અલ્ટ્રાસોનિકેશનથી તૈયાર કરેલાં બફર દ્રાવણો
અલ્ટ્રાસોનિક ટિશ્યુ હોમોજેનાઇઝરનો ઉપયોગ કરીને લાઇસિસ બફર કાર્યક્ષમ રીતે અને ઝડપથી તૈયાર કરી શકાય છે. અલ્ટ્રાસોનિકેટર મિશ્રણ, ઓગાળવા અને વિખેરવા માટે આદર્શ સાધન હોવાથી, તે લાઇસિસ બફરને વિશ્વસનીય અને વપરાશકર્તા માટે સરળ રીતે તૈયાર કરવાની સુવિધા આપે છે.
લાઇસિસ બફરની અલ્ટ્રાસોનિક તૈયારી
અલ્ટ્રાસોનિક ટિશ્યુ હોમોજેનાઇઝર કોષ વિઘટન, લાઇસિસ અને નિષ્કર્ષણ માટેનું સામાન્ય સાધન છે, તેથી તે મોટાભાગની પ્રયોગશાળાઓમાં ઉપલબ્ધ હોય છે. પ્રોબ પ્રકારના અલ્ટ્રાસોનિકેટરનો એક ગૌણ ઉપયોગ લાઇસિસ બફર તૈયાર કરવાનો છે.
લાઇસિસ બફર એ કોષોને તોડી ખોલવા (લાઇસિસ કરવા) અને અનુવર્તી વિશ્લેષણ માટે તેમની અંદરની સામગ્રી મુક્ત કરવા માટે વપરાતું દ્રાવણ છે. લાઇસિસ કરવામાં આવતા કોષોના પ્રકાર અને અનુવર્તી ઉપયોગના આધારે લાઇસિસ બફરની ચોક્કસ સંરચના બદલાઈ શકે છે. જોકે, સામાન્ય લાઇસિસ બફરમાં ડિટર્જન્ટ, ક્ષાર અને પ્રોટીએઝ અવરોધકો જેવા ઘટકો હોય છે. લાઇસેટના pH અને ઓસ્મોલારિટીને નિયંત્રિત કરવા માટે સામાન્ય રીતે બફરિંગ ક્ષાર (દા.ત. Tris-HCl) અને આયનિક ક્ષાર (દા.ત. NaCl) વપરાય છે.
લાઇસિસ બફર બનાવવા માટે ઘટકોને યોગ્ય સાંદ્રતાઓ અને pH પર એકસાથે મિશ્રિત કરવામાં આવે છે. ઘટકો ઓગળી જાય અને દ્રાવણ સમાન બને ત્યાં સુધી મિશ્રણને સામાન્ય રીતે હલાવવામાં અથવા ઝંઝોડવામાં આવે છે.
અલ્ટ્રાસોનિક સમાનાંગીકરણ એ એવી પદ્ધતિ છે, જે ઘટકોના મિશ્રણ અને દ્રાવણમાં ઓગળવાની પ્રક્રિયાને સુધારીને સારું લાઇસિસ બફર બનાવવામાં મદદરૂપ થઈ શકે છે. આ પદ્ધતિમાં મિશ્રણ પર અલ્ટ્રાસાઉન્ડ તરંગો – સામાન્ય રીતે 20 થી 30 kHzની શ્રેણીમાં – લાગુ કરવામાં આવે છે, જેનાથી કેવિટેશનના પરપોટા બને છે. આ પરપોટા તૂટી પડતાં તીવ્ર સ્થાનિક ઊર્જા ઉત્પન્ન કરે છે, જેના પરિણામે યાંત્રિક શિયર અને ઘટકોનું મિશ્રણ થાય છે.
અલ્ટ્રાસોનિક સમાનાંગીકરણની પ્રક્રિયા ઘટકોની કોઈપણ ગાંઠો અથવા સમૂહોને તોડવામાં અને દ્રાવણ એકસરખું મિશ્રિત થાય તેની ખાતરી કરવામાં મદદ કરી શકે છે. પરિણામે, આ રીતે સુધારેલું લાઇસિસ બફર વધુ કાર્યક્ષમ કોષ વિઘટન અને નિષ્કર્ષિત પદાર્થની વધુ ઉપજ આપી શકે છે. વધુમાં, પરંપરાગત રીતે હલાવવાની અથવા ઝંઝોડવાની પદ્ધતિઓની સરખામણીમાં અલ્ટ્રાસોનિક સમાનાંગીકરણ લાઇસિસ બફર બનાવવા માટે જરૂરી સમય ઘટાડી શકે છે.
એકંદરે, અલ્ટ્રાસોનિક સમાનાંગીકરણ લાઇસિસ બફરની તૈયારીની ગુણવત્તા અને કાર્યક્ષમતા સુધારવા માટેનું શક્તિશાળી સાધન છે.
અલ્ટ્રાસોનિક લેબ હોમોજેનાઇઝર UP200Ht સંશોધન પ્રયોગશાળાઓમાં નમૂનાની તૈયારી, લાઇસિસ, નિષ્કર્ષણ, DNA ખંડન અને ઓગાળવા માટે લોકપ્રિય છે.
અલ્ટ્રાસોનિક પદ્ધતિથી લાઇસિસ બફર તૈયાર કરવા માટેની કાર્યવિધિ
પ્રોબ પ્રકારના અલ્ટ્રાસોનિકેટરનો ઉપયોગ કરીને લાઇસિસ બફર બનાવવા માટેની આ સામાન્ય કાર્યવિધિ છે:
સામગ્રી:
- પસંદગીનું ડિટર્જન્ટ અથવા ડિટર્જન્ટો (દા.ત. Triton X-100, SDS, CHAPS)
- પસંદગીનો ક્ષાર અથવા ક્ષારો (દા.ત. NaCl, KCl)
- પ્રોટીએઝ અવરોધકો (દા.ત. PMSF, એપ્રોટિનિન, લ્યુપેપ્ટિન)
- અલ્ટ્રાસોનિકેટર
- સ્ટિરર
- વિઆયનીકૃત પાણી
- pH મીટર અથવા pH પટ્ટીઓ
પગલુંવાર સૂચનાઓ:
- તમે જે કોષો અથવા પેશીનું લાઇસિસ કરવાના હો અને જે અનુવર્તી ઉપયોગો માટે લાઇસેટ વાપરવાના હો તેના આધારે લાઇસિસ બફરની સંરચના નક્કી કરો. ઇચ્છિત સાંદ્રતાઓ પર ડિટર્જન્ટ, ક્ષાર અને પ્રોટીએઝ અવરોધકોનાં સ્ટોક દ્રાવણો તૈયાર કરો.
- ડિટર્જન્ટ, ક્ષાર અને પ્રોટીએઝ અવરોધકોનાં સ્ટોક દ્રાવણોને બીકર અથવા ફ્લાસ્કમાં ઉમેરો.
- બફરનું ઇચ્છિત કદ મેળવવા માટે વિઆયનીકૃત પાણી ઉમેરો.
- પૂર્વમિશ્રિત દ્રાવણ મેળવવા માટે સ્ટિરરનો ઉપયોગ કરીને ઘટકોને મિશ્રિત કરો.
- pH મીટર અથવા pH પટ્ટીઓનો ઉપયોગ કરીને બફરનો pH માપો અને જરૂર મુજબ ઓછી માત્રામાં અમ્લ અથવા ક્ષારક ઉમેરીને pH સમાયોજિત કરો.
- પૂર્વમિશ્રિત દ્રાવણનું સમાનાંગીકરણ કરવા માટે પ્રોબ પ્રકારના અલ્ટ્રાસોનિકેટરનો ઉપયોગ કરો, જેથી અત્યંત સમાનાંગી દ્રાવણ મળે. આ માટે દ્રાવણ સંપૂર્ણપણે મિશ્રિત થાય અને કોઈપણ ગાંઠો અથવા સમૂહો તૂટી જાય ત્યાં સુધી થોડી સેકન્ડ માટે દ્રાવણનું સોનિકેશન કરો. ઉપયોગમાં લેવાતા ચોક્કસ લાઇસિસ બફર અને અલ્ટ્રાસોનિકેટરના આધારે સોનિકેશનનો સમયગાળો અને શક્તિ શ્રેષ્ઠ બનાવી શકાય છે.
- અલ્ટ્રાસોનિકેશન પછી બફરનો pH ફરીથી માપો અને જરૂર મુજબ સમાયોજિત કરો.
- સોનિકેશન દરમિયાન બન્યો હોઈ શકે એવો કોઈપણ કચરો અથવા સમૂહો દૂર કરવા માટે બફરને 0.2 માઇક્રોનના ફિલ્ટરમાંથી ગાળો.
- લાઇસિસ બફર હવે ઉપયોગ માટે તૈયાર છે.
નોંધ: લાઇસિસ કરવામાં આવતા કોષો અથવા પેશી અને અનુવર્તી ઉપયોગોના આધારે લાઇસિસ બફરની ચોક્કસ સંરચના અને pH બદલાઈ શકે છે. ઉપરની કાર્યવિધિ સામાન્ય માર્ગદર્શિકા છે અને ચોક્કસ ઉપયોગો માટે તેને શ્રેષ્ઠ બનાવવાની જરૂર પડી શકે છે.
અલ્ટ્રાસોનિક હોમોજેનાઇઝરનો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે કોષ વિઘટન અને કોષાંતર્ગત અણુઓના નિષ્કર્ષણ માટે થાય છે. તેથી લાઇસિસના ઘણા ઉપયોગોમાં પ્રોબ પ્રકારના સોનિકેશનનો ઉપયોગ લાઇસિસ બફરની તૈયારી માટે તેમજ યાંત્રિક કોષ વિઘટન અને નિષ્કર્ષણ માટે પણ થાય છે.
આ બાબત અલ્ટ્રાસોનિક ટિશ્યુ હોમોજેનાઇઝરને પ્રયોગશાળાઓ માટે બહુહેતુક સાધન બનાવે છે અને સૂક્ષ્મજીવવિજ્ઞાન, જૈવપ્રૌદ્યોગિકી અને જીવનવિજ્ઞાનમાં અલ્ટ્રાસોનિકેટરના વ્યાપક ઉપયોગનું કારણ સમજાવે છે.
અલ્ટ્રાસોનિક લેબ હોમોજેનાઇઝર
Hielscher Ultrasonics વિવિધ શક્તિ રેટિંગ અને નમૂનાના કદ માટે અલ્ટ્રાસોનિક હોમોજેનાઇઝર અને પ્રોબ (સોનોટ્રોડ)નું ઉત્પાદન અને પુરવઠો કરે છે. આથી અમે તમને તમારી નમૂનાની તૈયારી માટે સૌથી યોગ્ય અલ્ટ્રાસોનિક વિઘટક આપી શકીએ છીએ. અમે સર્વોચ્ચ ગુણવત્તા, વપરાશમાં ઉત્કૃષ્ટ સુવિધા અને સોનિકેશનનાં વિશ્વસનીય પરિણામો પર ધ્યાન કેન્દ્રિત કરીએ છીએ. તમામ ડિજિટલ અલ્ટ્રાસોનિકેટરમાં સ્માર્ટ સોફ્ટવેર, સોનિકેશન કાર્યવિધિઓનું પ્રોગ્રામિંગ અને પૂર્વસેટિંગ, બ્રાઉઝર દ્વારા રિમોટ નિયંત્રણ, તાપમાન નિયંત્રણ, નમૂના માટે પ્રકાશની વ્યવસ્થા તેમજ અંદર સ્થાપિત SD-કાર્ડ પર સ્વચાલિત ડેટા નોંધણી જેવી સુવિધાઓ હોય છે.
ડિઝાઇન, ઉત્પાદન અને પરામર્શ – જર્મનીમાં નિર્મિત ગુણવત્તા
Hielscher અલ્ટ્રાસોનિકેટર તેમની સર્વોચ્ચ ગુણવત્તા અને ડિઝાઇનનાં ધોરણો માટે જાણીતા છે. મજબૂતાઈ અને સરળ સંચાલનને કારણે અમારા અલ્ટ્રાસોનિકેટરને ઔદ્યોગિક સુવિધાઓમાં સહજ રીતે સંકલિત કરી શકાય છે. Hielscher અલ્ટ્રાસોનિકેટર કઠોર પરિસ્થિતિઓ અને પડકારજનક વાતાવરણમાં સરળતાથી કાર્ય કરે છે.
Hielscher Ultrasonics એક ISO પ્રમાણિત કંપની છે અને અત્યાધુનિક ટેક્નોલોજી તથા વપરાશની સરળતા ધરાવતા ઉચ્ચ કાર્યક્ષમતાવાળા અલ્ટ્રાસોનિકેટર પર વિશેષ ભાર મૂકે છે. નિઃસંદેહ, Hielscher અલ્ટ્રાસોનિકેટર CE અનુરૂપ છે અને UL, CSA તથા RoHsની આવશ્યકતાઓ પૂર્ણ કરે છે.
નીચેનું કોષ્ટક અમારા વિવિધ લેબ અલ્ટ્રાસોનિકેટરની ઝાંખી આપે છે:
| UP200St પર VialTweeter | 200W | 26kHz | નાની વાયલ્સનું અલ્ટ્રાસોનિકેશન, દા.ત. Eppendorf 1.5mL |
| UP50H | 50W | 30kHz | હાથમાં પકડી શકાય તેવું અથવા સ્ટેન્ડ પર સ્થાપિત લેબ હોમોજેનાઇઝર |
| UP100H | 100W | 30kHz | હાથમાં પકડી શકાય તેવું અથવા સ્ટેન્ડ પર સ્થાપિત લેબ હોમોજેનાઇઝર |
| UP200Ht | 200W | 26kHz | હાથમાં પકડી શકાય તેવું અથવા સ્ટેન્ડ પર સ્થાપિત લેબ હોમોજેનાઇઝર |
| UP200St | 200W | 26kHz | સ્ટેન્ડ પર સ્થાપિત લેબ હોમોજેનાઇઝર |
| UP400St | 400W | 24kHz | સ્ટેન્ડ પર સ્થાપિત લેબ હોમોજેનાઇઝર |
| SonoStep | 200W | 26kHz | અલ્ટ્રાસોનિકેશન, પંપ, સ્ટિરર અને પાત્રને સંયોજિત કરતું લેબ રિએક્ટર |
| GDmini2 | 200W | 26kHz | દૂષણમુક્ત ફ્લો સેલ |
| CupHorn | 200W | 26kHz | વાયલ્સ અને બીકર માટે તીવ્ર અલ્ટ્રાસોનિક બાથ |
| UIP400MTP | 400W | 24kHz | મલ્ટિ-વેલ પ્લેટ / માઇક્રોટાઇટર પ્લેટ માટે અલ્ટ્રાસોનિક સિસ્ટમ |
અલ્ટ્રાસોનિક કપહોર્ન નમૂનાઓના જંતુરહિત સમાનાંગીકરણ માટે બંધ ટ્યુબ અને વાયલ્સનું તીવ્ર સોનિકેશન કરવા માટે વપરાય છે.
અમારો સંપર્ક કરો! / અમને પૂછો!
અલ્ટ્રાસોનિક લેબ હોમોજેનાઇઝર UP400St સામાન્ય રીતે લાઇસિસ બફરની તૈયારી અને ત્યારબાદના કોષ વિઘટન માટે વપરાય છે.
સાહિત્ય / સંદર્ભો
- Fernandes, Luz; Santos, Hugo; Nunes-Miranda, J.; Lodeiro, Carlos; Capelo, Jose (2011): Ultrasonic Enhanced Applications in Proteomics Workflows: single probe versus multiprobe. Journal of Integrated OMICS 1, 2011.
- Priego-Capote, Feliciano; Castro, María (2004): Analytical uses of ultrasound – I. Sample preparation. TrAC Trends in Analytical Chemistry 23, 2004. 644-653.
- Welna, Maja; Szymczycha-Madeja, Anna; Pohl, Pawel (2011): Quality of the Trace Element Analysis: Sample Preparation Steps. In: Wide Spectra of Quality Control; InTechOpen 2011.
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.
Hielscher Ultrasonics ઉચ્ચ કાર્યક્ષમતાવાળા અલ્ટ્રાસોનિક હોમોજેનાઇઝરનું પ્રયોગશાળાના કદથી લઈને ઔદ્યોગિક કદ સુધી ઉત્પાદન કરે છે.