ულტრაბგერითი დამუშავების მნიშვნელოვანი მეთოდია მაიმუნის ყვავილის ვირუსის (MPXV) იზოლაციისთვის ანალიტიკური ნიმუშებიდან, ვირუსის დნმ-ის ფრაგმენტაციისთვის, ასევე მაიმუნის ვაქცინის წარმოებაში. ნიმუშის მომზადებისთვის დიაგნოსტიკამდე და ანალიზამდე (PCR, ELISA და ა.შ.) გამოიყენება ულტრაბგერითი ზემოქმედება უჯრედების ლიზისთვის, რათა განთავისუფლდეს მაიმუნის ვირუსი უჯრედის შიგნიდან და/ან დნმ-ის ფრაგმენტად. ვაქცინის წარმოებაში, აპლიკაციები მერყეობს ვირუსის ნაწილაკების/დნმ-ის მომზადებიდან, წამლის მატარებლებში ჩასმა და ინოკულის ფორმულირება.
ქვემოთ შეგიძლიათ იხილოთ დეტალური ინფორმაცია ულტრაბგერითი მაიმუნის ვირუსის ნიმუშის მომზადებისა და ასევე ულტრაბგერითი დახმარებით MPXV ვაქცინის წარმოების შესახებ.

რას ნახავთ ამ გვერდზე:

• ულტრაბგერითი ლიზისი Monkeypox ვირუსის ექსტრაქციისთვის
• მაიმუნის ვირუსის დნმ-ის ულტრაბგერითი ფრაგმენტაცია
• ულტრაბგერითი აპლიკაციები MPXV ვაქცინის წარმოებაში

ულტრაბგერითი ლიზისი და დნმ-ის ფრაგმენტაცია პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციამდე (PCR)

მაიმუნის ვირუსული ინფექცია გამოვლენილია ნუკლეინის მჟავას ამპლიფიკაციის ტესტირებით (NAAT), რეალურ დროში ან ჩვეულებრივი პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციის (PCR) გამოყენებით ვირუსული დნმ-ის უნიკალური თანმიმდევრობების გამოსავლენად. ნიმუში (მაგ. ნაზოფარინგეალური სვოპიდან ან კანის ბიოფსიიდან) შეიცავს ვირუსს უჯრედებში.
ანალიზისთვის, ვირუსი უნდა განთავისუფლდეს უჯრედებიდან და ვირუსული დნმ უნდა იყოს ფრაგმენტირებული PCR-სთვის.

ულტრაბგერითი ლიზისი:

უჯრედების ულტრაბგერითი დაშლა/ლიზი არის საიმედო და ეფექტური მეთოდი უჯრედის ნიმუშებიდან ვირუსების იზოლირებისთვის და, შესაბამისად, სასურველია ქიმიურ აგენტებთან შედარებით, როგორიცაა ლიზოზიმი, პროტეინაზა K და სხვადასხვა სარეცხი საშუალებები, რომლებიც ალტერნატიულად გამოიყენება უჯრედების ლიზისა და დნმ-ის განთავისუფლებისთვის.
თუმცა, ასეთი ქიმიური რეაგენტების გამოყენება მოითხოვს შრომატევადი ნიმუშის მომზადებას PCR ანალიზამდე რამდენიმე საფეხურზე, რათა თავიდან აიცილოს PCR რეაქციის ინჰიბირება. ვინაიდან PCR ინჰიბიტორები გავლენას ახდენენ ამპლიფიკაციის ეფექტურობაზე, ინჰიბიტორების რაოდენობის მცირე ცვალებადობამ, რომლებიც არ მოიხსნება, შეიძლება გამოიწვიოს PCR პროდუქტის გაძლიერების დიდი ვარიაციები (Diaco, 1995).
ლიზისისთვის ულტრაბგერითი მოქმედების უპირატესობა ის არის, რომ სასურველია უჯრედული სტრუქტურების სრული დარღვევა და დნმ-ის განთავისუფლება ლიზინგის რეაგენტებისა და შრომატევადი ნიმუშის მომზადების გარეშე. (შდრ. Fykse et al., 2003)

ულტრაბგერითი დნმ ფრაგმენტაცია:

ულტრაბგერითი დნმ-ის ფრაგმენტაცია მარტივი და საიმედოა, რადგან ის აწარმოებს დნმ-ის ფრაგმენტებს, რომლებიც არეგულირებენ სიგრძეს (ბაზის წყვილები, bp). ულტრაბგერის გამოყენებით, დნმ შეიძლება ეფექტურად დაიშალოს დნმ-ის მიზნობრივ სიგრძემდე. ულტრაბგერითი პარამეტრების ზუსტი კონტროლი და დახვეწილი გაგრილების პარამეტრები ხელს უშლის დნმ-ის დეგრადაციას.
წაიკითხეთ მეტი ულტრაბგერითი დნმ-ის ფრაგმენტაციის შესახებ!

ულტრაბგერითი აპლიკაციები მაიმუნის ვირუსის ვაქცინაში

მაიმუნის ვირუსის წინააღმდეგ გამოყენებული ვაქცინები ამჟამად ცოცხალი ვირუსის ვაქცინებია. ახლად შემუშავებულმა ვაქცინებმა შესაძლოა გამოიყენონ სხვა პლატფორმები, როგორიცაა დნმ-ზე დაფუძნებული. ამჟამად შეიცავს მოდიფიცირებულ Vaccinia Ankara ვირუსებს, დასუსტებულ, არარეპლიკაციურ ორთოპოქსვირუსს. ის ასევე შეიცავს ტრის (ტრის-ამინომეთანს) და ნატრიუმის ქლორიდს. ვაქცინა ასევე შეიძლება შეიცავდეს მცირე რაოდენობით დნმ-ს და ცილას ქათმის ემბრიონის ფიბრობლასტის უჯრედებიდან, რომლებიც გამოიყენება ვაქცინის ვირუსის, ბენზონაზას და ანტიბიოტიკების ნაერთების გასაშენებლად, როგორიცაა გენტამიცინი და ციპროფლოქსაცინი.

ულტრაბგერითი ჰომოგენიზაცია გამოიყენება ცოცხალი შესუსტებული ვირუსის ვაქცინების, დნმ ვაქცინების, მრავალვალენტიანი დნმ კოქტეილების, mRNA ვაქცინების, რეკომბინანტული ცილის ვაქცინების, ვირუსის მსგავსი ნაწილაკების ვაქცინების წარმოებაში და ა.შ.

თქვენ შეგიძლიათ იპოვოთ მეტი სიღრმისეული ინფორმაცია ულტრაბგერითი აპლიკაციების შესახებ ვაქცინის გაუმჯობესებული წარმოებისთვის!

მაიმუნის ჩუტყვავილას ვირუსის ულტრაბგერითი იზოლაციის პროტოკოლი

Stittelaar-ის მკვლევარმა ჯგუფმა (2005) გამოიყენა ულტრაბგერითი ლიზისი მაიმუნის ვირუსის გასათავისუფლებლად ზრდის მასპინძელი უჯრედის კულტურისგან, ისევე როგორც ინფიცირებული პრიმატებისგან ყელის გაცვლის გზით მიღებული უჯრედებიდან.

მაიმუნის ჩუტყვავილას ვაქცინის მომზადება:

Monkeypox ვირუსები გაიზარდა სპეციფიკური პათოგენისგან თავისუფალ ქათმის ემბრიონის ფიბრობლასტ უჯრედებზე. 1-დან 2 დღის განმავლობაში ინკუბაციის შემდეგ, ვირუს-უჯრედული სუსპენზია აღებული იქნა გაყინვა-დათბობის ერთი რაუნდით და შემდეგ კონცენტრირებული იყო ცენტრიფუგირებით. გრანულები ხელახლა შეჩერდა და დაექვემდებარა ულტრაბგერითი ჰომოგენიზაციის რამდენიმე რაუნდს.

Monkeypox ვირუსის იზოლაცია ვაქცინირებული მაკაკებისაგან:

ნიმუშები სამჯერ იყო გაყინული და გალღობილი და გაჟღენთილია ულტრაბგერითი CupHorn-ში. ორი განზავება (1:10 და 1:100) სატრანსპორტო გარემოში, რომელსაც დაემატა 1% ნაყოფის მსხვილფეხა რქოსანი შრატი, გამოყენებული იქნა ვეროს უჯრედის მონოფენების ინოკულაციისთვის ექვს ჭაბურღილიან ფირფიტებში. 37°C-ზე ინკუბაციიდან 1 სთ-ის შემდეგ, ინოკულები ამოიღეს და ჩაანაცვლეს კულტურის საშუალებით, რომელიც დაემატა 1% ნაყოფის მსხვილფეხა რქოსანი შრატით. მონოფენები კულტივირებული იყო 5 დღის განმავლობაში 37°C ტემპერატურაზე და შეღებილი იყო ბროლის იისფერი ხსნარით.
(შდრ. Stittelaar et al., 2005)

ულტრაბგერითი ვირუსების ანალიზისა და ვაქცინის წარმოებისთვის

Hielscher Ultrasonics-ის ფართო პროდუქტის პორტფოლიო გთავაზობთ იდეალურ ულტრაბგერას კვლევით და ანალიტიკური ლაბორატორიებისთვის, ასევე სამრეწველო ვაქცინების წარმოებისთვის.
Hielscher Ultrasonics სპეციალიზირებულია მაღალი ხარისხის ულტრაბგერითი და სონო-ბიორეაქტორების დიზაინში, წარმოებასა და დისტრიბუციაში კვლევით და ანალიტიკურ ლაბორატორიებში გამოსაყენებლად, აგრეთვე სამრეწველო ვაქცინების წარმოებაში დასანერგად (მაგ. ვაქცინები, APIs).
Sonication შეიძლება გამოყენებულ იქნას ღია ჭურჭელზე, დახურულ მუდმივად მორევის რეაქტორებზე და უწყვეტი დინების რეაქტორებზე. ულტრაბგერითი სისტემების ყველა ნაწილი, რომელიც კონტაქტში შედის თხევად გარემოსთან, დამზადებულია უჟანგავი ფოლადისგან, ტიტანისგან ან მინისგან. ავტოკლავირებადი ნაწილები და სანიტარული მოწყობილობები უზრუნველყოფს წარმოებას ქვეშ ფარმაკოლოგიური პირობები.
მონაცემთა ავტომატური ჩაწერა: ინტელექტუალური პროგრამული უზრუნველყოფა ჩანაწერი sonication პროცესი პარამეტრების ავტომატურად ინტეგრირებული SD მეხსიერების ბარათი. ყველა პროცესის პარამეტრების ზუსტი კონტროლი უზრუნველყოფს რეპროდუცირება, წარმოების სტანდარტიზაცია, და ხელს უწყობს ფარმაცევტული პროდუქტის უსაფრთხოების სტანდარტების შესრულებას.
Hielscher Ultrasonics’ ულტრაბგერითი პროცესორები უაღრესად საიმედოა და მათი ზუსტი კონტროლი შესაძლებელია. ყველა სამრეწველო ულტრაბგერითი შეიძლება მორგებული იყოს, რათა უზრუნველყოს სრული დიაპაზონი ქვედადან ძალიან მაღალ ამპლიტუდამდე. Hielscher-ის ულტრაბგერითი სისტემების სიმტკიცე საშუალებას იძლევა 24/7 მუშაობა მძიმე მოვალეობის პირობებში და მომთხოვნ გარემოში.

ქვემოთ მოყვანილი ცხრილი გაძლევთ ჩვენს ულტრასონისტების სავარაუდო დამუშავების შესაძლებლობებს: