Préparation d'échantillons de masse sur plaque de microtitration par ultrasons

Les plaques de microtitration, les plaques multi-puits, les plaques 96 puits ou les plaques ELISA sont utilisées pour la culture de masse et le traitement des échantillons biologiques. Avec l'appareil de microtitrage à ultrasons UIP400MTP, Hielscher offre une solution ultrasonique unique pour la préparation uniforme et fiable d'échantillons sur des plaques de 96 puits. Les applications courantes du microtitreur ultrasonique UIP4000MTP comprennent la lyse cellulaire, l'extraction de protéines, l'homogénéisation et la solubilisation de cellules ainsi que la fragmentation de l'ADN.

Préparation d'échantillons de masse avec l'ultrasonateur UIP400MTP

Les plaques de microtitration et les plaques à 96 puits sont des outils permettant de manipuler et de traiter simultanément un grand nombre d'échantillons. Comme son nom l'indique déjà, la plaque de 96 puits possède 96 puits et peut contenir 96 échantillons individuels. La préparation des échantillons avant l'analyse, par exemple avant les tests cellulaires (tels que l'ELISA ou la PCR), nécessite la lyse des cellules, la désintégration des cellules ainsi que l'extraction des protéines et la libération d'autres molécules intracellulaires ciblées. La lyse et l'extraction cellulaires par ultrasons est une méthode de longue date et bien établie de préparation d'échantillons de haute qualité. La lyse cellulaire et l'extraction de protéines par ultrasons sont effectuées conformément à des protocoles et donnent ainsi des résultats répétables et fiables. L'ultrasonateur pour échantillons de masse UIP400MTP est un système ultrasonore puissant de 400 watts qui couple les ondes ultrasonores indirectement à travers les parois des plaques multipuits dans le milieu de l'échantillon. Chacun des 96 puits d'échantillonnage est soniqué avec exactement la même intensité ultrasonique, ce qui permet d'obtenir des rendements supérieurs de lyse cellulaire et d'extraction.

Contrôle précis de la température pendant la sonication des plaques de microtitration

L'UIP400MTP est un ultrasonateur puissant de 400 watts, qui transmet des ondes ultrasonores et des vibrations indirectement à travers les parois de la plaque de microtitration dans les échantillons et crée une cavitation et des forces de cisaillement dans le milieu. Comme toutes les méthodes mécaniques de désintégration cellulaire, la sonication crée de la chaleur. Cependant, contrairement aux autres méthodes de rupture cellulaire, l'UIP400MTP permet un contrôle sophistiqué de la température et le préréglage de limites de température pour empêcher toute dégradation thermique des échantillons biologiques.
L'UIP400MTP est équipé d'un logiciel intelligent. L'écran tactile numérique permet d'accéder facilement au menu pour prérégler les limites de température et programmer l'apport énergétique total de votre échantillon.

Contrôle de la température de l'échantillon : L'ultrasonateur multi-échantillons UIP400MTP est équipé d'un logiciel intelligent et d'un capteur de température enfichable. Branchez le capteur de température dans l'UIP400MTP et insérez la pointe du capteur de température dans l'un des puits du microtitre. Grâce à l'écran tactile numérique en couleur, vous pouvez définir dans le menu de l'UIP400MTP une plage de température spécifique pour votre échantillon de sonication. L'ultrasonateur s'arrêtera automatiquement lorsque la température maximale sera atteinte et fera une pause jusqu'à ce que la température de l'échantillon soit descendue à la valeur inférieure de la température réglée ∆. Ensuite, la sonication redémarre automatiquement. Cette fonction intelligente empêche la dégradation induite par la chaleur.
Si possible, vous pouvez pré-refroidir la plaque de microtitration et ses échantillons pour retarder l'atteinte de la limite de température critique.

Sonication uniforme de tous les puits avec l'UIP400MTP

Des tests tels que le test de la feuille d'aluminium et le test de l'émulsion prouvent l'intensité uniforme des ultrasons sur toute la surface de l'UIP4000MTP. Cette intensité uniforme permet une sonication homogène de l'échantillon dans tous les puits des plaques multi-puits.
Test de la feuille d'aluminium avec l'UIP400MTP
Le test de la feuille d'aluminium réalisé avec l'ultrasoniseur de plaque multi-puits UIP400MTP
démontre la génération uniforme de cavitation acoustique sur toute la surface.
La surface complète de la feuille d'aluminium présente des trous uniformément répartis causés par la cavitation.

Test d'émulsion avec l'UIP400MTP
Les résultats du test d'émulsion démontrent visuellement l'intensité ultrasonique uniforme de l'UIP400MTP. L'image supérieure montre le mélange eau-huile clair dans une plaque à 96 puits.
avant la sonication. La deuxième image montre les émulsions par ultrasons après 1 min. de traitement. Tous les puits présentent la même perte de transparence, ce qui indique une émulsion uniforme dans toutes les cavités.

Ultrasons UIP400MTP MassSample

Les clients du monde entier utilisent l'UIP400MTP de Hielscher pour la préparation fiable, reproductible et pratique d'échantillons de masse dans des plaques multipuits. L'UIP400MTP facilite leur travail quotidien dans les laboratoires biologiques, biochimiques, des sciences de la vie, médicaux et cliniques. Grâce au logiciel intelligent et au contrôle de la température de l'UIP400MTP de Hielscher, la température est contrôlée de manière fiable et la dégradation des échantillons induite par la chaleur est évitée. La préparation d'échantillons par ultrasons avec l'UIP400MTP de Hielscher Ultrasonics donne des résultats très fiables et reproductibles !
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Le tableau ci-dessous vous donne une indication de la capacité de traitement approximative de nos systèmes à ultrasons, des homogénéisateurs portables compacts et des ultrasons multi-échantillons aux processeurs ultrasoniques industriels pour les applications commerciales :

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Littérature / Références

• Chen J.-X; Cipriani P.G.; Mecenas D.; Polanowska J.; Piano F.; Gunsalus K.C.; Selbach M. (2016): In Vivo Interaction Proteomics in Caenorhabditis elegans Embryos Provides New Insights into P Granule Dynamics. Molecular & Cellular Proteomics 15.5; 2016. 1642-1657.
• LeThanh, H.; Neubauer, P.; Hoffmann, F. (2005): The small heat-shock proteins IbpA and IbpB reduce the stress load of recombinant Escherichia coli and delay degradation of inclusion bodies. Microb Cell Fact 4, 6; 2005.
• Martínez-Gómez A.I.; Martínez-Rodríguez S.; Clemente-Jiménez J.M.; Pozo-Dengra J.; Rodríguez-Vico F.; Las Heras-Vázquez F.J. (2007): Recombinant polycistronic structure of hydantoinase process genes in Escherichia coli for the production of optically pure D-amino acids. Appl Environ Microbiol. 73(5); 2007. 1525-1531.
• Kotowska M.; Pawlik K.; Smulczyk-Krawczyszyn A.; Bartosz-Bechowski H.; Kuczek K. (2009): Type II Thioesterase ScoT, Associated with Streptomyces coelicolor A3(2) Modular Polyketide Synthase Cpk, Hydrolyzes Acyl Residues and Has a Preference for Propionate. Appl Environ Microbiol. 75(4); 2009. 887-896.

Qu'il faut savoir

Que sont les plaques de microtitration ?

Les plaques de microtitration, également appelées plaques à 96 puits, microplaques à 96 puits, plaques multipuits ou plaques ELISA, sont des plaques multipuits rectangulaires, qui sont largement utilisées dans les laboratoires pour traiter les cellules cultivées, les échantillons cellulaires. Les plaques de microtitration sont couramment utilisées dans les essais multiples tels que l'ELISA et la PCR. La plupart des plaques de 96 puits sont conçues pour des flux de travail à haut débit et sont compatibles avec les instruments d'analyse et la manipulation et le traitement robotisés. Il existe donc de multiples variantes, telles que les plaques entièrement plissées adaptées aux plateformes robotisées, les plaques sans plis, les plaques avec demi plis et les plaques avec code à barres adaptées au traitement d'échantillons de masse.
Les plaques de microtitration sont couramment utilisées pour des applications telles que la collecte d'échantillons, la préparation de composés, la chimie combinatoire, le criblage à haut débit, la purification des acides nucléiques, la croissance de cultures bactériennes et la réplication de plaques.