Comment utiliser les homogénéisateurs de tissus à ultrasons Hielscher
Avant de purifier ou de caractériser des macromolécules intracellulaires telles que des protéines, des organites, des enzymes ou des composés actifs, il est essentiel d’utiliser une méthode efficace de lyse tissulaire et de désintégration cellulaire. Les ultrasons sont une technique très efficace pour la préparation cellulaire, libérant rapidement des matériaux intracellulaires dans une solution tampon. Les forces mécaniques de cisaillement générées lors de l’homogénéisation des tissus par ultrasons peuvent être ajustées avec précision pour s’adapter à des matériaux spécifiques. Cela permet une préparation en douceur des tissus mous ou un cisaillement de l’ADN/ARN avec une sonication plus douce, ainsi qu’une cavitation ultrasonique intense pour une perturbation cellulaire destructrice (par exemple, pour le nannochloropsis, la levure).
Vous trouverez ci-dessous une sélection de tissus, de cellules et d’autres matières biologiques avec des protocoles de sonication recommandés et des directives pour préparer efficacement vos échantillons à l’aide d’un homogénéisateur de tissus à ultrasons ou d’un broyeur de cellules.
Ultrasoniseur de laboratoire UP200Ht (200W, 26kHz) pour les tâches de préparation d’échantillons
Comment préparer vos lysats, homogénats et extraits de matières biologiques
Par ordre alphabétique :
Acetobacter suboxydans
Rupture cellulaire en 5 à 15 secondes
Recommandation de l’appareil :
UP200St
Actinomyces
Perturbation et extraction des protéines en 3-5 min.
Recommandation de l’appareil :
UP50H
Activité ALP et LDH
Détermination de l’activité ALP et LDH et de la teneur en protéines
Les échantillons de cellules congelés ont été décongelés pendant 20 minutes sur de la glace, suivis d’une lyse cellulaire avec du PBS contenant 1 % de Triton X-100 pendant 50 minutes sur de la glace. Au cours de la lyse cellulaire, chaque échantillon a été sonique pendant 1 min à 80 W avec un processeur à ultrasons UP100H (Ultrasons de Hielscher).
Recommandation de l’appareil :
UP100H
Référence/ Document de recherche :
Bernhardt, A. et al. (2008) : Le collagène minéralisé – une matrice osseuse artificielle et extracellulaire – améliore la différenciation ostéogénique des cellules stromales de la moelle osseuse.
Phosphate tricalcique amorphe (ATCP)
Les nanoparticules d’ATCP, qui sont un précurseur exceptionnellement réactif pour la formation de l’hydroxyapatite, ont été dispersées dans du chloroforme contenant 5 % (p/p) de Tween20 référencé à PLGA à l’aide de l’appareil à ultrasons Hielscher UP400S à 320 W pendant 5 min. en appliquant des intervalles pulsés (50 %) pour permettre la relaxation des particules.
Recommandation de l’appareil :
UP400S
Référence/ Document de recherche :
Mohn, Dirk ; Ege, Duygu ; Feldman, Kirifl ; Schneider, Oliver D. ; Imfeld, Thomas ; Boccaccini, Aldo R. (2014) : Les charges sphériques de nanoparticules de phosphate de calcium permettent le traitement des polymères de dispositifs de fixation osseuse à haute bioactivité. La bibliothèque gratuite 01 mai 2010. 21 janvier 2014.
Anthocyanes
Anthocyanes : di-glucosides, mono-glucosides, monoglucosides acylés et di-glucosides acylés de péonidine, malvidine, cyanidine, pétunidine et delphinidine :Extraction de la peau du raisin en 40 sec. ; pH 5,0 ; rapport matière/solvant d’extraction de 1:6.
Recommandation de l’appareil :
UP100H
Anthraquinones
Extraction d’anthraquinones à partir des racines de Morinda citrifolia
Recommandation de l’appareil :
UP400S
Graines d’abricot
Prétraitement par ultrasons avant l’extraction de l’huile des graines de Jatropha curcas L. pour améliorer l’extraction.
Recommandation de l’appareil :
UP400S
Artemisia selengensis Turcz
Extraction de la rutine (1,0 g d’échantillon broyé dans 30 mL de méthanol) à 25°C en 5-10 min.
Recommandation de l’appareil :
UP50H
Aspergillus flavus
Inactivation par ultrasons d’Aspergillus flavus dans le milieu de croissance de Sabouraud
Recommandation de l’appareil :
UP200S
B. sphaericus / Bacillus sphaericus
Spores de Bacillus anthracis sterne 34F2
Élimination par ultrasons des spores de Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 et Bacillus thuringiensis ATCC 33680. L’utilisation de 150 ppm d’hypochlorite de sodium associée à des ultrasons a entraîné l’inactivation des spores.
Recommandation de l’appareil :
UP200S à 100 % d’amplitude
Référence/ Document de recherche :
Pamarthi, S.R. et al. : Efficacité des ultrasons dans le désendsolage des spores de Bacillus spp intégrées dans des matrices alimentaires complexes attachées à diverses surfaces de contact.
Spores de Bacillus cereus ATCC 21281
Élimination par ultrasons des spores de Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 et Bacillus thuringiensis ATCC 33680. L’utilisation de 150 ppm d’hypochlorite de sodium associée à des ultrasons a entraîné l’inactivation des spores.
Recommandation de l’appareil :
UP200S à 100 % d’amplitude
Référence/ Document de recherche :
Pamarthi, S.R. et al. : Efficacité des ultrasons dans le désendsolage des spores de Bacillus spp intégrées dans des matrices alimentaires complexes attachées à diverses surfaces de contact.
Bacillus subtilis
Des ultrasons de haute puissance et de basse fréquence dans de faibles volumes de suspension bactérienne entraînent une réduction continue du nombre de cellules bactériennes, c’est-à-dire que le taux de destruction prédomine. Dans de plus grands volumes, la sonication entraîne une augmentation initiale du nombre de cellules suggérant un délumping de la bactérie, mais cette augmentation initiale diminue ensuite à mesure que le délumping se termine et que le taux de destruction devient plus important.
Recommandation de l’appareil :
UP200St
Référence/ Document de recherche :
Joyce, E. ; Phull, S. S. ; Lorimer, J. P. ; Mason, T. J. (2003) : Le développement et l’évaluation de l’échographie pour le traitement des suspensions bactériennes. Une étude de la fréquence, de la puissance et du temps de sonication sur des espèces de Bacillus cultivées. Ultrasons. Sonochem. 10/2003. p. 315 à 318.
Barley's Alpha-amylase
Stimulation ou inhibition de l’activité de l’alpha-amylase de l’orge : L’échantillon (10 g de graines d’orge) a été dispersé dans 80 ml d’eau du robinet à sonication directe à une intensité ultrasonore de 20, 60 et 100 % d’amplitude, cycle de 50 % et avec agitation supplémentaire. La sonotrode a été immergée à environ 9 mm dans la solution. La solution a été traitée à température constante de 30°C pendant 5, 10 et 15 min.
Recommandation de l’appareil :
UP200S, amplitudes : 20, 60 et 100 % ; cycle de 50 %; Sonotrode S3, 30C°.
Référence/ Document de recherche :
Yaldagard et al. (2008) : Effet de la puissance ultrasonique sur l’activité de l’alpha-amylase de l’orge à partir du traitement des graines après le semis
Nauplies de balanes
Désherbage/destruction cellulaire du mésozooplancton : par sonication dans les conditions suivantes de quatre débits (200, 400, 520 et 800 lh-1) et de quatre amplitudes (25, 50, 75 et 100 %), un taux de destruction compris entre 61 et 97 % a été atteint.
Recommandation de l’appareil :
UIP2000hd
Référence/ Document de recherche :
Viitaslo et al. (2005) : L’ozone, la lumière ultraviolette, les ultrasons et le peroxyde d’hydrogène comme traitements de l’eau de ballast – Expériences avec le mésozooplancton dans les eaux salines-saumâtres basses.
Souches de bifidobactéries : B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. Lactis (BB-12), B. longum (BB-46)
Destruction cellulaire bactérienne et libération de ß-galactosidase à partir de souches de bifidobactéries : B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. Lactis (BB-12), B. longum (BB-46) : 100 mL de lait pasteurisé mélangé à une culture bactérienne a été appliqué par ultrasons. La cavitation provoque la destruction des cellules bactériennes et en même temps, la libération de ß-galactosidase.
Recommandation de l’appareil :
UIP1000hd: amplitude : 10 %, puissance : 80W, amplitude : 100 %, puissance : 200W ; Sonotrode BS2d34 ; 15 à 30 min.
Référence/ Document de recherche :
Hung et al. (2009) : Fermentation du yogourt assistée par ultrasons avec des probiotiques.
Cellules pAtHNL BL21(DE3) (cellules d’Arabidopsis thaliana)
Rupture cellulaire : 15 g de cellules BL21-(DE3)_pAtHNL ont été lentement suspendues dans un tampon de phosphate de potassium de 50 mM (pH 7,5) à 0 °C.
Recommandation de l’appareil :
UP200S + sonotrode S14D : à 70W/cm2 (4 x 5 min), refroidi dans un bain de glace
Référence/ Document de recherche :
Okrob, D. et al (2009) : Hydroxynitrile lyase d’Arabidopsis thaliana : identification des paramètres de réaction pour la synthèse de cyanohydrine énantiopure par un catalyseur pur et immobilisé. Adv. Synth. Catal. 2011, 353, 2399 – 2408.
Cellules sanguines (rouges et blanches)
Boldine à partir de feuilles de Boldo (Peumus boldus Molina)
Un composé actif important dans le boldo est la boldine ((S)-2,9-dihydroxy-1,10-diméthoxiaporphine), qui est, outre la catéchine ((2S,3R)-2-(3,4-dihydroxy-phényl)-3,4-dihydro-1(2H)-benzopyran-3,5,7-triol), les principaux composants de la fraction alcaloïde et flavonoïde dans les feuilles de boldo. La boldine est un puissant agent antioxydant qui subit des dommages peroxydatifs médiés par les radicaux libres et agit comme un piégeur efficace des radicaux hydroxyles.
Procédure d’extraction : Pour une procédure d’extraction typique, des échantillons de feuilles de boldo ont été extraits avec 1 L d’eau distillée à pression atmosphérique à l’aide de l’ultrasoniseur UIP1000hd en mode batch et flow-through. Le temps d’extraction varie entre 10 et 40 min., avec une intensité ultrasonique de 10 à 23 W/cm2, et une plage de température de 10 à 70 °C. Les meilleurs résultats ont été obtenus dans les conditions suivantes : intensité ultrasonore de 23 W/cm2 pendant 40 min. à une température de 36°C
Résultats: Les résultats de l’analyse montrent que la sonication à haute puissance augmente la libération d’analytes du matériel de matrice végétale de Boldo à des taux nettement meilleurs par rapport à la méthode conventionnelle : un rendement égal a été libéré par sonication en 30 min. alors que le temps d’extraction conventionnel était de 2h.
Chemat (2013) et ses collaborateurs ont montré que l’extraction assistée par ultrasons améliore l’efficacité de l’extraction des plantes tout en réduisant le temps d’extraction à une concentration accrue des extraits (même quantité de solvant et de matière végétale). L’analyse a révélé que les conditions optimisées étaient : puissance de sonication 23 W/cm2 avec UIP1000hd pendant 40 min. et à une température de 36°C. Les paramètres optimisés de l’extraction par ultrasons permettent une meilleure extraction par rapport à une macération conventionnelle en termes de temps de traitement (30 min. au lieu de 120 min), de rendement plus élevé, d’efficacité énergétique plus élevée, de propreté améliorée, de sécurité accrue et de meilleure qualité du produit.
Recommandation de l’appareil :
UIP1000hd avec sonotrode BS2d34 et cellule d’écoulement
Référence/ Document de recherche :
Petigny, L. ; Périno-Issartier, S. ; Wajsman, J. ; Chemat, F. (2013) : Extraction assistée par ultrasons en discontinu et en continu de feuilles de boldo (Peumus boldus Mol.). International Journal of Molecular Science 14, 2013. 5750-5764.
Albumine sérique bovine (BSA)
Microencapsulation dans de l’acide poly(lactique-co-glycolique) en 40 sec.
Recommandation de l’appareil :
GDmini
Référence/ Document de recherche :
Freitas et al. (2005) : Émulsification par ultrasons à flux continu combinée à un micromélange statique pour la production aseptique de microsphères par extraction par solvant.
Tronc cérébral + glande surrénale
Analyse de la dispersion et des nucléotides ; Taille de l’échantillon : 10 mg Échantillons dans un liquide de 10 ml.
Recommandation de l’appareil :
UP50H
Candida albicans
Glucides, polysaccharides et autres composés fonctionnels
Extraction de glucides, de polysaccharides et d’autres composés fonctionnels
Recommandation de l’appareil :
UP200St
Acide carnosique du romarin
Extraction de l’acide carnosique, un composé actif, à partir du romarin.
Recommandation de l’appareil :
UP400S
Capsaïcinoïdes
Extraction de capsaïcinoïdes (capsaïcine, nordihydrocapsaïcine) à partir de piments : Capsaïcinoïdes de Capsicum frutescens Les poivrons ont été obtenus par extraction par ultrasons dans les conditions suivantes : Solvant : éthanol à 95 % (V/V), rapport solvant/masse de 10 ml/g, temps d’extraction par sonication de 40 min, température d’extraction de 45 °C. Rendement en extractif : 85 % des capsaïcinoïdes
Recommandation de l’appareil :
UP400S
Caroténoïdes, Bêta-caroténoïdes
ADNc
L’ARN poly-A a été purifié à l’aide du kit de purification de l’ARNm Dynabeads (Invitrogen) conformément aux instructions du fabricant et a été traité pendant 30 minutes à 37 °C avec de la TURBO DNase (Ambion ; 0,2 unité/1 μg d’ARN). La synthèse du premier et du deuxième brin a suivi le protocole du fabricant. Environ 500 ng d’ADNc double brin ont été fragmentés par sonication avec la maladie de Hielscher UTR200. L’ADN a été divisé en fragments dans un gel d’agarose à haute résolution à 2 % et 230 à 270 fragments pb ont été coupés.
Recommandation de l’appareil :
UTR200 ou TD_CupHorn
Référence/ Document de recherche :
Delft, J. van ; Gaj, St. ; Lienhard, M. ; Albrecht, M. W. ; Kirpiy, A. ; Brauers, K. ; Claessen, S. ; Lizarraga, D. ; Lehrach, H. ; Herwig, R. ; Kleinjans, J. (2012) : Le RNA-Seq fournit de nouvelles informations sur les réponses transcriptomiques induites par le cancérogène benzo[a]pyrène. Sciences toxicologiques 130/2, 2012. 427–439.
Caryophanon latum
Extraction de la glucosamine, de l’acide muramique, de l’alanine, de l’acide glutamique et de la lysine à partir du datum caryophanon.
Recommandation de l’appareil :
UP100H
cellulose
Homogénéisation/préparation de cellulose isotopiquement homogène.
Recommandation de l’appareil :
UP200S; dans un bain de glace
Référence/ Document de recherche :
Laumer et al. (2009) : Une nouvelle approche pour l’homogénéisation de la cellulose afin d’utiliser des microquantités pour les analyses d’isotopes stables.
Nanocristaux de cellulose (CNC) préparés à partir de CNC de cellulose d’eucalyptus
Des nanocristaux de cellulose (CNC) préparés à partir de CNC de cellulose d’eucalyptus ont été modifiés par la réaction avec du chlorure de méthyl adipoyle, CNCm, ou avec un mélange d’acide acétique et d’acide sulfurique, CNCa. Par conséquent, les CNC lyophilisés, les CNCm et les CNCa ont été redispersés dans des solvants purs (EA, THF ou DMF) à 0,1 % en poids, par agitation magnétique pendant une nuit à (24 ± 1) °C, suivie de 20 min dans un bain de sonication à l’aide d’ultrasons Hielscher UP100H (Allemagne), équipés d’une sonotrode de 130 W/cm2, à 24 ± 1 °C. Après cela, le CAB a été ajouté à la dispersion CNC, de sorte que la concentration finale du polymère était de 0,9 % en poids.
Recommandation de l’appareil :
UP100H; à 24 °C pendant 20 min.
Référence/ Document de recherche :
Blachechen, L. S. et al (2013) : Interaction de la stabilité colloïdale des nanocristaux de cellulose et de leur dispersibilité dans la matrice de butyrate d’acétate de cellulose. Cellulose 2013.
Cellulose de bagasse de canne à sucre
Extraction de la cellulose de la bagasse de canne à sucre
Recommandation de l’appareil :
UP200St
Essai ChIP
Les ultrasons sont utilisés pour la lyse cellulaire afin de libérer la chromatine. Une sonication légère (pulsée) est utilisée pour fragmenter la chromatine. De plus, les ultrasons accélèrent le taux de liaison des anticorps aux protéines cibles et réduisent ainsi le temps d’immunoprécipitation.
Recommandation de l’appareil :
UP100H
Référence/ Document de recherche :
Basselet, P. et al. (2008) : Traitement d’échantillons pour l’analyse basée sur des puces à ADN d’Escherichia coli entérohémorragique (EHEC).
Lauri, A. (2005) : Analyse moléculaire du développement des pétales par X-ChIP et technologie bi-hybride. Thèse de doctorat, Université de Cologne, 2005.
Chromatine
Cisaillement de la chromatine
Recommandation de l’appareil :
UP400S; à 30 % d’amplitude et 0,5 cycle ; sur la glace.
Référence/ Document de recherche :
Oh et al. (2003) : Le gène de l’acétyl-CoA carboxylase est régulé par la protéine 1 de liaison aux éléments régulateurs de stérols dans le foie.
Extraction de la chromatine
Le lysat des cellules MEL DS19 a été soniqué en 10 tours de 20 s chacun à 70 % de la puissance maximale à l’aide du processeur à ultrasons Hielscher 200W UP200H
Recommandation de l’appareil :
UP200H; 70 % de la production maximale ; Mode impulsion : 10 cycles de 20 secondes chacun.
Référence/ Document de recherche :
Kang, H. Ch. et al (2010) : PIAS1 régule la localisation de CP2c et la formation du complexe promoteur actif dans l’expression de l’a-globine spécifique des cellules érythroïdes. Acides nucléiques Res. 38/ 16, 2010. p. 5456 à 5471.
Chromatographie
La sonication de l’adsorbant dans le solvant élimine les agglomérats en quelques secondes et prépare une colonne uniforme et facile à remplir. Pertinent pour la préparation d’adsorbant (par exemple gel de silice) avant la chromatographie sur colonne.
Recommandation de l’appareil :
UP400S
Cladocères
Perturbation cellulaire du mésozooplancton
Recommandation de l’appareil :
UP2000HD avec cellule d’écoulement
Référence/ Document de recherche :
Viitaslo et al. (2005) : L’ozone, la lumière ultraviolette, les ultrasons et le peroxyde d’hydrogène comme traitements de l’eau de ballast – Expériences avec le mésozooplancton dans les eaux salines-saumâtres basses.
Copépodes adultes et copépodites
Désorganisation cellulaire du mésozooplancton : par sonication dans les conditions suivantes de quatre débits (200, 400, 520 et 800 lh-1) et de quatre amplitudes (25, 50, 75 et 100 %), un taux de destruction compris entre 87 et 99 % a été atteint.
Recommandation de l’appareil :
UIP2000hd avec cellule d’écoulement
Référence/ Document de recherche :
Viitaslo et al. (2005) : L’ozone, la lumière ultraviolette, les ultrasons et le peroxyde d’hydrogène comme traitements de l’eau de ballast – Expériences avec le mésozooplancton dans les eaux salines-saumâtres basses.
Nauplies de copépodes
Désorganisation cellulaire du mésozooplancton : par sonication dans les conditions suivantes de quatre débits (200, 400, 520 et 800 lh-1) et de quatre amplitudes (25, 50, 75 et 100 %), un taux de destruction compris entre 87 et 99 % a été atteint.
Recommandation de l’appareil :
UIP2000hd avec cellule d’écoulement
Référence/ Document de recherche :
Viitaslo et al. (2005) : L’ozone, la lumière ultraviolette, les ultrasons et le peroxyde d’hydrogène comme traitements de l’eau de ballast – Expériences avec le mésozooplancton dans les eaux salines-saumâtres basses.
Cellules COS7
Lyse dans un tampon de 400 μl
Recommandation de l’appareil :
UP200S; 7 cycles
Référence/ Document de recherche :
Zaim (2005) : Analyse von Nesprin-2 Defizienten Mäusen.
Cryptosporidium parvaum
Inactivation par ultrasons de Cryptosporidium parvaum (protozoaires) dans l’eau.
Recommandation de l’appareil :
UP400S
Référence/ Document de recherche :
Tsukamoto, I. ; Yim, B. ; Stavarache, C. E. ; Furuta, M. ; Hashiba, K. ; Maeda, Y. (2004) : Inactivation de Saccharomyces cerevisiae par irradiation ultrasonique. Sonochimie par ultrasons 11/2004. p. 61 à 65.
cubosomes
cubosomes – soit vide, soit dopé avec des molécules de fluorophore – ont été préparés en dispersant la quantité appropriée de monooléine dans une solution de Pluronic F108 à l’aide de l’ultrasoniseur UP100H. Pour obtenir des cubosomes fluorescents, le fluorophore a été dispersé dans la monooléine fondue par sonification douce avant dispersion dans le pluronique F108. La même procédure a été suivie lorsque les cubosomes fluorescents ont également été chargés de quercétine.
Échantillon : taille de l’échantillon : 4 mL – env. 96,4 % en poids d’eau, 3,3 % en poids de monooléine, 0,3 % en poids de Pluronic F108. Le pourcentage de fluorophore était de 2,5 × 10−3 et de 2,8 × 10−3 % en poids. Quantité de quercétine ajoutée : 6,4 × 10−6 % en poids.
Sonication : UP100H, amplitude 90 %, cycle d’impulsion 0,9, pendant 10 min.
Recommandation de l’appareil :
UP100H
Référence/ Document de recherche :
Murgia, S. ; Bonacchi, S. ; Falchi, A. M. ; Lampis, S. ; Lippolis, V. ; Meli, V. ; Monduzzi, M. ; Prodi, L. ; Schmidt, J. ; Talmon, Y. ; Caltagirone, C. (2013) : Cubosomes fluorescents chargés de médicaments : nanoparticules polyvalentes pour des applications théranostiques potentielles. Langmuir 29, 2013. 6673-6679.
Dekkera bruxellensis
Inactivation par ultrasons de Dekkera bruxellensis dans l’eau
Recommandation de l’appareil :
UIP1500hd
Référence/ Document de recherche :
Borthwick, K. A. J. ; Coakley, W. T. ; McDonnell, M. B. ; Nowotny, H. ; Benes, E. ; Grfschl, . M (2005) : Développement d’un nouveau sonicateur compact pour la rupture cellulaire. J. Microbio. Méthamphétamine. 60/2005, p. 207 à 216. / Lörincz, A. (2004) : Perturbation cellulaire ultrasonique de la levure dans des suspensions à base d’eau. Biosys. Eng. 89/ 2004. p. 297 à 308. / Tsukamoto, I. ; Yim, B. ; Stavarache, C. E. ; Furuta, M. ; Hashiba, K. ; Maeda, Y. (2004) : Inactivation de Saccharomyces cerevisiae par irradiation ultrasonique. Ultrasons. Sonochem. 11/2004, p. 61 à 65.
Dekkera/ Brettanomyces bruxellensis
Inactivation en 90-120 sec.
Recommandation de l’appareil :
UIP1500hd
Référence/ Document de recherche :
voir ci-dessus
ADN
Fragmentation de l’ADN : sonication de 2 min. de 100μL avec UP100H ou sonication de 4 min. de 100μL avec UTR200.
Recommandation de l’appareil :
UP100H, UTR200 ou VialTweeter
Référence/ Document de recherche :
Larguinho M. et al. (2010) : Développement d’une stratégie rapide et efficace basée sur les ultrasons pour la fragmentation de l’ADN.
Cellules S2 de Drosophila melanogaster
Extraction de protéines cellulaires à partir de cellules S2 de Drosophila melanogaster : Des cellules S2 congelées (1,56108) ont été lysées dans un tampon d’homogénéisation glacé de 1 mL (100 mM de Tris-HCl pH 7,5, 1 % SDS) et laissées sur de la glace pendant 10 min. La lyse cellulaire a été réalisée par ultrasonication sur glace (6615 rafales, impulsion de 0,5 s ; intensité de 75 %) avec un processeur à ultrasons Hielscher UP200S.
Recommandation de l’appareil :
UP200S (200W), intensité 75 % mode impulsion : 6615 rafales, impulsion 0,5 s.
Référence/ Document de recherche :
Schwientek, T. et al. (2007) : Une approche lectine en série de l’O-glycoprotéome de type mucine des cellules S2 de Drosophila melanogaster. Protéomique 7, 2007. p. 3264 à 3277.
Dérivés d’E. coli
Rupture cellulaire des dérivés d’E. coli : Les granulés congelés correspondant au volume d’échantillon de Vculture = 4/OD mL ont été remis en suspension dans un tampon de phosphate de potassium de 580 μL 10 mM pH 7, 1 mM EDTA. On a ajouté 20 μL de lysozyme (concentration de 1 g L-1) et la suspension de cellules a été incubée sur de la glace pendant environ 30 min. Ensuite, les cellules ont été perturbées par ultrasons continus avec un ultrasoniseur (UP 200S Ultraschallprozessor, Dr. Hielscher GmbH, Teltow) sur de la glace, à une amplitude de 50 % pendant 20 sec. Les fractions cellulaires solubles et insolubles ont été séparées par centrifugation à 13000 tr/min pendant 20 min. Les protéines insolubles ont été lavées deux fois avec le tampon de phosphate de potassium de 10 mM pH 7, 1 mM d’EDTA et stockées à -20 °C.
Recommandation de l’appareil :
UP200S avec une amplitude de 50 %
Référence/ Document de recherche :
HA (2005) : Optimisation de la production de protéines recombinantes actives, explorant l’impact des petites protéines de choc thermique d’Escherichia coli, IbpA et IbpB, sur la réactivation in vivo des corps d’inclusion.
Antigène d’Echinococcus granulosus
Lyse et désintégration cellulaires : L’échantillon homogénéisé de protéines solubles d’E. granulosus matures, préparé par congélation-décongélation dans de l’azote liquide et 42°C, a été sonique à 110V, 170W pendant 3×15 sec sur glace. Après cela, l’échantillon a été centrifugé pendant 15 minutes à 10000g. La concentration des protéines a été mesurée par la méthode de Bradford et stockée à -20 °C.
Recommandation de l’appareil :
UP200S; 170W, refroidissement sur glace ; 3 x 15 secondes
Référence/ Document de recherche :
Tabar et al. (2010) : Sérodiagnostic de l’hydatidose ovine avec le liquide hydatique, Protoscolex et corps entier de l’antigène d’Echinococcus granulosus.
Escherchia coli Gr-
Inactivation par ultrasons d’Escherchia coli Gr- dans le lait et les jus.
Recommandation de l’appareil :
UP100H
Référence/ Document de recherche :
Zenker, M. ; Heinz, V. ; Knorr, D. (2003) : Application du traitement thermique assisté par ultrasons pour la conservation et la rétention de la qualité des aliments liquides. J Food Prot 66/2003. p. 1642 à 1649.
Escherchia coli Gr- in salin
Inactivation par ultrasons d’Escherchia coli Gr- in saline.
Recommandation de l’appareil :
UP100H
Référence/ Document de recherche :
Duckhouse, H. ; Mason, T. J. ; Phull, S. S. ; Lorimer, J. P. (2004) : L’effet de la sonication sur la désinfection microbienne à l’aide d’hypochlorite. Ultrasons. Sonochem. 11/ 2004. p. 173 à 176.
Escherchia coli Gr- dans l’eau
Inactivation par ultrasons d’Escherchia coli Gr- dans l’eau.
Recommandation de l’appareil :
UP100H
Référence/ Document de recherche :
Furuta, M. ; Yamaguchi, M. ; Tsukamoto, T. ; Yim, B. ; Stavarache, C. E. ; Hasiba, K. ; Maeda, Y. (2004) : Inactivation d’Escherichia coli par irradiation ultrasonique. Ultrasons. Sonochem. 11/2004. p. 57 à 60.
Glaucome, tête du nerf optique
Fragmentation de l’ARN des têtes nerveuses optiques (à partir d’yeux de rat) : La tête nerveuse optique (ONH) a été congelée sur de la glace carbonique et stockée à 80°C avant d’être extraite. L’ARN a été isolé en sonifiant les têtes nerveuses congelées dans le tampon d’extraction du kit à l’aide d’une sonde MS 0.5 (UP50H), puis, après les instructions fournies par le kit Arcturus, en incluant un traitement à la DNase pour éliminer tout ADN. L’ARN purifié a été quantifié.
Recommandation de l’appareil :
UP50H avec sonde MS0.5
Référence/ Document de recherche :
Johnson et al. (2007) : Changements globaux dans l’expression génique de la tête du nerf optique après une exposition à une pression intraoculaire élevée dans un modèle de glaucome de rat.
Glycosaminoglycane sulfate de chondroïtine (CS)
Détermination de la CS par dosage au bleu de diméthylène
Mise en suspension des cellules : des pastilles de CS dans des tubes de microcentrifugation ont été remises en suspension dans 0,5 ml d’une solution de papaïne à 0,1 mg/ml dans une solution saline équilibrée de Hank (HBSS) à l’aide d’impulsions provenant d’un cornet à ultrasons (UP 100H, Hielscher Ultrasonics GmbH, Allemagne) au cycle 1 et à une amplitude de 100 % pendant 3 secondes. Par la suite, la digestion a eu lieu à 60 °C pendant 24 h.
Pour le test immuno-enzymatique (ELISA), les cellules ont ensuite été suspendues dans de l’eau distillée et désionisée à une concentration de 106 cellules/ml, et ont été conservées dans un congélateur à -70 °C pendant la nuit afin de faciliter la lyse cellulaire. Les cellules ont ensuite été homogénéisées par ultrasons pendant 40 secondes à l’aide de l’homogénéisateur de tissus à ultrasons Hielscher UP100H.
Recommandation de l’appareil :
UP100H
Référence/ Document de recherche :
Vandrovcova et al. (2011) : Influence des revêtements de collagène et de sulfate de chondroïtine (CS) sur le poly-(lactide-co-glycolide) (PLGA) sur les cellules de type ostéoblaste MG 63. Physiol. Res. 60 ; 2011. 797-813.
Cellules HaCaT
Lyse des cellules HaCaT pour l’immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) : Les cellules HaCaT ont été fixées avec 1 % de formaldéhyde pendant 10 minutes à 37uC. Les cellules fixes ont été lysées dans le tampon RIPA et soniquées sur de la glace à l’aide d’un appareil à ultrasons de 100 W à une amplitude = 1 et à un rapport cyclique = 100 % en 12 impulsions d’une minute (12 x 1 min).
Recommandation de l’appareil :
UP100H; pendant 12 min. sur glace,
Référence/ Document de recherche :
Zhang et al. (2007) : Basonuclin régule un sous-ensemble de gènes d’ARN ribosomique dans les cellules HaCaT.
Héparine : Dépolymérisation de l’héparine
La méthode par ultrasons permet de produire une héparine de bas poids moléculaire (HBPM). Par conséquent, l’héparine subit une dépolymérisation radicalaire catalysée par le peroxyde d’hydrogène. La réaction est très rapide et prend moins d’une heure, tandis que le processus de dépolymérisation physicochimique repose sur des conditions de réaction douces, ne nécessite aucun réactif agressif ou toxique et fournit un produit exempt d’artefacts chimiques. Ainsi, le procédé par ultrasons est bien adapté à la production à grande échelle d’HBPM, mais aussi d’analogues produits à partir de polysaccharides sulfatés naturels.
Procédure par ultrasons :
Pour la dépolymérisation physicochimique de l’héparine non fractionnée par dépolymérisation radicalaire assistée par ultrasons, l’héparine a été dissoute dans l’eau jusqu’à une concentration finale de 25 mg/mL (5 mL). Le mélange réactionnel a été soniqué à l’aide d’un ultrasoniseur de type sonde UP50H. L’ultrasoniseur était équipé d’une sonde (micro pointe MS3) d’un diamètre de 3mm, qui fournissait une amplitude de 180μm. Le processeur générait des vibrations longitudinales mécaniques d’une fréquence de 30 kHz qui étaient produites par excitation électrique. Le mélange réactionnel a été maintenu à 60 °C dans un réacteur Radleys® et des ondes ultrasonores ont été appliquées sous forme d’impulsion de 0,5 seconde pour éviter l’échauffement du mélange. Une aliquote à temps zéro (250 μl) a été retirée de la solution avant le lancement de la réaction par l’ajout simultané de peroxyde d’hydrogène et l’application d’ondes ultrasonores. Du peroxyde d’hydrogène a été ajouté pour obtenir un rapport final peroxyde d’hydrogène/héparine (p/p) de 0,15 (3,75 mg/mL).
Recommandation de l’appareil :
UP50H avec sonotrode MS3
Référence/ Document de recherche :
Achour, Oussama ; Bridiau, Nicolas ; Godhbani, Azza ; Le Joubioux, Florian ; Bordenave Juchereau, Stéphanie ; Sannier, Frédéric ; Piot, Jean-Marie ; Fruité Arnaudin, Ingrid ; Maugard, Thierry (2013) : Préparation assistée par ultrasons d’une héparine de faible poids moléculaire (HBPM) à activité anticoagulante. Polymères glucidiques 97 ; 2013. 684–689.
Houblon
Extraction de composés actifs / extraits de plantes dans de l’eau et de l’éthanol.
Recommandation de l’appareil :
UP400S
Lactobacillus (lyse/isolement de l’ADN de diverses souches de Lactobacillus)
Souches de Lactobacillus : L. pontis, L. sanfranciscensis, L. farciminis, L. panis, L. oris, L. vaginalis et L. reuteri, L. sp.
Procédure : Pour l’isolement de l’ADN de colonies individuelles, un protocole de lyse ultrasonore a été développé. Une colonie (de 2 à 3 mm de diamètre) a été suspendue dans un tampon de lyse de 100 μl (20 mM d’EDTA, 10 mM de Tris [pH 7,9], 1 % de Triton X-100, 500 mM de guanidine-HCl, 250 mM de NaCl). Les cellules ont été lysées par 1 min d’ultrasonication avec un ultrasoniseur de type sonde UP50H. Après l’ajout de 150 μl d’éthanol froid (-20°C), le mélange a été centrifugé sur une colonne de centrifugation du kit de tissus QIAamp et enfin élué avec 60 μl de tampon (10 mM de Tris [pH 7,5]).
Pour disposer d’un outil permettant une identification rapide et fiable de cultures pures uniques, le test PCR a été combiné à une procédure rapide d’isolement de l’ADN. Les procédures de lyse enzymatique fastidieuses et la sensibilité variable des bactéries au lysozyme ont été surmontées par un traitement par ultrasons des cellules, suivi d’une purification et d’une concentration en liant l’ADN à une matrice de silice. Le matériel cellulaire d’une seule colonie s’est avéré suffisant pour la PCR.
Recommandation de l’appareil :
UP50H
Référence/ Document de recherche :
Müller, M. R. A. (2000) : Caractérisation de l’écosystème microbien des fermentations de céréales à l’aide de méthodes de biologie moléculaire. Thèse Université de Cologne, 2000.
Lactobacillus acidophilus Gr+
Inactivation par ultrasons de Lactobacillus acidophilus Gr+ dans le lait et les jus.
Recommandation de l’appareil :
UIP500hd
Référence/ Document de recherche :
Zenker, M. ; Heinz, V. ; Knorr, D. (2003) : Application du traitement thermique assisté par ultrasons pour la conservation et la rétention de la qualité des aliments liquides. J Food Prot 66/2003. p. 1642 à 1649.
Legionella pneumophila Gr+ en milieu dilué
Inactivation par ultrasons de Legionella pneumophila Gr+ en milieu dilué.
Recommandation de l’appareil :
UIP500hd
Référence/ Document de recherche :
Dadjour, M. F. ; Ogino, C. ; Matsumura, S. ; Nakamura, S. ; Shimizu N. (2006) : Désinfection de Legionella pneumophila par traitement par ultrasons au TiO2. Résolution de l’eau 40/2006. pp.1137 à 1142.
Leuconostoc mesenteroides
Activité lysozme leucocytaire dans la leucémie myélocytaire : la suspension cellulaire a été sonicée pendant 15 min. et les échantillons ont été dosés pour l’activité lysozyme. La concentration en lysozymes des leucocytes ug./10 cellules a été déterminée.
Recommandation de l’appareil :
UP50H
Activité isozymisaire leucocytaire dans la leucémie myéloïde
Préparation de l’échantillon : la suspension cellulaire a été traitée par ultrasons et les échantillons ont été analysés pour l’activité lysozyme. La concentration en lysozyme des leucocytes ug/106 a été déterminée.
Recommandation de l’appareil :
UP200St
liposomes
Formation de SUV
Cliquez ici pour en savoir plus sur la préparation des liposomes par ultrasons !
Recommandation de l’appareil :
UP50H; 3 cycles de 5 min ; dans un bain de glace.
Vert malachite
Dégradation sonophotocatalytique du Malachite Green (un bactéricide puissant) : La dégradation photocatalytique seule est considérablement plus rapide que la dégradation sonolytique, l’efficacité peut être améliorée en couplant les deux processus. Le vert malachite, un bactéricide puissant, est très écotoxique pour les bactéries marines mais il est converti en matières organiques moins ou pas toxiques.
Recommandation de l’appareil :
UP400S
Acylation de la mangiférine
Mangiférine (1,3,6,7-tétrahydroxy-2-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxyméthyl)oxan-2-yl]xanthène-9-one ; formule : C19H18O11)est un polyphénol de structure C-glycosylxanthone que l’on retrouve dans de nombreuses espèces végétales. La mangiférine présente diverses activités pharmacologiques. L’acylation régiosélective de la mangiférine peut être catalysée très efficacement par la lipase sous ultrasons. Par rapport aux méthodes conventionnelles, la catalyse assistée par ultrasons se distingue par les avantages d’un temps de réaction plus court et de rendements plus élevés. Les conditions optimales pour l’acylation par ultrasons de la mangiférine ont été trouvées comme suit :
lipase : LCP, donneur d’acyle : acétate de vinyle ; solvant de réaction : DMSO, température de réaction : 45 °C, puissance ultrasonique : 200W ; Rapport substrat : donneur d’acyle/mangiférine 6/1, charge enzymatique : 6 mg/ml
Le rendement d’acylation régiosélective a atteint 84 %.
Recommandation de l’appareil :
UP200St ou UP200Ht
Référence/ Document de recherche :
cp. : Wang, Z. ; Wang, R. ; Tian, J. ; Zhao, B ; Wei, X.F. ; Su, Y.L. ; Li, C.Y. ; Cao, S.G. ; Wang, L. (2010) : L’effet des ultrasons sur l’acylation régiosélective de la mangiférine catalysée par la lipase dans les solvants non aqueux. J. Asian Nat Prod. Res. 12/1, 2010. 56-63.
Extraction de molécules
Protocole d’extraction pour l’extraction du gypse, de la rhéolite, du basalte, de la cendre d’Edfell et du verre d’obsidienne :
Un échantillon de 1 g de régolithe ou de roche concassée est soumis à une extraction liquide sous irradiation ultrasonique pour extraire et solubiliser les molécules cibles. Par conséquent, 3 ml de MeOH P80 ont été ajoutés à un échantillon analogique de 1 g dans un tube à essai en verre et soniqués pendant 20 minutes avec un appareil de type sonde à ultrasons UP50H réglé à 40 % d’amplitude. Le mélange a été laissé reposer pendant 10 minutes, et le surnageant trouble qui s’était formé au-dessus de l’échantillon analogue sédimenté a été transvasé dans des tubes à centrifuger de 1,5 ml. Pour minimiser la perte de composants extraits par adsorption sur les surfaces des tubes à centrifuger en polymère hydrophobe, les tubes ont d’abord été bloqués avec 0,5 % (p/v) de BSA dans 100 mM HEPES pH 7,4. Les surnageants ont été clarifiés par centrifugation à 17000 G pendant 10 minutes et stockés à 2 – 8°C dans des flacons en verre jusqu’à ce qu’ils soient testés dans le cadre de l’immunoessai.
Recommandation de l’appareil :
UP50H
Référence/ Document de recherche :
Rix, C.(2012) : Détection de la vie sur Mars et de la puce de marqueur de vie : tests d’anticorps pour la détection de molécules organiques dans des extraits liquides d’échantillons martiens. Thèse de doctorat, Université de Cranfield, 2012.
Granules de foie de souris
Les pastilles ont été lavées et soniquées pendant 5 minutes avec 0,5 mL de LB2 supplémentaire, puis centrifugées à 12 000 g pendant 20 minutes supplémentaires, et les deux fractions de surnageant résultantes ont été recueillies. Enfin, les pastilles ont été dissoutes avec 0,5 mL de tampon contenant 40 mM de tris base, 5 M d’urée, 2 M de thiourée, 4 % de CHAPS, 100 mM de DTT, 0,5 % (v/v) de biolyte 3-10 (LB3), puis ont été soniquées et centrifugées à 12 000 g pendant 20 min.
Recommandation de l’appareil :
UP200S; pendant 5 min.
Référence/ Document de recherche :
Gazzana et al. (2009) : Une mise à jour sur le protéome hépatique de souris.
Suspension hépatique de souris
Homogénéisation de l’échantillon pour produire du lysat cellulaire.
Recommandation de l’appareil :
UP200S; pendant 3 x 20 sec.
Référence/ Document de recherche :
Gazzana et al. (2009) : Une mise à jour sur le protéome hépatique de souris.
Penicillium digitatum
Inactivation par ultrasons de Penicillium digitatum (un phytopathogène) dans le milieu de culture de Sabouraud.
Recommandation de l’appareil :
UP200St
Référence/ Document de recherche :
López-Malo, A. ; Palou, E. ; Jiménez-Fernández, M. ; Alzamora, S. M. ; Guerrero, S. (2005) : Inactivation fongique multifactorielle combinant thermosonication et antimicrobiens. J. Food Eng. 67/ 2005. p. 87 à 93.
Phycocyanine de Spirulina platensis (Arthrospira platensis)
Extraction de la phycocyanine à partir de cellules de Spirulina platensis (Arthrospira platensis).
Recommandation de l’appareil :
UP400S
Cellules et tissus végétaux
30 % des cellules végétales emballées (P/V) et de l’eau distillée sont perturbées par la sonication pendant 1 à 15 min ; Désintégration des tissus végétaux : 1 g de tissu séché en suspension dans de l’alcool se désintègre lors d’une sonication d’environ 5 min.
Recommandation de l’appareil :
UP100H
Plaquettes
Préparation du lysat de plaquettes : Interruption en 1 à 5 min.
Recommandation de l’appareil :
UP200Ht
Pleurotus tuberregium
Extraction de polysaccharides à partir du champignon comestible Pleurotus tuberregium
Recommandation de l’appareil :
UP400S
Poly(acide lactique-co-glycolique) (PLGA)
Préparation de poly(acide lactique-co-glycolique) (PLGA) chargé en albumine sérique bovine (BSA) par sonication en 40 sec.
Recommandation de l’appareil :
Dmini; pendant 40sec.
Référence/ Document de recherche :
Freitas et al. (2005) : Émulsification par ultrasons à flux continu combinée à un micromélange statique pour la production aseptique de microsphères par extraction par solvant.
Polyphénols de la pomme
Extraction par ultrasons des polyphénols de la pomme. Solvant : aqueux. Augmentation du rendement de 6 % ; intensité de sonication : 20-75Ws/ml ; température du processus : chauffé à 80 °C.
Recommandation de l’appareil :
UIP2000hd
Référence/ Document de recherche :
Vilkhu, K. ; Manassé, R. ; Mawson, R. ; Ashokkumar, M. (2011) : Récupération et modification par ultrasons des ingrédients alimentaires. Dans : Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011) : Technologies à ultrasons pour l’alimentation et la biotransformation. New York : Springer, 2011. p. 345 à 368.
Polyphénols du thé noir
Extraction par ultrasons des polyphénols du thé noir. Solvant : aqueux. Augmentation du rendement de 6 à 18 % ; intensité de sonication : 8-10Ws/ml ; pression ambiante, température du processus : chauffé à 90 °C.
Recommandation de l’appareil :
UIP2000hd
Référence/ Document de recherche :
Vilkhu, K. ; Manassé, R. ; Mawson, R. ; Ashokkumar, M. (2011) : Récupération et modification par ultrasons des ingrédients alimentaires. Dans : Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011) : Technologies à ultrasons pour l’alimentation et la biotransformation. New York : Springer, 2011. p. 345 à 368.
Polyphénols du marc de raisin rouge
Extraction par ultrasons des polyphénols du marc de raisin rouge. Solvant : aqueux. Augmentation du rendement de 11 à 35 % ; intensité de sonication : 20-75Ws/ml ; pression ambiante.
Recommandation de l’appareil :
UIP2000hd
Référence/ Document de recherche :
Vilkhu, K. ; Manassé, R. ; Mawson, R. ; Ashokkumar, M. (2011) : Récupération et modification par ultrasons des ingrédients alimentaires. Dans : Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011) : Technologies à ultrasons pour l’alimentation et la biotransformation. New York : Springer, 2011. p. 345 à 368.
Polyphénols, acides aminés et caféine issus du thé vert
Extraction des composés actifs du thé vert dans l’eau
Recommandation de l’appareil :
UP400S
Porc : Saumurage des longes de porc
Pour le saumurage assisté par ultrasons, les longes de porc (Longissimus dorsi) ont été immergées dans de la saumure de chlorure de sodium (40 g L−1) et traitées à 5 °C par ultrasons à basse fréquence (20 kHz) à faible intensité (2–4 W/cm−2). L’effet de la salaison assistée par ultrasons sur la microstructure du tissu porcin, la dénaturation des protéines, la capacité de rétention d’eau (WBC), la capacité de rétention d’eau (WHC), le coefficient de diffusion du chlorure de sodium (D) et le profil de texture de la viande (TPA) a été étudié. Les résultats ont montré que le traitement par ultrasons provoquait des changements microstructurels favorables dans les tissus de la viande. La capacité de rétention d’eau et les propriétés de texture ont été améliorées par le traitement par ultrasons par rapport aux échantillons roulés et saumurés statiques. Cependant, ces effets positifs dépendaient fortement de l’intensité des ultrasons. Des intensités plus élevées et/ou des temps de traitement plus longs ont provoqué une dénaturation des protéines. Le modèle à coefficient de diffusion constant a permis de décrire précisément la cinétique de diffusion du NaCl pendant le saumurage. Le traitement par ultrasons a considérablement amélioré la diffusion du sel par rapport aux échantillons saumurés dans des conditions statiques et le coefficient de diffusion a augmenté de façon exponentielle avec l’augmentation de l’intensité des ultrasons.
Recommandation de l’appareil :
UP200Ht avec sonotrode S26d40
Référence/ Document de recherche :
Siro, I. ; Ven, Cs. ; Balla, Cs. ; Jonas, G. ; Zeke, I. ; Friedrich, L. (2009) : Application d’une technique de salaison assistée par ultrasons pour améliorer la diffusion du chlorure de sodium dans la viande porcine. Journal de l’ingénierie alimentaire 91/2, 2009. 353–362.
Porphyra yezoensis
Dégradation par ultrasons des polysaccharides de Porphyra yezoensis : 50 ml de solution de polysaccarides de Porphyra yezoensis (poids sec) de 1,0 g/100 ml ont été soniqués pendant 4 heures avec un UP400S.
Recommandation de l’appareil :
UP400S; ultrasons pulsés (cycles : 2 sec on / 2 sec off) à 20°C.
Poudres
Broyage, désagglomération et dispersion à des particules de petite taille relativement uniforme.
Recommandation de l’appareil :
UP200St
Os de rat
Foie de rat
Perturbation et homogénéisation tissulaire avec un UP400S.
Recommandation de l’appareil :
UP400S; 3 fois pendant 30 secondes ; sur la glace.
Référence/ Document de recherche :
Oh et al. (2003) : Le gène de l’acétyl-CoA carboxylase est régulé par la protéine 1 de liaison aux éléments régulateurs stérols dans le foie. Journal de chimie biologique 2003.
Peau de rat
Rawolfia Serpentina
Extraction de l’alcaloïde réserpine.
Recommandation de l’appareil :
UP100H
Rébaudioside A
Des échantillons de 10 g de feuilles de stévia sèches et moulues ont été extraits dans 100 ml d’eau sous agitation continue (avec un agitateur magnétique). La valeur du pH a été contrôlée avec 0,01 M de phosphate de sodium pH 7. L’échantillon a été placé dans un bécher en verre de 150 mL et soniqué à l’aide d’un ultrasoniseur de type sonde (UIP500hd, 20 kHz, 500 W). L’extrémité de la sonotrode a été immergée à environ 1,5 cm dans la boue des feuilles de stévia. L’appareil à ultrasons a été réglé pour une puissance de sortie de 350W. Un traitement de sonication légère de 350 W pendant 5 à 10 minutes à une température de processus constante de 30 °C a donné un rendement en rébaudioside A de 30 à 34 g par échantillon de 100 g. Après sonication, la solution d’extrait a été centrifugée et filtrée à travers une membrane microporeuse de 0,45 μm ; le filtrat a été prélevé pour l’analyse de la teneur totale en rébaudioside A. Le rendement d’extraction de la teneur totale en rébaudioside A a été analysé par HPLC.
L’extraction assistée par ultrasons sans solvant a permis d’obtenir un rendement élevé de rébaudioside A par rapport aux méthodes d’extraction traditionnelles telles que l’extraction à la chaleur ou la macération.
Recommandation de l’appareil :
UIP500hd
Amidon de riz
Perturbation, isolement de l’amidon et rupture des liaisons non covalentes entre les protéines et l’amidon dans une suspension de farine de riz (33 %) chez 20 – Durée : 40 min.
Recommandation de l’appareil :
UP500hd; 20 – Durée : 40 min.
Rotifers
Désorganisation cellulaire du mésozooplancton : par sonication dans les conditions suivantes de quatre débits (200, 400, 520 et 800lh-1) et de quatre amplitudes (25, 50, 75 et 100 %) un taux de destruction compris entre 58 et 85 % a été atteint.
Recommandation de l’appareil :
JUSQU’EN 2000 avec cellule d’écoulement
Référence/ Document de recherche :
Viitaslo et al. (2005) : L’ozone, la lumière ultraviolette, les ultrasons et le peroxyde d’hydrogène comme traitements de l’eau de ballast – Expériences avec du mésozooplancton dans de l’eau saumâtre faiblement salée. Journal de l’ingénierie environnementale marine, 8(1), 35-55.
S. fragilis
libération de galactokinease en 4 min.
Recommandation de l’appareil :
UP200St
Saccharomyces cerevisiae
Perturbation
Recommandation de l’appareil :
UP400S
Référence/ Document de recherche :
Guerrero, S, ; López-Malo, A. ; Alzamora, S. M. (2001) : Effet des ultrasons sur la survie de Saccharomyces cerevisiae : influence de la température, du pH et de l’amplitude. Innov. Food Sci. Emerg Technol. 2/2001. p. 31 à 39.
Saccharomyces cerevisiae
Inactivation par ultrasons de Saccharomyces cerevisiae dans le milieu de croissance de Sabouraud et dans une solution saline.
Recommandation de l’appareil :
UP400S
Référence/ Document de recherche :
Yap, A. ; Jiranek, V. ; Grbin, P. ; Barnes, M. ; Bates, D. (2007) : Études sur l’application d’ultrasons de haute puissance pour le nettoyage et la désinfection des barils et des planches. Austr. Industrie du vin néo-zélandaise. J. 22(3)/ 2007. p. 96 à 104.
Safran, crocus sativus
Extraction de composés actifs (arômes et colorants).
Cliquez ici pour en savoir plus sur l’extraction du safran !
Recommandation de l’appareil :
UP50H
Référence/ Document de recherche :
Kadkhodaee et al. (2007) : Extraction par ultrasons de composés actifs du safran. Acta Hortic. 739, 2007. 417-425.
Salmonella Senftenberg 775W Gr-
Inactivation par ultrasons de Salmonella Senftenberg 775W Gr- dans un tampon de citrate-phosphate McIlvaine ou un bouillon nutritif.
Recommandation de l’appareil :
UP100H
Référence/ Document de recherche :
Álvarez, I. ; Manas, P. ; Virto, R. ; Condón, S. (2006) : Inactivation de Salmonella Senftenberg 775W par ondes ultrasonores sous pression lors de différentes activités de l’eau. Int. J. Microbiol. alimentaire. 108/2006, p. 218 à 225.
Salvia miltiorrhiza à l’élastique
Extraction de composés biologiques actifs : Danshensu de sodium et quatre tanshinones (dihydrotanshione I, tanshinone I, cryptotanshinone et tanshinone IIA).
Recommandation de l’appareil :
UP100H
Salvia Officinalis
Extraction des composés actifs de Salvia Officinalis (sauge) en moins de 2h.
Recommandation de l’appareil :
UP50H
Sérum
Foies, poumons et sang kystiques de mouton (antigènes d’Echinococcus granulosus)
Foies kystiques, poumons et sang positif de mouton (antigènes d’Echinococcus granulosus chez les agneaux) : L’échantillon a ensuite été soniqué pendant 2 × 15 secondes sur de la glace jusqu’à ce qu’aucun protoscolice intact ne soit visible.
Recommandation de l’appareil :
UP200S; 2 x 15 secondes
Référence/ Document de recherche :
Tabar et al. (2009) : Réponse anticorps contre le liquide hydatide, le protoscolex et le corps entier des antigènes d’Echinococcus granulosus chez les agneaux. Journal de la recherche vétérinaire, volume 10, numéro 3 ; 2009. 283-288.
Trioléate sorbitant, éthanol (comme solvant) et poudre Bi-2212
Désaggloméré une boue contenant le dispersant trioléate de sorbitant, de l’éthanol (comme solvant) et de la poudre de Bi-2212.
Recommandation de l’appareil :
UP200S; pendant 3 min.
Référence/ Document de recherche :
Mora et al. (2009) : Fabrication de revêtements supraconducteurs sur des carreaux de céramique structurelle.
Isoflavones de soja
Extraction par ultrasons des isoflavones de soja dans l’eau et le solvant. Rendement accru jusqu’à 15 % de l’efficacité d’extraction.
Recommandation de l’appareil :
UP200St
Référence/ Document de recherche :
Rostagno et al. (2003), référencé par Vilkhu, K. ; Manassé, R. ; Mawson, R. ; Ashokkumar, M. (2011) : Récupération et modification par ultrasons des ingrédients alimentaires. Dans : Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011) : Technologies à ultrasons pour l’alimentation et la biotransformation. New York : Springer, 2011. p. 345 à 368.
Protéine de soja
Extraction par ultrasons de protéines de soja dans l’eau et les alcalis (hydroxyde de sodium). Augmentation du rendement de 53 %. La sonication en ligne s’est avérée plus efficace en tant qu’extraction par lots (la sonication en ligne a donné un rendement supérieur de 23 % à celui de la sonication par lots).
Recommandation de l’appareil :
UIP1000hd pour discontinu/bécher et avec réacteur à cellule d’écoulement pour la sonication en ligne.
Référence/ Document de recherche :
Moulton et Wang (1982), référencé par Vilkhu, K. ; Manassé, R. ; Mawson, R. ; Ashokkumar, M. (2011) : Récupération et modification par ultrasons des ingrédients alimentaires. Dans : Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011) : Technologies à ultrasons pour l’alimentation et la biotransformation. New York : Springer, 2011. p. 345 à 368.
Têtes de spermatozoïdes (humains)
Queues de spermatozoïdes (humains)
Stevia rebaudiana Bert.
L’extraction par ultrasons du glycoside de stévioside à partir d’échantillons de 10 g de feuilles sèches de Stevia rebaudiana avec quatre tailles de particules (0,315 mm, 2 mm, 6,3 mm et feuilles sèches broyées) a été mélangée avec différents solvants : eau distillée et mélanges eau/éthanol (55 % et 70 %) avec différents rapports poids de l’échantillon/volume de solvant : 1/10, 1/8, 1/5 (p/v) puis exposés à des ultrasons à température ambiante. Temps de sonication : < 5 min.
Recommandation de l’appareil :
UP200St
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Ultrasons haute performance pour toutes les tailles
Les perturbateurs cellulaires et les homogénéisateurs de tissus Hielscher Ultrasonics sont disponibles dans n’importe quelle taille et n’importe quel volume. Que vous deviez sonicer des échantillons de petite taille, des échantillons de masse tels que des plaques de 96 puits, des volumes de taille moyenne ou des chargements de camions par heure, notre gamme offre l’ultrasoniseur idéal pour votre application. Les homogénéisateurs à ultrasons compacts et portatifs sont optimaux pour le laboratoire et la recherche, tandis que notre série industrielle couvre tout ce qui se situe entre 0,5 kW et 16 kW par processeur à ultrasons. Avec la possibilité d’être installé en grappes, les ultrasonisateurs Hielscher peuvent traiter pratiquement n’importe quel volume. La robustesse de l’équipement à ultrasons de Hielscher permet un fonctionnement 24 heures sur 24 et 7 jours sur 7 dans des environnements lourds et exigeants.
Le logiciel sophistiqué et intelligent permet un contrôle maximal du processus et un confort d’utilisation. Toutes les données de sonication sont automatiquement enregistrées sur une carte SD intégrée. D’autres fonctionnalités intelligentes incluent le préréglage et l’enregistrement des paramètres de sonication, la connexion LAN et le contrôle à distance du navigateur.
Le tableau ci-dessous vous donne une indication de la capacité de traitement approximative de nos sonicateurs de laboratoire pour l’homogénéisation des tissus et d’autres tâches de préparation d’échantillons :
| Dispositifs recommandés | Volume du lot | Débit |
|---|---|---|
| UIP400MTP Sonicateur pour plaques de 96 puits | plaques multi-puits / microtitres | n.d. |
| Cornet à ultrasons | CupHorn pour flacons ou béchers | n.d. |
| GDmini2 | réacteur ultrasonique à micro-flux | n.d. |
| VialTweeter | 00,5 à 1,5 ml | n.d. |
| UP100H | 1 à 500mL | 10 à 200mL/min |
| UP200Ht, UP200St | 10 à 1000mL | 20 à 200mL/min |
| UP400St | 10 à 2000mL | 20 à 400mL/min |
| Tamiseuse à ultrasons | n.d. | n.d. |
Ultrasons UP200Ht avec micro-pointe de 2mm S26d2 pour la sonication de petits échantillons
