Pufferoldatok ultrahanggal elkészítve
A lízispufferek hatékonyan és gyorsan előállíthatók ultrahangos szövethomogenizátorokkal. Mivel az ultrahangos készülékek álom eszköz keverésre, feloldásra és diszpergálásra, lehetővé teszik a lízispufferek megbízható és felhasználóbarát előkészítését.
Lízispufferek ultrahangos előkészítése
Az ultrahangos szövethomogenizátorok a sejtek megzavarásának általános eszköze, lízis és extrakció, ezért a legtöbb laboratóriumban elérhető. A szonda típusú ultrahangos készülékek másodlagos alkalmazása a lízispufferek előállítása.
A lízispuffer egy olyan oldat, amelyet a nyitott (lizóz) sejtek feltörésére és tartalmuk felszabadítására használnak a downstream elemzéshez. A lízispuffer specifikus összetétele a lizálandó sejtek típusától és a későbbi alkalmazástól függően változhat. A tipikus lízispuffer azonban olyan összetevőket tartalmaz, mint a mosószerek, sók és proteázgátlók. A puffersókat (pl. Trisz-HCl) és az ionos sókat (pl. NaCl) általában a lizátum pH-jának és ozmolaritásának szabályozására használják.
A lízispuffer előállításához az összetevőket megfelelő koncentrációban és pH-értékben összekeverik. Az elegyet általában addig keverjük vagy rázzuk, amíg az összetevők fel nem oldódnak, és az oldat homogén.
Az ultrahangos homogenizálás olyan módszer, amely segíthet egy jó lízispuffer előállításában a komponensek keverésének és oldódásának javításával. Ebben a módszerben ultrahang hullámok – általában a 20 és 30 kHz közötti tartományban – alkalmazzák a keverékre, amely kavitációs buborékokat hoz létre, amelyek összeomlanak és intenzív helyi energiát generálnak, ami mechanikai nyíráshoz és az összetevők keveréséhez vezet.
Az ultrahangos homogenizálási folyamat segíthet szétválasztani az összetevők csomóit vagy aggregátumait, és biztosíthatja, hogy az oldat egyenletesen keveredjen. Következésképpen az ilyen továbbfejlesztett lízispuffer hatékonyabb sejtzavarhoz és az extrahált anyag nagyobb hozamához vezethet. Ezenkívül az ultrahangos homogenizálás csökkentheti a lízispuffer készítéséhez szükséges időt a hagyományos keverési vagy rázási módszerekhez képest.
Összességében, ultrahangos homogenizálás hatékony eszköz a lízis puffer előkészítésének minőségének és hatékonyságának javítására.

Az ultrahangos laboratóriumi homogenizátor UP200Ht népszerű a kutatólaboratóriumokban a minta előkészítéséhez, líziséhez, extrahálásához, DNS-fragmentálásához és feloldásához.
Protokoll ultrahangos lízis puffer előkészítéséhez
Ez egy általános protokoll lízis puffer készítéséhez szonda típusú ultrahangos készülékkel:
Anyagok:
- Választott mosószer(ek) (pl. Triton X-100, SDS, CHAPS)
- Választott só(k) (pl. NaCl, KCl)
- Proteázgátlók (pl. PMSF, aprotinin, leupeptin)
- ultrahangos készülék
- Keverő
- Ionmentes víz
- pH-mérő vagy pH-csíkok
Lépésről lépésre:
- Határozza meg a lízispuffer összetételét a lizálni kívánt sejtek vagy szövetek és a lizátumot használó későbbi alkalmazások alapján. Készítsük el a mosószerek, sók és proteázgátlók törzsoldatait a kívánt koncentrációban.
- Töltsük a mosószerek, sók és proteázgátlók törzsoldatait főzőpohárba vagy lombikba.
- Adjunk hozzá ionmentes vizet, hogy a térfogat a kívánt puffermennyiségre emelkedjen.
- Keverjük össze a komponenseket keverővel, hogy előkeveréket kapjunk.
- Mérjük meg a puffer pH-ját pH-mérővel vagy pH-csíkokkal, és szükség szerint állítsuk be a pH-t kis mennyiségű savval vagy lúggal.
- Használja a szonda típusú ultrahangos készüléket az előkeverék oldat homogenizálásához, hogy nagyon homogén oldatot kapjunk. Ezért szonikálja az oldatot néhány másodpercig, amíg az oldatot alaposan összekeverik, és minden csomó vagy aggregátum lebomlik. Az ultrahangos kezelés időtartama és teljesítménye optimalizálható a specifikus lízispuffer és az alkalmazott ultrahangos készülék alapján.
- Az ultrahangos kezelés után mérjük meg újra a puffer pH-ját, és szükség szerint állítsuk be.
- Szűrjük át a puffert egy 0,2 mikronos szűrőn, hogy eltávolítsuk az ultrahangos kezelés során esetlegesen keletkező törmeléket vagy aggregátumokat.
- A lízispuffer most már használatra kész.
Megjegyzés: A lízispuffer pontos összetétele és pH-ja a lizálandó sejtektől vagy szövetektől és a későbbi alkalmazásoktól függően változhat. A fenti protokoll általános irányelv, és előfordulhat, hogy speciális alkalmazásokhoz kell optimalizálni.
Az ultrahangos homogenizátorokat általában az intracelluláris molekulák sejtbontására és extrakciójára használják. Ezért sok lízis alkalmazás szonda típusú szondát használ nemcsak a lízispuffer előkészítéséhez, hanem a mechanikai sejtbontáshoz és extrakcióhoz is.
Ez teszi az ultrahangos szövethomogenizátorokat sokoldalú eszközzé a laboratóriumok számára, és magyarázza az ultrahangos készülékek széles körű használatát a mikrobiológiában, a biotechnológiában és az élettudományban.
Ultrahangos laboratóriumi homogenizátorok
A Hielscher Ultrasonics ultrahangos homogenizátorokat és szondákat (sonotrodes) gyárt és szállít különböző teljesítményfokozatokkal és mintamennyiségekkel. Ez lehetővé teszi számunkra, hogy a legmegfelelőbb ultrahangos zavarót kínáljuk Önnek a minta előkészítéséhez. A legmagasabb minőségre, a kiemelkedő felhasználói kényelemre és a megbízható szonikációs eredményekre összpontosítunk. Minden digitális ultrahangos készülék intelligens szoftverrel, ultrahangos protokollok programozásával és előzetes beállításával, böngésző távirányítóval, hőmérséklet-szabályozással, minta megvilágítással, valamint automatikus adatrögzítéssel rendelkezik a beépített SD-kártyán.
Tervezés, gyártás és tanácsadás – Németországban gyártott minőség
A Hielscher ultrahangos készülékek jól ismertek a legmagasabb minőségi és tervezési szabványokról. A robusztusság és a könnyű kezelhetőség lehetővé teszi ultrahangos készülékeink zökkenőmentes integrálását ipari létesítményekbe. A durva körülmények és az igényes környezetek könnyen kezelhetők Hielscher ultrasonicators.
Hielscher Ultrasonics egy ISO tanúsítvánnyal rendelkező cég, és különös hangsúlyt fektet a nagy teljesítményű ultrasonicatorokra, amelyek a legmodernebb technológiát és felhasználóbarátságot mutatják. Természetesen a Hielscher ultrasonicators CE-kompatibilis és megfelel az UL, CSA és RoHs követelményeinek.
Az alábbi táblázat áttekintést nyújt a különböző laboratóriumi ultrahangos készülékeinkről:
VialTweeter az UP200St-nél | 200 W | 26kHz | kis injekciós üvegek ultrahangos kezelése, pl. Eppendorf 1,5 ml |
UP50H | 50W | 30kHz | kézi vagy állványra szerelt laboratóriumi homogenizátor |
UP100H | 100W | 30kHz | kézi vagy állványra szerelt laboratóriumi homogenizátor |
UP200Ht | 200 W | 26kHz | kézi vagy állványra szerelt laboratóriumi homogenizátor |
UP200St | 200 W | 26kHz | állványra szerelt laboratóriumi homogenizátor |
UP400ST | 400 W | 24kHz | állványra szerelt laboratóriumi homogenizátor |
SonoStep | 200 W | 26kHz | laboratóriumi reaktor kombinálása, ultrahangos kezelés, szivattyú, keverő és edény |
GDmini2 | 200 W | 26kHz | szennyeződésmentes áramlási cella |
Cuphorn | 200 W | 26kHz | intenzív ultrahangos fürdő injekciós üvegekhez és főzőpoharakhoz |
UIP400MTP | 400 W | 24kHz | ultrahangos rendszer többlyukú lemezekhez / mikrotiter lemezekhez |

Ultrahangos CupHorn Zárt csövek és injekciós üvegek intenzív ultrahangos kezelésére a minták steril homogenizálásához.
Kapcsolat! / Kérdezzen tőlünk!

Ultrahangos laboratóriumi homogenizátor UP400St általában lízis puffer előkészítésére és az azt követő sejtkárosodásra használják.
Irodalom / Hivatkozások
- Fernandes, Luz; Santos, Hugo; Nunes-Miranda, J.; Lodeiro, Carlos; Capelo, Jose (2011): Ultrasonic Enhanced Applications in Proteomics Workflows: single probe versus multiprobe. Journal of Integrated OMICS 1, 2011.
- Priego-Capote, Feliciano; Castro, María (2004): Analytical uses of ultrasound – I. Sample preparation. TrAC Trends in Analytical Chemistry 23, 2004. 644-653.
- Welna, Maja; Szymczycha-Madeja, Anna; Pohl, Pawel (2011): Quality of the Trace Element Analysis: Sample Preparation Steps. In: Wide Spectra of Quality Control; InTechOpen 2011.
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.

Hielscher Ultrasonics gyárt nagy teljesítményű ultrahangos homogenizátorok labor hoz ipari méret.