頑強なバイオフィルムを破壊する新しいマイクロプレート用超音波処理装置
、Kathrin Hielscher、Hielscherニュースに掲載
バイオフィルム – 表面に付着する高密度の微生物群集 – は、微生物学および臨床診断における最も困難な課題の一つです。新しいマイクロプレート用超音波処理装置UIP400MTPは、ハイスループットのサンプル調製を容易にします。査読済み研究の分析によると、Hielscherのマルチウェルプレート用超音波処理装置などの高性能超音波システムは、これらの頑強な構造をMBEC™プレートから剥離させるための不可欠な実験室用ツールとなりつつあり、抗菌薬試験の精度向上と研究ワークフローの迅速化を可能にしています。
超音波処理によるバイオフィルムの剥離
Staphylococcus aureus、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌、およびStaphylococcus saprophyticusのバイオフィルムに関する二つの主要な研究によると、バイオフィルムの抗菌薬に対する耐性は、浮遊状態のプランクトン型細菌の数百倍になることがあります。このため、科学者はマルチウェルプレートの超音波処理をますます活用するようになっています。バイオフィルムのマトリックスに埋め込まれたこれらの微生物は、最小発育阻止濃度(MIC)および最小殺菌濃度(MBC)が著しく上昇し、しばしば臨床的に到達可能な薬物濃度を超えます。
しかし、有効な試験は、バイオフィルム中の細胞を効率的かつ確実に剥離させることから始まります – この点でUIP400MTPは際立っています。
あらゆる標準的なマイクロプレートから接着細胞培養を剥離: 超音波処理装置UIP400MTPによるハイスループットのサンプル調製
バイオフィルム:抗菌薬に対する隠れた防御壁
引用した両研究で、研究者は細菌をバイオフィルムの状態で試験すると抗菌薬耐性が著しく増加することを記録しました:
MIC値はプランクトン型細胞と比較して2–32倍に上昇し、ときにはそれ以上になりました。
一部の分離株は、バイオフィルムの状態になると、抗菌薬感受性から完全な耐性へと変化しました。
一部のバイオフィルムでは、試験した最高濃度を超えるMBCが必要となり、その極めて高い耐容性が浮き彫りになりました。
これらの知見は、バイオフィルムを破壊することがなぜ重要なのかを示しています。正確な薬剤耐性プロファイルを得るには、防御的なマトリックスから細胞を放出させ、個別に試験できるようにする必要があります。
解決策:マイクロプレート用超音波処理装置UIP400MTP
両研究では、専用のMBEC™ピン付き蓋デバイス上で増殖させたバイオフィルムを剥離するために、Hielscherのマルチウェルプレート用超音波処理装置UIP250MTPを使用しました。マルチウェルプレートを5分間超音波処理することで、バイオフィルム中の細胞を新鮮な培地中へ剥離させることに成功し、研究者は高い再現性でMICBおよびMBCBを測定できました。
この手法が広く採用されている理由は、以下のとおりです:
- すべてのウェルを同時かつ均一に処理でき、これは抗菌薬の比較試験に不可欠です。
- 音響キャビテーションは、細胞を破壊することなく細胞外マトリックスを効果的に分解します。
- バイオフィルムの耐性研究に使用されるMBECピン付き蓋プラットフォームと円滑に連携します。
研究者がすぐに納得する主な特長
- 迅速かつ徹底的なバイオフィルム剥離を実現する400ワットの超音波出力(20 kHz)
- エネルギー投入量(Ws/mL)、振幅、温度、時間を含む全パラメーターの制御
- 超音波処理中にプレートを冷却するための、再循環ポンプ付き内蔵熱交換器
- 再現性のある自動化ワークフローのためのプログラム可能なモード
- プレート全体にわたる均一な超音波処理。以下の動画をご覧ください!
均一性試験は、標準化されたバイオフィルム破壊に必要な均一なキャビテーション場を視覚的に確認します – この均一性の確保は、低出力の超音波浴における既知の課題です。
マルチウェルプレート用超音波処理装置UIP400MTP による効率的なMBECアッセイ
病院、実験室、抗菌薬開発にとって重要な理由
バイオフィルム関連感染症 – 尿路感染症からカテーテル関連血流感染症まで – は、治療が極めて難しいことで知られています。研究は以下のことを示しています:
- プランクトン型細胞を用いる従来の抗菌薬試験は、実際の環境における耐性を過小評価します。
- 正確なバイオフィルム由来サンプルを調製するには、高品質の超音波処理が不可欠です。
- UIP400MTPのようなツールは、実験室での試験と臨床の実態との隔たりを埋めるのに役立ちます。
抗菌薬耐性が増加し続ける中、バイオフィルム研究の再現性と信頼性を高める技術は、新しい治療法の開発において決定的な役割を果たす可能性があります。
添付の研究は、一つの結論を明確に示しています。バイオフィルムを形成する細菌には新しい試験アプローチが必要であり、マルチウェルプレートの超音波処理 – 特にHielscher UIP400MTPのように極めて高出力で超音波を均一に分布させるシステムを用いた処理 – は、MBECプレートからバイオフィルムを剥離するためのゴールドスタンダードに急速になりつつあります。
微生物学の実験室、医薬品開発者、臨床研究者にとって、これらの装置はもはや単に便利なものというだけではありません – バイオフィルムに埋め込まれた病原体の実際の抗菌薬耐性を正確に測定するために、不可欠なツールになりつつあります。
その他の参考文献
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
- Lauren E. Cruchley-Fuge, Martin R. Jones, Ossama Edbali, Gavin R. Lloyd, Ralf J. M. Weber, Andrew D. Southam, Mark R. Viant (2024): Automated extraction of adherent cell lines from 24-well and 96-well plates for multi-omics analysis using the Hielscher UIP400MTP sonicator and Beckman Coulter i7 liquid handling workstation. Metabomeeting 2024, University of Liverpool, 26-28th November 2024.

