Ultralydsbaseret fremstilling af blodpladerigt serum

• Blodpladerigt plasma (PRP) er blodplasma, der er blevet beriget med blodplader, og som anvendes til medicinske og æstetiske behandlinger.
• Ultralydsbaseret lyse og konditionering er en meget effektiv metode til fremstilling af blodpladerigt plasma.
• Hielscher Ultrasonics tilbyder forskellige ultralydssystemer, der opfylder kravene til behandling af blod (f.eks. til klargøring inden for og uden for et renrum).

Blodpladerigt serum

Sonikering er en pålidelig og enkel metode til at lysere blodpladerne i autologt blodserum for at frigive vækstfaktorerne. De blodpladeafledte fraktioner – også kendt som autologt konditioneret serum (ACS) – anvendes til vævsreparation eller æstetiske behandlinger. For at opnå optimale resultater beriges PRP før injektion.
Ved fremstilling af beriget plasma med cellevækstfaktorer er sonikering en meget effektiv metode til at lysere cellemembranerne og frigive næsten alle cellevækstfaktorerne fra blodpladerne. Med ultralydsbaseret lyse og konditionering kan selv antikoaguleret blod anvendes.
Konditionering af PRP ved sonikering er en praktisk og omkostningseffektiv måde at opnå koncentrerede vækstfaktorer på.

Ultralydsbaseret lyse af blodpladerigt plasma (PRP)

Virkninger af ultralydsbaseret lyse

Ultralydsbehandling af blodserum medfører en homogen lyse af blodpladerne for at frigive de indesluttede vækstfaktorer (vækstfaktor AB (PDGF-AB), vækstfaktor AA (PDGF-AA), vækstfaktor BB (PDGF-BB), vaskulær endotelial vækstfaktor (VEGF), transformerende vækstfaktor β (TGF-β), epidermal vækstfaktor (EGF), insulinlignende vækstfaktor (IGF), epitelcellevækstfaktor ECGF og fibroblastvækstfaktor (FGF)). Blodpladerne og deres alfa-granula nedbrydes ved sonikering ved hjælp af fænomenet akustisk kavitation. Anvendelse af ultralydskavitation til lyse af blodplader mindsker den mulige negative påvirkning af vækstfaktorernes aktivitet ved metoden med gentagen frysning og optøning.

Protokol for ultralydsbaseret fremstilling af PRP

Ca. 16mL af en frisk udtaget autolog blodprøve vendes forsigtigt 8–10 gange i et rør, så blodet og antikoagulanterne blandes godt. Derefter centrifugeres prøven ved 1800 g i 20 min ved stuetemperatur. Efter centrifugeringen danner blodpladerne og de mononukleære celler et hvidligt lag nederst i plasmalaget, som kaldes blodpladerigt plasma (PRP). Det øverste lag kaldes blodpladefattigt plasma (PPP). De mononukleære celler kan fjernes eller forblive i prøven. Ofte forbliver de mononukleære celler i PRP-prøven for at undgå yderligere trin, som indebærer risiko for kontaminering.
Bemærk: Ultralydsbehandlingen af autologt PRP skal udføres under sterile forhold.
PRP og PPP adskilles og opsamles. Til PPP tilsættes 1,5mL 10% calciumchloridopløsning, mens der til PRP tilsættes 0,5mL 5% ethanol. Begge suspensioner omrøres forsigtigt og henstår i 5 min ved stuetemperatur. Til sidst tilsættes 1mL PPP til PRP-suspensionen, som henstår, indtil der dannes et fibrinkoagel.
Ultralydsbehandling: Da den dannede blodpladegel fungerer som et reservoir for de frigivne vækstfaktorer, skal fibringelen nedbrydes for at frigive de tilgængelige vækstfaktorer. Parametrene for ultralydsbaseret lyse og frigivelse af vækstfaktorer er følgende: Sonikér prøven i røret med en UP200Ht eller UP200St (200W, 26kHz) med sonotrode S26d2. For at undgå overophedning af blodprøven kan sonikeringen udføres i pulserende cyklusser (f.eks. 10 sek. tændt, 30 sek. slukket). Prøven bør placeres på is til køling, så temperaturen optimalt holdes mellem 2 – 5°C. Efter sonikeringen centrifugeres prøven ved 16.000 g i 5 min. ved stuetemperatur. Supernatanten opsamles og kan opbevares ved -70°C.
Blodpladekoncentrationen i PRP-fraktionen blev ved sonikeringsmetoden øget 1,7 – 4,5 gange sammenlignet med det gennemsnitlige blodpladetal i fuldblod angivet i litteraturen.

PRP er blevet kombineret med behandling med stamceller fra fedtvæv (autologe stamceller frigivet fra fedtvæv ved hjælp af ultralyd, blandet med PRP og injiceret tilbage i patientens væv med henblik på reparation).

Ultralydsudstyr

Hielscher Ultrasonics er ekspert i avanceret og pålidelig ultralydsteknologi. Vores ultralydsapparater anvendes over hele verden til lyse, ekstraktion og prøveforberedelse – både direkte og indirekte. Autoklaverbart tilbehør såvel som engangstilbehør sikrer en kontamineringsfri behandling af autologe blodprøver. De fleste af vores systemer kan anvendes til ultralydsbaseret lyse af stamceller og PRP, hvilket gør vores ultralydsapparater endnu mere økonomisk effektive.
Tabellen nedenfor viser vores ultralydsapparater, der er egnede til fremstilling af blodpladerigt plasma, samt det anbefalede prøvevolumen for hvert apparat. Større ultralydsapparater og specialtilpassede systemer er også tilgængelige.

Kontakt os i dag! Vi hjælper dig gerne med at finde det optimale ultralydsapparat!