Ultraäänellä valmistetut puskuriliuokset

Lyysipuskurit voidaan valmistaa tehokkaasti ja nopeasti ultraäänikudoshomogenisaattoreilla. Koska ultraääniastiat ovat unelmatyökalu sekoittamiseen, liuottamiseen ja dispergointiin, ne mahdollistavat lyysipuskureiden luotettavan ja käyttäjäystävällisen valmistuksen.

Lyysipuskureiden ultraäänivalmistus

Ultraäänikudoshomogenisaattorit ovat yleinen työkalu solujen häiriöihin, lyysiin ja uuttamiseen, joten ne ovat saatavilla useimmissa laboratorioissa. Toissijainen sovellus koetintyyppisille ultraäänilaitteille on lyysipuskureiden valmistus.

Lyysipuskuri on liuos, jota käytetään murtamaan (lyse) soluja ja vapauttamaan niiden sisältö loppupään analyysiä varten. Lyysipuskurin spesifinen koostumus voi vaihdella lysoitavan solutyypin ja loppupään sovelluksen mukaan. Tyypillinen lyysipuskuri sisältää kuitenkin komponentteja, kuten pesuaineita, suoloja ja proteaasinestäjiä. Puskurointisuoloja (esim. Tris-HCl) ja ionisuoloja (esim. NaCl) käytetään yleisesti lysaatin pH:n ja osmolaarisuuden säätelyyn.
Lyysipuskurin muodostamiseksi komponentit sekoitetaan keskenään sopivissa pitoisuuksissa ja pH: ssa. Seosta sekoitetaan tai ravistetaan yleensä, kunnes komponentit ovat liuenneet ja liuos on homogeeninen.
Ultraäänihomogenisointi on menetelmä, jota voidaan käyttää hyvän lyysipuskurin tekemiseen parantamalla komponenttien sekoittamista ja liukenemista. Tässä menetelmässä ultraääniaallot – normaalisti alueella 20–30 kHz – levitetään seokseen, joka luo kavitaatiokuplia, jotka romahtavat ja tuottavat voimakasta paikallista energiaa, mikä johtaa komponenttien mekaaniseen leikkaamiseen ja sekoittumiseen.
Ultraäänihomogenointiprosessi voi auttaa hajottamaan komponenttien kaikki kokkareet tai aggregaatit ja varmistamaan, että liuos sekoitetaan tasaisesti. Näin ollen tällainen parannettu lyysipuskuri voi johtaa tehokkaampaan solujen hajoamiseen ja uutetun materiaalin suurempiin saantoihin. Lisäksi ultraäänihomogenisointi voi vähentää lyysipuskurin valmistamiseen tarvittavaa aikaa verrattuna perinteisiin sekoitus- tai ravistelumenetelmiin.
Kaiken kaikkiaan ultraäänihomogenisointi on tehokas työkalu lyysipuskurivalmisteen laadun ja tehokkuuden parantamiseksi.

Protokolla ultraäänilyysipuskurin valmistamiseksi

Tämä on yleinen protokolla lyysipuskurin valmistamiseksi koetintyyppisellä ultraäänilaitteella:
 
Materiaalit:

• Valitsemasi pesuaine(et) (esim. Triton X-100, SDS, CHAPS)
• Valittu suola (suolat) (esim. NaCl, KCl)
• Proteaasi-inhibiittorit (esim. PMSF, aprotiniini, leupeptiini)
• ultraäänilaite
• Sekoitin
• Deionisoitu vesi
• pH-mittari tai pH-liuskat

 
 
Vaiheittaiset ohjeet:

1. Määritä lyysipuskurin koostumus makaamiesi solujen tai kudosten ja lysaattia käyttävien loppupään sovellusten perusteella. Valmistetaan pesuaineiden, suolojen ja proteaasi-inhibiittoreiden kantaliuokset haluttuina pitoisuuksina.
2. Lisätään pesuaineiden, suolojen ja proteaasinestäjien kantaliuokset dekantterilasiin tai pulloon.
3. Lisää deionisoitua vettä, jotta tilavuus saadaan haluttuun puskurimäärään.
4. Sekoita komponentit sekoittimella esiseoksen saamiseksi.
5. Puskurin pH mitataan pH-mittarilla tai pH-liuskoilla ja säädetään pH tarpeen mukaan pienillä määrillä happoa tai emästä.
6. Käytä koetintyyppistä ultraäänilaitetta homogenisoimaan esiseosliuos niin, että saadaan erittäin homogeeninen liuos. Siksi sonikoi liuosta muutaman sekunnin ajan, kunnes liuos sekoitetaan perusteellisesti ja kaikki kokkareet tai aggregaatit hajoavat. Sonikoinnin kesto ja teho voidaan optimoida käytetyn spesifisen lyysipuskurin ja ultraäänilaitteen perusteella.
7. Ultrasonicationin jälkeen mittaa puskurin pH uudelleen ja säädä tarvittaessa.
8. Suodata puskuri 0,2 mikronin suodattimen läpi poistaaksesi kaikki roskat tai aggregaatit, jotka ovat saattaneet muodostua sonikoinnin aikana.
9. Lyysipuskuri on nyt käyttövalmis.

 
Huomautus: Lyysipuskurin tarkka koostumus ja pH voivat vaihdella riippuen lysoitettavista soluista tai kudoksista ja loppupään sovelluksista. Yllä oleva protokolla on yleinen ohje, ja se on ehkä optimoitava tietyille sovelluksille.
 
Ultraäänihomogenisaattoreita käytetään yleisesti solujen häiriöihin ja solunsisäisten molekyylien uuttamiseen. Siksi monet lyysisovellukset käyttävät koetintyyppistä sonikaatiota paitsi lyysipuskurin valmistukseen myös mekaanisen solun häiriöön ja uuttamiseen.
Tämä tekee ultraäänikudoshomogenisaattoreista monipuolisen työkalun laboratorioille ja selittää ultraäänilaitteiden laajan käytön mikrobiologiassa, biotekniikassa ja biotieteissä.

ultraäänilaboratorion homogenisaattorit

Hielscher Ultrasonics valmistaa ja toimittaa ultraäänihomogenisaattoreita ja koettimia (sonotrodeja) eri teholuokilla ja näytemäärillä. Näin voimme tarjota sinulle sopivimman ultraäänihäiritsijän näytteen valmisteluun. Keskitymme korkeimpaan laatuun, erinomaiseen käyttömukavuuteen ja luotettaviin sonikaatiotuloksiin. Kaikissa digitaalisissa ultraäänilaitteissa on älykäs ohjelmisto, sonikaatioprotokollien ohjelmointi ja esiasetus, selaimen kaukosäädin, lämpötilan säätö, näytteen valaistus sekä automaattinen tietojen tallennus sisäänrakennetulle SD-kortille.

Suunnittelu, valmistus ja konsultointi – Laatu valmistettu Saksassa

Hielscher-ultraääniastiat ovat tunnettuja korkeimmista laatu- ja suunnittelustandardeistaan. Kestävyys ja helppokäyttöisyys mahdollistavat ultraäänilaitteidemme sujuvan integroinnin teollisuuslaitoksiin. Hielscher-ultraäänilaitteet käsittelevät helposti karkeita olosuhteita ja vaativia ympäristöjä.

Hielscher Ultrasonics on ISO-sertifioitu yritys ja painottaa erityisesti korkean suorituskyvyn ultraäänilaitteita, joissa on huipputeknologia ja käyttäjäystävällisyys. Tietenkin, Hielscher-ultraäänilaitteet ovat CE-yhteensopivia ja täyttävät UL: n, CSA: n ja RoHs: n vaatimukset.

Alla oleva taulukko antaa sinulle yleiskuvan erilaisista laboratorioultraäänilaitteistamme: