การใช้งานอัลตราโซนิกใน MonkeyPox ไวรัส

Ultrasonication เป็นวิธีการประมวลผลที่สําคัญสําหรับการแยกไวรัส monkeypox (MPXV) จากตัวอย่างการวิเคราะห์สําหรับการกระจายตัวของดีเอ็นเอของไวรัสเช่นเดียวกับในการผลิตวัคซีนโรคฝีดาษลิง สําหรับการเตรียมตัวอย่างก่อนการวินิจฉัยและการวิเคราะห์ (PCR, ELISA ฯลฯ ) ultrasonication จะใช้ใน lyse เซลล์เพื่อปล่อยไวรัส monkeypox จากภายในเซลล์และ / หรือชิ้นส่วนดีเอ็นเอ ในการผลิตวัคซีนการใช้งานมีตั้งแต่การเตรียมอนุภาคไวรัส / ดีเอ็นเอการห่อหุ้มในพาหะนํายาและการกําหนดสูตร inocula
ด้านล่างนี้คุณสามารถค้นหาข้อมูลรายละเอียดเกี่ยวกับการเตรียมตัวอย่างไวรัสโรคฝีดาษลิงอัลตราโซนิกเช่นเดียวกับการผลิตวัคซีน MPXV ช่วย ultrasonically

 

สิ่งที่คุณจะพบในหน้านี้:

ขอข้อมูล





ultrasonicators ที่มีประสิทธิภาพสูงเป็นเครื่องมือการประมวลผลที่สําคัญในการผลิตวัคซีนจํานวนมาก

ระบบเครื่องอัลตราโซนิก 2x 1kW นี้สําหรับการดําเนินการไหลอย่างต่อเนื่องได้รับการติดตั้งในโรงงานผลิตวัคซีน

อัลตราโซนิกสลายและการกระจายตัวของดีเอ็นเอก่อนปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR)

การติดเชื้อไวรัสโรคฝีดาษลิงถูกตรวจพบโดยการทดสอบการขยายกรดนิวคลีอิก (NAAT) โดยใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสแบบเรียลไทม์หรือแบบธรรมดา (PCR) เพื่อตรวจจับลําดับดีเอ็นเอของไวรัสที่ไม่เหมือนใคร ตัวอย่าง (เช่น จากช่องจมูกสลับหรือการตรวจชิ้นเนื้อผิวหนัง) ประกอบด้วยไวรัสในเซลล์
สําหรับการวิเคราะห์ไวรัสจะต้องถูกปล่อยออกมาจากเซลล์ ans ดีเอ็นเอของไวรัสจะต้องแยกส่วนสําหรับ PCR

สลายอัลตราโซนิก:

Ultrasonicator UP200Ht กับ microtip S26d2 สําหรับการสลายอัลตราโซนิกของตัวอย่างทางชีวภาพการหยุดชะงักของเซลล์อัลตราโซนิก / การสลายเป็นวิธีที่เชื่อถือได้และมีประสิทธิภาพในการแยกไวรัสออกจากตัวอย่างเซลล์และเป็นเทคนิคที่ดีกว่าสารเคมีเช่นไลโซไซม์โปรตีนเคและผงซักฟอกที่แตกต่างกันซึ่งใช้อีกวิธีหนึ่งในการสลายเซลล์และการปล่อยดีเอ็นเอ
อย่างไรก็ตามการใช้รีเอเจนต์ทางเคมีดังกล่าวจําเป็นต้องมีการเตรียมตัวอย่างที่ใช้เวลานานในหลายขั้นตอนก่อนการวิเคราะห์ PCR เพื่อป้องกันการยับยั้งปฏิกิริยา PCR เนื่องจากสารยับยั้ง PCR มีผลต่อประสิทธิภาพของการขยายปริมาณสารยับยั้งที่แปรผันเล็กน้อยที่ไม่ได้กําจัดออกอาจนําไปสู่การเปลี่ยนแปลงครั้งใหญ่ในการขยายผลิตภัณฑ์ PCR (Diaco, 1995)
ข้อดีของ ultrasonication สําหรับการสลายคือการหยุดชะงักอย่างสมบูรณ์ของโครงสร้างเซลล์และการปล่อยดีเอ็นเอโดยไม่จําเป็นต้อง lysing รีเอเจนต์และการเตรียมตัวอย่างใช้เวลานานเป็นที่ต้องการ (cf เลย Fykse et al., 2003)

การกระจายตัวของดีเอ็นเออัลตราโซนิก:

การกระจายตัวของดีเอ็นเออัลตราโซนิกเป็นเรื่องง่ายและเชื่อถือได้เป็นผลิตชิ้นส่วนดีเอ็นเอปรับความยาวได้ (basepairs, bp) การใช้อัลตร้าซาวด์ดีเอ็นเอสามารถแยกส่วนได้อย่างมีประสิทธิภาพตามความยาวของดีเอ็นเอเป้าหมาย การควบคุมที่แม่นยําเหนือพารามิเตอร์อัลตราโซนิกและตัวเลือกการระบายความร้อนที่ซับซ้อนป้องกันการเสื่อมสภาพของดีเอ็นเอ
อ่านเพิ่มเติมเกี่ยวกับการกระจายตัวของดีเอ็นเออัลตราโซนิก!

 

วิดีโอแสดงระบบเตรียมตัวอย่างอัลตราโซนิก UIP400MTP ซึ่งช่วยให้การเตรียมตัวอย่างที่เชื่อถือได้ของแผ่นหลายหลุมมาตรฐานใด ๆ โดยใช้อัลตราซาวนด์ความเข้มสูง การใช้งานทั่วไปของ UIP400MTP รวมถึงการสลายเซลล์ดีเอ็นเออาร์เอ็นเอและการตัดโครมาตินเช่นเดียวกับการสกัดโปรตีน

Ultrasonicator UIP400MTP สําหรับ sonication แผ่นหลายดี

ขอข้อมูล





การใช้งานอัลตราโซนิกในวัคซีนไวรัส Monkeypox

Ultrasonication ใช้ในการผลิตวัคซีนเช่นวัคซีนโรคฝีดาษลิง วัคซีนที่ใช้กับไวรัสโรคฝีดาษลิงเป็นวัคซีนไวรัสที่มีชีวิตในปัจจุบัน วัคซีนที่พัฒนาขึ้นใหม่อาจใช้แพลตฟอร์มอื่น ๆ เช่น DNA-based ปัจจุบันมี Vaccinia Ankara viurs ที่ได้รับการดัดแปลงซึ่งเป็นไวรัสออร์โธพอกซ์ที่ลดทอนและไม่ทําซ้ํา นอกจากนี้ยังมีทริส (ไตรส์-อะมิโนมีเทน) และโซเดียมคลอไรด์ วัคซีนอาจมีดีเอ็นเอและโปรตีนจํานวนเล็กน้อยจากเซลล์ไฟโบรบลาสต์ตัวอ่อนไก่ซึ่งใช้ในการปลูกไวรัสวัคซีนเบนโซเนสและสารประกอบยาปฏิชีวนะเช่น gentamicin และ ciprofloxacin

การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันอัลตราโซนิกใช้ในการผลิตวัคซีนไวรัสที่มีชีวิตลดทอน, วัคซีนดีเอ็นเอ, ค็อกเทลดีเอ็นเอหลาย valent, วัคซีน mRNA, วัคซีนโปรตีน recombinant, วัคซีนอนุภาคคล้ายไวรัส ฯลฯ

การใช้งานของ ultrasonics ในการผลิตวัคซีนมีตั้งแต่

  • การกระจายตัวของอนุภาคไวรัสและสาร
  • emulsification
  • การปิดใช้งานไวรัส
  • สูตรพาหะนํายา (NLC, SLN)
  • ห่อหุ้ม
  • การละลายของตัวแทน
  • การเตรียมสารเสริม
  • การเดกาส / De-Aeration

 

คุณสามารถค้นหาข้อมูลเพิ่มเติมในเชิงลึกเกี่ยวกับการใช้งานอัลตราโซนิกสําหรับการผลิตวัคซีนที่ดีขึ้น!

โปรโตคอลสําหรับการแยกอัลตราโซนิกของไวรัสโรคฝีดาษ Monkey

ทีมวิจัยของ Stittelaar (2005) ใช้การสลายอัลตราโซนิกเพื่อปล่อยไวรัส monkeypox จากการเพาะเลี้ยงเซลล์โฮสต์การเจริญเติบโตเช่นเดียวกับจากเซลล์ที่ได้จากการแลกเปลี่ยนคอจากบิชอพที่ติดเชื้อ

การเตรียมวัคซีนโรคฝีดาษลิง:

ไวรัส Monkeypox เติบโตในเซลล์ไฟโบรบลาสต์ตัวอ่อนไก่ที่ปราศจากเชื้อโรคบางชนิด หลังจากการฟักตัวเป็นเวลา 1 ถึง 2 วันการระงับเซลล์ไวรัสจะถูกเก็บเกี่ยวโดยการละลายน้ําแข็งหนึ่งรอบแล้วเข้มข้นโดยการหมุนเหวี่ยง เม็ดถูก resuspended และอยู่ภายใต้หลายรอบของการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันล้ําเสียง

การแยกไวรัส Monkeypox จากลิงแสมที่ได้รับวัคซีน:

ตัวอย่างถูกแช่แข็งละลายสามครั้งและ sonicated ใน CupHorn ล้ําเสียง การเจือจางสองครั้ง (1:10 และ 1:100) ในสื่อการขนส่งที่เสริมด้วยเซรั่มวัวของทารกในครรภ์ 1% ถูกนํามาใช้ในการฉีดวัคซีน monolayers เซลล์ Vero ในแผ่นหกหลุม หลังจากฟักตัว 1 ชั่วโมงที่ 37 °C inocula จะถูกลบออกและแทนที่ด้วยสื่อวัฒนธรรมที่เสริมด้วยเซรั่มวัวของทารกในครรภ์ 1% ชั้นเดียวได้รับการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 5 วันที่ 37 ° C และย้อมด้วยสารละลายคริสตัลไวโอเล็ต
(cf. Stittelaar et al., 2005)

ในวิดีโอนี้เราจะแสดงระบบอัลตราโซนิก 2 กิโลวัตต์สําหรับการทํางานแบบอินไลน์ในตู้ล้าง Hielscher จัดหาอุปกรณ์อัลตราโซนิกให้กับเกือบทุกอุตสาหกรรมเช่นอุตสาหกรรมเคมียาเครื่องสําอางกระบวนการปิโตรเคมีรวมถึงกระบวนการสกัดด้วยตัวทําละลาย ตู้สแตนเลสแบบล้างได้นี้ออกแบบมาเพื่อใช้งานในพื้นที่อันตราย เพื่อจุดประสงค์นี้ตู้ปิดผนึกสามารถกําจัดโดยลูกค้าด้วยไนโตรเจนหรืออากาศบริสุทธิ์เพื่อป้องกันไม่ให้ก๊าซหรือไอระเหยไวไฟเข้าสู่ตู้

เครื่องอัลตราโซนิก 2x 1000 วัตต์ในตู้ล้างสําหรับติดตั้งในพื้นที่อันตราย

เครื่องอัลตราโซนิกสําหรับการวิเคราะห์ไวรัสและการผลิตวัคซีน

กลุ่มผลิตภัณฑ์ Hielscher Ultrasonics กว้างนําเสนอ ultrasonicator ที่เหมาะสําหรับห้องปฏิบัติการวิจัยและวิเคราะห์เช่นเดียวกับการผลิตวัคซีนอุตสาหกรรม
Hielscher Ultrasonics มีความเชี่ยวชาญในการออกแบบการผลิตและจําหน่ายเครื่องอัลตราโซนิกประสิทธิภาพสูงและเครื่องปฏิกรณ์โซโนชีวภาพสําหรับใช้ในห้องปฏิบัติการวิจัยและวิเคราะห์รวมถึงการดําเนินการในการผลิตวัคซีนอุตสาหกรรม (เช่น วัคซีน, Apis)
การควบคุมที่แม่นยำกว่าพารามิเตอร์กระบวนการอัลตราโซนิก Hielscher Ultrasonics' ซอฟต์แวร์อัจฉริยะSonication สามารถนําไปใช้กับภาชนะเปิดเครื่องปฏิกรณ์ที่กวนอย่างต่อเนื่องแบบปิดและเครื่องปฏิกรณ์แบบไหลผ่านอย่างต่อเนื่อง ทุกส่วนของระบบอัลตราโซนิคซึ่งสัมผัสกับสื่อของเหลวทําจากสแตนเลสไทเทเนียมหรือแก้ว ชิ้นส่วนที่นึ่งด้วยความร้อนและอุปกรณ์สุขภัณฑ์ช่วยให้มั่นใจได้ถึงการผลิตภายใต้ เงื่อนไขระดับยา
การบันทึกข้อมูลอัตโนมัติ: ซอฟต์แวร์อัจฉริยะบันทึกพารามิเตอร์ของกระบวนการ sonication โดยอัตโนมัติในการ์ดหน่วยความจำ SD แบบบูรณาการ การควบคุมพารามิเตอร์กระบวนการทั้งหมดอย่างแม่นยำ การทำสำเนาได้, standardisation ของการผลิตและอํานวยความสะดวกในการปฏิบัติตามมาตรฐานความปลอดภัยของผลิตภัณฑ์ยา
Ultrasonics Hielscher’ โปรเซสเซอร์ล้ําเสียงมีความน่าเชื่อถือสูงและสามารถควบคุมได้อย่างแม่นยํา อัลตราโซนิกอุตสาหกรรมทั้งหมดสามารถปรับให้ส่งมอบช่วงเต็มจากด้านล่างถึงแอมพลิจูดสูงมาก ความทนทานของระบบอัลตราโซนิกของ Hielscher ช่วยให้การดําเนินงานตลอด 24 ชั่วโมงทุกวันภายใต้งานหนักและในสภาพแวดล้อมที่ต้องการ

ตารางด้านล่างนี้จะช่วยให้คุณมีข้อบ่งชี้ของความจุในการประมวลผลโดยประมาณของ ultrasonicators ของเรา:

ปริมาณชุด อัตราการไหล อุปกรณ์ที่แนะนำ
แผ่นหลายหลุม / ไมโครไทเตอร์ n/a UIP400MTP
1 ถึง 500mL 10 ถึง 200mL / นาที UP100H
10 ถึง 2000ml 20 ถึง 400ml / นาที Uf200 ःที, UP400St
00.1 เพื่อ 20L 00.2 เพื่อ 4L / นาที UIP2000hdT
10 100L 2 ถึง 10L / นาที UIP4000hdT
n/a 10 100L / นาที UIP16000
n/a ที่มีขนาดใหญ่ กลุ่มของ UIP16000

ติดต่อเรา! / ถามเรา!

สอบถามข้อมูลเพิ่มเติม

กรุณาใช้แบบฟอร์มด้านล่างเพื่อขอข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับตัวประมวลผลอัลตราโซนิกโปรแกรมประยุกต์และราคา เราจะยินดีที่จะหารือเกี่ยวกับกระบวนการของคุณกับคุณและเพื่อให้คุณระบบอัลตราโซนิกการประชุมความต้องการของคุณ!










อัลตราโซนิก homogenizers มีความน่าเชื่อถือสําหรับการเขียนดีเอ็นเอ

อัลตราโซนิกตัดดีเอ็นเอ
ดัดแปลงจาก Jkwchui ภายใต้ CC-BY-SA.03



วรรณกรรม / อ้างอิง

  • Stittelaar, Koert; Amerongen, Geert; Kondova, Ivanela; Kuiken, Thijs; Lavieren, Rob; Pistoor, Frank; Niesters, Hubert; Doornum, Gerard; Van der Zeijst, Bernard; Mateo, Luis; Chaplin, Paul; Osterhaus, Albert (2005): Modified Vaccinia Virus Ankara Protects Macaques against Respiratory Challenge with Monkeypox Virus. Journal of Virology 79, 2005. 7845-51.
  • Shah Purvin, Parameswara Rao Vuddanda, Sanjay Kumar Singh, Achint Jain, and Sanjay Singh (2014): Pharmacokinetic and Tissue Distribution Study of Solid Lipid Nanoparticles of Zidovudine in Rats. Journal of Nanotechnology, Volume 2014.
  • J. Robin Harris, Andrei Soliakova, Richard J. Lewis, Frank Depoix, Allan Watkinson, Jeremy H. Lakeya (2012): Alhydrogel® adjuvant, ultrasonic dispersion and protein binding: a TEM and analytical study. Micron Volume 43, Issues 2–3, February 2012, 192-200.
  • Doron Melamed, Gabriel Leitner, E. Dan Heller (1991): A Vaccine against Avian Colibacillosis Based on Ultrasonic Inactivation of Escherichia coli. Avian Diseases Vol. 35, No. 1 (Jan. – Mar., 1991), 17-22.
  • Huang C-F, Wu T-C, Wu C-C, Lee C-C, Lo W-T, Hwang K-S, Hsu M-L, Peng H-J. (2011): Sublingual vaccination with sonicated Salmonella proteins and mucosal adjuvant induces mucosal and systemic immunity and protects mice from lethal enteritis. APMIS 119, 2011. 468–78.

ข้อเท็จจริงที่รู้

ไวรัสโรคฝีดาษลิง

Monkeypox (MPV, MPXV หรือ hMPXV) เป็นสายพันธุ์ของไวรัสดีเอ็นเอสองเส้นซึ่งเป็นสาเหตุของโรค zoonotic ของไวรัส โรคนี้เรียกว่าการติดเชื้อฝีดาษลิงและสามารถเกิดขึ้นได้ในมนุษย์และสัตว์ มันเป็นของสกุล Orthopoxvirus ในตระกูล Poxviridae ไวรัส Monkeypox เป็นหนึ่งในไวรัสออร์โธพอกซ์ในมนุษย์พร้อมกับไวรัส variola (VARV), cowpox (CPX) และวัคซีน (VACV) Orthopoxviruses มีลักษณะเป็นอนุภาคไวรัสรูปอิฐขนาดใหญ่ซึ่งมีจีโนมดีเอ็นเอสองเส้นประมาณ 200,000 bp

การทดสอบ ELISA

ELISA ย่อมาจาก Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay และเป็นอิมมูโนแอสเซย์ที่มีป้ายกํากับซึ่งถือเป็นมาตรฐานทองคําของอิมมูโนแอสเซย์ ELISA เป็นการทดสอบทางภูมิคุ้มกันซึ่งมีค่าสําหรับความไวในการวินิจฉัยสูงใช้ในการตรวจจับและหาปริมาณโมเลกุลรวมถึงแอนติบอดีแอนติเจนโปรตีนไกลโคโปรตีนและฮอร์โมน หลักการของ ELISA ขึ้นอยู่กับปฏิสัมพันธ์ระหว่างแอนติเจนกับแอนติบอดี โดยปฏิสัมพันธ์ระหว่างแอนติเจนกับแอนติบอดีนี้แอนติบอดีจําเพาะจะจับกับแอนติเจนเป้าหมาย เฉพาะเมื่อมีปฏิสัมพันธ์เกิดขึ้นสารตั้งต้นสามารถจับกับเอนไซม์และสามารถสังเกตการแปลงสารตั้งต้นที่ตามมาได้ซึ่งหมายความว่าจะได้รับผลลัพธ์ที่เป็นบวก


อัลตราโซนิกประสิทธิภาพสูง! กลุ่มผลิตภัณฑ์ของ Hielscher ครอบคลุมสเปกตรัมเต็มรูปแบบจาก ultrasonicator ห้องปฏิบัติการขนาดกะทัดรัดมากกว่าหน่วยบนม้านั่งไปจนถึงระบบอัลตราโซนิกอุตสาหกรรมเต็มรูปแบบ

Hielscher Ultrasonics ผลิต homogenizers อัลตราโซนิกที่มีประสิทธิภาพสูงจาก ห้องปฏิบัติการ ไปยัง ขนาดอุตสาหกรรมของ