Hielscher VialTweeter არის უნიკალური ულტრაბგერითი მრავალ სინჯის მომზადება, რომელიც გამოიყენება კონავირუსის SARS-COV-2 ინაქტივაციისთვის. VialTweeter საშუალებას გაძლევთ მოამზადოთ 10 ნიმუშის ფლაკონი ერთდროულად და იდეალური ერთეულია მასალის დამუშავებისათვის.

SARS-CoV-2 კორონავირუსის ინაქტივაცია VialTweeter- თან

ფიქსატორის ამოღების შემდეგ, მონოლოები სამჯერ გარეცხილია ფოსფატის ბუფერული ხსნარით (PBS), სანამ უჯრედებს გაანადგურებდნენ 1 მლ MEM / 5% FBS– ში და გაასუფთავეს (3 × 10 წამი, 10 წამი გამორთვა 100% ენერგიით და ამპლიტუდით) Hielscher– ის გამოყენებით. ულტრაბგერითი პროცესორი UP200St ერთად VialTweeter მიმაგრება. ზედმეტი ნივთიერებების დაზუსტება მოხდა ცენტრიფუგით 3000 გრგ-ზე 10 წუთის განმავლობაში. წაიკითხეთ სრული პროტოკოლი SARS-CoV-2 კორონავირუსის ინაქტივაციის შესახებ Welch და სხვების მიერ. (2020) ქვემოთ:

უჯრედები და ვირუსი

ვერო E6 უჯრედები (Vero C1008; ATCC CRL-1586) კულტივირებული იქნა Eagle– ის მინიმალურ არსებით გარემოში (MEM), რომელსაც დაემატა ნაყოფის ხბოს შრატი 10% (ვ / ვ) (FCS). გამოყენებული ვირუსი იყო SARS-CoV-2 შტამი hCOV-19 / ინგლისი / 2/2020, რომელიც იზოლირებული იყო PHE- ს მიერ დიდი ბრიტანეთის პაციენტთა პირველი კასეტურიდან 29/01/2020. ეს ვირუსი მიიღეს გავლის 1 – ზე და გამოიყენეს ინაქტივაციის შესასწავლად მე –2 ან მე –3 პასაჟზე.
რეაგენტების და ქიმიკატებისათვის, რომლებიც გამოიყენება SARS-CoV-2 ინაქტივაციისთვის, აგრეთვე რეაგენტის ციტოტოქსიურობის მოსაშორებლად, იხილეთ Welch et al. (2020)

სარეცხი საშუალებების მიერ ვირუსის ინაქტივაცია – SARS-CoV-2 კორონავირუსის ინაქტივაციის პროტოკოლი Welch- ისა და სხვათა მიერ. 2020 წელი

SARS-CoV-2 ინაქტივაცია

კომერციული პროდუქტებისთვის, ვირუსული პრეპარატები (ქსოვილის კულტურის სითხე, ტიტრები 1 × 10-დან)⁶ 1 × 10-მდე⁸ PFU / მლ) სამჯერ გაიკეთეს რეაგენტებით კონცენტრაციებში და მწარმოებლის ინსტრუქციებში რეკომენდებული კონტაქტის დროს, თუ ეს შესაძლებელია, ან იმ კონცენტრაციებისა და დროებისათვის, რომლებიც სპეციალურად ითხოვენ ტესტირების ლაბორატორიებს. როდესაც მწარმოებლის მიერ მოცემულია კონცენტრაციების სპექტრი, შემოწმდა პროდუქტისა და ნიმუშის ყველაზე დაბალი თანაფარდობა (ანუ საცდელი პროდუქტის ყველაზე დაბალი რეკომენდებული კონცენტრაცია). ნიმუშების სატრანსპორტო მილის რეაგენტები შემოწმდა ქსოვილის კულტურის სითხის ერთი მოცულობის და ათი მოცულობის რეაგენტის თანაფარდობით, თუ მწარმოებლის მიერ მითითებული არ არის სინჯის სითხის მოცულობის თანაფარდობა. სარეცხი საშუალებები, ფიქსატორები და გამხსნელები შემოწმდა მითითებული კონცენტრაციებით მითითებული დროით. ინაქტივაციის ყველა ეტაპი შესრულდა ატმოსფერული ოთახის ტემპერატურაზე (18 - 25 ° C). ალტერნატიული ნიმუშის ტიპების შესამოწმებლად, ვირუსი გაიზარდა მითითებულ ნიმუშის მატრიქსში 1: 9 თანაფარდობით, შემდეგ კი დამუშავდა ზემოთ მოყვანილი საცდელი რეაგენტებით. ყველა ექსპერიმენტში შედიოდა სამმაგი საკონტროლო იმიტირებული დამუშავებული ნიმუშები PBS- ის ექვივალენტური მოცულობით საცდელი რეაქტივის ადგილას. საჭირო საკონტაქტო დროის შემდეგ დაუყოვნებლივ დამუშავდა 1 მლ დამუშავებული ნიმუში, სათანადოდ შერჩეული ფილტრაციის მატრიცის გამოყენებით. ინაქტივაციის ტესტირებისთვის რეაგენტის მოცილება უფრო დიდი დატრიალების სვეტის ფორმატით განხორციელდა Pierce 4mL სარეცხის მოცილების დატრიალების სვეტების გამოყენებით (Thermo Fisher), ან Pierce 10 მლ მოცულობის ცენტრიფუგის სვეტების (თერმო ფიშერი) SM2 Bio-Beads, Sephacryl S-400HR ან Sephadex LH-20 მისცეს 4 მლ შეფუთული მძივები / ფისი. გაწმენდის მიზნით Amicon ფილტრების გამოყენებით, 2 × 500μl ნიმუშები გაიწმინდა ორი ცენტრიდანული ფილტრის გამოყენებით, ადრე აღწერილი მეთოდით, შემდეგ კი გაერთიანდა. ფორმალდეჰიდისა და ფორმალდეჰიდისთვის გლუტარალდეჰიდის მოცილებით, გამოიყენეს ერთი ფილტრი 1 × 500μl ნიმუშის მოცულობით, 500 მლ PBS– ში დამუშავების შემდეგ განახლდა და დაემატა 400 მლ MEM / 5% FBS. ინფიცირებული ინაქტივაციისთვის ერთშრიანი, 12,5 სმ² ვერო E6 უჯრედების კოლბები (2.5 × 10)⁶ უჯრედები / კოლბა 2.5 მლ MEM / 5% FBS– ში) ინფიცირებული იყო MOI 0.001 ტემპერატურაზე და ინკუბაცირდებოდა 37 ° C / 5% CO– ზე₂ 24 საათის განმავლობაში. ზედმეტი ნივთიერება ამოიღეს და უჯრედები დაფიქსირდა 5 მლ ფორმალდეჰიდის, ან ფორმალდეჰიდისა და გლუტარალდეჰიდის გამოყენებით ოთახის ტემპერატურაზე 15 ან 60 წთ. ფიქსატორი ამოიღეს და მონოლოები სამჯერ გარეცხეს PBS– ით, სანამ უჯრედებს გაანადგურებდნენ 1 მლ MEM / 5% FBS– ში და გაასუფთავეს (3 × 10 წამი, 10 წამი გამორთვა 100% ენერგიით და ამპლიტუდით) UP200St– ით VialTweeter დანართით (Hielscher ულტრაბგერითი) ტექნოლოგია). ზედმეტი ნივთიერებების დაზუსტება მოხდა ცენტრიფუგით 3000 გრგ-ზე 10 წუთის განმავლობაში.

ულტრაბგერითი VialTweeter- ით SARS-CoV-2 კორონავირუსის ინაქტივაციისთვის გამოყენებული რეაგენტის დეტალები Welch- ის და პროტოკოლის მიხედვით. 2020 წელი

სრული პროტოკოლი Hielscher VialTweeter– ის გამოყენების ჩათვლით შეგიძლიათ იხილოთ აქ:
Welch, Stephen R.; Davies, Katherine A.; Buczkowski, Hubert; Hettiarachchi, Nipunadi; Green, Nicole; Arnold, Ulrike; Jones, Matthew; Hannah, Matthew J.; Evans, Reah; Burton, Christopher; Burton, Jane E.; Guiver, Malcolm; Cane, Patricia A.; Woodford, Neil; Bruce, Christine B.; Roberts, Allen D. G.; Killip, Marian J. (2020): Inactivation analysis of SARS-CoV-2 by specimen transport media, nucleic acid extraction reagents, detergents and fixatives. Journal of Clinical Microbiology. Accepted Manuscript Posted Online 24 August 2020.

დახვეწილი ულტრაბგერითი დისმბრამერები და უჯრედების გამშლელები

ულტრაბგერითი ულტრაბგერითი VialTweeter არის ულტრაბგერითი გადაწყვეტილებებიდან მხოლოდ ერთი ბიოლოგიური, ბიოქიმიური და კლინიკური ლაბორატორიების ნიმუშების მოსამზადებლად. Hielscher Ultrasonics გთავაზობთ იდეალურ ულტრაბგერით დემმბრატორს თქვენი განაცხადისთვის, მაგ. უჯრედების ლიზირება, უჯრედების ექსტრაქცია, ქსოვილების ჰომოგენიზაცია, ლიზატის ხსნადი, დაშლა, ნიმუშის დეგაზირება და ა.შ.
შეგვატყობინეთ, რამდენი ნიმუშის დამუშავება გჭირდებათ საათში და დღეში, თუ გირჩევნიათ პირდაპირი ან არაპირდაპირი დამუშავება და რა არის ულტრაბგერითი სინჯის მკურნალობის მიზანი. ჩვენ გირჩევთ ყველაზე შესაფერისი ულტრაბგერითი განყოფილება თქვენი ყოველდღიური მუშაობისთვის!
Hielscher Ultrasonics- ის ციფრული ულტრაბგერითი პროცესორები აღჭურვილია ჭკვიანი პროგრამით, მონაცემთა ავტომატური ჩაწერით, ტემპერატურის კონტროლის წინასწარ დაყენების მარტივი ვარიანტებით, გაჟღენთის ხანგრძლივობა, ციკლის / პულსის რეჟიმი, აგრეთვე ნიმუშის განათება და ბრაუზერის დისტანციური მართვა. ჩვენ ვცდილობთ, ჩვენი ულტრაბგერითი მოწყობილობები რაც შეიძლება ჭკვიანი გავხადოთ, რათა თქვენი კვლევისა და მუშაობის რუტინული გახდეს რაც შეიძლება მოსახერხებელი და წარმატებული.
დააჭირეთ აქ, რომ იპოვოთ მეტი პროგრამა, მათ შორის ულტრაბგერითი ნიმუშის მომზადების ოქმები VialTweeter- ით!