अल्ट्रासोनिक स्टेम सेल अलगाव
- अल्ट्रासोनिक गुहिकायन मानव वसा ऊतकों से स्टेम कोशिकाओं को अलग करने के एक अत्यंत प्रभावी यांत्रिक विधि है।
- Ultrasonically अलग stromal संवहनी अंश SVF () चिकित्सा अनुप्रयोगों के लिए एक उच्च पुनर्योजी क्षमता दिखाते हैं।
- Hielscher Ultrasonics स्टेम कोशिकाओं की कटाई के लिए प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष sonication के विभिन्न विकल्प प्रदान करता है।
स्टेम सेल की अल्ट्रासोनिक अलगाव
मानव शरीर निकाले वसा ऊतकों से (लिपोसक्शन के माध्यम से) ultrasonication द्वारा इलाज किया जाता है स्टेम सेल और अन्य विकास कोशिकाओं से ऊतक को हटाने के लिए। कोशिकाओं की इस अलग भाग stromal संवहनी अंश कोशिकाओं SVF () के रूप में जाना जाता है।
वसा ऊतकों से स्टेम सेल के अल्ट्रासोनिक अलगाव तकनीक अल्ट्रासोनिक व्युत्पन्न गुहिकायन, जो यांत्रिक कतरनी है के काम करने के सिद्धांत पर आधारित होता है। cavitational कतरनी बलों, वसा ऊतकों को बाधित ताकि स्टेम सेल वसा ऊतकों की संरचना से जारी कर रहे हैं। अल्ट्रासोनिक स्टेम सेल अलगाव एक एंजाइम से मुक्त प्रक्रिया, कोलैजिनेज़, ट्रिप्सिन, या dispase के उपयोग से परहेज है।
निकाली गई स्टेम सेल, मीजेनकाइमल स्टेम कोशिका, endothelial पूर्ववर्ती और अन्य प्रकार के विकास सेल को अलग करने के लिए, sonicated वसा ऊतकों centrifuged है।
अलग स्टेम कोशिकाओं एकत्र और कोशिकाओं की संख्या, व्यवहार्यता, अन्तर्जीवविष, और ग्राम दाग से पहले ऑटोलॉगस प्रत्यारोपण के लिए तुरंत इस्तेमाल या क्रायो-भंडारण में संरक्षित कर रहे हैं सहित उनकी गुणवत्ता के लिए विश्लेषण किया जाता है।
क्यों एंजाइमों से बचने के?
स्टेम सेल अलगाव के लिए एंजाइमी पाचन के बाद से उच्च लागत और संभव सुरक्षा जोखिम के साथ ही कमी प्रभावकारिता [Oberbauer एट अल के साथ साथ है। 2015], इस तरह के अल्ट्रासोनिक गुहिकायन के रूप में गैर एंजाइमी अलगाव तरीकों पसंद किया जाता है। अल्ट्रासोनिक अलगाव कदम वसा ऊतकों से यंत्रवत् कोशिकाओं और सेल समुच्चय को अलग करके एंजाइमी पाचन प्रतिस्थापित करता है।
GDmini2 UP200St-टीडी ट्रांन्सड्यूसर पर (200 वाट)
- तीव्र
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- प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य
- सुरक्षित
- एनजाइम मुक्त
- प्रभावी लागत
- बाँझ विकल्प
वसा व्युत्पन्न स्टेम कोशिकाओं
स्टेम सेल यील्ड
1.67-2.24 × 10 में अल्ट्रासोनिक गुहिकायन उपज का उपयोग कर SVF अलगाव विधि प्रकाशित7 97.1-98.9% की व्यवहार्यता के साथ कोशिकाओं [विक्टर, एस, 2014]. लगभग 2-4 मिलियन कोशिकाओं/ग्राम वसा ऊतकों की कोशिका पैदावार असंबद्ध वसा ऊतक [ब्राइट एट अल,2014] में परिपक्व एडिपोसाइट्स की अल्ट्रासोनिक lysis द्वारा प्राप्त की गई थी।
Ultrasonically तैयार कोशिकाओं एक मानक एंजाइमी अलगाव विधि [Oberbauer एट अल की तुलना में समान रूप से उच्च adipogenic और osteogenic भेदभाव संभावित अधिकारी,। 2015]।
अल्ट्रासोनिक प्रणाली स्टेम सेल अलगाव के लिए
उच्चतम सुरक्षा और अच्छी गुणवत्ता, विश्वसनीय अल्ट्रासोनिक उपकरण है, जो स्टेम सेल उपचार अधिक सटीक नियंत्रण के लिए अनुमति देता है, यह सुनिश्चित करने के रोगियों के एक सफल उपचार के लिए एक महत्वपूर्ण कारक है। Hielscher Ultrasonics एक ऑटोलॉगस अल्ट्रासोनिक गुहिकायन जुदाई प्रक्रिया और फसल स्टेम और endothelial अग्रदूत कोशिकाओं को अलग करने के लिए विभिन्न विकल्प प्रदान करता है।
प्रत्यक्ष sonication
प्रत्यक्ष sonication के माध्यम से स्टेम सेल अलगाव प्रक्रिया के लिए, अल्ट्रासोनिक सींग (sonotrode, अल्ट्रासोनिक नोक / जांच) वसा वसा ऊतकों में डूब जाता है। वाया sonotrode, अल्ट्रासाउंड तरंगों ताकि अल्ट्रासोनिक गुहिकायन अवशिष्ट ऊतक से स्टेम कोशिकाओं और stromal कोशिकाओं विज्ञप्ति ऑटोलॉगस वसा में सीधे मिलकर कर रहे हैं। Hielscher अल्ट्रासोनिक प्रोसेसर UP200Ht तथा UP200St sonotrode S26d14 साथ आमतौर पर ऑटोलॉगस स्टेम सेल उपचार के लिए प्रणाली का इस्तेमाल कर रहे हैं। प्रत्यक्ष sonication द्वारा SVF अलगाव ज्यादातर cleanroom सुविधाओं में उपयोग के लिए उपयुक्त है।
अप्रत्यक्ष Sonication
के बाद से स्टेम सेल ऑटोलॉगस अनुप्रयोगों के लिए उपयोग किया जाता है, इस प्रक्रिया का बाँझपन बहुत महत्वपूर्ण है। इसलिए, Hielscher जैसे अप्रत्यक्ष sonication के कई विकल्प विकसित किया गया है GDmini2, VialTweeter और अन्य अनुकूलित प्रणाली। अप्रत्यक्ष sonication द्वारा, अल्ट्रासाउंड तरंगों वसा ऊतकों में दीवार कंटेनर के माध्यम से मिलकर कर रहे हैं। stromal संवहनी अंश SVF () प्रत्यक्ष sonication के दौरान के रूप में ही रूप में अल्ट्रासोनिक गुहिकायन से वसा ऊतकों से अलग है।
अप्रत्यक्ष sonication प्रक्रिया लाभ के तहत एक बंद बर्तन में कोशिकाओं को प्रोसेस करने में प्रदान करता है संदूषण से मुक्त की स्थिति अल्ट्रासाउंड सींग (sonotrode) डालने से पार संदूषण का जोखिम के बाद से निकाल दिया जाता है। सेल अलगाव बाँझ प्रक्रिया की स्थिति सुनिश्चित करने एक बंद व्यवस्था में किया जाता है।
Hielscher के डिजिटल अल्ट्रासोनिक उपकरण ठीक स्पर्श प्रदर्शन या ब्राउज़र नियंत्रण के माध्यम से नियंत्रित किया जा सकता। Sonication प्रक्रियाओं सहज ज्ञान युक्त मेनू के माध्यम से पहले से सेट किया जा सकता है। अल्ट्रासोनिक उपकरण एक स्वचालित डेटा रिकॉर्डिंग (सभी sonication प्रक्रिया डेटा एक एकीकृत एसडी कार्ड पर जमा हो जाती) से लैस हैं। अल्ट्रासोनिक पावर इनपुट वास्तव में सेल अलगाव प्रोटोकॉल लिए समायोजित किया जा सकता है।
साहित्य / संदर्भ
- ओबरबेउर, एलीनी; स्टेफेन्हागेन, कैरोलिन; Wurzer, क्रिस्टोफ; गेब्रियल, ईसाई; रेडल, हेन्ज़; Wolbank, Susanne (2015): वसा ऊतक व्युत्पन्न कोशिकाओं के लिए एंजाइमी और गैर एंजाइमी अलगाव प्रणाली: कला की वर्तमान स्थिति. सेल पुनर्जनन (2015) 4:7.
जानने के योग्य तथ्य
मूल कोशिका
स्टेम कोशिकाएं एक बहुकोशिकीय जीव की अव्यवस्थित कोशिकाएं होती हैं जिनमें एक ही प्रकार की अनिश्चित काल तक अधिक कोशिकाओं का उत्पादन करने की क्षमता होती है। वे जीवन की शुरुआती स्थिति और विकास के दौरान शरीर में कई अलग-अलग सेल प्रकारों में विकसित होने की उल्लेखनीय क्षमता से विशेषता रखते हैं। स्टेम कोशिकाओं की सबसे विशिष्ट विशेषता सेल विभाजन द्वारा खुद को नवीनीकृत करने और उनकी क्षमता को ऊतक में बदलने के लिए या विशेष कार्यों वाले अंग-विशिष्ट कोशिकाओं में बदलने की क्षमता है। प्लुरिपोटेंट स्टेम कोशिकाओं में तीन जीवाणु कोशिकाओं में से किसी एक में अंतर करने की क्षमता होती है: एंडोडर्म (इंटीरियर पेट अस्तर, गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रैक्ट, फेफड़े), मेसोदर्म (मांसपेशी, हड्डी, रक्त, यूरोजेनिक), या एक्टोडर्म (एपिडर्मल ऊतक और तंत्रिका तंत्र)।
इस तरह के पेट और अस्थि मज्जा के रूप में कुछ अंगों, में, स्टेम कोशिकाओं को नियमित रूप से मरम्मत करने के लिए विभाजित और पहने बाहर या क्षतिग्रस्त ऊतकों की जगह। इस तरह के अग्न्याशय और दिल के रूप में अन्य अंगों में, स्टेम कोशिकाओं को केवल विशेष परिस्थितियों में विभाजित करते हैं।
मेसेंकाईमल stromal / स्टेम सेल (एमएससी), जो पुनर्योजी और aestethic चिकित्सा के क्षेत्र में कई गुना चिकित्सीय अनुप्रयोगों के लिए एक उच्च क्षमता प्रदान करते हैं, मुख्य रूप से अस्थि मज्जा में पाए जाते हैं, लेकिन वे (जैसे उपास्थि, वसा, मांसपेशियों की कोशिकाओं) अन्य ऊतकों से अलग किया जा सकता, भी। मीजेनकाइमल स्टेम कोशिका प्रोटोटाइप वयस्क स्टेम सेल कि आत्म नवीकरण की उनकी क्षमता की विशेषता है माना जाता है।
स्टेम सेल अनुसंधान और उपचार प्रत्यारोपण प्रयोजनों (ऊतक इंजीनियरिंग) के लिए ऊतक और अंगों की खेती के लिए उपयोग किया जाता है। स्टेम सेल के आवेदन के लिए अन्य चिकित्सा क्षेत्रों मस्तिष्क रोग के उपचार में पाया जा सकता है (उदाहरण के लिए पार्किंसंस और अल्जाइमर रोग), सेल कमी चिकित्सा, रक्त रोग (जैसे ल्यूकेमिया), जोड़ों और उपास्थि अध: पतन (जैसे पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस) और साथ ही कॉस्मेटिक उपचार (जैसे विरोधी उम्र बढ़ने उपचार)। सामान्य तौर पर, स्टेम सेल लगभग एक आकार की है। व्यास में 15-25 माइक्रोन।
मेसेनचिमल स्टेम सेल (एमएससी) multipotent stromal कोशिकाओं है, जो क्षमता अस्थिकोरक (अस्थि कोशिकाओं), chondrocytes (उपास्थि कोशिकाओं), myocytes (मांसपेशियों की कोशिकाओं) सहित प्रकार की कोशिकाओं, की एक किस्म में अंतर करने के लिए है, और adipocytes (वसा कोशिकाओं) कर रहे हैं।
Stromal संवहनी अंश SVF ()
Stromal संवहनी अंश SVF () lipoaspirate मानव शरीर में वसा ऊतकों से लिपोसक्शन के माध्यम से निकाला जा सकता है, जिनमें से एक घटक है। lipoaspirate कोशिकाओं की एक विषम मिश्रण में होते हैं और इस तरह उनकी क्षमता multilineage कोशिकाओं में अंतर करने के लिए के रूप में स्टेम सेल, वसा व्युत्पन्न स्टेम कोशिकाओं (एएससी या ADSC) है, जो अस्थि मज्जा स्टेम सेल, के साथ समानता दिखाने के रूप में जाना जाता का एक उच्च सामग्री है।
SVF की विषम आबादी अंतर्कलीय कोशिकाओं, एरिथ्रोसाइट्स, फ़ाइब्रोब्लास्ट, लिम्फोसाइटों, monocytes / मैक्रोफेज, और pericytes दूसरों के बीच में, और साथ ही वसा व्युत्पन्न स्टेम कोशिकाओं का एक महत्वपूर्ण अंश भी शामिल है।
वसा व्युत्पन्न Stromal / स्टेम सेल (एएससी)
एडीपोज-व्युत्पन्न स्ट्रॉमल / स्टेम सेल (एएससी / एडीएससी) बायोएक्टिव विकास कारकों के उच्च स्तर जैसे कि एपिडर्मल ग्रोथ फैक्टर (ईजीएफ), संवहनी एंडोथेलियल ग्रोथ फैक्टर (वीईजीएफ), मूल फाइब्रोब्लास्ट ग्रोथ फैक्टर (बीएफजीएफ), केरातिनोसाइट विकास कारक (केजीएफ) , प्लेटलेटडेव ग्रोथ फैक्टर (पीडीजीएफ), हेपेटोसाइट विकास कारक (एचजीएफ), विकास कारक-बीटा (टीजीएफ-β), इंसुलिन विकास कारक (आईजीएफ), और मस्तिष्क-व्युत्पन्न न्यूरोट्रोफिक कारक (बीडीएनएफ) को बदल रहा है। एसीएस न केवल विकास कारकों को जारी करता है, वे एफएमएस से संबंधित टायरोसिन किनेज 3 (फ्लैट -3) लिगैंड, ग्रैनुलोसाइट-कॉलोनी उत्तेजक कारक (जी-सीएसएफ), ग्रैनुलोसाइट मैक्रोफेज-कॉलोनी उत्तेजक कारक (जीएम-सीएसएफ), मैक्रोफेज सहित साइटोकिन्स को भी सिकुड़ते हैं। -कोनी उत्तेजक कारक (एम-सीएसएफ), इंटरलेक्विन (आईएल) जैसे आईएल -6, आईएल -7, आईएल -8, आईएल -11, और आईएल -12, ल्यूकेमिया अवरोधक कारक (एलआईएफ), और ट्यूमर नेक्रोसिस कारक-अल्फा (TNF-α)।
स्टेम सेल प्रकार का निष्कर्षण
मनुष्यों से ऑटोलॉगस वयस्क स्टेमसेल निम्नलिखित स्रोतों से निकाले जा सकते हैं:
- अस्थि मज्जा, जो कटाई, कि है, हड्डी में ड्रिलिंग द्वारा निकासी की आवश्यकता है।
- वसा ऊतकों (लिपिड कोशिकाओं) है, जो liposuction द्वारा निकासी की आवश्यकता है।
- रक्त, जो apheresis के माध्यम से निकासी की आवश्यकता है, जिसमें दाता से रक्त एक से होकर गुजरता है “डायलिसिस” मशीन जहां स्टेम सेल जबकि अन्य रक्त घटकों निकाले जाते हैं वापस दाता को लौट रहे हैं।