Ultrasonication का उपयोग कर प्लास्मिड तैयारी
Ultrasonication प्लास्मिड डीएनए टुकड़ा करने के लिए एक विश्वसनीय तकनीक है। ठीक नियंत्रणीय आयाम, स्पंदन मोड और तापमान नियंत्रण गैर हानिकारक प्लास्मिड विखंडन के लिए एक ultrasonicator की सबसे महत्वपूर्ण विशेषताएं हैं। इसके अतिरिक्त, कुछ एजेंटों का उपयोग प्लास्मिड गिरावट से बचाने में मदद करता है। Hielscher Ultrasonics एकल शीशियों से नियंत्रित प्लास्मिड विखंडन के लिए विभिन्न समाधान प्रदान करता है, साथ ही साथ कई नमूनों के sonication के रूप में अच्छी तरह से बहु अच्छी तरह से प्लेटों. सफल अल्ट्रासोनिक प्लास्मिड विखंडन के बारे में अधिक जानें!
The UIP400MTP ठीक बहु अच्छी तरह से प्लेटों के नियंत्रित ultrasonication के लिए अनुमति देता है. UIP400MTP के अनुप्रयोगों में से एक प्लास्मिड डीएनए का विखंडन है ताकि विशेष रूप से लक्षित लंबाई के टुकड़े प्राप्त किए जा सकें।
Ultrasonication का उपयोग कर प्लास्मिड कर्तन
जब डीएनए नमूनों को अल्ट्रासोनिक तरंगों के अधीन किया जाता है, तो अल्ट्रासोनिक रूप से उत्पन्न कंपन तरल में ध्वनिक cavitation बनाते हैं जो यांत्रिक बलों के माध्यम से उच्च आणविक वजन डीएनए अणुओं को कतरनी या तोड़ता है। Sonication थोक डीएनए कर्तन प्रयोगों के लिए सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल किया जाने वाला तरीका है, जिसमें क्रोमैटिन इम्यूनोप्रिसिपेशन (CHIP) जैसे अनुप्रयोग शामिल हैं, जिसके लिए छोटे टुकड़े के आकार उच्च रिज़ॉल्यूशन प्राप्त करने के लिए बिल्कुल महत्वपूर्ण हैं। (cf. Tseng et al., 2012)
प्लास्मिड डीएनए (पीडीएनए) डीएनए का विशिष्ट रूप है, जो इसके अंगूठी के आकार की विशेषता है और बैक्टीरिया और कुछ यूकेरियोट्स में पाया जाता है।
सुपरकोइल्ड पीडीएनए प्लास्मिड डीएनए का वांछित रूप है क्योंकि यह स्वचालित अनुक्रमण और अभिकर्मक जैसी डाउन-स्ट्रीम प्रक्रियाओं में सबसे अच्छा परिणाम दिखाता है। Ultrasonication pDNA टुकड़ा करने के लिए उपयुक्त है, जिसमें supercoiled pDNA भी शामिल है, सफलतापूर्वक।
थॉम्पसन एट अल(2008) ने प्रदर्शित किया कि प्लास्मिड sonication, जो supercoiled डीएनए टुकड़ा करने के लिए जाना जाता है, अनुक्रम phred20 पढ़ने की लंबाई में सुधार करने के लिए एक प्रभावी तरीका है कि वे बेकमैन Coulter के नियंत्रण टेम्पलेट या enzymatically linearized plasmids से काफी अलग नहीं हैं।
- संक्षेप में नियंत्रणीय
- पुनरुत्पादनीय परिणाम
- डीएनए टुकड़ा लंबाई को लक्षित करने के लिए समायोज्य
- तापमान नियंत्रण
- किसी भी नमूना आकार के लिए स्केलेबल
प्लास्मिड वैक्टर का उपयोग
प्लास्मिड का उपयोग अक्सर जीन को क्लोन, ट्रांसफर और हेरफेर करने के लिए उपकरण के रूप में किया जाता है। जब प्लास्मिड का उपयोग इन उद्देश्यों के लिए प्रयोगात्मक रूप से किया जाता है, तो उन्हें वैक्टर कहा जाता है। डीएनए के टुकड़े या जीन को एक प्लास्मिड वेक्टर में डाला जा सकता है, जिससे एक तथाकथित पुनः संयोजक प्लास्मिड बनता है। प्लास्मिड वैक्टर का उपयोग एक मेजबान सेल में पुनः संयोजक डीएनए को चलाने के लिए वाहनों के रूप में किया जाता है और आणविक क्लोनिंग का एक प्रमुख घटक है।
“गैर-वायरल वैक्टरों का विभिन्न जटिल बीमारियों के इलाज के लिए जीन थेरेपी में उनके संभावित उपयोग के लिए बड़े पैमाने पर अध्ययन किया जा रहा है। गैर-वायरल वैक्टर भौतिक, रासायनिक और एंजाइमेटिक गिरावट के खिलाफ प्लास्मिड डीएनए की रक्षा करते हैं और डीएनए अणु को लक्ष्य स्थल पर पहुंचाते हैं। उदाहरण के लिए, कैटिओनिक लिपोसोम, चिटोसन और अन्य सकारात्मक रूप से चार्ज किए गए नैनोकण इलेक्ट्रोस्टैटिक इंटरैक्शन के माध्यम से प्लास्मिड डीएनए के साथ कॉम्प्लेक्स बनाते हैं। हालांकि, आसानी से गठित कैटिओनिक लिपोसोम / प्लास्मिड डीएनए कॉम्प्लेक्स अपेक्षाकृत बड़े (यानी, 300-400 एनएम) और प्रकृति में विषम हैं जिससे उन्हें दवा अनुप्रयोगों में उपयोग करना मुश्किल हो जाता है। बड़े और विषम प्लास्मिड डीएनए / लिपोसोम, प्लास्मिड डीएनए / एयरोसोल, और प्लास्मिड डीएनए / पेप्टाइड्स कॉम्प्लेक्स को अल्ट्रासोनिकेशन का उपयोग करके छोटे, और सजातीय कणों तक कम किया जा सकता है।” (Sarker et al., 2019)
प्लास्मिड वैक्टर के उपयोग के लिए एक प्रमुख उदाहरण CRISPR-Cas9 है। CRISPR-Cas9 प्रणाली को आमतौर पर कोशिकाओं को एक बड़े प्लास्मिड या कई छोटे प्लास्मिड के रूप में वितरित किया जाता है जो एक लक्ष्य अनुक्रम, एक CRISPR गाइड और Cas9 को एन्कोड करते हैं।
नैनोप्रिसिपिटेशन द्वारा डीएनए-लोडेड पीएलजीए नैनोकणों की अल्ट्रासोनिक तैयारी
जो एट अल(2020) ने प्राथमिक अस्थि मज्जा व्युत्पन्न मैक्रोफेज में एक मॉडल CRISPR-Cas9 प्लास्मिड के वितरण के लिए एक नैनोपार्टिकल वाहक बनाने के लिए पॉली (लैक्टिक-को-ग्लाइकोलिक एसिड) (पीएलजीए) का उपयोग किया। पीएलजीए नैनोकणों के नैनोप्रिसिपिटेशन के लिए, दो अलग-अलग अंत समूहों (एस्टर और अमाइन समूहों) के साथ पीएलजीए का उपयोग इस उद्देश्य के साथ किया गया था कि सकारात्मक रूप से चार्ज किए गए अमाइन एंड कैप्स एनकैप्सुलेशन दक्षता में वृद्धि करते हैं और डीएनए के नकारात्मक रूप से चार्ज बैकबोन के बीच चार्ज इंटरैक्शन के कारण लोड होते हैं। एक 50 मिलीलीटर polypropylene शंक्वाकार सेंट्रीफ्यूज ट्यूब में, 100 मिलीग्राम Pluronic F127 भंवर मिश्रण द्वारा 20 मिलीलीटर autoclaved DI पानी में भंग कर दिया गया था एक अल्ट्रासोनिक स्नान का उपयोग कर कोमल sonication के 30 मिनट के बाद (CupHorn देखें). एक ऑटोक्लेव्ड चुंबकीय सरगर्मी बार जोड़ा गया था और समाधान को 30 मिनट के लिए 600 आरपीएम पर मिलाया गया था, जबकि अन्य समाधान किए गए थे। डीएनए के गैर-विशिष्ट सोखने को कम करने के लिए ग्लासवेयर के बजाय प्लास्टिक लैबवेयर का उपयोग किया गया था। डीएमएफ (44.48 मिलीग्राम / एमएल) में भंग पीएलजीए के समाधान और टीएचएफ (0.667 मिलीग्राम / एमएल) में भंग किए गए टिप्स पेंटासीन को अलग से बनाया गया था। पीएलजीए को 30 मिनट के लिए सोनिकेट होने से पहले 30 मिनट के लिए डीएमएफ में गीला करने के लिए छोड़ दिया गया था (पूर्ण प्रोटोकॉल के लिए जो एट अल।
- DNA का निष्कर्षण
- DNA का Encapsulation
- Nanoparticle-लेपित डीएनए का फैलाव
- कोशिकाओं में प्लास्मिड डीएनए का वितरण
UP200St CupHorn नमूनों के अप्रत्यक्ष sonication के लिए, उदाहरण के लिए डीएनए निष्कर्षण और विखंडन के लिए।
Sonication के दौरान प्लास्मिड डीएनए संरक्षण
प्लास्मिड और सुपरकोइल्ड प्लास्मिड सहित डीएनए अत्यधिक संवेदनशील गिरावट हैं। उपलब्ध सभी विखंडन विधियों को कुछ नुकसानों के लिए जाना जाता है। अल्ट्रासोनिक डीएनए विखंडन सुरक्षात्मक उपायों के साथ संयोजन में नियंत्रित sonication के बाद से पसंदीदा तरीकों में से एक है कतरनी को कम करने के लिए अनुमति देता है- और गर्मी प्रेरित डीएनए किस्में के नुकसान.
अल्ट्रासोनिक डीएनए कर्तन के दौरान कम आयाम सेटिंग्स, स्पंदन मोड और तापमान नियंत्रण के अलावा, कुछ एजेंटों के उपयोग ने डीएनए गिरावट के खिलाफ महत्वपूर्ण सुरक्षात्मक प्रभाव दिखाया। उदाहरण के लिए, विभिन्न पॉलिमर, पेप्टाइड्स और लिपिड अल्ट्रासोनिकेशन के दौरान प्लास्मिड डीएनए की रक्षा करते हैं।
प्लास्मिड डीएनए की स्थिरता, और अल्ट्रासोनिक कतरनी तनाव के खिलाफ प्लास्मिड डीएनए / आईएल नैनोकॉम्प्लेक्स की जांच एगारोज़ जेल वैद्युतकणसंचलन परख का उपयोग करके की गई थी। प्लास्मिड डीएनए और प्लास्मिड डीएनए / आईएल नैनोकॉम्प्लेक्स दोनों को अलग-अलग समय बिंदुओं के लिए अल्ट्रासोनिक कतरनी तनाव के अधीन किया गया था। प्लास्मिड डीएनए 0, 10, 20, 30, और 40 मिनट के लिए अल्ट्रासोनिक कतरनी तनाव के संपर्क में था। हालांकि, प्लास्मिड डीएनए / आईएल नैनोकॉम्प्लेक्स को 0, 10, 20, 30, 40, 60, 90 और 120 मिनट के लिए अल्ट्रासोनिक कतरनी तनाव के संपर्क में लाया गया था।
(अध्ययन और चित्र: ©Sarker et al., 2019)
Sarker et al. (2019) ने प्रदर्शित किया कि जब प्लास्मिड डीएनए / आयनिक तरल (pDNA / IL) nanostructures को 0, 10, 20, 30, 40, 60, 90, और 120 मिनट के लिए अल्ट्रासोनिक कतरनी तनाव के अधीन किया गया था और व्यावसायिक रूप से उपलब्ध कैटिओनिक जीन डिलीवरी एजेंट लिपोफेक्टामाइन के साथ जटिल था, तो फ्लोरोसेंट सकारात्मक कोशिकाओं का प्रतिशत 80%, 98%, 97%, 85%, 78%, 65%, 65%, 65% था। क्रमशः 65%, और 50%, (नीचे चार्ट देखें)। फ्लोरोसेंट सकारात्मक कोशिकाओं का प्रतिशत बढ़ गया जब nanostructures 10, और 20 मिनट के लिए अल्ट्रासोनिक कतरनी तनाव के अधीन थे, और उसके बाद धीरे-धीरे कम हो गया।
COS7 कोशिकाओं के लिए प्लास्मिड डीएनए के वितरण पर आयनिक तरल [Bmim][PF6] का प्रभाव। प्लास्मिड डीएनए / आईएल (आयनिक तरल) नैनोकॉम्प्लेक्स को 120 मिनट तक अल्ट्रासोनिक कतरनी तनाव के अधीन किया गया था और सीओएस 7 कोशिकाओं में वितरित करने से पहले एलए के साथ जटिल किया गया था। डेटा 10 अलग-अलग माइक्रोस्कोपिक क्षेत्रों में गिने जाने वाले जीएफपी पॉजिटिव हेला कोशिकाओं की औसत संख्या (%) को दर्शाता है और प्रयोग तीन अलग-अलग दिनों में कई बार किया गया था। (अध्ययन और चार्ट: ©Sarker et al., 2019)
प्लास्मिड डीएनए अल्ट्रासोनिक विखंडन से पहले एक एजेंट जोड़ने की रक्षा की जा सकती है: Sonication-नग्न pDNA (ए) और pDNA के प्रेरित गिरावट CaCl2 के 1.5 mM और 20% (v / v) t-butanol (बी) के साथ तैयार
नमूनों को 120 के दशक तक के लिए 20W जांच के साथ sonicated किया गया था, जैसा कि प्रत्येक लेन के शीर्ष पर इंगित किया गया था। लेन एच हाइपरलैडर I ™️ मार्कर से मेल खाती है। ओसी और एससी प्लास्मिड बैंड का संकेत दिया जाता है।
(अध्ययन और चित्र: ©वू एट अल. 2009)
अल्ट्रासोनिक Lysate तैयारी
अल्ट्रासोनिक सेल Lysis प्रोटोकॉल
कोशिकाओं के एक समृद्ध नमूने के साथ शुरू करें जो सेल पृथक्करण विधि के माध्यम से तैयार किया गया था (उदाहरण के लिए, इम्यूनोमैग्नेटिक सेल पृथक्करण, प्रतिदीप्ति-सक्रिय सेल सॉर्टिंग (एफएसीएस), घनत्व ग्रेडिएंट सेंट्रीफ्यूजेशन, इम्यूनोडेंसिटी सेल अलगाव)।
सेल नमूने प्रयोगात्मक लक्ष्य और जांच-प्रकार ultrasonicator के लिए उपयुक्त है जो एक lysis बफ़र की मात्रा दिखाना होगा।
Hypotonic buffers पसंद कर रहे हैं के रूप में वे अल्ट्रासोनिक सेल lysis बढ़ाने. यह महत्वपूर्ण है कि additives और नमक एकाग्रता एक उपयुक्त तरीके से उपयोग किया जाता है।
अपने अल्ट्रासोनिक लाइसिस डिवाइस का चयन करें: शीशियों के अप्रत्यक्ष sonication के लिए, VialTweeter या CupHorn की सिफारिश की जाती है। मल्टीवेल-प्लेटों के लिए, UIP400MTP आदर्श ultrasonicator है। और शास्त्रीय जांच प्रकार sonication, एक अल्ट्रासोनिक homogenizer UP100H या UP200Ht के रूप में एक माइक्रो टिप के साथ सबसे उपयुक्त हैं।
जांच-प्रकार sonication के लिए प्रोटोकॉल: एक microcentrifuge ट्यूब में नमूना मात्रा में ultrasonicator जांच जगह और लगभग 10 सेकंड के लिए sonicate. डीएनए नमूने के आधार पर, sonication एक या दो और बार दोहराया जा सकता है। आवश्यक अल्ट्रासोनिक ऊर्जा इनपुट (Ws / mL) नमूना चिपचिपाहट और डीएनए प्रकार पर निर्भर करता है। बर्फ स्नान और ultrasonicator के स्पंदन मोड के माध्यम से ठंडा करने के लिए यह रोकने में मदद करता है कि नमूना थर्मल रूप से अवक्रमित है।
अल्ट्रासोनिक लाइसिस के बाद, नमूना गोली मलबे को अलग करने के लिए सेंट्रीफ्यूज किया जाता है (जिसमें अप्रकाशित कोशिकाएं, नाभिक और अप्रकाशित ऑर्गेनेल होते हैं)
यदि नमूने को तुरंत आगे संसाधित नहीं किया जाता है, तो इसे इसकी व्यवहार्यता को संरक्षित करने के लिए उचित तापमान पर संग्रहीत किया जा सकता है।
Dna विखंडन के लिए Ultrasonicators
Hielscher Ultrasonics डीएनए, आरएनए, और क्रोमेटिन विखंडन के लिए विभिन्न अल्ट्रासाउंड आधारित प्लेटफार्मों प्रदान करता है। इन विभिन्न प्लेटफार्मों में अल्ट्रासोनिक प्रोब्स (सोनोटोड्स), कई ट्यूबों या मल्टी-वेल प्लेटों (जैसे, 96-वेल प्लेट्स, माइक्रोटिटर प्लेट्स), सोनोरिएक्टर और अल्ट्रासोनिक कपहॉर्न के एक साथ नमूना तैयार करने के लिए अप्रत्यक्ष सोनीशन समाधान शामिल हैं। डीएनए कतरनी के लिए सभी प्लेटफार्मों आवृत्ति देखते, उच्च प्रदर्शन अल्ट्रासोनिक प्रोसेसर, जो ठीक नियंत्रणीय है और प्रजनन योग्य परिणाम देने के द्वारा संचालित कर रहे हैं ।
किसी भी नमूना संख्या और आकार के लिए अल्ट्रासोनिक प्रोसेसर
Hielscher के बहु नमूना ultrasonicators VialTweeter (अप करने के लिए 10 टेस्ट ट्यूब के लिए) और UIP400MTP (माइक्रोप्लेट्स / अल्ट्रासोनिक डीएनए विखंडन प्लास्मिड तैयारी चरणों को कुशल, विश्वसनीय और स्केलेबल बनाता है। प्रोटोकॉल को लगातार अल्ट्रासाउंड मापदंडों को लागू करके एक से कई नमूनों तक रैखिक रूप से स्केल किया जा सकता है।
एक से पांच उंगलियों के साथ जांच अल्ट्रासोनिकेटर छोटे नमूना संख्या की तैयारी के लिए आदर्श हैं। हिल्सचर की प्रयोगशाला अल्ट्रासोनिकेटर विभिन्न शक्ति स्तरों के साथ उपलब्ध हैं ताकि आप अपने डीएनए से संबंधित एप्लिकेशन के लिए आदर्श अल्ट्रासोनिक विघटनकारी चुन सकें।
अल्ट्रासोनिक बहु नमूना तैयारी इकाई VialTweeter 10 शीशियों तक के एक साथ सोनीकेशन के लिए अनुमति देता है। क्लैंप-ऑन डिवाइस VialPress के साथ, तीव्र सोनीफिकेशन के लिए सामने 4 अतिरिक्त ट्यूबों को दबाया जा सकता है।
सटीक प्रक्रिया नियंत्रण
ठीक नियंत्रणीय सोनीशन सेटिंग्स महत्वपूर्ण हैं क्योंकि संपूर्ण सोनिफिकेशन डीएनए, आरएनए और क्रोमेटिन को नष्ट कर सकता है, लेकिन अपर्याप्त अल्ट्रासोनिक कतरनी परिणाम बहुत लंबे डीएनए और क्रोमेटिन टुकड़ों में होते हैं। Hielscher के डिजिटल अल्ट्रासोनिकेटर आसानी से सटीक सोनीशन पैरामीटर के लिए सेट किया जा सकता है । एक ही प्रक्रिया की तेजी से पुनरावृत्ति के लिए प्रोग्राम की गई सेटिंग के रूप में विशिष्ट सोनीशन सेटिंग्स को भी सहेजा जा सकता है।
सभी सोनीशन स्वचालित रूप से एक अंतर्निहित एसडी कार्ड पर सीएसवी फ़ाइल के रूप में स्वचालित रूप से प्रोटोकॉल और संग्रहीत होते हैं। यह प्रदर्शन किए गए परीक्षणों के सटीक दस्तावेज के लिए अनुमति देता है और सोनीशन को आसानी से संशोधित करना संभव बनाता है।
ब्राउज़र रिमोट कंट्रोल के माध्यम से, सभी डिजिटल अल्ट्रासोनिकेटर को किसी भी मानक ब्राउज़र के माध्यम से संचालित और निगरानी की जा सकती है। अतिरिक्त सॉफ्टवेयर की स्थापना की आवश्यकता नहीं है, क्योंकि लैन कनेक्शन एक बहुत ही सरल प्लग-एन-प्ले सेटअप है।
अल्ट्रासोनिक डीएनए तैयारी के दौरान उच्चतम उपयोगकर्ता-मित्रता
सभी Hielscher अल्ट्रासोनिकेटर उच्च प्रदर्शन अल्ट्रासाउंड देने के लिए डिज़ाइन किए गए हैं, जबकि एक ही समय में हमेशा बहुत उपयोगकर्ता के अनुकूल और आसानी से संचालित किया जा रहा है। सभी सेटिंग्स एक स्पष्ट मेनू में अच्छी तरह से संरचित हैं, जिन्हें रंगीन टच-डिस्प्ले या ब्राउज़र रिमोट कंट्रोल के माध्यम से आसानी से एक्सेस किया जा सकता है। प्रोग्राम करने योग्य सेटिंग्स और स्वचालित डेटा रिकॉर्डिंग के साथ स्मार्ट सॉफ्टवेयर विश्वसनीय और प्रजनन योग्य परिणामों के लिए इष्टतम सोनीशन सेटिंग्स सुनिश्चित करता है। स्वच्छ और उपयोग में आसान मेनू इंटरफ़ेस हाइल्चर अल्ट्रासोनिकेटर को उपयोगकर्ता के अनुकूल और कुशल उपकरणों में बदल देता है।
नीचे दी गई तालिका आपको सेल लाइसिस और डीएनए विखंडन के लिए हमारे प्रयोगशाला ultrasonicators की अनुमानित प्रसंस्करण क्षमता का संकेत देती है:
| बैच वॉल्यूम | प्रवाह की दर | अनुशंसित उपकरणों |
|---|---|---|
| बहु कूप प्लेटें | n/a | यूआईपी400एमटीपी |
| शीशियों, छोटे बीकर | n/a | अल्ट्रासोनिक cuphorn |
| 10 शीशियों तक | n/a | VialTweeter |
| 1 से 500 एमएल | 10 से 200 मील / मिनट | UP100H |
| 10 से 2000 मील | 20 से 400 एमएल / मिनट | UP200Ht, UP400St |
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साहित्य/संदर्भ
- Mark D. Thompson, Kelly G. Aukema, Dana M. O’Bryan, Stephen D. Rader, Brent W. Murray (2008): Plasmid sonication improves sequencing efficiency and quality in the Beckman Coulter CEQ system. BioTechniques 2008, 45:3, 327-329
- Fykse, Else; Olsen, Jaran; Skogan, Gunnar (2003): Application of sonication to release DNA from Bacillus cereus for quantitative detection by real-time PCR. Journal of microbiological methods 55, 2003. 1-10.
- Ming L. Wu; Sindélia S. Freitas; Gabriel A. Monteiro; Duarte M. F. Prazeres; José A. L. Santos (2009). Stabilization of naked and condensed plasmid DNA against degradation induced by ultrasounds and high-shear vortices. Biotechnology Applied Biochemistry 53(4), 2009.
- Sarker, Satya Ranjan; Ball, Andrew S.; Bhargava, Suresh Kumar; Soni., Sarvesh K. (2019): Evaluation of plasmid DNA stability against ultrasonic shear stress and its in vitro delivery efficiency using ionic liquid [Bmim][PF6]. RSC Advances 9, 2019. 29225-29231.
- Miguel Larguinho, Hugo M. Santos, Gonçalo Doria, H. Scholz, Pedro V. Baptista, José L. Capelo (2010): Development of a fast and efficient ultrasonic-based strategy for DNA fragmentation. Talanta, Volume 81, Issue 3, 2010. 881-886.
- Julie Ann Wyber; Julie Andrews; Antony D’Emanuele (1997): The Use of Sonication for the Efficient Delivery of Plasmid DNA into Cells. Pharmaceutical Research 14(6), 1997. 750–756.
जानने के योग्य तथ्य
Plasmids क्या हैं?
एक प्लास्मिड एक छोटा परिपत्र डीएनए अणु है जो शारीरिक रूप से क्रोमोसोमल डीएनए से अलग होता है और स्वतंत्र रूप से दोहराता है। प्लास्मिड अक्सर जीन से जुड़े होते हैं जो एक जीव के अस्तित्व में योगदान करते हैं और विशिष्ट लाभ प्रदान करते हैं, जैसे एंटीबायोटिक प्रतिरोध। प्लास्मिड आमतौर पर बैक्टीरिया में छोटे परिपत्र, डबल-फंसे डीएनए अणुओं के रूप में पाए जाते हैं; हालांकि, प्लास्मिड कभी-कभी आर्किया और यूकेरियोटिक जीवों में मौजूद होते हैं। प्लास्मिड आणविक जीव विज्ञान, आनुवंशिकी, जैव रसायन और जीवन विज्ञान में महत्वपूर्ण उपकरण हैं। जेनेटिक इंजीनियरिंग में वैक्टर के रूप में जाना जाता है, प्लास्मिड का उपयोग कुछ जीनों को दोहराने या व्यक्त करने के लिए किया जाता है। वेक्टर के लक्षित परिवर्तन को वेक्टर डिजाइन कहा जाता है।
सेल अनुसंधान में GFP विश्लेषण
ग्रीन फ्लोरोसेंट प्रोटीन (जीएफपी) शारीरिक प्रक्रियाओं की निगरानी, प्रोटीन स्थानीयकरण की कल्पना करने और विवो में ट्रांसजेनिक अभिव्यक्ति का पता लगाने के लिए एक बहुमुखी जैविक मार्कर है। जीएफपी को 488 एनएम लेजर लाइन द्वारा उत्साहित किया जा सकता है और 510 एनएम पर बेहतर ढंग से पता लगाया जाता है।
हिल्स्चर अल्ट्रासोनिक्स उच्च प्रदर्शन अल्ट्रासोनिक होमोजेनाइजर्स से बनाती है प्रयोगशाला सेवा मेरे औद्योगिक आकार।