Vasta-aineiden eluutio sonikaatiolla käyttämällä korkean suorituskyvyn sonikaatiota

Affiniteettikromatografia on tehokas tekniikka proteiinien puhdistamiseen, joka vaatii Ultraäänellä avustettu epäspesifinen eluutio on luotettava näytteenvalmistustekniikka vasta-aineiden saamiseksi affiniteettikromatografiasta. Affiniteettimatriiseihin sitoutuneiden kohdevasta-aineiden tehokas ja toistettavissa oleva eluutio paranee merkittävästi sonikaatiolla. Korkean suorituskyvyn levy-sonikaattorin UIP400MTP soveltuu optimaalisesti eluoimaan suuria näytemääriä 96-kuoppa-, mikrotiitteri- ja monikuoppalevyissä ja helpottaa vasta-aineiden talteenottoa affiniteettikromatografiassa.

Miten sonikaatio helpottaa eluutiota?

Ultraäänellä tehostetun epäspesifisen eluution avulla laboratoriotyöntekijät ja tutkijat voivat tehokkaasti ottaa talteen puhdistettuja vasta-aineita affiniteettikromatografiakolonneista. Näitä puhdistettuja vasta-aineita käytetään loppupään sovelluksissa eri aloilla, kuten immunologiassa, biotekniikassa ja lääketieteellisessä diagnostiikassa.

Eluutio on näytteen valmistusvaihe, jota käytetään yleisesti affiniteettikromatografiassa: Affiniteettikromatografia hyödyntää kohdemolekyylin (kuten vasta-aineen) ja kromatografiamatriisiin immobilisoidun ligandin välisiä erittäin spesifisiä vuorovaikutuksia. Tämä mahdollistaa kohdemolekyylin selektiivisen puhdistamisen monimutkaisesta seoksesta käyttämällä molekyylien spesifistä sitoutumisaffiniteettia, esimerkiksi vasta-aineita.
Vasta-aineiden spesifinen sitoutuminen: Vasta-aineet puhdistetaan usein affiniteettikromatografialla, jossa ne sitoutuvat selektiivisesti kromatografiahartsiin immobilisoituun ligandiin. Tämä voi olla antigeeni, proteiini A/G tai mikä tahansa muu molekyyli, joka on vuorovaikutuksessa erityisesti kiinnostavan vasta-aineen kanssa.
Eluutio: Kun kohdevasta-aine on sitoutunut matriisiin, seuraava vaihe sisältää sitoutuneen vasta-aineen eluoinnin (tai pesemisen) hartsista. Tämä eluutiovaihe sisältää tyypillisesti vasta-aineen ja ligandin välisen spesifisen sitoutumisen häiritsemisen. Tämä vaihe voidaan toteuttaa sonikaatiolla.
Ultraäänianturi UP50H on laboratoriohomogenisaattori, jota käytetään usein solujen häiritsijänä, dispergointiaineena ja emulgointiaineena laboratorioissa.Ultraäänellä avustettu epäspesifinen eluutio: Toisin kuin spesifiset eluutiomenetelmät, jotka häiritsevät vain vasta-aine-ligandi-vuorovaikutusta, epäspesifiset eluutiomenetelmät häiritsevät kaikkia hartsin vuorovaikutuksia, myös epäspesifisiä. Tämä voi olla hyödyllistä, kun käsitellään voimakkaasti sitoutuneita epäpuhtauksia, jotka saattavat häiritä puhdistusprosessia. Tässä tulee sonikaatio peliin! Ultraääniaaltoja käytetään kavitaatiokuplien tuottamiseen eluutiopuskurissa. Kun nämä kuplat romahtavat hartsimatriisin lähellä, ne tuottavat voimakkaita paikallisia leikkausvoimia ja mikrovirtausta. Tämä mekaaninen häiriö auttaa rikkomaan vasta-aineen ja ligandin väliset epäspesifiset vuorovaikutukset, mikä helpottaa sitoutuneen vasta-aineen eluutiota matriisista.

96-kuoppalevyt ja muut multiwell-levyt käsitellään parhaiten sonicator-UIP400MTP avulla. Tämä ultraäänijärjestelmä on ihanteellinen lyysiin, DNA: n pirstoutumiseen ja solujen liukenemisen käsittelyyn näytteissä suurella suorituskyvyllä.

Korkean suorituskyvyn sonicator UIP400MTP helpottaa vasta-aineiden ja proteiinien eluutiota

Informaatio pyyntö




Huomaa, että Tietosuojakäytäntö.


 

Tämä opetusohjelma selittää, minkä tyyppinen sonikaattori on paras näytteenvalmistustehtäviin, kuten lyysiin, solujen häiriöihin, proteiinien eristämiseen, DNA: n ja RNA: n pirstoutumiseen laboratorioissa, analyysiin ja tutkimukseen. Valitse ihanteellinen sonikaattorityyppi sovelluksellesi, näytteen määrälle, näytteen numerolle ja läpäisykyvylle. Hielscher Ultrasonicsilla on ihanteellinen ultraäänihomogenisaattori sinulle!

Kuinka löytää täydellinen sonikaattori solujen häiriöihin ja proteiinien uuttamiseen tieteessä ja analyysissä

Videon pikkukuva

 

Ultraäänieluution edut sonikaatiolla

Ultraäänieluutio tarjoaa useita etuja, erityisesti proteiinien puhdistustekniikoiden, kuten affiniteettikromatografian, yhteydessä.
Esimerkiksi sonikaatio ylittää vaihtoehtoiset menetelmät proteiinien eheyden, talteenoton, puhtauden, monipuolisuuden ja tehokkuuden kannalta. Nämä edut tekevät ultraäänieluutiosta edullisen valinnan proteiinien puhdistusprosesseissa, erityisesti sovelluksissa, joissa proteiinirakenteen ja aktiivisuuden ylläpitäminen on välttämätöntä. Lisäksi ultraäänieluutio erottuu yksinkertaisuudestaan, tehokkuudestaan, monipuolisuudestaan ja yhteensopivuudestaan monenlaisten proteiinien ja affiniteettimatriisien kanssa. Ultraääniaaltojen soveltaminen proteiini-matriisi-vuorovaikutusten häiritsemiseen, ultraäänieluutio tarjoaa lempeän ja nopean menetelmän proteiinien puhdistamiseen, mikä varmistaa korkeat talteenottoasteet ja säilyttää proteiinin eheyden loppupään sovelluksissa.

hellävaraisempi proteiinirakenteelle: Alhaisen pH:n eluutiossa käytetään happamia puskureita häiritsemään kohdeproteiinin (esim. vasta-aineiden) ja affiniteettimatriisin välistä sitoutumista. Altistuminen alhaiselle pH: lle voi kuitenkin denaturoida proteiineja, mikä voi vaarantaa niiden rakenteen ja biologisen aktiivisuuden. Sitä vastoin ultraäänieluutio perustuu ensisijaisesti mekaanisiin häiriöihin eikä kemialliseen denaturointiin, mikä tekee siitä hellävaraisemman proteiinirakenteelle. Tämä on erityisen edullista puhdistettaessa herkkiä proteiineja tai vasta-aineita, jotka ovat herkkiä pH-muutoksille.

  • Pienempi aggregoitumisriski: Matalan pH:n eluutio voi lisätä proteiinien aggregaation riskiä proteiinien avautumisen ja hydrofobisten alueiden altistumisen vuoksi. Aggregaatio voi johtaa proteiiniaktiivisuuden menetykseen ja vaikeuksiin jatkokäsittelyssä. Ultraäänieluutio minimoi vertailun riskin käyttämällä mekaanisia voimia proteiinin ja affiniteettimatriisin välisten vuorovaikutusten häiritsemiseksi muuttamatta merkittävästi proteiinin natiivia konformaatiota.
  • Parempi talteenotto ja puhtaus: Ultraäänieluutio voi saavuttaa korkeammat talteenottoasteet ja puhtaustasot verrattuna vaihtoehtoisiin eluutiomenetelmiin. Ultrasonicationin tarjoama mekaaninen häiriö vapauttaa tehokkaasti sitoutuneita proteiineja affiniteettimatriisista minimoiden samalla epäspesifiset vuorovaikutukset. Tämä johtaa kohdeproteiinin parempaan talteenottoon vähentämällä kontaminaatiota epäspesifisesti sitoutuneista molekyyleistä, mikä edistää eluoituneen fraktion suurempaa puhtautta.
  • Korkean suorituskyvyn käsittely: Hielscher Ultrasonics tarjoaa erilaisia sonikaattoreita ultraääniavusteiseen proteiinien puhdistukseen, eluutioon ja biopannointiin. Mikrotitterilevy-sonikaattori mahdollistaa UIP400MTP näytteiden massakäsittelyn 96-kuopassa ja muissa multiwell-levyissä. VialTweeter on ihanteellinen jopa 10 putken, kuten Eppendorf-injektiopullojen, vaivattomaan, samanaikaiseen sonikaatioon samoissa olosuhteissa. CupHorn on monipuolinen sonicator, joka on ihanteellinen useille putkille, pienille dekantterilasille ja muille aluksille. Ja tietysti klassiset koetintyyppiset sonikaattorit, joissa on mikrokärjet, ovat vakiintunut laboratoriotyökalu näytteen valmistukseen. Hielscher Ultrasonics -tuotevalikoimassa on ihanteellinen sonicator kokeiluasetuksiin ja näytteen kokoon.
  • Monipuolisuus ja yhteensopivuus: Ultraäänieluutio on yhteensopiva monenlaisten proteiinien ja affiniteettimatriisien kanssa, mikä tarjoaa monipuolisuutta puhdistussovelluksissa. Sitä vastoin matalan pH:n eluutio ei välttämättä sovellu tietyille proteiineille, jotka ovat herkkiä happamille olosuhteille, tai affiniteettimatriiseille, jotka ovat alttiita hajoamiselle tai huuhtoutumiselle alhaisessa pH:ssa. Ultraäänieluutio tarjoaa lempeän ja yleisesti sovellettavan vaihtoehdon, joka voidaan räätälöidä erityisiin puhdistustarpeisiin vaarantamatta proteiinin eheyttä tai matriisin vakautta.
  • Aika ja tehokkuus: Ultraäänieluutio vaatii tyypillisesti lyhyempiä eluutioaikoja verrattuna muihin eluutiomenetelmiin. Ultrasonicationin helpottama sitoutuneiden proteiinien nopea ja tehokas vapautuminen vähentää käsittelyaikaa ja lisää yleistä puhdistustehokkuutta, mikä tekee siitä houkuttelevan vaihtoehdon korkean suorituskyvyn sovelluksiin tai kun tarvitaan aikaherkkiä tuloksia.
96-kuoppainen levysonikaattori UIP400MTP solulyysiin, DNA: n uuttamiseen, DNA: n pirstoutumiseen, solujen liukenemiseen ja proteiinien puhdistamiseen.

96-kuoppainen levysonikaattori UIP400MTP multiwell-levyjen, PCR- ja ELISA-levyjen sonikointiin

 

VialTweeter ultraääniprosessori up200ST

VialTweeter-sonikaattori 10 näytteen samanaikaiseen sonikaatioon, esimerkiksi solujen häiritsemiseksi ja proteiinien uuttamiseksi

Ultraäänellä avustettu biopannointi

Biopannointi on kriittinen tekniikka vasta-aineiden puhdistuksessa, varsinkin kun on hankittava erittäin spesifisiä vasta-aineita tutkimusta tai lääketieteellistä diagnostiikkaa varten. Biopannointi on prosessi, jossa vasta-aineet eristetään vasta-aineiden seoksesta, niin sanotusta vasta-ainekirjastosta.

Miten ultraääni Biopanning toimii?

Se alkaa vasta-aineiden kirjastosta, erilaisten vasta-aineiden seoksesta. Jokaiselle vasta-aineelle on ominaista oma ainutlaatuinen muoto ja spesifisyys. Analyysiä ja hoitoja varten on eristettävä spesifiset vasta-aineet, jotka tunnistavat tietyn kohteen, kuten viruksen tai syöpäsolun. Biopannoinnin avulla nämä spesifiset vasta-aineet voidaan eristää. Ultrasonication auttaa helpottamaan biopanointiprosessia, mikä tekee vasta-aineiden puhdistuksesta tehokkaamman.

Vasta-ainekirjastosta alkaen vasta-aineet näytetään tyypillisesti bakteriofagin, hiivasolun tai muun näyttöjärjestelmän pinnalla. Tämä kirjasto edustaa monipuolista vasta-ainevalikoimaa.
Ensimmäisessä vaiheessa tämä kirjasto altistetaan kohdemolekyylillesi. Kohteeseen sitoutuvat vasta-aineet tarttuvat, kun taas muut huuhtoutuvat pois. Sitoutumattomien vasta-aineiden poistamiseksi näytteet pestään useita kertoja puskuriliuoksella.

Nyt meillä on näytteitä, jotka sisältävät vain sitoutuneita vasta-aineita. Tämä tarkoittaa kuitenkin, että vasta-aineet ovat edelleen kiinni näyttöjärjestelmässään. Niiden vapauttamiseksi vasta-aine-ligandi-vuorovaikutus on katkaistava. Tätä vaihetta kutsutaan eluutioksi. Näytteet voidaan eluoida käyttämällä sitoutumista häiritsevää liuosta, esimerkiksi käyttämällä erityistä eluutiopuskuria, kaotrooppista, alentamalla pH-arvoa, käyttämällä lämpöä jne. Nämä eluutiotekniikat tuhoavat vasta-aine-ligandin sitoutumisen, mutta voivat myös heikentää itse vasta-aineita. Siksi sonikaatiota käytetään vaihtoehtoisena tekniikkana vasta-aineiden poistamiseksi varovasti kohteestaan.

Eluutiovaiheen päätyttyä saamme puhdistettuja vasta-aineita, jotka ovat valmiita käytettäväksi tutkimuksessa, diagnostiikassa tai hoidossa.

Biopanning on tehokas tekniikka vasta-aineiden puhdistuksessa ja ultraäänieluutiossa, helpottaa ja tehostaa tehokkuutta – tuloksena on erittäin puhdistettuja, vahingoittumattomia vasta-aineita. Ultraäänibiopanointi antaa tutkijoille mahdollisuuden eristää erittäin spesifisiä vasta-aineita monimutkaisista näytteistä, mikä avaa ovia monenlaisiin sovelluksiin.

Sonikaattorit vasta-aineiden puhdistukseen

Hielscher-sonikaattorit ovat vakiintuneita työkaluja, joita käytetään maailman parhaissa tutkimuslaitoksissa. Hielscher-sonikaattoreita arvostetaan huipputeknisestä suunnittelustaan ja erinomaisesta suorituskyvystään, ja niitä pidetään välttämättöminä laboratoriotyökaluina bioteknologian ja molekyylibiologian aloilla. Hielscher Ultrasonics tarjoaa sonikaattoreita yksittäiselle näytteelle sekä korkean suorituskyvyn näytteenvalmistusta, jotka helpottavat vasta-aineiden tehokasta puhdistusta ja kohdesidottujen molekyylien eluutiota ja mahdollistavat tehokkaan biopanoinnin spesifisten vasta-aineiden eristämiseksi tarkasti ja nopeasti.
Vasta-aineiden puhdistuksen yhteydessä Hielscherin sonikaattorit helpottavat erinomaisesti pesu- ja eluutiovaiheita poistamalla tehokkaasti sitoutumattomat vasta-aineet säilyttäen samalla kohdesidottujen kompleksien eheyden. Niiden tarkka hallinta ja skaalautuvuus mahdollistavat räätälöidyt käsittelyolosuhteet, mikä takaa optimaaliset puhdistustulokset monenlaisille näytemäärille ja monimutkaisuuksille.
Hielscher-sonikaattorit edustavat ultraäänikäsittelyn teknologista innovaatiota, joka tarjoaa vertaansa vailla olevia ominaisuuksia vasta-aineiden puhdistukseen, eluutioon ja biopannointiin. Tarkkuuden, luotettavuuden ja helppokäyttöisyyden ansiosta erilaiset ultraäänijärjestelmät tarjoavat optimaalisen tehokkuuden ja monipuolisuuden biofarmaseuttiseen tutkimukseen, diagnostiikkaan ja hoitoon.
Ota yhteyttä nyt saadaksesi lisätietoja Hielscher-sonikaattoreista vasta-aineiden puhdistukseen, eluutioon ja biopannointiin! Kokenut tekninen henkilökuntamme keskustelee mielellään vasta-aineisiin liittyvästä sovelluksestasi!

Miksi Hielscher Ultrasonics?

  • korkea hyötysuhde
  • Uusi tekniikka
  • luotettavuus & kestävyys
  • säädettävä, tarkka prosessinohjaus
  • erä & linjassa
  • minkä tahansa aseman
  • älykkäät ohjelmistot
  • älykkäät ominaisuudet (esim. ohjelmoitava, dataprotokolla, kaukosäädin)
  • Helppo ja turvallinen käyttää
  • Huono kunnossapito
  • CIP (clean-in-place)

Informaatio pyyntö




Huomaa, että Tietosuojakäytäntö.


Suunnittelu, valmistus ja konsultointi – Laatu valmistettu Saksassa

Hielscherin ultraäänilaitteet ovat tunnettuja korkeimmista laatu- ja suunnittelustandardeistaan. Kestävyys ja helppo käyttö mahdollistavat ultraäänilaitteidemme sujuvan integroinnin teollisuuslaitoksiin. Hielscherin ultraäänilaitteet käsittelevät helposti karkeita olosuhteita ja vaativia ympäristöjä.

Hielscher Ultrasonics on ISO-sertifioitu yritys, joka painottaa erityisesti korkean suorituskyvyn ultraäänilaitteita, joissa on uusinta tekniikkaa ja käyttäjäystävällisyyttä. Tietenkin Hielscherin ultraäänilaitteet ovat CE-yhteensopivia ja täyttävät UL: n, CSA: n ja RoHs: n vaatimukset.

Ota meihin yhteyttä! / Kysy meiltä!

Kysy lisä tietoja

Käytä alla olevaa lomaketta pyytääksesi lisätietoja ultraääniprosessoreista, sovelluksista ja hinnasta. Keskustelemme mielellämme prosessistasi kanssasi ja tarjoamme sinulle vaatimukset täyttävän ultraäänijärjestelmän!









Huomaathan, että Tietosuojakäytäntö.


Video näyttää ultraääninäytteen valmistusjärjestelmän UIP400MTP, joka mahdollistaa minkä tahansa tavallisen monikaivolevyn luotettavan näytteen valmistuksen korkean intensiteetin ultraäänellä. UIP400MTP: n tyypillisiä sovelluksia ovat solulyysi, DNA, RNA ja kromatiini leikkaus sekä proteiinin uuttaminen.

Ultraääni UIP400MTP monitasoiseen levyn sonikaatioon

Videon pikkukuva

Ultraäänieluution vertailu verrattuna perinteisiin eluutiotekniikoihin

  1. Gradientin eluutio: Gradienttieluutiossa kohdeproteiinin ja affiniteettimatriisin välistä sitoutumislujuutta vähennetään vähitellen muuttamalla eluutiopuskurin koostumusta. Tähän voi liittyä muuttuvia tekijöitä, kuten pH, suolapitoisuus tai kilpailevien ligandien pitoisuus. Gradienttieluutio mahdollistaa eluutio-olosuhteiden hienosäädön kohdeproteiinin vapauttamiseksi selektiivisesti minimoiden samalla epäspesifisen sitoutumisen.
    Ultraäänieluution edut: Ultraäänieluutio tarjoaa sitoutuneiden proteiinien nopeamman ja tasaisemman vapautumisen verrattuna gradienttieluutioon. Vaikka gradienttieluutio vaatii eluutio-olosuhteiden huolellista optimointia ja seurantaa, ultraäänieluutio tarjoaa yksinkertaisemman ja tehokkaamman menetelmän proteiinien talteenottoon.
  2. Kilpailukykyinen eluutio: Kilpailevassa eluutiossa suuri kilpailevan ligandin pitoisuus lisätään eluutiopuskuriin häiritsemään kohdeproteiinin ja affiniteettimatriisin välistä sitoutumista. Kilpaileva ligandi kilpailee kohdeproteiinin kanssa sitoutumiskohdista matriisissa, jolloin proteiini syrjäytetään ja vapautuu eluaattiin.
    Ultraäänieluution edut: Ultraäänieluutio tarjoaa hellävaraisemman ja monipuolisemman vaihtoehdon kilpailukykyiselle eluutiolle. Kilpaileva eluutio voi edellyttää suurten pitoisuuksien käyttöä kaotrooppisia aineita (eli koliuotettua ainetta, joka häiritsee vesimolekyylien välistä vedyn sidosverkostoa ja vähentää proteiinien alkuperäisen tilan stabiiliutta heikentämällä hydrofobista vaikutusta) tai voimakkaita kemikaaleja, jotka voivat vaikuttaa proteiinien stabiilisuuteen ja aktiivisuuteen. Sitä vastoin ultraäänieluutio tarjoaa mekaanisen häiriön ilman muita kemiallisia aineita, säilyttää proteiinin eheyden ja varmistaa korkeat talteenottoasteet.
  3. Lämpötilan aiheuttama eluutio: Lämpötilan aiheuttamassa eluutiossa eluutiopuskurin lämpötilaa muutetaan kohdeproteiinin ja affiniteettimatriisin välisen sitoutumisen häiritsemiseksi. Tämä voidaan saavuttaa joko lisäämällä tai vähentämällä lämpötilaa spesifisestä proteiini-matriisivuorovaikutuksesta riippuen.
    Ultraäänieluution edut: Ultraäänieluutio tarjoaa nopeamman ja hallitumman menetelmän proteiinien eluutiolle verrattuna lämpötilan aiheuttamiin menetelmiin. Vaikka lämpötilan aiheuttama eluutio voi vaatia lämpötilagradienttien tarkkaa hallintaa ja pidempiä tasapainotusaikoja, ultraäänieluutio tarjoaa välittömän mekaanisen häiriön, mikä johtaa lyhyempiin eluutioaikoihin ja parempaan tehokkuuteen.
  4. Entsymaattinen eluutio: Entsymaattinen eluutio käyttää spesifisiä entsyymejä, jotka pilkkovat kohdeproteiinin ja affiniteettimatriisin väliset sidokset vapauttaen proteiinin eluaattiin. Tämä menetelmä on erityisen hyödyllinen proteiineille, jotka ovat tiukasti sitoutuneet matriisiin, tai sovelluksissa, jotka edellyttävät tarkkaa eluutio-olosuhteiden hallintaa.
    Ultraäänieluution edut: Ultraäänieluutio tarjoaa ei-entsymaattisen ja kemikaalittoman vaihtoehdon entsymaattiselle eluutiolle. Vaikka entsymaattinen eluutio voi vaatia entsyymipitoisuuden, inkubointiajan ja pH-olosuhteiden optimointia, ultraäänieluutio tarjoaa suoraviivaisen ja yleisesti sovellettavan menetelmän proteiinien talteenottoon ilman lisäreagensseja tai erikoislaitteita.
Sonicator korkean suorituskyvyn näytteen valmistukseen! UIP400MTP levysonikoija helpottaa biologisten näytteiden lyysiä, proteiinien uuttamista, DNA: n pirstoutumista ja solujen liukoisuutta 96-kuoppalevyihin.

Levysonikaattori UIP400MTP kaikille 96-kuoppaisille levyille, mikrotitterilevyille ja monikuoppalevyille.



Kirjallisuus / Referenssit


Korkean suorituskyvyn ultraääni! Hielscherin tuotevalikoima kattaa koko spektrin kompaktista laboratorion ultraäänilaitteesta penkki-top-yksiköihin täysteollisiin ultraäänijärjestelmiin.

Hielscher Ultrasonics valmistaa korkealaatuisia ultraäänihomygenisoijia laboratorio että teollisen koon mukaan.


Keskustelemme mielellämme prosessistanne.

Otetaan yhteyttä.