ულტრაბგერითი აპლიკაციები MonkeyPox ვირუსში

ულტრაბგერითი დამუშავების მნიშვნელოვანი მეთოდია მაიმუნის ყვავილის ვირუსის (MPXV) იზოლაციისთვის ანალიტიკური ნიმუშებიდან, ვირუსის დნმ-ის ფრაგმენტაციისთვის, ასევე მაიმუნის ვაქცინის წარმოებაში. ნიმუშის მომზადებისთვის დიაგნოსტიკამდე და ანალიზამდე (PCR, ELISA და ა.შ.) გამოიყენება ულტრაბგერითი ზემოქმედება უჯრედების დასალიზის მიზნით, რათა განთავისუფლდეს მაიმუნის ვირუსი უჯრედის შიგნიდან და/ან დნმ-ის ფრაგმენტად. ვაქცინის წარმოებაში, აპლიკაციები მერყეობს ვირუსის ნაწილაკების/დნმ-ის მომზადებიდან, წამლის მატარებლებში ჩასმა და ინოკულის ფორმულირება.
ქვემოთ შეგიძლიათ იხილოთ დეტალური ინფორმაცია მაიმუნის ვირუსის ულტრაბგერითი ნიმუშის მომზადებისა და ასევე ულტრაბგერითი დახმარებით MPXV ვაქცინის წარმოების შესახებ.

რას ნახავთ ამ გვერდზე:

• ულტრაბგერითი ლიზისი Monkeypox ვირუსის ექსტრაქციისთვის
• მაიმუნის ვირუსის დნმ-ის ულტრაბგერითი ფრაგმენტაცია
• ულტრაბგერითი აპლიკაციები MPXV ვაქცინის წარმოებაში

ულტრაბგერითი ლიზისი და დნმ-ის ფრაგმენტაცია პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციამდე (PCR)

მაიმუნის ვირუსის ინფექცია გამოვლენილია ნუკლეინის მჟავას გამაძლიერებელი ტესტით (NAAT), რეალურ დროში ან ჩვეულებრივი პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციის (PCR) გამოყენებით ვირუსული დნმ-ის უნიკალური თანმიმდევრობების გამოსავლენად. ნიმუში (მაგ. ცხვირ-ხახის სვოპიდან ან კანის ბიოფსიიდან) შეიცავს ვირუსს უჯრედებში.
ანალიზისთვის, ვირუსი უნდა განთავისუფლდეს უჯრედებიდან და ვირუსული დნმ უნდა იყოს ფრაგმენტირებული PCR-სთვის.

ულტრაბგერითი ლიზისი:

უჯრედების ულტრაბგერითი დაშლა/ლიზი არის საიმედო და ეფექტური მეთოდი უჯრედის ნიმუშებიდან ვირუსების იზოლირებისთვის და, შესაბამისად, სასურველია ქიმიურ აგენტებთან შედარებით, როგორიცაა ლიზოზიმი, პროტეინაზა K და სხვადასხვა სარეცხი საშუალებები, რომლებიც ალტერნატიულად გამოიყენება უჯრედების ლიზისა და დნმ-ის განთავისუფლებისთვის.
თუმცა ასეთი ქიმიური რეაგენტების გამოყენება მოითხოვს შრომატევადი ნიმუშის მომზადებას PCR ანალიზამდე რამდენიმე საფეხურზე, რათა თავიდან აიცილოს PCR რეაქციის ინჰიბირება. ვინაიდან PCR ინჰიბიტორები გავლენას ახდენენ ამპლიფიკაციის ეფექტურობაზე, ინჰიბიტორების რაოდენობის მცირე ცვალებადობამ, რომლებიც არ მოიხსნება, შეიძლება გამოიწვიოს PCR პროდუქტის გაძლიერების დიდი ვარიაციები (Diaco, 1995).
ლიზისისთვის ულტრაბგერითი მოქმედების უპირატესობა ის არის, რომ სასურველია უჯრედული სტრუქტურების სრული დარღვევა და დნმ-ის გამოყოფა ლიზინგის რეაგენტების და შრომატევადი ნიმუშის მომზადების გარეშე. (შდრ. Fykse et al., 2003)

ულტრაბგერითი დნმ ფრაგმენტაცია:

ულტრაბგერითი დნმ-ის ფრაგმენტაცია მარტივი და საიმედოა, რადგან ის აწარმოებს დნმ-ის ფრაგმენტებს, რომლებიც არეგულირებენ სიგრძეს (ბაზის წყვილები, bp). ულტრაბგერის გამოყენებით, დნმ შეიძლება ეფექტურად დაიშალოს დნმ-ის მიზნობრივ სიგრძემდე. ულტრაბგერითი პარამეტრების ზუსტი კონტროლი და დახვეწილი გაგრილების პარამეტრები ხელს უშლის დნმ-ის დეგრადაციას.
წაიკითხეთ მეტი ულტრაბგერითი დნმ-ის ფრაგმენტაციის შესახებ!

ულტრაბგერითი აპლიკაციები მაიმუნის ვირუსის ვაქცინაში

მაიმუნის ვირუსის წინააღმდეგ გამოყენებული ვაქცინები ამჟამად ცოცხალი ვირუსის ვაქცინებია. ახლად შემუშავებულმა ვაქცინებმა შესაძლოა გამოიყენონ სხვა პლატფორმები, როგორიცაა დნმ-ზე დაფუძნებული. ამჟამად შეიცავს მოდიფიცირებულ Vaccinia Ankara viurs, დასუსტებულ, არარეპლიკაციურ ორთოპოქსვირუსს. იგი ასევე შეიცავს ტრის (ტრის-ამინომეთანს) და ნატრიუმის ქლორიდს. ვაქცინა ასევე შეიძლება შეიცავდეს მცირე რაოდენობით დნმ-ს და ცილას ქათმის ემბრიონის ფიბრობლასტის უჯრედებიდან, რომლებიც გამოიყენება ვაქცინის ვირუსის, ბენზონაზას და ანტიბიოტიკების ნაერთების გასაშენებლად, როგორიცაა გენტამიცინი და ციპროფლოქსაცინი.

ულტრაბგერითი ჰომოგენიზაცია გამოიყენება ცოცხალი შესუსტებული ვირუსის ვაქცინების, დნმ ვაქცინების, მრავალვალენტიანი დნმ კოქტეილების, mRNA ვაქცინების, რეკომბინანტული ცილის ვაქცინების, ვირუსის მსგავსი ნაწილაკების ვაქცინების წარმოებაში და ა.შ.

თქვენ შეგიძლიათ იპოვოთ მეტი სიღრმისეული ინფორმაცია ულტრაბგერითი აპლიკაციების შესახებ ვაქცინის გაუმჯობესებული წარმოებისთვის!

მაიმუნის ჩუტყვავილას ვირუსის ულტრაბგერითი იზოლაციის პროტოკოლი

Stittelaar-ის მკვლევარმა ჯგუფმა (2005) გამოიყენა ულტრაბგერითი ლიზისი მაიმუნის ვირუსის გასათავისუფლებლად ზრდის მასპინძელი უჯრედის კულტურისგან, ასევე ინფიცირებული პრიმატებისგან ყელის გაცვლის გზით მიღებული უჯრედებიდან.

მაიმუნის ჩუტყვავილას ვაქცინის მომზადება:

Monkeypox ვირუსები გაიზარდა სპეციფიკური პათოგენისგან თავისუფალ ქათმის ემბრიონის ფიბრობლასტ უჯრედებზე. 1-დან 2 დღის განმავლობაში ინკუბაციის შემდეგ, ვირუს-უჯრედული სუსპენზია აღებული იქნა გაყინვა-დათბობის ერთი რაუნდით და შემდეგ კონცენტრირებული იყო ცენტრიფუგირებით. გრანულები ხელახლა შეჩერდა და დაექვემდებარა ულტრაბგერითი ჰომოგენიზაციის რამდენიმე რაუნდს.

მაიმუნის ჩუტყვავილას ვირუსის იზოლაცია ვაქცინირებული მაკაკებისაგან:

ნიმუშები სამჯერ იყო გაყინული და გალღობილი და გაჟღენთილი იქნა ულტრაბგერითი CupHorn-ში. ორი განზავება (1:10 და 1:100) სატრანსპორტო გარემოში, რომელსაც დაემატა 1% ნაყოფის მსხვილფეხა რქოსანი შრატი, გამოყენებული იქნა ვეროს უჯრედის მონოფენების ექვს ჭაბურღილიან თეფშებში ინოკულაციისთვის. 37°C-ზე ინკუბაციიდან 1 სთ-ის შემდეგ, ინოკულები ამოიღეს და ჩაანაცვლეს 1% ნაყოფის მსხვილფეხა რქოსანი შრატით. მონოფენები კულტივირებული იყო 5 დღის განმავლობაში 37°C ტემპერატურაზე და შეღებილი იქნა ბროლის იისფერი ხსნარით.
(შდრ. Stittelaar et al., 2005)

ულტრაბგერითი ვირუსების ანალიზისა და ვაქცინის წარმოებისთვის

Hielscher Ultrasonics-ის ფართო პროდუქტის პორტფოლიო გთავაზობთ იდეალურ ულტრაბგერას კვლევით და ანალიტიკური ლაბორატორიებისთვის, ასევე სამრეწველო ვაქცინების წარმოებისთვის.
Hielscher Ultrasonics სპეციალიზირებულია მაღალი ხარისხის ულტრაბგერითი და სონო-ბიორეაქტორების დიზაინში, წარმოებასა და დისტრიბუციაში კვლევით და ანალიტიკურ ლაბორატორიებში გამოსაყენებლად, აგრეთვე სამრეწველო ვაქცინების წარმოებაში დასანერგად (მაგ. ვაქცინები, API-ები).
Sonication შეიძლება გამოყენებულ იქნას ღია ჭურჭელზე, დახურულ მუდმივად მორევის რეაქტორებზე და უწყვეტი დინების რეაქტორებზე. ულტრაბგერითი სისტემების ყველა ნაწილი, რომელიც კონტაქტში შედის თხევად გარემოსთან, დამზადებულია უჟანგავი ფოლადისგან, ტიტანისგან ან მინისგან. ავტოკლავირებადი ნაწილები და სანიტარული მოწყობილობები უზრუნველყოფენ წარმოებას ფარმაკოლოგიური პირობები.
მონაცემთა ავტომატური ჩაწერა: ინტელექტუალური პროგრამული უზრუნველყოფა იწერს ხმოვანი პროცესის პარამეტრებს ავტომატურად ჩაშენებულ SD მეხსიერების ბარათზე. პროცესის ყველა პარამეტრის ზუსტი კონტროლი უზრუნველყოფს განმეორებადობა, წარმოების სტანდარტიზაცია, და ხელს უწყობს ფარმაცევტული პროდუქტის უსაფრთხოების სტანდარტების შესრულებას.
Hielscher Ultrasonics’ ულტრაბგერითი პროცესორები უაღრესად საიმედოა და მათი ზუსტი კონტროლი შესაძლებელია. ყველა სამრეწველო ულტრაბგერითი შეიძლება მორგებული იყოს, რათა უზრუნველყოს სრული დიაპაზონი ქვედადან ძალიან მაღალ ამპლიტუდამდე. Hielscher-ის ულტრაბგერითი სისტემების სიმტკიცე საშუალებას იძლევა 24/7 მუშაობა მძიმე მოვალეობის პირობებში და მომთხოვნი გარემოში.

ქვემოთ მოყვანილი ცხრილი გვიჩვენებს ჩვენი ულტრაბგერითი აპარატების სავარაუდო დამუშავების შესაძლებლობებს: