અલ્ટ્રાસોનિક વાયલટવીટર સાથે નમૂનાની તૈયારી

અલ્ટ્રાસોનિક નમૂના તૈયારી

Ultrasonication is a common technique of sample treatment in order to get the sample ready for analyses such as polymers chain reaction (PCR), Western Blots, assays, molecular sequencing, chromatography etc. Ultrasonication is a technique widely used in laboratories to treat samples pre-analytically. A major advantage of sonication is that the working principle of ultrasound is based on purely mechanical forces. Ultrasonic lysis and cell disruption is achieved by sonomechanical shear forces, which gives ultrasonication the advantage that the solvents used for protein extraction can be used also during lysis. Ultrasonic cell disruptors such as the VialTweeter break the cell walls / membranes and promote mass transfer between cell interior and solvent. Thereby, the analyte (e.g. DNA, RNA, proteins, organelles etc.) are efficiently transferred from the cell matrix into the solvent. This means the steps of quenching and extraction overlap with the ultrasonic cell disruption process, which makes ultrasonic lysis very effective. Furthermore, ultrasonic sample preparation does not require detergents and other lysis reagents, which might alter and destruct the structure of the lysate and is known for the subsequent troubles with purification. Another lysis method, the enzymatic disruption requires long incubation times and delivers often non-reproducible results. Ultrasonic sample preparation overcomes common problems in sample preparation such as tissue homogenization, cell disruption, lysis, protein extraction and lysate solubilization. Since the intensity of the ultrasonic treatment can be exactly controlled and adjusted to the biological sample, degradation and sample loss are avoided. Automatically monitored and controlled sample temperature, pulse mode and sonication duration ensure optimum outcomes.

વાયલટવીટર ખાસ કરીને પ્રયોગશાળાના કામ માટે અનુકૂળ છે જેને સમાન શરતો હેઠળ બહુવિધ નમૂનાઓની એક સાથે તૈયારી કરવાની જરૂર છે. વાયલટવીટર એ અલ્ટ્રાસોનિક બ્લ blockક સોનોટ્રોડ છે જે 10 શીશીઓ (દા.ત. એપપેંડર્ફ, સેન્ટ્રિગ્યુજ, એનયુસીસી ટ્યુબ્સ, ક્રિઓ-શીશીઓ) ધરાવે છે અને ચોક્કસ નિયંત્રિત પરિસ્થિતિઓમાં તેમને તીવ્ર રીતે સોનિકેટ કરે છે. અલ્ટ્રાસોનિક energyર્જા શીશીઓની દિવાલો દ્વારા નમૂના માધ્યમમાં જોડાયેલી હોવાથી, સારવાર દરમિયાન શીશીઓ બંધ રહે છે. ત્યાંથી, નમૂનાનું નુકસાન અને ક્રોસ-દૂષણ સંપૂર્ણપણે ટાળી શકાય છે.

વાયોલવીટરને ફીટ કરતી શીશીઓ અને નળીઓ

વાયલટવીટર 10 સામાન્ય શંક્વાકાર અથવા રાઉન્ડ-બ tubટ ટ્યુબ્સ જેમ કે એપેન્ડorfર્ફ, સેન્ટ્રિફ્યુજ, ક્રિઓ-શીશીઓ અને વિવિધ એનયુનસી શીશીના પ્રકારો રાખવા માટે યોગ્ય છે, પરંતુ છિદ્રો વિનંતી પર અન્ય શીશી અને નળીના કદમાં બદલી શકાય છે. કૃપા કરીને અમને જણાવો કે તમે કયા પ્રકારનાં પરીક્ષણ ટ્યુબ્સનો ઉપયોગ કરવા માંગો છો જેથી અમે તે મુજબ તમારા વાયલ્ટવીટરને સંશોધિત કરી શકીએ. ફાલ્કન ટ્યુબ અને અન્ય પરીક્ષણ કન્ટેનર, બીકર્સ અને જહાજો જેવા મોટા ટેસ્ટ ટ્યુબ માટે, વાયલપ્રેસ એ અનુકૂળ ઉપાય છે.

VialPress સાથે VialTweeter

જ્યારે તેની 10 ટ્યુબ છિદ્રો સાથે વીએલટવીટર પોતે પહેલેથી જ એક અનન્ય અને અત્યંત વિધેયાત્મક અલ્ટ્રાસોનિક ડિવાઇસ છે, વાયલપ્રેસ એડ-ઓન વાઈલટવીટરને વધુ સર્વતોમુખી અને કામગીરી માટે લવચીક બનાવે છે. વાયલપ્રેસ એ વાયલવીટર માટે એક સહાયક છે જે ક્લેમ્પ-barન બારમાં સમાયેલ છે જે ફાલ્કન ટ્યુબ જેવા મોટા નમૂના ટ્યુબ અથવા અન્ય નાનાથી મધ્યમ કદના પરીક્ષણ બીકર્સને વાયલવીટર આગળના ભાગમાં ઠીક કરવાની મંજૂરી આપે છે. ડાબી બાજુની તસવીરમાં વાયલટવીટર બતાવવામાં આવ્યું છે જેમાં બ્લોકમાં 10 એપ્પેન્ડોર્ફ શીશીઓ હોલ્ડ કરવામાં આવી છે, જ્યારે વાયલપ્રેસ સોનીકશન માટે આગળની એક મોટી ટેસ્ટ ટ્યુબને ઠીક કરે છે. વાઈલપ્રેસ તીવ્ર Sonication માટે 5 મોટી પરીક્ષણ ટ્યુબ્સ રાખવા માટે સક્ષમ છે.

VialTweeter નમૂના તૈયારી પ્રોટોકોલ્સ

જૈવિક નમૂનાઓનો જીવવિજ્ .ાન નમૂનાઓ સોનિકેટ કરવા માટે વ્યાપકપણે ઉપયોગ થાય છે. વિશ્લેષણ પહેલાં, બાયોકેમિકલ અથવા બાયોફિઝિકલ વિશ્લેષણ અને સહાય માટે નમૂનાઓ તૈયાર કરવા આવશ્યક છે, દા.ત. લિસોસ, ટીશ્યુ હોમોજેનાઇઝેશન, પ્રોટીન નિષ્કર્ષણ, ડીએનએ / આરએનએ શીયરિંગ, ડિગસિંગ વગેરે દ્વારા વાયલટવીટરની સામાન્ય એપ્લિકેશન એ સસ્તન પ્રાણી (માનવ અને પ્રાણી) ના પેશીઓ તેમજ બેક્ટેરિયાના કોષો અને વાયરલ કણોના લીસીસ / સેલ વિક્ષેપ છે. સફળતાપૂર્વક VialTweeter- ચિકિત્સાના જૈવિક નમૂનાઓમાં માનવ ફેફસાના ઉપકલા કોષો, હીમેટોપોએટીક સ્ટેમ સેલ્સ, માયલોઇડ લ્યુકેમિયા કોષો, એસ્ચેરીચીયા કોલી, બેસિલસ સબટાઇટલિસ, બેસિલસ એન્થ્રેસિસ, ફ્રાન્સિસેલા તુલારેન્સિસ, યર્સિનિયા પેસ્ટિસ, સ્ટ્રેપ્ટોકોકસ પાયોજેન્સ, કulલોબેક્ટર ક્રેસન્ટસ, માયકોપ્લાઝ્મા ન્યુમોનિયા, માયકોબેક્ટેરિયા / માયકોબેક્ટેરિયમ ટ્યુબરક્યુલોસિસ કોમ્પ્લેક્સ (એમટીબીસી) અને અન્ય ઘણા બેક્ટેરિયલ, વનસ્પતિશાસ્ત્ર અને માઇક્રોબાયલ સેલ્સ છે.
નીચે, તમે VialTweeter દર્શાવતા કેટલાક પસંદ કરેલા પ્રોટોકોલ શોધી શકો છો.

ઇન-વિવો ગ્લુટાથિઓન નિર્ધારણ માટે વાયલટવીટર સાથે ઇ.કોલી લિસીસ

એમઆરપીએસ 655 ના તાણની એસ્ચેરીચીયા કોલી બેક્ટેરિયા એમઓપીએસ ન્યૂનતમ માધ્યમમાં 200 એમએમના કુલ વોલ્યુમમાં ઉગાડવામાં આવ્યા હતા ત્યાં સુધી 0.5 ની A600 થાય ત્યાં સુધી. તાણની સારવાર માટે સંસ્કૃતિને 50 મિલી સંસ્કૃતિમાં વહેંચવામાં આવી હતી. 0.79 એમએમ એલિસિન, 1 એમએમ ડાયમાઇડ અથવા ડાઇમિથિલ સલ્ફોક્સાઇડ (નિયંત્રણ) સાથેના 15 મિનિટના સેવન પછી, કોષો 10 મિનિટ માટે 4 ° સે તાપમાને 4,000 ગ્રામ પર કાપવામાં આવ્યા હતા. કેપીઇ બફરના 700µl માં ગોળીઓ ફરીથી લગાડતા પહેલા સેલને બે વખત કેપીઇ બફરથી ધોવાઈ હતી. અવક્ષય માટે, 10% (ડબલ્યુ / વી) સલ્ફોસાલિસિલિક એસિડના 300µl અલ્ટ્રાસોનિકેશન (3 x 1 મિનિટ; વાયલ્ટવીટર અલ્ટ્રાસોનિસેટર) દ્વારા કોષોના ભંગાણ પહેલાં ઉમેરવામાં આવ્યા હતા. સુપરમેનટન્ટ્સ સેન્ટ્રિફ્યુગેશન (30 મિનિટ, 13,000 ગ્રામ, 4 ° સે) પછી એકત્રિત કરવામાં આવ્યા હતા. કેપીઇ બફરના 3 વોલ્યુમોના ઉમેરા દ્વારા સલ્ફોસાલિસિલિક એસિડ સાંદ્રતા 1% થઈ ગઈ. કુલ ગ્લુટાથિઓન અને જીએસએસજીના માપન ઉપર વર્ણવ્યા મુજબ કરવામાં આવ્યા હતા. સેલ્યુલર ગ્લુટાથિઓન સાંદ્રતા 6.7 × 10-15 લિટરના ઇ કોલી કોષો અને A600 0.5 (1 × 108 કોષો મિલી -1 સંસ્કૃતિની સમકક્ષ) ની સેલ ઘનતાના વોલ્યુમના આધારે ગણવામાં આવી હતી. કુલ ગ્લુટાથિઓનમાંથી 2 [જીએસએસજી] ના બાદબાકી દ્વારા જીએસએચ સાંદ્રતાની ગણતરી કરવામાં આવી હતી. (મlerલર એટ અલ. 2016)

ગ્રેફાઇટ ફર્નેસ એટોમિક શોષણ સ્પેક્ટ્રોમેટ્રી પહેલાં વાયલટવીટર સાથે સેલ લિસિસ

બેસિલસ સબટિલિસ 168 (ટીઆરપીસી 2) એ એન્ટિબાયોટિક તાણના 15 મિનિટ સુધી સંપર્કમાં આવ્યા હતા, ત્યારબાદ કોષો 3,320 XG પર લણવામાં આવ્યા હતા, 100 એમએમ ટ્રિસ / 1 એમએમ ઇડીટીએ, પીએચ 7.5 સાથે પાંચ વખત ધોવાયા, 10 એમએમ ટ્રિસમાં ફરી વળ્યા, પીએચ 7.5 અને અલ્ટ્રાસોનિકેશન દ્વારા વિક્ષેપિત હિલ્સચર વાઈલટવીટર ઇન્સ્ટ્રુમેન્ટમાં. (વેન્ઝેલ એટ અલ. 2014)

માસ સ્પેક્ટ્રોમેટ્રી પહેલાં VialTweeter નમૂનાની તૈયારી

100 એમએમ એમોનિયમ હાઇડ્રોજન કાર્બોનેટમાં 8 એમ યુરિયાના 10µ􏰇l (પેલ્ફાઇડ મંદન શ્રેણી માટે બલ્ક હેક 293 તૈયારી માટે 200µl) માનવ સીડી 34􏰀 હિમાટોપોઇટીક સ્ટેમ / પ્રોજેનિટર કોશિકાઓના લ્યુઓફાઇલાઇઝ્ડ સેલ ગોળીઓ ફરીથી લગાવી દેવામાં આવી હતી અને હીલ્સચર વાયલટવીટર દ્વારા સોનેક્શન દ્વારા લિસ્ટેડ સહાયિત કરવામાં આવી હતી. 60% ના કંપનવિસ્તાર પર, 60% નું એક ચક્ર અને બરફ પરના મધ્યવર્તી ઠંડક સાથે ત્રણ વખત 20 ના સમયગાળા. (એમોન એટ અલ. 2019)

VialPress નો ઉપયોગ કરીને નમૂના તૈયારી પ્રોટોકોલ્સ

તાજી લેટીસ (લેક્ટુકા સટિવા) 0.5 ગ્રામ એચઇપીઇએસ બફર (પીએચ 8, કોહસ્ટ એડજસ્ટ) માં 1 જી પ્લાન્ટ (તાજા વજન) થી 200, 100, 50, અથવા 20 એમએલ બફર સોલ્યુશનના ગુણોત્તરમાં એકરૂપ થયું હતું. કુલ હોમોજેનેટ વોલ્યુમ 3.5 અને 12 એમએલ વચ્ચે રાખવા માટે પ્લાન્ટ માસ અને બફર સોલ્યુશન વોલ્યુમનો ગુણોત્તર વૈવિધ્યસભર હતો. કુલ હોમોજેનેટ વોલ્યુમ 3.5 અને 12 એમએલની વચ્ચે રાખવા માટે પ્લાન્ટ માસ અને બફર સોલ્યુશન વોલ્યુમનો ગુણોત્તર વૈવિધ્યસભર હતો, જેથી સમર્થનને સમજાવી શકાય. ત્યારબાદ હોમોજેનેટે 200 એમપી વાયલપ્રેસ (હિલ્સચર અલ્ટ્રાસોનિક્સ જીએમબીએચ, જર્મની) થી 3 મિનિટ (80% પલ્સ અને 100% પાવર) સજ્જ યુઆઈ 200200 ની મદદથી યુપી 200 સ્ટStરનો ઉપયોગ કરીને પરોક્ષ અલ્ટ્રાસોનિકેશન કર્યું. આ ઉપકરણનો ઉપયોગ દૂષિત થવાનું ટાળે છે. (લાફ્ટોન એટ અલ. 2019)

વાયલટવીટર સાથે સોનિકેશન દરમિયાન વિશ્વસનીય તાપમાન નિયંત્રણ

તાપમાન એ નિર્ણાયક પ્રક્રિયાને અસરકારક પરિબળ છે જે ખાસ કરીને જૈવિક નમૂનાઓના ઉપચાર માટે મહત્વપૂર્ણ છે. બધી યાંત્રિક નમૂનાની તૈયારીની તકનીકીઓ તરીકે, સોનિકેશન ગરમીનું નિર્માણ કરે છે. જો કે, VialTweeter નો ઉપયોગ કરતી વખતે નમૂનાઓનું તાપમાન સારી રીતે નિયંત્રિત કરી શકાય છે. વિશ્લેષણ માટે વાયલવીટર અને વાયલપ્રેસ સાથે તૈયાર થતાં તમારા નમૂનાઓના તાપમાનનું નિરીક્ષણ અને નિયંત્રણ કરવા માટે અમે તમને વિવિધ વિકલ્પો પ્રસ્તુત કરીએ છીએ.

1. નમૂનાના તાપમાનનું નિરીક્ષણ કરવું: અલ્ટ્રાસોનિક પ્રોસેસર યુપી 200 એસટી, જે વાયલટવીટર ચલાવે છે, એક બુદ્ધિશાળી સ softwareફ્ટવેર અને પ્લગિબલ તાપમાન સેન્સરથી સજ્જ છે. તાપમાન સેન્સરને UP200St માં પ્લગ કરો અને નમૂના ટ્યુબમાંથી એકમાં તાપમાન સેન્સરની મદદ દાખલ કરો. ડિજિટલ રંગીન ટચ-ડિસ્પ્લે દ્વારા, તમે UP200St ના મેનૂમાં તમારા નમૂના નમૂના માટે ચોક્કસ તાપમાન શ્રેણી સેટ કરી શકો છો. મહત્તમ તાપમાન પહોંચે ત્યારે અલ્ટ્રાસોનાઇટર આપમેળે બંધ થઈ જાય છે અને સેમ્પલ તાપમાન સેટ તાપમાનના નીચા મૂલ્ય સુધી નીચે ન આવે ત્યાં સુધી થોભો. પછી સોનીકેશન ફરીથી આપમેળે શરૂ થાય છે. આ સ્માર્ટ સુવિધા ગરમી-પ્રેરિત અધોગતિને અટકાવે છે.
2. VialTweeter બ્લોક પૂર્વ-ઠંડુ કરી શકાય છે. ટાઇટેનિયમ બ્લોકને પૂર્વ-ઠંડુ કરવા માટે, વાયલટવીટર બ્લોક (ટ્રાન્સડ્યુસર વિના ફક્ત સોનોટ્રોડ!) ફ્રિજમાં અથવા ફ્રીઝરમાં મૂકો, નમૂનામાં તાપમાનમાં વધારો મુલતવી રાખવામાં મદદ કરે છે. જો શક્ય હોય તો, નમૂના પોતે પણ પૂર્વ-ઠંડુ થઈ શકે છે.
3. સોનિફિકેશન દરમિયાન ઠંડુ કરવા માટે સૂકા બરફનો ઉપયોગ કરો. શુષ્ક બરફથી ભરેલી છીછરા ટ્રેનો ઉપયોગ કરો અને શુષ્ક બરફ પર વાયલટવીટર મૂકો જેથી ગરમી ઝડપથી ઓગળી શકે.

જૈવિક, બાયોકેમિકલ, તબીબી અને ક્લિનિકલ પ્રયોગશાળાઓમાં તેમના દૈનિક નમૂનાની તૈયારી કાર્ય માટે વિશ્વભરમાં ગ્રાહકો વાયલટવીટર અને વાયલપ્રેસનો ઉપયોગ કરે છે. યુપી 200 એસટી પ્રોસેસરનું બુદ્ધિશાળી સ softwareફ્ટવેર અને તાપમાન નિયંત્રણ, તાપમાન વિશ્વસનીય રીતે નિયંત્રિત થાય છે અને ગરમી-પ્રેરિત નમૂનાના અધોગતિને ટાળી શકાય છે. VialTweeter અને VialPress સાથે અલ્ટ્રાસોનિક નમૂનાની તૈયારી ખૂબ વિશ્વસનીય અને પ્રજનનક્ષમ પરિણામો પહોંચાડે છે!

વાયલટવીટરની તકનીકી વિગતો

વાયલટવીટર એ ટાઇટેનિયમથી બનાવેલું એક બ્લોક સોનોટ્રોઇડ છે જે બ્લોકની અંદરના છિદ્રોમાં 10 શીશીઓ રાખી શકે છે. આ ઉપરાંત, 5 જેટલા મોટા પરીક્ષણ ટ્યુબ્સને વાયોલપ્રેસનો ઉપયોગ કરીને વાયલટવીટર ફ્રન્ટ પર ક્લેમ્પ્ડ કરી શકાય છે. વાઈલટવીટર એટલું રચાયેલ છે કે અલ્ટ્રાસોનિકેશન energyર્જા વિશ્વસનીય અને સમાન સોનિકિકેશન પરિણામોની ખાતરી કરવા માટે દરેક દાખલ શીશીમાં સમાનરૂપે વિતરિત કરવામાં આવે છે. એક નાનો પીવટ વાઈલટવીટર સોનોટ્રોડને અસમાન જમીન પર સમાયોજિત કરે છે અને પરીક્ષણ ટ્યુબને icallyભી ગોઠવે છે.

એક જ નજરમાં VialTweeter લાભો

• 10 શીશીઓ ના તીવ્ર sonication એકસાથે
• પેટ્રોલ દિવાલ દ્વારા નમૂનામાં ઉચ્ચ અલ્ટ્રાસોનિક તીવ્રતા પર પરોક્ષ sonication
• પરોક્ષ sonication ક્રોસ દૂષણ અને નમૂના નુકશાન કરવાનું ટાળે છે
• એડજસ્ટેબલ અને કન્ટ્રોલપાત્ર સોનીકશન ઍપ્લિડ્યૂડને કારણે પ્રજનનક્ષમ પરિણામો
• VialPress તમને મોટી ટ્યુબને સોનિટ કરવા માટે સક્ષમ કરે છે
• 20 થી 100% સુધી એડજસ્ટેબલ કંપનવિસ્તાર
• 0 થી 100% એડજસ્ટેબલ પલ્સ સ્થિતિમાં
• ઑટોક્લેબલ

VialTweeter દ્વારા સંચાલિત છે UP200St, 200 વોટનો શક્તિશાળી અલ્ટ્રાસોનિક પ્રોસેસર. યુપી 200 એસટી એક બુદ્ધિશાળી સ softwareફ્ટવેરથી સજ્જ છે જે કંપનવિસ્તાર, સોનિકેશન સમય, ધબકારા અને તાપમાન જેવા તમામ મહત્વપૂર્ણ અલ્ટ્રાસોનિક પ્રક્રિયા પરિમાણો પર ચોક્કસ નિયંત્રણની મંજૂરી આપે છે. આ જૈવિક અને બાયોકેમિકલ પ્રયોગશાળાઓમાં પુન repઉત્પાદન પ્રક્રિયાના સફળ પરિણામો માટે વિઅલટવીટરને વિશ્વસનીય સાધન બનાવે છે.
કંપનવિસ્તાર 20 અને 100% ની વચ્ચે ગોઠવી શકાય છે અને ત્યાંથી તમારા નમૂનામાં અલ્ટ્રાસોનિક તીવ્રતાને અનુકૂલન કરવાની મંજૂરી આપે છે. હમણાં પૂરતું, ડીએનએ અને આરએનએના વાળ કાપવા અને ટુકડા કરવા માટે ખૂબ નાના ડીએનએ ટુકડાઓનું ઉત્પાદન અટકાવવા માટે હળવા કંપનવિસ્તારની આવશ્યકતા હોય છે, માઉસ મગજના પેશીના એકરૂપતાને intensંચી તીવ્રતાના સોનિકેશનની જરૂર હોય છે. UP200St પ્રોસેસર પર સ્માર્ટ અને સાહજિક મેનૂ દ્વારા આદર્શ કંપનવિસ્તાર, સોનિકેશનની તીવ્રતા અને અવધિ પસંદ કરો. રંગીન ટચ ડિસ્પ્લે દ્વારા મેનૂ અને સેટિંગ્સ સરળતાથી andક્સેસ અને સંચાલિત કરી શકાય છે. સેટિંગ્સમાં તમે કંપનવિસ્તાર, પલ્સશન / ચક્ર મોડ, સોનીકેશન અવધિ, કુલ energyર્જા ઇનપુટ અને તાપમાન મર્યાદા જેવા સોનેકશન પરિમાણોને પ્રી-સેટ કરી શકો છો. સંશોધન અને ઉત્પાદનમાં, પરીક્ષણો અને પરીક્ષણ પરિણામોની પુનરાવર્તિતતા નિર્ણાયક છે. આનો અર્થ એ કે પ્રક્રિયાની સ્થિતિ અને સોનિકેશન પ્રોટોકોલ્સનું ચોક્કસ રેકોર્ડિંગ એકદમ મહત્વપૂર્ણ છે. સ્વચાલિત ડેટા પ્રોટોકlingલિંગ, એકીકૃત એસડી-કાર્ડ પરની સીએસવી ફાઇલમાં તમામ સોનિકેશન ડેટા લખે છે જેથી તમે વિવિધ સોનિકેશન રનને સરળતાથી ચકાસી અને તુલના કરી શકો. બધા અલ્ટ્રાસોનિક પ્રક્રિયા ડેટા સરળતાથી CSક્સેસ કરી શકાય છે અને સીએસવી ફાઇલ તરીકે શેર કરી શકાય છે.
હિલ્સચર અલ્ટ્રાસોનિક્સ તમારા સંશોધન કાર્યને સરળ બનાવવા અને સુધારવા માટે તમને અદ્યતન તકનીક પ્રદાન કરવા માટે પ્રયત્ન કરે છે!