અલ્ટ્રાસોનિકેશન દ્વારા બીએલ 21 કોષોનું સેલ લિસીસ

બીએલ 21 કોષો ઇ કોલીનો તાણ છે જેનો ઉપયોગ સંશોધન પ્રયોગશાળાઓ, બાયોટેકનોલોજી અને industrialદ્યોગિક ઉત્પાદનમાં પ્રોટીનને અત્યંત કાર્યક્ષમ રીતે વ્યક્ત કરવાની ક્ષમતાને કારણે થાય છે. અલ્ટ્રાસોનિક કોષ વિક્ષેપ, લિસીસ અને પ્રોટીન નિષ્કર્ષણ એ બીએલ 21 કોષોના સેલ્યુલર આંતરિકથી લક્ષિત પ્રોટીનને અલગ કરવા અને એકત્રિત કરવાની સામાન્ય પદ્ધતિ છે. અલ્ટ્રાસોનિકેશન સેલને સંપૂર્ણ વિક્ષેપિત કરે છે અને 100% પ્રોટીનને ઉપલબ્ધ બનાવે છે, બધા જ ફસાયેલા પ્રોટીનને મુક્ત કરે છે.

પ્રોટીન અભિવ્યક્તિ માટે બીએલ 21 કોષો

બીએલ 21 સેલ એ રાસાયણિક રીતે સક્ષમ ઇ. કોલી બેક્ટેરિયલ સ્ટ્રેન છે જે T7 RNA પોલિમરેઝ-આઇપીટીજી ઇન્ડક્શન સિસ્ટમનો ઉપયોગ કરીને રૂપાંતર અને ઉચ્ચ સ્તરની પ્રોટીન અભિવ્યક્તિ માટે યોગ્ય છે. બીએલ 21 કોષો કોઈપણ જીનનું ઉચ્ચ કાર્યક્ષમતા પ્રોટીન અભિવ્યક્તિને મંજૂરી આપે છે જે ટી 7 પ્રમોટર્સના નિયંત્રણ હેઠળ છે. ઇ કોલી સ્ટ્રેઇન બીએલ 21 (ડીઇ 3) એ ટી 7 આરએનએ પોલિમરેઝ આધારિત પ્રોટીન ઉત્પાદન સ્ટ્રેઇન છે જે ટી 7 પ્રમોટર-આધારિત અભિવ્યક્તિ વેક્ટર સાથે જોડાયેલી છે અને પ્રયોગશાળાઓ અને ઉદ્યોગમાં પુન recપ્રાપ્ત પ્રોટીન ઉત્પન્ન કરવા માટે વ્યાપકપણે લાગુ પડે છે. બીએલ 21 (ડીઇ 3) માં, રિકોમ્બિનન્ટ પ્રોટીનને એન્કોડિંગ કરેલા જનીનની અભિવ્યક્તિ ક્રોમોઝોમલી એન્કોડેડ ટી 7 આરએનએ પોલિમરેઝ (ટી 7 આરએનએપી) દ્વારા ટ્રાંસ્ક્રિપ્ટ કરવામાં આવે છે, જે પરંપરાગત ઇ. કોલી આરએનએપી કરતા આઠ ગણી ઝડપથી ટ્રાંસ્ક્રિપ્શન કરે છે. આ તાણ બીએલ 21 (ડીઇ 3) ને ખૂબ કાર્યક્ષમ બનાવે છે અને તેને સૌથી વધુ પસંદ કરેલી પ્રોટીન અભિવ્યક્તિ સેલ સિસ્ટમમાં ફેરવે છે.

બીએલ 21 કોષોમાંથી અલ્ટ્રાસોનિક લિસીસ અને પ્રોટીન નિષ્કર્ષણ માટેનો પ્રોટોકોલ

બીએલ 21 કોષોનું સેલ લિસીસ મોટાભાગે સોડિયમ લૌરોઇલ સરકોસિનેટ (જેને સરકોસીલ તરીકે પણ ઓળખાય છે) ને લિસીસ બફર તરીકે સંયોજનમાં અલ્ટ્રાસોનિકેશનનો ઉપયોગ કરીને કરવામાં આવે છે. અલ્ટ્રાસોનિક સેલ વિક્ષેપ અને પ્રોટીન નિષ્કર્ષણના ફાયદા વિશ્વસનીયતા, પ્રજનનક્ષમતા તેમજ અલ્ટ્રાસોનિસેટર્સની સરળ, સલામત અને ઝડપી કામગીરીમાં રહે છે. નીચેનો પ્રોટોકોલ અલ્ટ્રાસોનિક બીએલ 21 સેલ લિસીસ માટે એક પગલું-દર-દિશા દિશા આપે છે:

• ચેપરોન પ્રોટીનને દૂર કરવા માટે, બીએલ 21 બેક્ટેરિયલ ગોળીઓ બરફ કોલ્ડ સોડિયમ ટ્રિસ-ઇડીટીએ (એસટીઇ) બફર (10 એમએમ ટ્રિસ-એચસીએલ, પીએચ 8.0, 1 એમએમ ઇડીટીએ, 150 એમએમ એનસીએલ સાથે 100 એમએમ પૂરક) માં 50 મીલીલીટરમાં ફરી શરૂ કરાઈ હતી. પીએમએસએફ).
• , લિસોઝાઇમનો 500 ઉલ (10 મિલિગ્રામ / મિલી) ઉમેરવામાં આવે છે અને કોષો બરફ પર 15 મિનિટ માટે સેવામાં આવે છે.
• પછીથી, ડીટીટીનો 500 ઉલ અને સરકોસીલનો 7 મિલી (એસટીઇ બફરમાં બનેલો 10% (ડબલ્યુ / વી)) ઉમેરવામાં આવે છે.
• તમામ શુદ્ધિકરણ બફર્સને બરફ-ઠંડુ રાખવા અને બરફ પરના નમૂનાઓનો બધો સમય જાળવવા જરૂરી છે. શક્ય હોય તો બધા શુદ્ધિકરણ પગલાં ઠંડા રૂમમાં હાથ ધરવા જોઈએ.



• અલ્ટ્રાસોનિક લિસીસ અને પ્રોટીન નિષ્કર્ષણ માટે, નમૂનાઓ સોનાઇટેડ છે VialTweeter મલ્ટિસ્મ્પલ અલ્ટ્રાસોનિસેટર 4 સો 30 સેકંડ માટે 100% કંપનવિસ્તાર સાથે દરેક સોનિકેશન વચ્ચે 2 મિનિટના અંતરાલ સાથે. વૈકલ્પિક રીતે, માઇક્રો-ટીપવાળા પ્રોબ-ટાઇપ અલ્ટ્રાસોનિક હોમોજેનાઇઝર, Uf200 ः ટી એસ 26 ડી 2 (3 x 30 સેકંડ, 2 મિનિટ. અલ્ટ્રાસોનિક ચક્ર વચ્ચે થોભો, 80% કંપનવિસ્તાર) નો ઉપયોગ કરી શકાય છે.
• શુદ્ધિકરણના વધુ પગલાઓ માટે, આગળની પ્રક્રિયા થાય ત્યાં સુધી નમૂનાઓ બરફ પર રાખવા જોઈએ અથવા વૈકલ્પિક રૂપે -80 ° સે.

પ્રેસસાઇઝ તાપમાન નિયંત્રણ હેઠળ અલ્ટ્રાસોનિક લિસીસ

જૈવિક નમૂનાઓનું સંચાલન કરતી વખતે ચોક્કસ અને વિશ્વસનીય તાપમાન નિયંત્રણ નિર્ણાયક છે. ઉચ્ચ તાપમાન નમૂનાઓમાં થર્મલ પ્રેરિત પ્રોટીન અધોગતિ શરૂ કરે છે.
તમામ યાંત્રિક નમૂનાની તૈયારીની તકનીકીઓ તરીકે, સોનિકેશન ગરમીનું નિર્માણ કરે છે. જો કે, VialTweeter નો ઉપયોગ કરતી વખતે નમૂનાઓનું તાપમાન સારી રીતે નિયંત્રિત કરી શકાય છે. વિશ્લેષણ માટે વાયલવીટર અને વાયલપ્રેસ સાથે તૈયાર કરતી વખતે અમે તમને તમારા નમૂનાઓના તાપમાનને મોનિટર કરવા અને તેના નિયંત્રણ માટે વિવિધ વિકલ્પો રજૂ કરીએ છીએ.

1. નમૂનાના તાપમાનનું નિરીક્ષણ કરવું: અલ્ટ્રાસોનિક પ્રોસેસર યુપી 200 એસટી, જે વાયલટવીટર ચલાવે છે, એક બુદ્ધિશાળી સ softwareફ્ટવેર અને પ્લગિબલ તાપમાન સેન્સરથી સજ્જ છે. તાપમાન સેન્સરને UP200St માં પ્લગ કરો અને નમૂના ટ્યુબમાંથી એકમાં તાપમાન સેન્સરની મદદ દાખલ કરો. ડિજિટલ રંગીન ટચ-ડિસ્પ્લે દ્વારા, તમે UP200St ના મેનૂમાં તમારા નમૂના નમૂના માટે ચોક્કસ તાપમાન શ્રેણી સેટ કરી શકો છો. મહત્તમ તાપમાન પહોંચે ત્યારે અલ્ટ્રાસોનાઇટર આપમેળે બંધ થઈ જાય છે અને સેમ્પલ તાપમાન સેટ તાપમાનના નીચા મૂલ્ય સુધી નીચે ન આવે ત્યાં સુધી થોભો. પછી સોનીકેશન ફરીથી આપમેળે શરૂ થાય છે. આ સ્માર્ટ સુવિધા ગરમી-પ્રેરિત અધોગતિને અટકાવે છે.
2. VialTweeter બ્લોક પૂર્વ-ઠંડુ કરી શકાય છે. ટાઇટેનિયમ બ્લોકને પૂર્વ-ઠંડુ કરવા માટે, વાયલટવીટર બ્લોક (ટ્રાન્સડ્યુસર વિના ફક્ત સોનોટ્રોડ!) ફ્રિજમાં અથવા ફ્રીઝરમાં મૂકો, નમૂનામાં તાપમાનમાં વધારો મુલતવી રાખવામાં મદદ કરે છે. જો શક્ય હોય તો, નમૂના પોતે પણ પૂર્વ-ઠંડુ થઈ શકે છે.
3. સોનિફિકેશન દરમિયાન ઠંડુ કરવા માટે સૂકા બરફનો ઉપયોગ કરો. શુષ્ક બરફથી ભરેલી છીછરા ટ્રેનો ઉપયોગ કરો અને બરફ પર વાયલટવીટર મૂકો જેથી ગરમી ઝડપથી ઓગળી શકે.

જૈવિક, બાયોકેમિકલ, તબીબી અને ક્લિનિકલ પ્રયોગશાળાઓમાં તેમના દૈનિક નમૂનાની તૈયારી કાર્ય માટે વિશ્વભરમાં ગ્રાહકો વાયલટવીટર અને વાયલપ્રેસનો ઉપયોગ કરે છે. યુપી 200 એસટી પ્રોસેસરનું બુદ્ધિશાળી સ softwareફ્ટવેર અને તાપમાન નિયંત્રણ, તાપમાન વિશ્વસનીય રીતે નિયંત્રિત થાય છે અને ગરમી-પ્રેરિત નમૂનાના અધોગતિને ટાળી શકાય છે. VialTweeter અને VialPress સાથે અલ્ટ્રાસોનિક નમૂનાની તૈયારી ખૂબ વિશ્વસનીય અને પ્રજનનક્ષમ પરિણામો પહોંચાડે છે!

તમારી લિસીસ એપ્લિકેશન માટે શ્રેષ્ઠ અલ્ટ્રાસોનિક ડિસપ્ટર શોધો

હિલ્સચર અલ્ટ્રાસોનિક્સ પ્રયોગશાળાઓ, બેંચ-ટોપ અને industrialદ્યોગિક સ્કેલ સિસ્ટમો માટે ઉચ્ચ-પ્રદર્શન અલ્ટ્રાસોનિક સેલ ડિસપ્ટર્સ અને હોમોજેનાઇઝર્સના લાંબા સમયનો અનુભવી ઉત્પાદક છે. તમારી બેક્ટેરિયલ સેલ સંસ્કૃતિનું કદ, તમારું સંશોધન અથવા ઉત્પાદન લક્ષ્ય અને કલાક દીઠ અથવા દિવસ દીઠ પ્રક્રિયા કરવા માટેના કોષની માત્રા તમારી એપ્લિકેશન માટે યોગ્ય અલ્ટ્રાસોનિક સેલ ડિસપ્ટર શોધવા માટે આવશ્યક પરિબળો છે.
હિલ્સચર અલ્ટ્રાસોનિક્સ મલ્ટિ-સેમ્પલ્સ (વાયલવીટર સાથે 10 શીશીઓ સુધી) અને સામૂહિક નમૂનાઓ (એટલે કે, માઇક્રોટિટર પ્લેટો / ઇલિસા પ્લેટો, યુઆઈપી 400 એમટીપી સાથે), સાથે સાથે ક્લાસિક પ્રોબ-ટાઇપ લેબ અલ્ટ્રાસોનાઇટર માટે વિવિધ સોલ્યુશન્સ વિવિધ સોલ્યુશન્સ પ્રદાન કરે છે. મોટા ઉત્પાદનમાં વ્યાપારી કોષ વિક્ષેપ અને પ્રોટીન નિષ્કર્ષણ માટે પ્રતિ યુનિટ દીઠ 16,000 વોટસ સાથે સંપૂર્ણપણે industrialદ્યોગિક અલ્ટ્રાસોનિક પ્રોસેસરો સુધી 50 થી 400 વોટથી પાવર સ્તર. બધા હિલ્સચર અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સ સંપૂર્ણ લોડ હેઠળ 24/7/365 ઓપરેશન માટે બનાવવામાં આવ્યા છે. મજબૂતાઈ અને વિશ્વસનીયતા એ આપણા અવાજ ઉપકરણોની મુખ્ય સુવિધાઓ છે.
બધા ડિજિટલ અલ્ટ્રાસોનિક હોમોજેનાઇઝર્સ સ્માર્ટ સ softwareફ્ટવેર, રંગીન ટચ ડિસ્પ્લે અને સ્વચાલિત ડેટા પ્રોટોકોલિંગથી સજ્જ છે, જે અલ્ટ્રાસોનિક ડિવાઇસને લેબ અને ઉત્પાદન સુવિધાઓમાં અનુકૂળ વર્ક ટૂલમાં બનાવે છે.
અમને જણાવો કે, કયા પ્રકારનાં કોષો, કયા વોલ્યુમ, કયા આવર્તન સાથે અને કયા લક્ષ્ય સાથે તમારે તમારા જૈવિક નમૂનાઓ પર પ્રક્રિયા કરવાની છે. તમારી પ્રક્રિયાની આવશ્યકતાઓ માટે અમે તમને સૌથી યોગ્ય અવાજ સેલ ડિસપ્ટરની ભલામણ કરીશું.

નીચે આપેલ કોષ્ટક તમને કોમ્પેક્ટ હાથથી પકડેલા હોમોજેનાઇઝર્સ અને મલ્ટિસ્મ્પલ અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સથી લઈને વેપારી કાર્યક્રમો માટે industrialદ્યોગિક અલ્ટ્રાસોનિક પ્રોસેસર્સ સુધીની અમારા અલ્ટ્રાસોનિક સિસ્ટમોની અંદાજિત પ્રક્રિયા ક્ષમતાનો સંકેત આપે છે: