प्लेटलेट रिच सीरम की अल्ट्रासोनिक तैयारी
- प्लेटलेट रिच प्लाज्मा (पीआरपी) रक्त प्लाज्मा कि प्लेटलेट्स, जो चिकित्सा और estethic उपचार के लिए प्रयोग किया जाता है के साथ समृद्ध किया गया है।
- अल्ट्रासोनिक lysis और कंडीशनिंग प्लेटलेट रिच प्लाज्मा तैयार करने के लिए एक बहुत प्रभावी तरीका है।
- Hielscher Ultrasonics (जैसे के अंदर और एक साफ कमरे की तैयारी के बाहर के लिए) विभिन्न अल्ट्रासोनिक रक्त उपचार की आवश्यकताओं से मेल खाते सिस्टम प्रदान करता है।
प्लेटलेट रिच सीरम
Sonication आदेश वृद्धि कारकों को रिहा करने ऑटोलॉगस रक्त सीरम में प्लेटलेट्स lyse करने के लिए एक विश्वसनीय और आसान तरीका है। प्लेटलेट व्युत्पन्न अंशों – भी ऑटोलॉगस वातानुकूलित सीरम के रूप में जाना (ACS) – ऊतक की मरम्मत या aesthetical उपचार के लिए किया जाता है। इष्टतम परिणाम प्राप्त करने के लिए, पीआरपी इंजेक्शन से पहले समृद्ध है।
आदेश कोशिकाओं की वृद्धि कारकों के साथ समृद्ध प्लाज्मा तैयार करने के लिए, sonication कोशिका झिल्ली lyse करने के लिए और प्लेटलेट्स से लगभग पूरा हो गया कोशिकाओं की वृद्धि कारकों को रिहा करने का एक बहुत ही प्रभावी और कुशल तरीका है। अल्ट्रासोनिक lysis और कंडीशनिंग तक, यहां तक कि विरोधी coagulated खून इस्तेमाल किया जा सकता।
sonication के माध्यम से पीआरपी की कंडीशनिंग केंद्रित वृद्धि कारकों में उपज के लिए एक सुविधाजनक और लागत प्रभावी तरीका है।
अल्ट्रासोनिक Lysis प्रभाव
आदेश फँस वृद्धि कारक (वृद्धि कारक एबी (PDGF-एबी), वृद्धि कारक ए.ए. (PDGF-एए), वृद्धि कारक बी बी (PDGF-बी बी), संवहनी जारी करने के लिए में प्लेटलेट्स की एक सजातीय lysis में रक्त सीरम परिणामों की अल्ट्रासोनिक उपचार endothelial वृद्धि कारक (वीईजीएफ़), बदलने वृद्धि कारक β (TGF-β), एपिडर्मल वृद्धि कारक (EGF), इन्सुलिन जैसे विकास कारक (आईजीएफ), उपकला कोशिकाओं वृद्धि कारक ECGF और fibroblastic वृद्धि कारक (FGF))। प्लेटलेट्स और उनके अल्फा कणिकाओं, sonication द्वारा बाधित कर रहे हैं की घटना का उपयोग कर ध्वनिक गुहिकायन। प्लेटलेट lysis के लिए अल्ट्रासोनिक गुहिकायन का उपयोग करते हुए दोहराया फ्रीज पिघलना विधि की वृद्धि कारक गतिविधि पर संभव नकारात्मक प्रभाव कम हो।
अल्ट्रासोनिक पीआरपी तैयारी के लिए प्रोटोकॉल
लगभग। ताजा एकत्र ऑटोलॉगस रक्त के नमूने की 16ml धीरे एक ट्यूब में 8-10 बार उलटी, ताकि रक्त और थक्का-रोधी अच्छी तरह से मिश्रित कर रहे हैं। बाद में, नमूना कमरे के तापमान पर 20 मिनट के लिए 1800 ग्राम पर centrifuged। centrifugation के बाद, प्लेटलेट्स और mononuclear कोशिकाओं प्लाज्मा परत है, जो प्लेटलेट रिच प्लाज्मा (पीआरपी) के रूप में जाना जाता है के तल पर एक सफेद परत का निर्माण। ऊपरी परत प्लेटलेट गरीब प्लाज्मा (पीपीपी) के रूप में जाना जाता है। mononuclear कोशिकाओं को हटाया या नमूने में रहने जा सकता है। अक्सर, mononuclear कोशिकाओं पीआरपी नमूने में रहने के लिए अतिरिक्त कदम है, जो प्रदूषण का खतरा सहन से बचने के लिए।
नोट: ऑटोलॉगस पीआरपी का अल्ट्रासोनिक उपचार बाँझ शर्तों के तहत किया जाना चाहिए।
पीआरपी और पीपीपी अलग कर दिया और एकत्र कर रहे हैं। करने के लिए पीपीपी, 1.5mL 10% कैल्शियम क्लोराइड समाधान जोड़ा जाता है, जबकि पीआरपी 0.5ml से 5% इथेनॉल जोड़ा जाता है। दोनों निलंबन धीरे उत्तेजित और कमरे के तापमान पर 5 मिनट के लिए खड़े करने के लिए अनुमति दी जाती है। अंत में, 1mL पीपीपी पीआरपी निलंबन में जोड़ा जाता है और एक फाइब्रिन थक्के रूपों तक खड़े रहने के लिए अनुमति दी है।
अल्ट्रासोनिक उपचार: जारी की वृद्धि कारकों के लिए एक जलाशय के रूप में गठन प्लेटलेट जेल में कार्य करता है के रूप में, फाइब्रिन जेल आदेश उपलब्ध वृद्धि कारकों को रिहा करने में बाधित किया जाना चाहिए। अल्ट्रासोनिक lysis और वृद्धि कारक रिहाई के लिए मानकों को निम्नलिखित हैं: Sonicate एक साथ UP200Ht या UP200St (200W, 26kHz) sonotrode S26d2 साथ ट्यूब में नमूना। रक्त के नमूने की गर्म होने से बचने के लिए, sonication चक्र pulsing में प्रदर्शन किया जा सकता है (उदाहरण के लिए 10 सेकंड। पर, 30 सेकंड। बंद)। नमूना ठंडा ताकि तापमान बेहतर 2 के बीच रखा जाता है के लिए बर्फ पर रखा जाना चाहिए – 5 डिग्री सेल्सियस। Sonication के बाद, नमूना 5 मिनट के लिए 16000 जी पर centrifuged है। कमरे के तापमान पर। सतह पर तैरनेवाला एकत्र किया जाता है और -70 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया जा सकता।
पीआरपी अंश में प्लेटलेट एकाग्रता 1.7 समृद्ध किया गया था – sonicated विधि में 4.5 गुना जब पूरे रक्त में साहित्य औसत प्लेटलेट काउंट की तुलना में।
पीआरपी वसा व्युत्पन्न स्टेम सेल थेरेपी के साथ संयुक्त कर दिया गया है (ultrasonically वसा ऊतकों से ऑटोलॉगस स्टेम कोशिकाओं का विमोचन किया, पीआरपी के साथ मिश्रित, और मरम्मत के लिए रोगी के ऊतकों में वापस इंजेक्शन)।
अल्ट्रासोनिक उपकरण
Hielscher Ultrasonics परिष्कृत और विश्वसनीय अल्ट्रासोनिक प्रौद्योगिकी के लिए विशेषज्ञ है। हमारे अल्ट्रासोनिक उपकरण lysis, निष्कर्षण और नमूना तैयार करने के लिए दुनिया भर में उपयोग किया जाता है – प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष द्वारा। autoclavable साथ ही साथ डिस्पोजेबल सामान एक सुनिश्चित संदूषण से मुक्त ऑटोलॉगस रक्त के नमूनों के उपचार। हमारे सिस्टम में से अधिकांश की अल्ट्रासोनिक lysis के लिए इस्तेमाल किया जा सकता मूल कोशिका और पीआरपी, जो बनाता है हमारे अल्ट्रासोनिक उपकरण आर्थिक रूप से भी अधिक कुशल।
नीचे इस तालिका में हमारे अल्ट्रासोनिक उपकरण है, जो प्लेटलेट रिच प्लाज्मा की तैयारी, और उनके सिफारिश नमूना मात्रा क्रमश: के लिए उपयुक्त हैं सूचीबद्ध करता है। बड़ी ultrasonicators और अनुकूलित प्रणाली उपलब्ध भी हैं।
युक्ति | पावर [W] | Freq। [KHz] | प्रकार | मात्रा [एमएल] | ||
---|---|---|---|---|---|---|
VialTweeter | 200 | 26 | स्टैंड-अलोन | 0.5 | – | 1.5 |
UP50H | 50 | 30 | हाथ या standmounted | 0.01 | – | 250 |
UP100H | 100 | 30 | हाथ या standmounted | 0.01 | – | 500 |
UP200Ht | 200 | 26 | हाथ या standmounted | 0.1 | – | 1000 |
UP200St | 200 | 26 | खड़ा होना | 0.1 | – | 1000 |
UP400St | 400 | 24 | खड़ा होना | 5.0 | – | 2000 |
UP200St-सोनोस्टेप | 200 | 26 | स्टैंड-अलोन | 30 | – | 500 |
GDmini2 | 200 | 26 | दूषित मुक्त प्रवाह सेल |
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साहित्य / संदर्भ
- Fortunato, टी एम .; Beltrami, Ch .; Emanueli, सी .; डी बैंक, प्रति वर्ष :; पुला, जी (2016): प्लेटलेट lysate जेल और endothelial पूर्वज इन विट्रो में microvascular नेटवर्क गठन को प्रोत्साहित: ऊतक इंजीनियरिंग निहितार्थ। विज्ञान। रेप। 6, 2016।
- हामिद, M.S.A .; Yusof, Ashril; अली, मोहम्मद Razif मोहम्मद (2014): तीव्र स्नायु चोट के लिए प्लेटलेट रिच प्लाज्मा (पीआरपी): एक व्यवस्थित समीक्षा। एक PLoS खंड 9, अंक 2, 2014।
जानने के योग्य तथ्य
प्लेटलेट प्रचुर प्लाज्मा
प्लेटलेट रिच प्लाज्मा वृद्धि कारक एबी (PDGF-एबी), प्लेटलेट व्युत्पन्न विकास कारक ए.ए. (PDGF-एए) होता है, प्लेटलेट व्युत्पन्न विकास कारक बी बी (PDGF-बी बी), संवहनी endothelial वृद्धि कारक (वीईजीएफ़), वृद्धि कारक β बदलने (TGF -β), एपिडर्मल वृद्धि कारक (EGF), इन्सुलिन जैसे विकास कारक (आईजीएफ), उपकला कोशिकाओं वृद्धि कारक ECGF और fibroblastic वृद्धि कारक (FGF), जो कोशिका विकास और नवीकरण के लिए महत्वपूर्ण उत्तेजक हैं।
ऑटोलॉगस कंडीशन्ड सीरम (ACS)
ऑटोलॉगस वातानुकूलित प्लाज्मा (एसीपी) एक प्लेटलेट युक्त प्लाज्मा है जो ऑटोलॉगस रक्त से निकाला जाता है जिसका उपयोग आर्थोपेडिक स्थितियों और शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं की एक किस्म में पुनर्जनन का समर्थन करने के लिए किया जाता है। वातानुकूलित सीरम प्लाज्मा को अन्य रक्त घटकों (जैसे एरिथ्रोसाइट्स) से अलग करके तैयार किया जाता है, और इसे ध्यान केंद्रित करता है। एसीपी एक प्लेटलेट युक्त प्लाज्मा (पीआरपी) है। पीआरपी प्लाज्मा का एक प्रकार है कि जब पूरे रक्त के साथ तुलना में थ्रोम्बोसाइट की एक काफी उच्च एकाग्रता शामिल है के लिए एक सामान्य शब्द है। यह पूरे रक्त से निकाला जाता है। एसीपी के मुख्य घटकों में थ्रोम्बोसाइट्स (प्लेटलेट्स) और कई विकास कारक शामिल हैं जो उपचार प्रक्रिया में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। अन्य प्लेटलेट युक्त प्लाज्मा योगों के विपरीत, एसीपी सफेद रक्त कोशिकाओं की कम एकाग्रता जैसे न्यूट्रोफिल ग्रैन्युलोसाइट्स द्वारा प्रतिष्ठित है जो उच्च सांद्रता में मौजूद होने पर उपचार प्रक्रिया के लिए हानिकारक हो सकता है।
प्लेटलेट रिच प्लाज्मा इंजेक्शन
प्लेटलेट रिच प्लाज्मा पुनर्योजी चिकित्सा में इंजेक्शन के रूप में और साथ ही कॉस्मेटिक प्रक्रियाओं में प्रयोग किया जाता है। पीआरपी के आवेदन पेशी चिकित्सा और मांसपेशियों में सुधार के महत्वपूर्ण त्वरण वादा करता है। इसके अलावा, यह सफलतापूर्वक सूजन, गठिया, दर्द, घाव, धीमी गति से चिकित्सा खुले घावों, और गंभीर त्वचा जलता का इलाज किया जाता है। पीआरपी वृद्धि कारक है, जो प्रोत्साहित करने और उपचार कोशिकाओं Ao कि क्षतिग्रस्त ऊतकों की मरम्मत की रक्षा का एक उच्च स्तरीय शामिल हैं।
कॉस्मेटिक treaments के लिए, पीआरपी बाल विकास, त्वचा नवीकरण (भी पिशाच इलाज के रूप में जाना जाता है) को प्रोत्साहित करने के लिए प्रभावी दिखाया गया है।
प्लेटलेट व्युत्पन्न वृद्धि कारक (PDGF)
अवधि प्लेटलेट व्युत्पन्न विकास कारक (PDGF) कारकों PDGF-ए, PDGF-बी, PDGF-सी और PDGF-डी को दर्शाता है। यह चार लाइगैंडों (PDGF-ए, PDGF-बी, PDGF-सी और PDGF-डी), और दो रिसेप्टर्स, PDGFR-अल्फा और बीटा PDGFR का संकेत नेटवर्क है।
विकास कारक, या प्रोटीन, कोशिका वृद्धि और विभाजन को विनियमित। प्रिंसिपल माइटोजन स्तनधारी सीरम में पाया है, जो प्लेटलेट्स से थक्का गठन के दौरान जारी किया गया है, यह एक महत्वपूर्ण (एंजियोजिनेसिस) रक्त वाहिका गठन में भूमिका, पहले से मौजूद रक्त वाहिनियों के ऊतकों से रक्त वाहिकाओं के विकास निभाता है।