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Estrazione di collagene a ultrasuoni

  • Il collagene è ricco di proteine ed è ampiamente utilizzato in numerose applicazioni industriali, ad esempio in campo alimentare, farmaceutico, degli additivi, ecc.
  • La sonicazione può essere facilmente combinata con l'estrazione enzimatica o acida del collagene.
  • L'implementazione degli ultrasuoni nel processo di estrazione del collagene consente di ottenere rese più elevate e un'estrazione più rapida.

Effetti degli ultrasuoni sull'estrazione del collagene

Gli ultrasuoni ad alta intensità sono ampiamente utilizzati per migliorare il trasferimento di massa nei processi a umido, come l'estrazione, la sicochimica, ecc. L'estrazione (nota anche come isolamento del collagene) del collagene può essere significativamente migliorata con il trattamento a ultrasuoni. La sonicazione favorisce la scissione del substrato di collagene e apre le fibrille di collagene, facilitando così l'idrolisi enzimatica o il trattamento con acidi.

Estrazione enzimatica assistita dagli ultrasuoni

La sonicazione è nota per la sua capacità di aumentare l'attività enzimatica. Questo effetto si basa sulla dispersione e sulla deagglomerazione a ultrasuoni degli aggregati di pepsina. Gli enzimi omogeneamente dispersi offrono una maggiore superficie per il trasferimento di massa, che è correlata a una maggiore attività enzimatica. Inoltre, le potenti onde ultrasoniche aprono le fibrille di collagene in modo che il collagene venga rilasciato.

Estrazione di pepsina a ultrasuoni: La pepsina combinata con gli ultrasuoni aumenta la resa del collagene fino a circa il 124% e riduce significativamente il tempo di estrazione rispetto all'idrolisi convenzionale con pepsina. L'analisi del dicroismo circolare, la microscopia a forza atomica e la FTIR hanno dimostrato che la struttura a tripla elica del collagene estratto non è stata influenzata dalla sonicazione ed è rimasta intatta. (Li et al. 2009) Ciò rende l'estrazione di pepsina assistita da ultrasuoni molto pratica per l'industria alimentare, offrendo un maggiore tasso di recupero delle proteine in un tempo di lavorazione significativamente più breve.

In uno studio comparativo tra estrazione a ultrasuoni e non a ultrasuoni di collagene da tendini bovini, il trattamento a ultrasuoni (20kHz, modalità di impulso 20/20 sec.) ha convinto per la maggiore resa ed efficienza. L'estrazione convenzionale è stata eseguita con pepsina in acido acetico per 48 ore. L'estrazione a ultrasuoni è stata eseguita nelle stesse condizioni, ma sono stati variati i tempi di esposizione alla sonicazione (da 3 a 24 ore) e alla pepsina (da 24 a 45 ore), per un totale di 48 ore di trattamento. L'estrazione con ultrasuoni e pepsina ha mostrato un'efficienza superiore nell'estrazione del collagene, raggiungendo un rendimento del 6,2%, mentre il rendimento dell'estrazione convenzionale era del 2,4%. I risultati migliori sono stati ottenuti con un tempo di estrazione a ultrasuoni di 18 ore. Il collagene estratto ha mostrato una struttura a elica continua non danneggiata, una buona solubilità e una stabilità termica piuttosto elevata. Ciò significa che l'estrazione con ultrasuoni e pepsina ha migliorato l'efficienza dell'estrazione del collagene naturale senza danneggiare la qualità del collagene ottenuto. (Ran e Wang 2014)

Configurazione a ultrasuoni con serbatoio agitato

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Estrazione di papaina a ultrasuoni: Il collagene delle squame di pesce può essere estratto in modo efficiente mediante idrolisi con papaina combinata con un pretrattamento a ultrasuoni. Per l'estrazione con ultrasuoni e papaina del collagene dalle squame di pesce sono stati individuati come ottimali i seguenti parametri di processo: durata del pretrattamento a ultrasuoni di 4 minuti, rapporto tra papaina e squame di pesce del 4%, temperatura di 60°C e tempo totale di estrazione di 5 ore. In queste condizioni ottimali, il tasso di estrazione del collagene ha raggiunto il 90,7%. (Jiang et al. 2011)

Estrazione acida assistita da ultrasuoni

In uno studio di Kim et al. (2012), l'estrazione di collagene solubile in acido dalla pelle di spigola giapponese (Lateolabrax japonicus) ha mostrato un aumento della resa e una riduzione del tempo di estrazione dopo il trattamento a ultrasuoni a una frequenza di 20 kHz in acido acetico 0,5 M. L'estrazione con ultrasuoni non ha alterato i componenti principali del collagene, in particolare le catene α1, α2 e β.

Estrazione a ultrasuoni di proteine dai gusci d'uovo

Gli idrolizzati enzimatici pretrattati con ultrasuoni presentano migliori proprietà funzionali. L'estrazione a ultrasuoni di idrolizzati proteici funzionali dal guscio dell'uovo di pollo ha migliorato le proprietà di solubilità, emulsione, schiumatura e tenuta dell'acqua.
La membrana del guscio d'uovo è una risorsa naturale abbondante ed è composta da circa 64 proteine, tra cui il collagene di tipo I, V e X, il lisozima, l'osteopontina e la sialoproteina. Ciò rende i gusci d'uovo una materia prima interessante per l'estrazione delle proteine. Con l'estrazione a ultrasuoni, il rilascio e la funzionalità delle proteine possono essere migliorati in modo significativo, con un processo rapido, efficiente ed economico.

Hielscher fornisce potenti dispositivi a ultrasuoni da laboratorio a scala industriale (Clicca per ingrandire!)

Processi a ultrasuoni: Da laboratorio a Industriale Scala

Estrazione alcalina assistita dagli ultrasuoni

per estrarre e solubilizzare queste proteine
Per l'estrazione di proteine dalla membrana del guscio d'uovo, il trattamento con ultrasuoni e alcali ha portato a una resa proteica solubilizzata vicina al 100% della proteina totale della membrana del guscio d'uovo. La cavitazione ultrasonica ha staccato dalla membrana del guscio d'uovo i grumi di proteine più grandi e ha facilitato la solubilizzazione dei suoi composti. La struttura e le proprietà delle proteine non sono state danneggiate dalla sonicazione e sono rimaste intatte. Le proprietà antiossidanti delle proteine erano le stesse sia nel trattamento alcalino assistito da ultrasuoni che nell'estrazione convenzionale.

Estrazione di gelatina a ultrasuoni

Le pelli di merluzzo congelate ed essiccate all'aria sono state trattate con soluzioni saline fredde, alcaline e acide per separare il tessuto collagene ed estrarre la gelatina mediante denaturazione del collagene a 45°C per quattro ore con un trattamento a ultrasuoni di potenza come ausilio alla lavorazione. Sono stati valutati la resa della gelatina, il pH, la chiarezza, la forza del gel e le proprietà viscoelastiche, nonché la distribuzione del peso molecolare determinata con il metodo PAGE-SDS. La gelatina estratta in un bagno d'acqua a 45°C per quattro ore è stata utilizzata come controllo. Il trattamento con ultrasuoni di potenza ha aumentato la resa di estrazione dell'11,1% rispetto al controllo, mentre la resistenza del gel è diminuita del 7%. Anche la temperatura di gelificazione era più bassa nella gelatina estratta con gli ultrasuoni (4,2°C). Questo comportamento è legato alle differenze nella distribuzione del peso molecolare delle bobine polipeptidiche nelle gelatine. L'estrazione con ultrasuoni può essere utilizzata per aumentare l'estrazione di gelatina da pelli di pesce congelate ed essiccate all'aria. (Olson et al. 2005)

sistemi industriali a ultrasuoni

Hielscher Ultrasonics fornisce potenti sistemi a ultrasuoni da laboratorio, da banco e su scala industriale. Per garantire una resa di estrazione ottimale, è possibile eseguire una sonicazione affidabile in condizioni difficili in modo continuo. Tutti i processori industriali a ultrasuoni sono in grado di fornire ampiezze molto elevate. Ampiezze fino a 200 µm possono essere facilmente gestite in modo continuo, 24 ore su 24 e 7 giorni su 7. Per ampiezze ancora maggiori, sono disponibili sonotrodi a ultrasuoni personalizzati. La robustezza delle apparecchiature a ultrasuoni di Hielscher consente di operare 24 ore su 24, 7 giorni su 7, in condizioni di lavoro gravose e in ambienti difficili.
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I dispersori a ultrasuoni sono disponibili dal piccolo dispositivo portatile ai sistemi a ultrasuoni da banco e industriali per la lavorazione di grandi volumi (Clicca per ingrandire!).

Gli omogeneizzatori ad ultrasuoni ad alta potenza di Hielscher sono disponibili per qualsiasi scala di processo – dal laboratorio alla produzione.

Letteratura/riferimenti

  • Álvarez, Carlos; Lélu, Pauline; Lynch, Sarah A.; Tiwari, Brijesh K. (2018): Recupero proteico ottimizzato da pesci interi di sgombro utilizzando l'estrazione sequenziale di precipitazione isoelettrica di solubilizzazione (ISP) acida/alcalina assistita da ultrasuoni. LWT – Scienza e tecnologia alimentare Vol. 88, febbraio 2018. 210-216.
  • Jain, Surangna; Kumar Anal, Anil (2016): Ottimizzazione dell'estrazione di idrolizzati proteici funzionali dalla membrana del guscio d'uovo di pollo (ESM) mediante estrazione assistita da ultrasuoni (UAE) e idrolisi enzimatica. LWT – Scienza e tecnologia alimentare Vol. 69, giugno 2016. 295-302.
  • Kim, H.K.; Kim, Y.H.; Kim, Y.J.; Park, H.J.; Lee, N.H. (2012): Effetti del trattamento a ultrasuoni sull'estrazione del collagene dalla pelle del branzino Lateolabrax japonicus. Fisheries Science Volume 78, Issue 78; 2013. 485-490.
  • Li, Defu; Mu, Changdao; Cai, Sumei; Lin, Wei (2016): Irradiazione ultrasonica nell'estrazione enzimatica del collagene. Ultrasonics Sonochemistry Volume 16, Issue 5; 2009. 605-609.
  • Olson, D.A., Avena Bustillos, R.D., Olsen, C.W., Chiou, B., Yee, E., Bower, C.K., Bechtel, P.J., Pan, Z., Mc Hugh, T.H. (2005): Valutazione degli ultrasuoni di potenza come ausilio alla lavorazione per l'estrazione della gelatina di pesce. Abstract della riunione n. 71C-26. Riunione annuale IFT. Luglio 2005. New Orleans, LA.
  • Ran, X.G.; Wang, L.Y. (2014): Uso di ultrasuoni e trattamento con pepsina in tandem per l'estrazione di collagene dai sottoprodotti dell'industria della carne. Journal of the Science of Food and Agriculture 94(3), 2014. 585-590.
  • Schmidt, M.M.; Dornelles, R.C.P.; Mello, R.O.; Kubota, E.H.; Mazutti, M.A.; Kempka, A.P.; Demiate, I.M. (2016): Processo di estrazione del collagene. International Food Research Journal 23(3), 2016. 913-922.
  • Siritientong, Tippawan; Bonani, Walter; Motta, Antonella; Migliaresi, Claudio; Aramwit, Pornanong (2016): Gli effetti del ceppo di seta Bombyx mori e del tempo di estrazione sulle caratteristiche molecolari e biologiche della sericina. Bioscienze, Biotecnologie e Biochimica Vol. 80 , Iss. 2, 2016. 241-249.
  • Zeng, J.N.; Jiang, B.Q.; Xiao, Z.Q., Li, S.H. (2011): Estrazione di collagene da squame di pesce con papaina sotto pretrattamento a ultrasuoni. Advanced Materials Research, Volume 366, 2011. 421-424.


Particolarità / Cose da sapere

collagene

Il collagene è la principale proteina strutturale dello spazio extracellulare nei vari tessuti connettivi degli animali. In quanto componente principale del tessuto connettivo, è la proteina più abbondante nei mammiferi,[1] costituendo dal 25% al 35% del contenuto proteico dell'intero corpo. Il collagene è costituito da aminoacidi avvolti insieme a formare triple eliche per formare fibrille allungate. Le quantità maggiori di collagene sono presenti nei tessuti fibrosi come tendini, legamenti e pelle. Si distinguono tre tipi di collagene:
Collagene di tipo I: fornisce il 90% delle proteine di pelle, capelli, unghie, organi, ossa e legamenti.
Collagene di tipo II: fornisce il 50-60% delle proteine della cartilagine, l'85-90% del collagene della cartilagine articolare.
Collagene di tipo III: fornisce proteine alle proteine fibrose di ossa, cartilagine, dentina, tendini e altri tessuti connettivi.

Il collagene nell'organismo

Ciascuno dei tre tipi di collagene è composto da proteine diverse che svolgono funzioni diverse nell'organismo. I tipi di collagene I e III sono entrambi componenti principali di pelle, muscoli, ossa, capelli e unghie. Sono necessari per la loro salute, crescita e ricostruzione. Il collagene di tipo II si trova soprattutto nella cartilagine e nelle articolazioni.
Il collagene di tipo I e III contiene entrambi 19 aminoacidi, considerati aminoacidi essenziali. Le proteine più importanti del collagene di tipo I e III includono glicina, prolina, alanina e idrossiprolina. Il tipo III è una scleroproteina fibrosa.
La glicina è l'aminoacido più presente nel collagene. La prolina è un aminoacido non essenziale, che può essere sintetizzato dalla glicina e contribuisce alle articolazioni e ai tendini. L'idrossiprolina è un aminoacido che contribuisce alla stabilità del collagene. L'alanina è un aminoacido importante per la biosintesi delle proteine.
Come i tipi I e III, anche il collagene di tipo II forma fibrille. Questa rete fibrillare di collagene è importante nella cartilagine, in quanto consente l'intrappolamento dei proteoglicani. Inoltre, fornisce resistenza alla trazione del tessuto.

Fonti e usi

Il collagene è una proteina fibrosa presente in abbondanza nel tessuto connettivo dei mammiferi, ad esempio bovini e suini. La maggior parte del collagene viene estratta
da pelli e ossa di suini e da fonti bovine. Una fonte alternativa per l'estrazione del collagene sono il pesce e il pollame. Il collagene è ampiamente utilizzato, tra gli altri prodotti, negli alimenti, negli integratori alimentari, nei prodotti farmaceutici/medicinali e nei cosmetici. L'estrazione del collagene è un'attività in crescita poiché questa proteina può sostituire gli agenti sintetici in vari processi industriali.

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