प्लेटलेट रिच सीरम की अल्ट्रासोनिक तैयारी
- प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा (पीआरपी) रक्त प्लाज्मा है जिसे प्लेटलेट्स से समृद्ध किया गया है, जिसका उपयोग चिकित्सा और एस्टेथिक उपचार के लिए किया जाता है।
- प्लेटलेट युक्त प्लाज्मा तैयार करने के लिए अल्ट्रासोनिक लसीका और कंडीशनिंग एक बहुत ही प्रभावी तरीका है।
- Hielscher Ultrasonics रक्त उपचार की आवश्यकताओं से मेल खाने वाले विभिन्न अल्ट्रासोनिक सिस्टम प्रदान करता है (उदाहरण के लिए एक साफ कमरे के अंदर और बाहर की तैयारी के लिए)।
प्लेटलेट रिच सीरम
सोनिकेशन विकास कारकों को जारी करने के लिए ऑटोलॉगस रक्त सीरम में प्लेटलेट्स को लाइज़ करने का एक विश्वसनीय और आसान तरीका है। प्लेटलेट-व्युत्पन्न अंश – ऑटोलॉगस वातानुकूलित सीरम (ACS) के रूप में भी जाना जाता है – ऊतक की मरम्मत या सौंदर्य संबंधी उपचार के लिए उपयोग किया जाता है। इष्टतम परिणाम प्राप्त करने के लिए, पीआरपी इंजेक्शन से पहले समृद्ध होता है।
सेल विकास कारकों के साथ समृद्ध प्लाज्मा तैयार करने के लिए, सोनिकेशन कोशिका झिल्ली को लाइज़ करने और प्लेटलेट्स से लगभग पूर्ण सेल विकास कारकों को जारी करने के लिए एक बहुत प्रभावी और कुशल तरीका है। अल्ट्रासोनिक लसीका और कंडीशनिंग द्वारा, यहां तक कि एंटी-जमा हुआ रक्त भी इस्तेमाल किया जा सकता है।
सोनिकेशन के माध्यम से पीआरपी की कंडीशनिंग केंद्रित विकास कारकों में उपज का एक सुविधाजनक और लागत प्रभावी तरीका है।
अल्ट्रासोनिक Lysis प्रभाव
रक्त सीरम के अल्ट्रासोनिक उपचार के परिणामस्वरूप प्लेटलेट्स का एक सजातीय लसीका होता है ताकि फंसे हुए विकास कारकों (विकास कारक एबी (पीडीजीएफ-एबी), विकास कारक एए (पीडीजीएफ-एए), विकास कारक बीबी (पीडीजीएफ-बीबी), संवहनी एंडोथेलियल ग्रोथ फैक्टर (वीईजीएफ), विकास कारक β (टीजीएफ -β), एपिडर्मल ग्रोथ फैक्टर (ईजीएफ), इंसुलिन जैसे विकास कारक (आईजीएफ), उपकला कोशिकाओं के विकास कारक ईसीजीएफ और फाइब्रोब्लास्टिक ग्रोथ फैक्टर (एफजीएफ))। प्लेटलेट्स और उनके अल्फा-ग्रैन्यूल सोनिकेशन द्वारा बाधित होते हैं, की घटना का उपयोग करते हुए ध्वनिक गुहिकायन. प्लेटलेट लसीका के लिए अल्ट्रासोनिक कैविटेशन का उपयोग बार-बार फ्रीज-पिघलना विधि के विकास कारक गतिविधि पर संभावित नकारात्मक प्रभाव को कम करता है।
अल्ट्रासोनिक पीआरपी तैयारी के लिए प्रोटोकॉल
ताजा एकत्र ऑटोलॉगस रक्त के नमूने के लगभग 16 एमएल को एक ट्यूब में 8-10 बार धीरे से उलटा किया जाता है ताकि रक्त और थक्कारोधी अच्छी तरह मिश्रित हो जाएं। बाद में, नमूना कमरे के तापमान पर 20 मिनट के लिए 1800 ग्राम पर अपकेंद्रित्र है। सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद, प्लेटलेट्स और मोनोन्यूक्लियर कोशिकाएं प्लाज्मा परत के नीचे एक सफेद परत का निर्माण करती हैं, जिसे प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा (पीआरपी) के रूप में जाना जाता है। ऊपरी परत को प्लेटलेट-गरीब प्लाज्मा (पीपीपी) के रूप में जाना जाता है। मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं को हटाया जा सकता है या नमूने में रह सकता है। अक्सर, अतिरिक्त चरणों से बचने के लिए मोनोन्यूक्लियर कोशिकाएं पीआरपी नमूने में रहती हैं, जो संदूषण का खतरा सहन करती हैं।
नोट: ऑटोलॉगस पीआरपी का अल्ट्रासोनिक उपचार बाँझ परिस्थितियों में किया जाना चाहिए।
पीआरपी और पीपीपी को अलग करके एकत्र किया जाता है। पीपीपी में, 1.5 एमएल 10% कैल्शियम क्लोराइड समाधान जोड़ा जाता है, जबकि पीआरपी 0.5 एमएल 5% इथेनॉल जोड़ा जाता है। दोनों निलंबन धीरे उत्तेजित कर रहे हैं और कमरे के तापमान पर 5 मिनट के लिए खड़े करने की अनुमति दी. अंत में, 1mL PPP को PRP निलंबन में जोड़ा जाता है और इसे तब तक खड़े रहने की अनुमति दी जाती है जब तक कि फाइब्रिन थक्का न बन जाए।
अल्ट्रासोनिक उपचार: चूंकि गठित प्लेटलेट जेल जारी विकास कारकों के लिए एक जलाशय के रूप में कार्य करता है, इसलिए उपलब्ध विकास कारकों को छोड़ने के लिए फाइब्रिन जेल को बाधित किया जाना चाहिए। अल्ट्रासोनिक lysis र वृद्धि कारक रिलीजको लागि मापदण्ड निम्न छन्: एक साथ Sonicate यूपी200एचटी नहीं तो यूपी200सेंट (200W, 26kHz) सोनोट्रोड S26d2 ट्यूब में नमूना के साथ। रक्त के नमूने के अति ताप से बचने के लिए, sonication स्पंदन चक्र (जैसे 10 सेकंड पर, 30 सेकंड बंद) में किया जा सकता है. नमूना ठंडा करने के लिए बर्फ पर रखा जाना चाहिए ताकि तापमान बेहतर 2 के बीच रखा जाए – 5 डिग्री सेल्सियस। सोनिकेशन के बाद, नमूना कमरे के तापमान पर 5 मिन के लिए 16000 ग्राम पर सेंट्रीफ्यूज किया जाता है। सतह पर तैरनेवाला एकत्र किया जाता है और -70 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया जा सकता है।
पीआरपी अंश में प्लेटलेट एकाग्रता 1.7 समृद्ध किया गया था – पूरे रक्त में साहित्य औसत प्लेटलेट गिनती की तुलना में सोनिकेटेड विधि में 4.5 गुना।
पीआरपी को वसा-व्युत्पन्न स्टेम सेल थेरेपी (अल्ट्रासोनिक रूप से वसा ऊतक से ऑटोलॉगस स्टेम सेल जारी किया, पीआरपी के साथ मिश्रित, और मरम्मत के लिए रोगी के ऊतक में वापस इंजेक्शन)।
अल्ट्रासोनिक उपकरण
Hielscher Ultrasonics परिष्कृत और विश्वसनीय अल्ट्रासोनिक प्रौद्योगिकी के लिए विशेषज्ञ है। हमारे अल्ट्रासोनिक उपकरणों का उपयोग दुनिया भर में lysis, निष्कर्षण और नमूना तैयार करने के लिए किया जाता है – प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष द्वारा। आटोक्लेवबल साथ ही फ़ेंकने योग्य सहायक उपकरण सुनिश्चित करते हैं कि एक संदूषण मुक्त ऑटोलॉगस रक्त के नमूनों का उपचार। हमारे अधिकांश सिस्टम का उपयोग अल्ट्रासोनिक लसीका के लिए किया जा सकता है मूल कोशिका और पीआरपी, जो हमारे अल्ट्रासोनिक उपकरणों को आर्थिक रूप से और भी अधिक कुशल बनाता है।
नीचे दी गई तालिका हमारे अल्ट्रासोनिक उपकरणों को सूचीबद्ध करती है, जो क्रमशः प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा की तैयारी के लिए उपयुक्त हैं, और उनकी अनुशंसित नमूना मात्रा। बड़े अल्ट्रासोनिकेटर और अनुकूलित सिस्टम भी उपलब्ध हैं।
उपकरण | पावर [डब्ल्यू] | Freq. [kHz] | प्रकार | वॉल्यूम [एमएल] | ||
---|---|---|---|---|---|---|
वायलट्वीटर | 200 | 26 | स्टैंड-अलोन | 0.5 | – | 1.5 |
यूपी50एच | 50 | 30 | हाथ में या स्टैंडमाउंटेड | 0.01 | – | 250 |
यूपी100एच | 100 | 30 | हाथ में या स्टैंडमाउंटेड | 0.01 | – | 500 |
यूपी200एचटी | 200 | 26 | हाथ में या स्टैंडमाउंटेड | 0.1 | – | 1000 |
यूपी200सेंट | 200 | 26 | स्टैंडमाउंटेड | 0.1 | – | 1000 |
UP400St | 400 | 24 | स्टैंडमाउंटेड | 5.0 | – | 2000 |
UP200St-सोनोस्टेप | 200 | 26 | स्टैंड-अलोन | 30 | – | 500 |
जीडीमिनी2 | 200 | 26 | संदूषण मुक्त प्रवाह सेल |
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साहित्य/संदर्भ
- फोर्टुनाटो, टी। बेल्ट्रामी, सीएच।; इमानुएली, सी।; डी बैंक, पीए :; पुला, जी (2016): प्लेटलेट लाइसेट जेल और एंडोथेलियल पूर्वज इन विट्रो में माइक्रोवास्कुलर नेटवर्क गठन को उत्तेजित करते हैं: ऊतक इंजीनियरिंग निहितार्थ। विज्ञान प्रतिनिधि 6, 2016।
- हामिद, एम.एस.ए.; यूसोफ, अश्रिल; अली, मोहम्मद रजीफ मोहम्मद (2014): तीव्र मांसपेशियों की चोट के लिए प्लेटलेट-रिच प्लाज्मा (पीआरपी): एक व्यवस्थित समीक्षा। पीएलओएस वन वॉल्यूम 9, अंक 2, 2014।
जानने के योग्य तथ्य
प्लेटलेट रिच प्लाज्मा
प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा में वृद्धि कारक एबी (पीडीजीएफ-एबी), प्लेटलेट व्युत्पन्न वृद्धि कारक एए (पीडीजीएफ-एए), प्लेटलेट व्युत्पन्न वृद्धि कारक बीबी (पीडीजीएफ-बीबी), संवहनी एंडोथेलियल ग्रोथ फैक्टर (वीईजीएफ), ट्रांसफॉर्मिंग ग्रोथ फैक्टर β (टीजीएफ -β), एपिडर्मल ग्रोथ फैक्टर (ईजीएफ), इंसुलिन जैसे ग्रोथ फैक्टर (आईजीएफ), एपिथेलियल सेल ग्रोथ फैक्टर ईसीजीएफ और फाइब्रोब्लास्टिक ग्रोथ फैक्टर (एफजीएफ), जो सेल विकास और नवीकरण के लिए महत्वपूर्ण उत्तेजक हैं।
ऑटोलॉगस वातानुकूलित सीरम (ACS)
ऑटोलॉगस वातानुकूलित प्लाज्मा (एसीपी) एक प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा है जिसे ऑटोलॉगस रक्त से निकाला जाता है जिसका उपयोग विभिन्न आर्थोपेडिक स्थितियों और सर्जिकल प्रक्रियाओं में पुनर्जनन का समर्थन करने के लिए किया जाता है। वातानुकूलित सीरम प्लाज्मा को अन्य रक्त घटकों (जैसे एरिथ्रोसाइट्स) से अलग करके तैयार किया जाता है, और इसे केंद्रित करता है। एसीपी एक प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा (पीआरपी) है। पीआरपी एक प्रकार के प्लाज्मा के लिए एक सामान्य शब्द है जिसमें पूरे रक्त की तुलना में थ्रोम्बोसाइट्स की काफी अधिक सांद्रता होती है। इसे पूरे खून से निकाला जाता है। एसीपी के मुख्य घटकों में थ्रोम्बोसाइट्स (प्लेटलेट्स), और कई विकास कारक शामिल हैं जो उपचार प्रक्रिया में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। अन्य प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा योगों के विपरीत, एसीपी को सफेद रक्त कोशिकाओं जैसे न्यूट्रोफिल ग्रैनुलोसाइट्स की कम सांद्रता द्वारा प्रतिष्ठित किया जाता है जो उच्च सांद्रता में मौजूद होने पर उपचार प्रक्रिया के लिए हानिकारक हो सकते हैं।
प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा इंजेक्शन
प्लेटलेट-समृद्ध प्लाज्मा का उपयोग पुनर्योजी चिकित्सा के साथ-साथ कॉस्मेटिक प्रक्रियाओं में इंजेक्शन के रूप में किया जाता है। पीआरपी का आवेदन मांसपेशियों के उपचार और मांसपेशियों की वसूली के महत्वपूर्ण त्वरण का वादा करता है। इसके अलावा, यह सूजन, गठिया, दर्द, घावों, धीमी गति से खुले घावों और गंभीर त्वचा जलने के इलाज के लिए सफलतापूर्वक उपयोग किया जाता है। पीआरपी में उच्च स्तर के विकास कारक होते हैं, जो उपचार कोशिकाओं को उत्तेजित और संरक्षित करते हैं कि क्षतिग्रस्त ऊतक की मरम्मत की जाती है।
कॉस्मेटिक ट्रीमेंट्स के लिए, पीआरपी को बालों के विकास, त्वचा नवीकरण (जिसे पिशाच उपचार भी कहा जाता है) को प्रोत्साहित करने के लिए प्रभावी दिखाया गया है।
प्लेटलेट-व्युत्पन्न वृद्धि कारक (PDGF)
प्लेटलेट-व्युत्पन्न वृद्धि कारक (PDGF) शब्द PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C और PDGF-D कारकों को संदर्भित करता है। यह चार लिगैंड (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C और PDGF-D), और दो रिसेप्टर्स, PDGFR-अल्फा और PDGFR-बीटा का सिग्नलिंग नेटवर्क है।
वृद्धि कारक, या प्रोटीन, कोशिका वृद्धि और विभाजन को नियंत्रित करते हैं। स्तनधारी सीरम में पाए जाने वाले प्रमुख माइटोजेन के रूप में, जो थक्का गठन के दौरान प्लेटलेट्स से जारी किया जाता है, यह रक्त वाहिका गठन (एंजियोजेनेसिस) में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, पहले से मौजूद रक्त वाहिका ऊतक से रक्त वाहिकाओं का विकास।