Ultralydspræparat af blodpladerigt serum
- Trombætrigt plasma (PRP) er blodplasma, der er beriget med blodplader, som bruges til medicinske og æstetiske behandlinger.
- Ultralydslyse og konditionering er en meget effektiv metode til fremstilling af blodpladerigt plasma.
- Hielscher Ultrasonics tilbyder forskellige ultralydssystemer, der matcher kravene til blodbehandlingen (f.eks. til indvendig og udvendig forberedelse af et rent rum).
blodpladerigt serum
Sonikering er en pålidelig og nem metode til at lyde blodpladerne i autologt blodserum for at frigive vækstfaktorerne. De trombocytafledte fraktioner – også kendt som autologt konditioneret serum (ACS) – bruges til vævsreparation eller æstetiske behandlinger. For at opnå optimale resultater beriges PRP før injektion.
For at fremstille beriget plasma med cellevækstfaktorer er sonikering en meget effektiv og effektiv metode til at lyse cellemembranerne og frigive næsten de komplette cellevækstfaktorer fra blodpladerne. Ved ultralydslyse og konditionering kan selv antikoaguleret blod bruges.
Konditionering af PRP via sonikering er en bekvem og omkostningseffektiv måde at give i koncentrerede vækstfaktorer.
Ultralyd lysis effekter
Ultralydsbehandling af blodserum resulterer i en homogen lysering af blodpladerne for at frigive de indespærrede vækstfaktorer (vækstfaktor AB (PDGF-AB), vækstfaktor AA (PDGF-AA), vækstfaktor BB (PDGF-BB), vaskulær endotelial vækstfaktor (VEGF), transformerende vækstfaktor β (TGF-β), epidermal vækstfaktor (EGF), insulinlignende vækstfaktor (IGF), epitelceller vækstfaktor ECGF og fibroblastisk vækstfaktor (FGF)). Blodpladerne og deres alfa-granuler forstyrres ved sonikering ved hjælp af fænomenet akustisk kavitation. Brug af ultralydskavitation til blodpladelyse mindsker den mulige negative indvirkning på vækstfaktoraktiviteten af den gentagne fryse-optøningsmetode.
Protokol til ultralyd PRP-forberedelse
Ca. 16 ml frisk indsamlet autolog blodprøve vendes forsigtigt 8-10 gange i et rør, så blodet og antikoagulantia blandes godt. Derefter centrifugeres prøven ved 1800 g i 20 minutter ved stuetemperatur. Efter centrifugeringen bygger blodpladerne og mononukleære celler et hvidligt lag i bunden af plasmalaget, som er kendt som blodpladerigt plasma (PRP). Det øverste lag er kendt som blodpladefattigt plasma (PPP). De mononukleære celler kan fjernes eller forblive i prøven. Ofte forbliver de mononukleære celler i PRP-prøven for at undgå yderligere trin, som indebærer risiko for kontaminering.
Bemærk: Ultralydsbehandlingen af autolog PRP skal udføres under sterile forhold.
PRP og PPP adskilles og indsamles. Til PPP tilsættes 1,5 ml 10 % calciumchloridopløsning, mens der tilsættes til PRP 0,5 ml 5 % ethanol. Begge suspensioner omrøres forsigtigt og får lov til at stå i 5 minutter ved stuetemperatur. Til sidst tilsættes 1 ml PPP til PRP-suspensionen og får lov til at stå, indtil der dannes en fibrinkoagulation.
Ultralydsbehandling: Da den dannede blodpladegel fungerer som et reservoir for de frigivne vækstfaktorer, skal fibringelen forstyrres for at frigive de tilgængelige vækstfaktorer. Parametrene for ultralydslysen og frigivelse af vækstfaktor er følgende: Sonikerat med en UP200Ht eller UP200St (200W, 26kHz) med sonotrode S26d2 prøven i røret. For at undgå overophedning af blodprøven kan sonikering udføres i pulserende cyklusser (f.eks. 10 sek. tændt, 30 sek. slukket). Prøven skal placeres på is til afkøling, så temperaturen holdes optimalt mellem 2 – 5°C. Efter sonikering centrifugeres prøven ved 16000 g i 5 min. ved stuetemperatur. Supernatanten opsamles og kan opbevares ved -70°C.
Trombocytkoncentrationen i PRP-fraktionen blev beriget 1,7 – 4,5 gange i den sonikerede metode sammenlignet med litteraturen gennemsnitligt blodpladetal i fuldblod.
PRP er blevet kombineret med fedtafledt stamcelleterapi (ultralydfrigivne autologe stamceller fra fedtvæv, mixed with PRP, and injected back into the patient’s tissue for repair).
Ultralyd udstyr
Hielscher Ultrasonics er ekspert i sofistikeret og pålidelig ultralydsteknologi. Vores ultralydsenheder bruges over hele verden til lysis, ekstraktion og prøveforberedelse – direkte og indirekte. Autoklaverbar samt Engangsbrug Tilbehør sikrer en Fri for kontaminering behandling af autologe blodprøver. De fleste af vores systemer kan bruges til ultralydslysering af Stamceller og PRP, hvilket gør vores ultralydsenheder økonomisk endnu mere effektive.
Denne tabel nedenfor viser vores ultralydsenheder, som er egnede til fremstilling af blodpladerigt plasma, og deres anbefalede prøvevolumen. Større ultralydapparater og tilpassede systemer er også tilgængelige.
Apparat | Effekt [W] | Frekvens [kHz] | Slags | Volumen [ml] | ||
---|---|---|---|---|---|---|
VialTweeter | 200 | 26 | Enkeltstående | 0.5 | – | 1.5 |
UP50H | 50 | 30 | håndholdt eller stativmonteret | 0.01 | – | 250 |
UP100H | 100 | 30 | håndholdt eller stativmonteret | 0.01 | – | 500 |
UP200Ht | 200 | 26 | håndholdt eller stativmonteret | 0.1 | – | 1000 |
UP200St | 200 | 26 | Stående | 0.1 | – | 1000 |
UP400St | 400 | 24 | Stående | 5.0 | – | 2000 |
UP200St-SonoStep | 200 | 26 | Enkeltstående | 30 | – | 500 |
GDmini2 | 200 | 26 | Forureningsfri flowcelle |
Kontakt os venligst i dag! Vi hjælper dig gerne med at finde den optimale ultralydsenhed!
Kontakt os!? Spørg os!
Litteratur/Referencer
- Fortunato, T. M.; Beltrami, Ch.; Emanueli, C.; De Bank, P.A.; Pula, G. (2016): Blodpladelysatgel og endotelprogenitorer stimulerer mikrovaskulær netværksdannelse in vitro: vævstekniske implikationer. Sci. Rep. 6, 2016.
- Hamid, M.S.A.; Yusof, Ashril; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): Blodpladerigt plasma (PRP) til akut muskelskade: En systematisk gennemgang. PLOS ONE bind 9, udgave 2, 2014.
Fakta, der er værd at vide
Blodpladerigt plasma
Trombocytrigt plasma indeholder vækstfaktor AB (PDGF-AB), blodpladeafledt vækstfaktor AA (PDGF-AA), blodpladeafledt vækstfaktor BB (PDGF-BB), vaskulær endotelial vækstfaktor (VEGF), transformerende vækstfaktor β (TGF-β), epidermal vækstfaktor (EGF), insulinlignende vækstfaktor (IGF), epitelcellers vækstfaktor ECGF og fibroblastisk vækstfaktor (FGF), som er vigtige stimulanser for cellevækst og fornyelse.
Autologt konditioneret serum (ACS)
Autologt konditioneret plasma (ACP) er et blodpladerigt plasma, der ekstraheres fra autologt blod, som bruges til at understøtte regenerering i en række ortopædiske tilstande og kirurgiske procedurer. Konditioneret serum fremstilles ved at adskille plasmaet fra de andre blodkomponenter (såsom erytrocytter) og koncentrere det. ACP er et blodpladerigt plasma (PRP). PRP er en generel betegnelse for en type plasma, der indeholder en signifikant højere koncentration af trombocytter sammenlignet med fuldblod. Det udvindes af fuldblod. Hovedkomponenterne i ACP inkluderer trombocytter (blodplader) og flere vækstfaktorer, der spiller en vigtig rolle i helingsprocessen. I modsætning til andre blodpladerige plasmaformuleringer er ACP kendetegnet ved en lav koncentration af hvide blodlegemer såsom neutrofile granulocytter, der kan være skadelige for helingsprocessen, når de er til stede i høje koncentrationer.
blodpladerige plasmainjektioner
Blodpladerigt plasma bruges som injektion i regenerativ medicin såvel som i kosmetiske procedurer. Anvendelsen af PRP lover betydelig acceleration af muskelheling og muskelrestitution. Desuden bruges det med succes til behandling af betændelse, gigt, smerter, sår, langsomt helende åbne sår og alvorlige hudforbrændinger. PRP indeholder et højt niveau af vækstfaktorer, som stimulerer og beskytter de helende celler for at det beskadigede væv repareres.
Til kosmetiske behandlinger har PRP vist sig effektiv til at stimulere hårvækst, hudfornyelse (også kendt som vampyrbehandling).
Blodpladeafledte vækstfaktorer (PDGF)
Udtrykket blodpladeafledt vækstfaktor (PDGF) refererer til faktorerne PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C og PDGF-D. Det er et signalnetværk af fire ligander (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C og PDGF-D) og to receptorer, PDGFR-alfa og PDGFR-beta.
Vækstfaktorer, eller proteiner, regulerer cellevækst og -deling. Som det vigtigste mitogen, der findes i pattedyrsserum, som frigives fra blodplader under dannelse af blodpropper, spiller det en væsentlig rolle i dannelsen af blodkar (angiogenese), væksten af blodkar fra allerede eksisterende blodkarvæv.