutaminsyre og lysin fra caryophanon datum.
Anbefalet udstyr:
UP100H
Cellulose
Homogenisering/klargøring af isotopisk homogen cellulose.
Anbefalet udstyr:
UP200S; i et isbad
Reference/videnskabelig artikel:
Laumer et al. (2009): En ny tilgang til homogenisering af cellulose med henblik på at anvende mikromængder til analyser af stabile isotoper.
Cellulosenanokrystaller (CNC) fremstillet af eukalyptuscellulose-CNC'er
Cellulosenanokrystaller (CNC) fremstillet af eukalyptuscellulose-CNC’er blev modificeret ved reaktion med methyl adipoyl chloride, CNCm, eller med en blanding af eddikesyre og svovlsyre, CNCa. Derfor blev frysetørrede CNC’er, CNCm og CNCa redispergeret i rene opløsningsmidler (EA, THF eller DMF) ved 0,1 wt% ved magnetisk omrøring natten over ved (24 ± 1) C, efterfulgt af 20 min i et sonikeringsbad med UP100H fra Hielscher Ultrasonics (Tyskland), udstyret med en sonotrode på 130 W/cm2, ved 24 ± 1 degC. Derefter blev CAB tilsat CNC-dispersionen, så den endelige polymerkoncentration var 0,9 wt%.
Anbefalet udstyr:
UP100H; ved 24 degC i 20 min.
Reference/videnskabelig artikel:
Blachechen, L. S. et al (2013): Samspillet mellem cellulosenanokrystallers kolloide stabilitet og deres dispergerbarhed i en celluloseacetatbutyratmatrix. Cellulose 2013.
Cellulose fra sukkerrørsbagasse
ChIP-analyse
Sonikering anvendes til cellelyse for at frigive kromatinet. Mild (pulseret) sonikering anvendes til at fragmentere kromatinet. Desuden øger ultralyd hastigheden af antistoffers binding til målproteiner og reducerer dermed immunpræcipitationstiden.
Anbefalet udstyr:
UP100H
Reference/videnskabelig artikel:
Basselet, P. et al. (2008): Prøvebehandling til DNA-chiparraybaseret analyse af entero hæmoragisk Escherichia coli (EHEC).
Lauri, A. (2005): Molekylær analyse af kronbladsudvikling ved hjælp af X-ChIP og tohybridteknologi. Doktorafhandling, Universität zu Köln 2005.
Kromatin
Fragmentering af kromatin ved forskydning
Anbefalet udstyr:
UP400S; ved 30% amplitude og en arbejdscyklus på 0,5; på is.
Reference/videnskabelig artikel:
Oh et al. (2003): Genet for acetyl-CoA-carboxylase reguleres af sterolregulatorisk elementbindende protein-1 i leveren.
Ekstraktion af kromatin
Lysatet fra MEL DS19-celler blev sonikeret i 10 omgange på hver 20 s ved 70% af den maksimale udgangseffekt med Hielscher 200W-ultralydsprocessoren UP200H
Anbefalet udstyr:
UP200H; 70% af den maksimale udgangseffekt; pulstilstand: 10 cyklusser på hver 20 sek.
Reference/videnskabelig artikel:
Kang, H. Ch. et al (2010): PIAS1 regulerer CP2c-lokalisering og dannelsen af aktive promotorkomplekser ved erytroid cellespecifik a-globinekspression. Nucleic Acids Res. 38/ 16, 2010. s. 5456–5471.
Kromatografi
Sonikering af adsorbenten i opløsningsmidlet eliminerer agglomerater i løbet af få sekunder og giver en ensartet kolonne, der er let at pakke. Relevant for klargøring af adsorbenter (f.eks. silicagel) før kolonnekromatografi.
Anbefalet udstyr:
UP400S
Dafnier
Celledisruption af mesozooplankton
Anbefalet udstyr:
UP2000hd med flowcelle
Reference/videnskabelig artikel:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraviolet lys, ultralyd og hydrogenperoxid til behandling af ballastvand – forsøg med mesozooplankton i brakvand med lav saltholdighed.
Voksne vandlopper og copepoditter
Celledisruption af mesozooplankton: Ved sonikering under følgende betingelser med fire volumenstrømme (200, 400, 520 og 800 lh-1) og fire amplituder (25, 50, 75 og 100%) er der opnået en drabsrate på mellem 87 og 99%.
Anbefalet udstyr:
UIP2000hd med flowcelle
Reference/videnskabelig artikel:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraviolet lys, ultralyd og hydrogenperoxid til behandling af ballastvand – forsøg med mesozooplankton i brakvand med lav saltholdighed.
Vandloppenauplier
Celledisruption af mesozooplankton: Ved sonikering under følgende betingelser med fire volumenstrømme (200, 400, 520 og 800 lh-1) og fire amplituder (25, 50, 75 og 100%) er der opnået en drabsrate på mellem 87 og 99%.
Anbefalet udstyr:
UIP2000hd med flowcelle
Reference/videnskabelig artikel:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraviolet lys, ultralyd og hydrogenperoxid til behandling af ballastvand – forsøg med mesozooplankton i brakvand med lav saltholdighed.
COS7-celler
Lyse i 400 μl buffer
Anbefalet udstyr:
UP200S; 7 cyklusser
Reference/videnskabelig artikel:
Zaim (2005): Analyse af mus med Nesprin-2-mangel.
Cryptosporidium parvum
Ultralydsinaktivering af Cryptosporidium parvaum (protozoer) i vand.
Anbefalet udstyr:
UP400S
Reference/videnskabelig artikel:
Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktivering af Saccharomyces cerevisiae ved ultralydsbestråling. Ultrasonics Sonochemistry 11/2004. s. 61–65.
Kubosomer
Cubosomer – enten tomme eller doteret med fluoroformolekyler – blev fremstillet ved at dispergere den passende mængde monoolein i en opløsning af Pluronic F108 ved hjælp af ultralydsapparatet UP100H. For at opnå fluorescerende cubosomer blev fluoroforen dispergeret i det smeltede monoolein ved skånsom sonikering før dispergering i Pluronic F108. Den samme fremgangsmåde blev fulgt, når de fluorescerende cubosomer også blev fyldt med quercetin.
Prøve: prøvestørrelse: 4 mL – ca. 96,4 wt% vand, 3,3 wt % monoolein, 0,3 wt% Pluronic F108. Fluoroforens procentandel var 2,5 × 10−3 og 2,8 × 10−3 wt%. Mængde tilsat quercetin: 6,4 × 10−6 wt%.
Sonikering: UP100H, amplitude 90%, pulscyklus 0,9, i 10 min.
Anbefalet udstyr:
UP100H
Reference/forskningsartikel:
Murgia, S.; Bonacchi,S.; Falchi, A. M.; Lampis, S.; Lippolis, V.; Meli, V.; Monduzzi, M.; Prodi, L.; Schmidt, J.; Talmon, Y.; Caltagirone, C. (2013): Lægemiddelfyldte fluorescerende kubosomer: Alsidige nanopartikler til potentielle teranostiske anvendelser. Langmuir 29, 2013. 6673–6679.
Dekkera bruxellensis
Inaktivering af Dekkera bruxellensis i vand med ultralyd
Anbefalet udstyr:
UIP1500hd
Reference/forskningsartikel:
Borthwick, K. A. J.; Coakley, W. T.; McDonnell, M. B.; Nowotny, H.; Benes, E.; Grfschl, .M (2005): Udvikling af et nyt kompakt sonikeringsapparat til celledisruption. J. Microbio. Meths. 60/2005. s. 207–216. / Lörincz, A. (2004): Celledisruption af gær i vandbaserede suspensioner med ultralyd. Biosys. Eng. 89/ 2004. s. 297–308. / Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktivering af Saccharomyces cerevisiae ved ultralydsbestråling. Ultrason. Sonochem. 11/2004. s. 61–65.
Dekkera/Brettanomyces bruxellensis
Inaktivering på 90–120 sec.
Anbefalet udstyr:
UIP1500hd
Reference/forskningsartikel:
se ovenfor
DNA
DNA-fragmentering: 2 min. sonikering af 100μL med UP100H eller 4 min. sonikering af 100μL med UTR200.
Anbefalet udstyr:
UP100H, UTR200 eller VialTweeter
Reference/forskningsartikel:
Larguinho M. et al. (2010): Udvikling af en hurtig og effektiv ultralydsbaseret strategi til DNA-fragmentering.
Drosophila melanogaster S2-celler
Ekstraktion af cellulære proteiner fra Drosophila melanogaster S2-celler: Frosne S2-celler (1,56108) blev lyseret i 1 mL iskold homogeniseringsbuffer (100 mM Tris-HCl pH 7,5, 1% SDS) og henstod på is i 10 min. Cellelysen blev fuldført ved sonikering på is (6615 pulstog, 0,5 s puls; 75% intensitet) med en ultralydsprocessor af typen Hielscher UP200S.
Anbefalet udstyr:
UP200S (200W), 75% intensitet; pulstilstand: 6615 pulstog, 0,5 s puls.
Reference/forskningsartikel:
Schwientek, T. et al. (2007): En seriel lektinbaseret tilgang til O-glykoproteomet af mucintypen i Drosophila melanogaster S2-celler. Proteomics 7, 2007. s. 3264–3277.
E. coli-derivater
Celledisruption af E. coli-derivater: De frosne pellets svarende til prøvevolumenet Vculture = 4/OD mL blev resuspenderet i 580 μL 10 mM kaliumfosfatbuffer pH 7, 1 mM EDTA. Der blev tilsat 20 μL lysozym (koncentration på 1 g L-1), og cellesuspensionen blev inkuberet på is i ca. 30 min. Derefter blev cellerne disrupteret ved kontinuerlig sonikering med et sonikeringsapparat (UP 200S-ultralydsprocessor, Dr. Hielscher GmbH, Teltow) på is ved en amplitude på 50 % i 20 sec. De opløselige og uopløselige cellefraktioner blev adskilt ved centrifugering ved 13.000 rpm i 20 min. De uopløselige proteiner blev vasket to gange med 10 mM kaliumfosfatbuffer pH 7, 1 mM EDTA og opbevaret ved –20°C.
Anbefalet udstyr:
UP200S med 50% amplitude
Reference/forskningsartikel:
HA (2005): Optimering af produktionen af aktive rekombinante proteiner med undersøgelse af virkningen af de små varmechokproteiner IbpA og IbpB fra Escherichia coli på in vivo-reaktivering af inklusionslegemer.
Echinococcus granulosus-antigen
Cellelyse og disintegration: Den homogeniserede prøve af opløseligt protein fra moden E. granulosus, fremstillet ved frysning og optøning i flydende nitrogen og ved 42◦C, blev sonikeret ved 110V, 170W i 3×15 sec på is. Derefter blev prøven centrifugeret i 15min ved 10.000g. Proteinkoncentrationen blev målt med Bradford-metoden, og prøven blev opbevaret ved -20◦C.
Anbefalet udstyr:
UP200S; 170W, køling på is; 3 x 15 sec.
Reference/forskningsartikel:
Tabar et al. (2010): Serodiagnostik af hydatidose hos får med hydatidevæske, protoscolex og helkropsantigen fra Echinococcus granulosus.
Escherichia coli Gr-
Inaktivering af Escherchia coli Gr- i mælk og juice med ultralyd.
Anbefalet udstyr:
UP100H
Reference/forskningsartikel:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Anvendelse af ultralydsassisteret varmebehandling til konservering og bevarelse af kvaliteten af flydende fødevarer. J Food Prot 66/2003. s. 1642–1649.
Escherichia coli Gr- i saltvandsopløsning
Inaktivering af Escherchia coli Gr- i saltvand med ultralyd.
Anbefalet udstyr:
UP100H
Reference/forskningsartikel:
Duckhouse, H.; Mason, T. J.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P. (2004): Virkningen af sonikering på mikrobiel desinfektion med hypoklorit. Ultrason. Sonochem. 11/ 2004. s. 173–176.
Escherichia coli Gr- i vand
Inaktivering af Escherchia coli Gr- i vand med ultralyd.
Anbefalet udstyr:
UP100H
Reference/forskningsartikel:
Furuta, M.; Yamaguchi, M.; Tsukamoto, T.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Hasiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktivering af Escherichia coli ved ultralydsbestråling. Ultrason. Sonochem. 11/2004. s. 57–60.
Glaukom, synsnervepapil
RNA-fragmentering af synsnervehoveder (fra rotteøjne): Synsnervehovedet (ONH) blev frosset på tøris og opbevaret ved 80°C før ekstraktion. RNA blev isoleret ved at sonikere de frosne synsnervehoveder i kittets ekstraktionsbuffer med en MS 0,5-sonde (UP50H) og derefter følge instruktionerne til Arcturus-kittet, herunder DNase-behandling for at fjerne eventuelt DNA. Det oprensede RNA blev kvantificeret.
Anbefalet udstyr:
UP50H med sonde MS0.5
Reference/forskningsartikel:
Johnson et al. (2007): Globale ændringer i genekspressionen i synsnervepapillen efter eksponering for forhøjet intraokulært tryk i en rottemodel for glaukom.
Glykosaminoglykanet chondroitinsulfat (CS)
Bestemmelse af CS ved dimethylmethylenblåt-assay
Resuspension af celler: CS-pellets i mikrocentrifugerør blev resuspenderet i 0,5 ml af en 0,1mg/ml papainopløsning i Hanks balancerede saltopløsning (HBSS) ved hjælp af pulser fra et ultralydshorn (UP 100H, Hielscher Ultrasonics GmbH, Tyskland) med cyklus 1 og 100 % amplitude i 3 sec. Derefter fandt fordøjelsen sted ved 60 °C i 24 h.
Til enzymkoblet immunosorbentassay (ELISA) blev cellerne derefter suspenderet i destilleret og deioniseret vand ved en koncentration på 106 celler/ml og opbevaret i en fryser ved –70°C natten over for at lette cellelysen. Cellerne blev derefter homogeniseret ved sonikering i 40 sec. med Hielschers ultralydsvævshomogenisator UP100H.
Anbefalet udstyr:
UP100H
Reference/forskningsartikel:
Vandrovcova et al. (2011): Virkningen af kollagen- og chondroitinsulfatbelægninger (CS) på poly-(lactid-co-glycolid) (PLGA) på osteoblastlignende MG 63-celler. Physiol. Res. 60; 2011. 797–813.
HaCaT-celler
Lyse af HaCaT-celler til kromatinimmunpræcipitation (ChIP): HaCaT-celler blev fikseret med 1% formaldehyd i 10 minutter ved 37uC. De fikserede celler blev lyseret i RIPA-bufferen og sonikeret på is med et 100W ultralydsapparat ved amplitude = 1 og arbejdscyklus = 100% i 12 pulser af ét minut (12 x 1 min.).
Anbefalet udstyr:
UP100H; i 12 min. på is,
Reference/forskningsartikel:
Zhang et al. (2007): Basonuclin regulerer en delmængde af generne for ribosomalt RNA i HaCaT-celler.
Heparin: depolymerisering af heparin
Ultralydsmetoden gør det muligt at fremstille lavmolekylært heparin (LMWH). Til dette gennemgår heparin en hydrogenperoxidkatalyseret radikal depolymerisering. Reaktionen er meget hurtig og tager mindre end 1 time, mens den fysisk-kemiske depolymeriseringsproces foregår under milde reaktionsbetingelser, ikke kræver aggressive eller giftige reagenser og giver et produkt uden kemiske artefakter. Ultralydsprocessen er derfor velegnet til produktion af LMWH i stor skala samt af analoger fremstillet af naturlige sulfaterede polysaccharider.
Ultralydsprocedure:
Til fysisk-kemisk depolymerisering af ufraktioneret heparin ved ultralydsassisteret radikal depolymerisering blev heparin opløst i vand til en slutkoncentration på 25 mg/mL (5 mL). Reaktionsblandingen blev sonikeret med et ultralydsapparat af sondetypen UP50H. Ultralydsapparatet var udstyret med en sonde (mikrospids MS3) med en diameter på 3mm, som gav en amplitude på 180μm. Processoren genererede mekaniske længdesvingninger med en frekvens på 30 kHz, frembragt ved elektrisk excitation. Reaktionsblandingen blev holdt ved 60°C i en Radleys®-reaktor, og ultralydsbølger blev tilført som en puls på 0,5sec for at forhindre opvarmning af blandingen. En alikvot ved tidspunkt nul (250μl) blev udtaget fra opløsningen, før reaktionen blev startet ved samtidig tilsætning af hydrogenperoxid og tilførsel af ultralydsbølger. Hydrogenperoxid blev tilsat for at opnå et endeligt hydrogenperoxid/heparin-forhold (w/w) på 0,15 (3,75 mg/mL).
Anbefalet udstyr:
UP50H med sonotrode MS3
Reference/forskningsartikel:
Achour, Oussama; Bridiau, Nicolas; Godhbani, Azza; Le Joubioux, Florian; Bordenave Juchereau, Stephanie; Sannier, Fredéric; Piot, Jean-Marie; Fruitier Arnaudin, Ingrid; Maugard, Thierry (2013): Ultralydsassisteret fremstilling af lavmolekylært heparin (LMWH) med antikoagulerende aktivitet. Carbohydrate Polymers 97; 2013. 684–689.
Humle
Ekstraktion af aktive forbindelser / urteekstrakter i vand og ethanol.
Anbefalet udstyr:
UP400S
Lactobacillus (lyse/DNA-isolering fra forskellige Lactobacillus-stammer)
Lactobacillus-stammer: L. pontis, L. sanfranciscensis, L. farciminis, L. panis, L. oris, L. vaginalis og L. reuteri, L. sp.
Procedure: Til isolering af DNA fra enkelte kolonier blev der udviklet en protokol for ultralydslyse. En koloni (2–3 mm i diameter) blev suspenderet i 100μl lysebuffer (20 mM EDTA, 10 mM Tris [pH 7,9], 1% Triton X-100, 500 mM guanidin-HCl, 250 mM NaCl). Cellerne blev lyseret ved 1 min sonikering med et ultralydsapparat af sondetypen UP50H. Efter tilsætning af 150μl kold ethanol (-20°C) blev blandingen centrifugeret gennem en spinkolonne fra QIAamp-vævskittet og til sidst elueret med 60μl buffer (10 mM Tris [pH 7,5]).
For at få et værktøj til hurtig og pålidelig identifikation af enkelte renkulturer blev PCR-assayet kombineret med en hurtig procedure til DNA-isolering. Tidskrævende enzymatiske lyseprocedurer og bakteriernes varierende følsomhed over for lysozym blev overvundet ved ultralydsbehandling af cellerne med efterfølgende oprensning og koncentrering ved binding af DNA til en silicamatrix. Cellematerialet fra en enkelt koloni viste sig at være tilstrækkeligt til PCR.
Anbefalet udstyr:
UP50H
Reference/forskningsartikel:
Müller, M. R. A. (2000): Karakterisering af det mikrobielle økosystem i kornfermenteringer ved hjælp af molekylærbiologiske metoder. Doktorafhandling, Kölns Universitet, 2000.
Lactobacillus acidophilus Gr+
Ultralydsinaktivering af Lactobacillus acidophilus Gr+ i mælk og juice.
Anbefalet udstyr:
UIP500hd
Reference/forskningsartikel:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Anvendelse af ultralydsassisteret termisk behandling til konservering og bevarelse af kvaliteten af flydende fødevarer. J Food Prot 66/2003. s. 1642–1649.
Legionella pneumophila Gr+ i fortyndet medium
Ultralydsinaktivering af Legionella pneumophila Gr+ i fortyndet medium.
Anbefalet udstyr:
UIP500hd
Reference/forskningsartikel:
Dadjour, M. F.; Ogino, C.; Matsumura, S.; Nakamura, S.; Shimizu N. (2006): Desinfektion af Legionella pneumophila ved ultralydsbehandling med TiO2. Water Res 40/2006. s. 1137–1142.
Leuconostoc mesenteroides
Lysozymaktivitet i leukocytter ved myelocytær leukæmi: cellesuspensionen blev sonikeret i 15 min., og prøverne blev analyseret for lysozymaktivitet. Leukocytternes lysozymkoncentration i ug./10 celler blev bestemt.
Anbefalet udstyr:
UP50H
Leukocytær isoenzymaktivitet ved myelocytær leukæmi
Prøveforberedelse: cellesuspensionen blev ultralydsbehandlet, og prøverne blev analyseret for lysozymaktivitet. Leukocytternes lysozymkoncentration i ug/106 blev bestemt.
Anbefalet udstyr:
UP200St
Liposomer
Dannelse af SUV’er
Klik her for at læse mere om fremstilling af liposomer med ultralyd!
Anbefalet apparat:
UP50H; 3 cyklusser à 5 min; i et isbad.
Malakitgrønt
Sonofotokatalytisk nedbrydning af malakitgrønt (et stærkt baktericid): Den fotokatalytiske nedbrydning alene er betydeligt hurtigere end den sonolytiske nedbrydning; effektiviteten kan forbedres ved at kombinere de to processer. Malakitgrønt, et stærkt baktericid, er meget økotoksisk for marine bakterier, men omdannes til organiske forbindelser, der er mindre giftige eller ugiftige.
Anbefalet apparat:
UP400S
Acylering af mangiferin
Mangiferin (1,3,6,7-Tetrahydroxy-2-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]xanthen-9-one; formel: C19H18O11) er en polyfenol med en C-glycosylxanthonstruktur, som findes i mange plantearter. Mangiferin udviser forskellige farmakologiske aktiviteter. Den regioselektive acylering af mangiferin kan katalyseres meget effektivt af lipase under sonikering. Sammenlignet med de konventionelle metoder udmærker den ultralydsassisterede katalyse sig ved fordelene ved kortere reaktionstid og højere udbytter. De optimale betingelser for acylering af mangiferin med ultralyd blev fundet at være følgende:
lipase: PCL, acyldonor: vinylacetat; reaktionsopløsningsmiddel: DMSO, reaktionstemperatur: 45 degC, ultralydseffekt: 200W; substratforhold: acyldonor/mangiferin 6/1, enzymdosering: 6 mg/ml
Udbyttet af den regioselektive acylering var op til 84%.
Anbefalet apparat:
UP200St eller UP200Ht
Reference/videnskabelig artikel:
jf.: Wang, Z.; Wang, R.; Tian, J.; Zhao, B; Wei, X.F.; Su, Y.L.; Li, C.Y.; Cao, S.G.; Wang, L. (2010): Effekten af ultralyd på lipasekatalyseret regioselektiv acylering af mangiferin i ikke-vandige opløsningsmidler. J. Asian Nat Prod. Res. 12/1, 2010. 56–63.
Ekstraktion af molekyler
Ekstraktionsprotokol til ekstraktion fra gips, rheolite, basalt, edfell-aske og obsidianglas:
En prøve på 1g af regolit eller knust sten underkastes væskeekstraktion under ultralydsbestråling for at ekstrahere og solubilisere målmolekyler. Derfor blev 3ml MeOH P80 tilsat til 1g analogprøve i et glasreagensglas og sonikeret i 20 minutter med et ultralydsapparat af probetypen UP50H indstillet til 40% amplitude. Blandingen fik lov til at stå i 10 minutter, og den uklare supernatant, der var dannet over den sedimenterede analogprøve, blev dekanteret over i 1,5 ml centrifugerør. For at minimere tabet af ekstraherede komponenter ved adsorption til overfladerne af de hydrofobe polymercentrifugerør blev rørene først blokeret med 0,5% (w/v) BSA i 100 mM HEPES pH 7,4. Supernatanterne blev klaret ved centrifugering ved 17.000 G i 10 minutter og opbevaret ved 2 – 8°C i hætteglas af glas, indtil de blev testet i immunanalysen.
Anbefalet apparat:
UP50H
Reference/videnskabelig artikel:
Rix, C.(2012): Påvisning af liv på Mars og Life Marker Chip: Antistofbaserede analyser til påvisning af organiske molekyler i væskeekstrakter af prøver fra Mars. Doktorafhandling, Cranfield University 2012.
Pellets af muselever
Pellets blev vasket og sonikeret i 5 min med yderligere 0,5 mL LB2 og centrifugeret ved 12.000 g i yderligere 20 min, og de to resulterende supernatantfraktioner blev opsamlet. Til sidst blev pellets opløst i 0,5 mL buffer indeholdende 40 mM trisbase, 5 M urinstof, 2 M thiourinstof, 4% CHAPS, 100 mM DTT, 0,5% (v/v) biolyte 3–10 (LB3), og blev sonikeret og centrifugeret ved 12.000 g i 20 min.
Anbefalet apparat:
UP200S; i 5min.
Reference/videnskabelig artikel:
Gazzana et al. (2009): En opdatering om museleverens proteom.
Suspension af muselever
Homogenisering af prøven for at fremstille cellelysat.
Anbefalet apparat:
UP200S; i 3 x 20 sec.
Reference/videnskabelig artikel:
Gazzana et al. (2009): En opdatering om museleverens proteom.
Penicillium digitatum
Ultralydsinaktivering af Penicillium digitatum (et plantepatogen) i Sabouraud-vækstmedium.
Anbefalet apparat:
UP200St
Reference/videnskabelig artikel:
López-Malo, A.; Palou, E.; Jiménez-Fernández, M.; Alzamora, S. M.; Guerrero, S. (2005): Multifaktoriel inaktivering af svampe ved kombination af termosonikering og antimikrobielle midler. J. Food Eng. 67/ 2005. s. 87–93.
Fykocyanin fra Spirulina platensis (Arthrospira platensis)
Ekstraktion af phycocyanin fra celler af Spirulina platensis (Arthrospira platensis).
Anbefalet apparat:
UP400S
Planteceller og plantevæv
30% pakkede planteceller (W/V) og destilleret vand underkastes celleopbrydning ved sonikering i 1–15 min.; disintegration af plantevæv: 1 g tørret væv suspenderet i alkohol disintegreres under sonikering i ca. 5 min.
Anbefalet apparat:
UP100H
Blodplader
Fremstilling af trombocytlysat: Celleopbrydning på 1–5 min.
Anbefalet apparat:
UP200Ht
Pleurotus tuberregium
Ekstraktion af polysakkarider fra den spiselige svamp Pleurotus tuberregium
Anbefalet udstyr:
UP400S
Poly(mælkesyre-co-glykolsyre) (PLGA)
Fremstilling af poly(mælkesyre-co-glykolsyre) (PLGA) med indlejret bovint serumalbumin (BSA) ved sonikering i 40 sec.
Anbefalet udstyr:
Dmini; i 40sec.
Reference/videnskabelig artikel:
Freitas et al. (2005): Ultralydsemulgering i gennemstrømning kombineret med statisk mikroblanding til aseptisk fremstilling af mikrosfærer ved opløsningsmiddelekstraktion.
Polyfenoler fra æbler
Ultralydsekstraktion af polyfenoler fra æble. Opløsningsmiddel: vandigt. Udbyttet øget med 6%; sonikeringsintensitet: 20–75Ws/ml; procestemperatur: opvarmet til 80 degC.
Anbefalet udstyr:
UIP2000hd
Reference/videnskabelig artikel:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Udvinding og modifikation af fødevareingredienser ved hjælp af ultralyd. I: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultralydsteknologier til fødevarer og bioprocesser. New York: Springer, 2011. s. 345–368.
Polyfenoler fra sort te
Ultralydsekstraktion af polyfenoler fra sort te. Opløsningsmiddel: vandigt. Udbyttet øget med 6–18%; sonikeringsintensitet: 8–10Ws/ml; omgivelsestryk, procestemperatur: opvarmet til 90 degC.
Anbefalet udstyr:
UIP2000hd
Reference/videnskabelig artikel:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Udvinding og modifikation af fødevareingredienser ved hjælp af ultralyd. I: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultralydsteknologier til fødevarer og bioprocesser. New York: Springer, 2011. s. 345–368.
Polyfenoler fra presserester af røde druer
Ultralydsekstraktion af polyfenoler fra presserester af røde druer. Opløsningsmiddel: vandigt. Udbyttet øget med 11–35%; sonikeringsintensitet: 20–75Ws/ml; omgivelsestryk.
Anbefalet udstyr:
UIP2000hd
Reference/videnskabelig artikel:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Udvinding og modifikation af fødevareingredienser ved hjælp af ultralyd. I: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultralydsteknologier til fødevarer og bioprocesser. New York: Springer, 2011. s. 345–368.
Polyfenoler, aminosyre og koffein fra grøn te
Svinekød: Lagesaltning af svinekam
Ved ultralydsassisteret lagesaltning blev svinekamme (Longissimus dorsi) nedsænket i natriumchloridlage (40 g L−1) og behandlet ved 5°C med lavfrekvent ultralyd (20 kHz) ved lav intensitet (2–4 W/cm−2). Effekten af den ultralydsassisterede saltning på svinevævets mikrostruktur, proteindenaturering, vandbindingskapacitet (WBC), vandtilbageholdelseskapacitet (WHC), natriumchlorids diffusionskoefficient (D) og kødets teksturprofil (TPA) blev undersøgt. Resultaterne viste, at ultralydsbehandlingen medførte gunstige mikrostrukturelle ændringer i kødvævet. Vandtilbageholdelseskapaciteten og teksturegenskaberne blev forbedret ved ultralydsbehandling sammenlignet med både tumblede og statisk lagesaltede prøver. Disse positive effekter var dog stærkt afhængige af ultralydsintensiteten. Højere intensiteter og/eller længere behandlingstider medførte denaturering af proteiner. Modellen med konstant diffusionskoefficient kunne præcist beskrive NaCl’s diffusionskinetik under lagesaltningen. Ultralydsbehandlingen øgede saltdiffusionen signifikant sammenlignet med prøver, der blev lagesaltet under statiske forhold, og diffusionskoefficienten steg eksponentielt med stigende ultralydsintensitet.
Anbefalet udstyr:
UP200Ht med sonotrode S26d40
Reference/videnskabelig artikel:
Siro, I.; Ven, Cs.; Balla, Cs.; Jonas, G.; Zeke, I.; Friedrich, L. (2009): Anvendelse af en ultralydsassisteret saltningsteknik til forbedring af natriumchlorids diffusion i svinekød. Tidsskrift for fødevareteknik 91/2, 2009. 353–362.
Porphyra yezoensis
Ultralydsnedbrydning af polysakkarider fra Porphyra yezoensis: 50mL af en opløsning med 1,0 g/100mL polysakkarider fra porphyra yezoensis (tørvægt) blev sonikeret i 4 hr med en UP400S.
Anbefalet udstyr:
UP400S; pulseret ultralyd (cyklusser: 2 sec til/ 2 sec fra) ved 20°C.
Pulvere
Formaling, deagglomerering og dispergering til en lille, relativt ensartet partikelstørrelse.
Anbefalet udstyr:
UP200St
Rotteknogler
Rottelever
Disruption og vævshomogenisering med en UP400S.
Anbefalet udstyr:
UP400S; 3 gange i 30 sec.; på is.
Reference/videnskabelig artikel:
Oh et al. (2003): Genet for acetyl-CoA-carboxylase reguleres af sterolregulatorisk elementbindende protein-1 i leveren. Journal of Biological Chemistry 2003.
Rottehud
Rauvolfia serpentina
Rebaudiosid A
Prøver med 10g tørrede og malede steviablade blev ekstraheret i 100mL vand under konstant omrøring (med en magnetomrører). pH-værdien blev reguleret med 0,01 M natriumfosfat ved pH 7. Prøven blev anbragt i et 150 mL bægerglas og sonikeret med et ultralydsapparat af probetypen (UIP500hd, 20kHz, 500W). Sonotrodens spids blev nedsænket ca. 1,5 cm i suspensionen af steviablade. Ultralydsapparatet blev indstillet til en udgangseffekt på 350W. En mild sonikering ved 350 W i 5–10 min. ved en konstant procestemperatur på 30°C gav et udbytte af rebaudiosid A på 30–34g pr. 100g prøve. Efter sonikering blev ekstraktopløsningen centrifugeret og filtreret gennem en 0,45 μm mikroporøs membran; filtratet blev udtaget til analyse af det samlede indhold af rebaudiosid A. Ekstraktionsudbyttet af det samlede indhold af rebaudiosid A blev analyseret ved HPLC.
Den opløsningsmiddelfrie, ultralydsassisterede ekstraktion gav et højt udbytte af rebaudiosid A sammenlignet med traditionelle ekstraktionsmetoder såsom varmeekstraktion eller maceration.
Anbefalet apparat:
UIP500hd
Risstivelse
Disintegration, isolering af stivelse og brydning af ikke-kovalente bindinger mellem protein og stivelse i en rismelssuspension (33%) på 20 – 40 min.
Anbefalet apparat:
UP500hd; 20 – 40 min.
Hjuldyr
Celledisintegration af mesozooplankton: Ved sonikering under følgende betingelser med fire flowhastigheder (200, 400, 520 og 800lh-1) og fire amplituder (25, 50, 75 og 100%) blev der opnået en drabsrate på mellem 58 og 85%.
Anbefalet apparat:
UP2000 med flowcelle
Reference/videnskabelig artikel:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraviolet lys, ultralyd og hydrogenperoxid til behandling af ballastvand – Forsøg med mesozooplankton i brakvand med lav saltholdighed. Journal of Marine Environmental Engineering, 8(1), 35–55.
S. fragilis
Saccharomyces cerevisiae
Disintegration
Anbefalet apparat:
UP400S
Reference/videnskabelig artikel:
Guerrero, S,; López-Malo, A.; Alzamora, S. M. (2001): Ultralyds effekt på overlevelsen af Saccharomyces cerevisiae: indflydelse af temperatur, pH og amplitude. Innov. Food Sci. Emerg Technol. 2/2001. s. 31–39.
Saccharomyces cerevisiae
Ultralydsinaktivering af Saccharomyces cerevisiae i Sabouraud-vækstmedium og i saltvand.
Anbefalet apparat:
UP400S
Reference/videnskabelig artikel:
Yap, A.; Jiranek, V.; Grbin, P.; Barnes, M.; Bates, D. (2007): Undersøgelser af anvendelsen af ultralyd med høj effekt til rengøring og desinfektion af fade og planker. Austr. NZ Wine Indust. J. 22(3)/ 2007. s. 96–104.
Safran, Crocus sativus
Ekstraktion af aktive forbindelser (aromastoffer og farvestoffer).
Klik her for at læse mere om ekstraktion fra safran!
Anbefalet apparat:
UP50H
Reference/videnskabelig artikel:
Kadkhodaee et al. (2007): Ultralydsekstraktion af aktive forbindelser fra safran. Acta Hortic. 739, 2007. 417–425.
Salmonella Senftenberg 775W Gr-
Ultralydsinaktivering af Salmonella Senftenberg 775W Gr- i McIlvaine-citrat-fosfatbuffer eller næringsbouillon.
Anbefalet apparat:
UP100H
Reference/videnskabelig artikel:
Álvarez, I.; Manas, P.; Virto, R.; Condón, S. (2006): Inaktivering af Salmonella Senftenberg 775W med ultralydsbølger under tryk ved forskellige vandaktiviteter. Int. J. Food Microbiol. 108/2006. s. 218–225.
Salvia miltiorrhiza Bunge
Ekstraktion af biologisk aktive forbindelser: natrium-Danshensu og fire tanshinoner (dihydrotanshione I, tanshinone I, cryptotanshinone og tanshinone IIA).
Anbefalet apparat:
UP100H
Salvia officinalis
Ekstraktion af aktive forbindelser fra Salvia Officinalis (salvie) på mindre end 2hr.
Anbefalet apparat:
UP50H
Serum
Lever og lunger med cyster samt positivt blod fra får (Echinococcus granulosus-antigener)
Levere og lunger med cyster samt positivt blod fra får (Echinococcus granulosus-antigener hos lam): Prøven blev derefter sonikeret i 2 × 15 sec på is, indtil ingen intakte protoscolices var synlige.
Anbefalet apparat:
UP200S; 2 x 15 sec.
Reference/ forskningsartikel:
Tabar et al. (2009): Antistofrespons mod hydatidevæske, protoscolex og helkropsantigener fra Echinococcus granulosus hos lam. Journal of Veterinary Research, bind 10, nummer 3; 2009. 283–288.
Sorbitantrioleat, ethanol (som opløsningsmiddel) og Bi-2212-pulver
Deagglomerering af en opslæmning, der indeholder dispergeringsmidlet Sorbitant Trioleate, ethanol (som opløsningsmiddel) og Bi-2212-pulver.
Anbefalet apparat:
UP200S; i 3 min.
Reference/ forskningsartikel:
Mora et al. (2009): Fremstilling af superledende belægninger på konstruktionskeramiske fliser.
Sojaisoflavoner
ultralydsekstraktion af sojaisoflavoner i vand og opløsningsmiddel. Øget udbytte på op til 15% i ekstraktionseffektivitet.
Anbefalet apparat:
UP200St
Reference/ forskningsartikel:
Rostagno et al. (2003), citeret af Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Genvinding og modifikation af fødevareingredienser ved hjælp af ultralyd. I: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultralydsteknologier til fødevareforarbejdning og bioprocessering. New York: Springer, 2011. s. 345–368.
Sojaprotein
Ultralydsekstraktion af sojaprotein i vand og alkali (natriumhydroxid). Udbyttet blev øget med 53%. Inline-sonikering viste sig at være mere effektiv end batchekstraktion (inline-sonikering gav et 23% højere udbytte end batchsonikering).
Anbefalet apparat:
UIP1000hd til batchbehandling/ bægerglas og med en flowcellereaktor til inline-sonikering.
Reference/ forskningsartikel:
Moulton og Wang (1982), citeret af Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Genvinding og modifikation af fødevareingredienser ved hjælp af ultralyd. I: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultralydsteknologier til fødevareforarbejdning og bioprocessering. New York: Springer, 2011. s. 345–368.
Sædcellehoveder (menneske)
Sædcellehaler (menneske)
Stevia rebaudiana Bert.
Ultralydsekstraktion af steviosidglykosid fra prøver med 10 g tørre blade fra Stevia rebaudiana med fire partikelstørrelser (0,315 mm, 2 mm, 6,3 mm og knuste tørre blade): Prøverne blev blandet med forskellige opløsningsmidler: destilleret vand og vand/ethanol-blandinger (55% og 70%) med forskellige forhold mellem prøvevægt og opløsningsmiddelvolumen: 1/10, 1/8, 1/5 (w/v), og derefter udsat for ultralyd ved stuetemperatur. Sonikeringstid: < 5 min.
Anbefalet apparat:
UP200St
Kontakt os! / Spørg os!
Højtydende ultralydsapparater til enhver størrelse
Hielscher Ultrasonics’ celleopbrydningsapparater og vævshomogenisatorer fås i enhver størrelse til ethvert volumen. Uanset om du skal sonikere små prøver, store antal prøver såsom 96-brøndsplader, mellemstore volumener eller lastbillæs i timen, tilbyder vores sortiment det ideelle ultralydsapparat til din anvendelse. Kompakte, håndholdte ultralydshomogenisatorer er optimale til laboratorier og forskning, mens vores industriserie dækker alt fra 0,5kW til 16kW pr. ultralydsprocessor. Da ultralydsapparater fra Hielscher kan installeres i grupper, kan du behandle praktisk talt ethvert volumen. Robustheden af Hielschers ultralydsudstyr muliggør drift 24/7 under høj belastning og i krævende miljøer.
Den avancerede og intelligente software giver den højeste grad af proceskontrol og brugervenlighed for operatøren. Alle sonikeringsdata registreres automatisk på et indbygget SD-kort. Andre intelligente funktioner omfatter forudindstilling og lagring af sonikeringsparametre, LAN-forbindelse og fjernstyring via browser.
Tabellen nedenfor giver dig et indtryk af den omtrentlige behandlingskapacitet for vores ultralydsapparater i laboratoriestørrelse til vævshomogenisering og andre prøveforberedelsesopgaver:
| Anbefalede apparater | Batchvolumen | Volumenstrøm |
|---|---|---|
| UIP400MTP sonikeringsapparat til 96-brøndsplader | flerbrøndsplader / mikrotiterplader | n.a. |
| Ultralyds-CupHorn | CupHorn til prøveglas eller bægerglas | n.a. |
| GDmini2 | ultralydsmikroflowreaktor | n.a. |
| VialTweeter | 0,5 til 1,5mL | n.a. |
| UP100H | 1 til 500mL | 10 til 200mL/min |
| UP200Ht, UP200St | 10 til 1000mL | 20 til 200mL/min |
| UP400St | 10 til 2000mL | 20 til 400mL/min |
| Ultralydssigteryster | n.a. | n.a. |
Ultralydsapparat UP200Ht med 2mm mikrospids S26d2 til sonikering af små prøver