Uudet mikrolevyjen ultraäänilaitteet sitkeiden biofilmien hajottamiseen
, Kathrin Hielscher, julkaistu kategoriassa Hielscher-uutiset
Biofilmit – pinnoille kiinnittyvät tiiviit mikrobiyhteisöt – kuuluvat mikrobiologian ja kliinisen diagnostiikan vaikeimpiin haasteisiin. Uusi mikrolevyjen ultraäänilaite UIP400MTP helpottaa suuren näytemäärän valmistelua. Vertaisarvioitujen tutkimusten analyysit osoittavat, että suorituskykyisistä ultraäänijärjestelmistä, kuten Hielscherin monikuoppalevyjen ultraäänilaitteista, on tulossa välttämättömiä laboratoriotyökaluja näiden sitkeiden rakenteiden irrottamiseen MBEC™-levyistä. Tämä mahdollistaa tarkemmat antimikrobiset testit ja nopeammat tutkimustyönkulut.
Biofilmin irrottaminen ultraäänikäsittelyllä
Tutkijat käyttävät yhä enemmän monikuoppalevyjen ultraäänikäsittelyä, sillä biofilmit voivat olla satoja kertoja vastustuskykyisempiä antibiooteille kuin vapaasti kelluvat planktoniset bakteerit. Tämä käy ilmi kahdesta merkittävästä tutkimuksesta, jotka käsittelevät Staphylococcus aureus -bakteerin, koagulaasinegatiivisten stafylokokkien ja Staphylococcus saprophyticus -bakteerin biofilmejä. Biofilmimatriisiin kiinnittyneillä mikrobeilla pienimmät kasvua estävät pitoisuudet (MIC) ja pienimmät bakteereja tappavat pitoisuudet (MBC) ovat huomattavasti suurentuneet ja ylittävät usein kliinisesti saavutettavat lääkeainepitoisuudet.
Tehokas testaus alkaa kuitenkin biofilmin solujen tehokkaasta ja luotettavasta irrottamisesta – ja juuri tässä UIP400MTP erottuu edukseen.
Kiinnittyneiden soluviljelmien irrottaminen mistä tahansa vakiomallisesta mikrolevystä: suurten näytemäärien valmistelu ultraäänilaitteella UIP400MTP
Biofilmit: piilevä suoja antibiootteja vastaan
Molemmissa viitatuissa tutkimuksissa tutkijat havaitsivat antimikrobisen resistenssin huomattavaa lisääntymistä, kun bakteereja testattiin biofilmimuodossa:
MIC-arvot nousivat 2–32-kertaisiksi ja toisinaan vielä suuremmiksi planktonisiin soluihin verrattuna.
Tietyt isolaatit muuttuivat antibiooteille herkistä täysin resistenteiksi biofilmimuotoon siirryttyään.
Joidenkin biofilmien tappamiseen tarvittavat MBC-arvot ylittivät suurimmat testatut pitoisuudet, mikä korostaa niiden äärimmäistä sietokykyä.
Nämä havainnot korostavat, miksi biofilmien hajottaminen on ratkaisevan tärkeää: lääkeaineresistenssin tarkka profilointi edellyttää solujen vapauttamista suojaavasta matriisista, jotta niitä voidaan testata yksittäin.
Ratkaisu: mikrolevyjen ultraäänilaite UIP400MTP
Molemmissa tutkimuksissa käytettiin Hielscherin monikuoppalevyjen ultraäänilaitetta UIP250MTP erityisissä MBEC™-tappikansilaitteissa kasvatettujen biofilmien irrottamiseen. Monikuoppalevyn 5 minuutin ultraäänikäsittely irrotti biofilmin solut onnistuneesti tuoreeseen kasvatusväliaineeseen, minkä ansiosta tutkijat pystyivät mittaamaan MICB- ja MBCB-arvot erittäin toistettavasti.
Tämä menetelmä on laajalti käytössä, koska:
- Se käsittelee kaikki kuopat samanaikaisesti ja tasaisesti, mikä on välttämätöntä vertailevassa antimikrobisessa testauksessa.
- Akustinen kavitaatio hajottaa solunulkoisen matriisin tehokkaasti tuhoamatta soluja.
- Se toimii saumattomasti biofilmien resistenssitutkimuksessa käytettävien MBEC-tappikansialustojen kanssa.
Keskeiset ominaisuudet, jotka vakuuttavat tutkijat välittömästi
- 400 watin ultraääniteho (20 kHz) biofilmin nopeaan ja perusteelliseen irrottamiseen
- Parametrien täydellinen hallinta, mukaan lukien syötetty energia (Ws/mL), amplitudi, lämpötila ja aika
- Sisäänrakennettu lämmönvaihdin ja kiertopumppu pitävät levyt viileinä ultraäänikäsittelyn aikana
- Ohjelmoitavat toimintatilat toistettaviin, automatisoituihin työnkulkuihin
- Tasainen ultraäänikäsittely koko levyn alueella. Katso alla oleva video!
Tasaisuustesti vahvistaa visuaalisesti homogeenisen kavitaatiokentän, jota biofilmin standardoitu hajottaminen edellyttää – sen saavuttaminen on tunnettu haaste pienempitehoisissa ultraäänikylvyissä.
Monikuoppalevyjen ultraäänilaite UIP400MTP tehokkaisiin MBEC-määrityksiin
Miksi tämä on tärkeää sairaaloille, laboratorioille ja antibioottien kehitykselle
Biofilmeihin liittyvät infektiot – virtsatieinfektioista katetreihin liittyviin verenkiertoinfektioihin – ovat tunnetusti vaikeahoitoisia. Tutkimukset osoittavat:
- Tavanomainen antibioottitestaus planktonisilla soluilla aliarvioi todellisissa olosuhteissa esiintyvää resistenssiä.
- Laadukas ultraäänikäsittely on välttämätöntä biofilmeistä peräisin olevien näytteiden valmistamiseksi tarkkaa analyysiä varten.
- UIP400MTP:n kaltaiset työkalut auttavat kuromaan umpeen laboratoriotestauksen ja kliinisen todellisuuden välistä kuilua.
Antimikrobisen resistenssin lisääntyessä edelleen teknologiat, jotka parantavat biofilmitutkimuksen toistettavuutta ja luotettavuutta, voivat olla ratkaisevassa asemassa uusien hoitojen kehittämisessä.
Liitteenä olevista tutkimuksista voidaan tehdä yksi kiistaton johtopäätös: biofilmejä muodostavat bakteerit edellyttävät uusia testausmenetelmiä, ja monikuoppalevyjen ultraäänikäsittelystä – erityisesti Hielscher UIP400MTP:n kaltaisilla erittäin tehokkailla, ultraääntä tasaisesti jakavilla järjestelmillä – on nopeasti tulossa kultainen standardi biofilmien irrottamiseen MBEC-levyistä.
Mikrobiologian laboratorioille, lääkekehittäjille ja kliinisille tutkijoille nämä laitteet eivät enää pelkästään helpota työtä – niistä on tulossa välttämättömiä työkaluja biofilmimatriisiin kiinnittyneiden taudinaiheuttajien todellisen antibioottiresistenssin tarkkaan mittaamiseen.
Löydät tietoa monikuoppalevyjen ultraäänilaitteesta UIP400MTP täältä!
Lisäviitteet
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
- Lauren E. Cruchley-Fuge, Martin R. Jones, Ossama Edbali, Gavin R. Lloyd, Ralf J. M. Weber, Andrew D. Southam, Mark R. Viant (2024): Automated extraction of adherent cell lines from 24-well and 96-well plates for multi-omics analysis using the Hielscher UIP400MTP sonicator and Beckman Coulter i7 liquid handling workstation. Metabomeeting 2024, University of Liverpool, 26-28th November 2024.

