การใช้งานอัลตราโซนิกใน MonkeyPox ไวรัส

Ultrasonication เป็นวิธีการประมวลผลที่สําคัญสําหรับการแยกไวรัส monkeypox (MPXV) จากตัวอย่างการวิเคราะห์สําหรับการกระจายตัวของดีเอ็นเอของไวรัสเช่นเดียวกับในการผลิตวัคซีนโรคฝีดาษลิง สําหรับการเตรียมตัวอย่างก่อนการวินิจฉัยและการวิเคราะห์ (PCR, ELISA ฯลฯ ) ultrasonication จะใช้ใน lyse เซลล์เพื่อปล่อยไวรัส monkeypox จากภายในเซลล์และ / หรือชิ้นส่วนดีเอ็นเอ ในการผลิตวัคซีนการใช้งานมีตั้งแต่การเตรียมอนุภาคไวรัส / ดีเอ็นเอการห่อหุ้มในพาหะนํายาและการกําหนดสูตร inocula
ด้านล่างนี้คุณสามารถค้นหาข้อมูลรายละเอียดเกี่ยวกับการเตรียมตัวอย่างไวรัสโรคฝีดาษลิงอัลตราโซนิกเช่นเดียวกับการผลิตวัคซีน MPXV ช่วย ultrasonically

สิ่งที่คุณจะพบในหน้านี้:

• อัลตราโซนิกสลายสําหรับการสกัดไวรัส Monkeypox
• การกระจายตัวของอัลตราโซนิกของดีเอ็นเอไวรัส Monkeypox
• การใช้งานอัลตราโซนิกในการผลิตวัคซีน MPXV

อัลตราโซนิกสลายและการกระจายตัวของดีเอ็นเอก่อนปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR)

การติดเชื้อไวรัสโรคฝีดาษลิงถูกตรวจพบโดยการทดสอบการขยายกรดนิวคลีอิก (NAAT) โดยใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสแบบเรียลไทม์หรือแบบธรรมดา (PCR) เพื่อตรวจจับลําดับดีเอ็นเอของไวรัสที่ไม่เหมือนใคร ตัวอย่าง (เช่น จากช่องจมูกสลับหรือการตรวจชิ้นเนื้อผิวหนัง) ประกอบด้วยไวรัสในเซลล์
สําหรับการวิเคราะห์ไวรัสจะต้องถูกปล่อยออกมาจากเซลล์ ans ดีเอ็นเอของไวรัสจะต้องแยกส่วนสําหรับ PCR

สลายอัลตราโซนิก:

การหยุดชะงักของเซลล์อัลตราโซนิก / การสลายเป็นวิธีที่เชื่อถือได้และมีประสิทธิภาพในการแยกไวรัสออกจากตัวอย่างเซลล์และเป็นเทคนิคที่ดีกว่าสารเคมีเช่นไลโซไซม์โปรตีนเคและผงซักฟอกที่แตกต่างกันซึ่งใช้อีกวิธีหนึ่งในการสลายเซลล์และการปล่อยดีเอ็นเอ
อย่างไรก็ตามการใช้รีเอเจนต์ทางเคมีดังกล่าวจําเป็นต้องมีการเตรียมตัวอย่างที่ใช้เวลานานในหลายขั้นตอนก่อนการวิเคราะห์ PCR เพื่อป้องกันการยับยั้งปฏิกิริยา PCR เนื่องจากสารยับยั้ง PCR มีผลต่อประสิทธิภาพของการขยายปริมาณสารยับยั้งที่แปรผันเล็กน้อยที่ไม่ได้กําจัดออกอาจนําไปสู่การเปลี่ยนแปลงครั้งใหญ่ในการขยายผลิตภัณฑ์ PCR (Diaco, 1995)
ข้อดีของ ultrasonication สําหรับการสลายคือการหยุดชะงักอย่างสมบูรณ์ของโครงสร้างเซลล์และการปล่อยดีเอ็นเอโดยไม่จําเป็นต้อง lysing รีเอเจนต์และการเตรียมตัวอย่างใช้เวลานานเป็นที่ต้องการ (cf เลย Fykse et al., 2003)

การกระจายตัวของดีเอ็นเออัลตราโซนิก:

การกระจายตัวของดีเอ็นเออัลตราโซนิกเป็นเรื่องง่ายและเชื่อถือได้เป็นผลิตชิ้นส่วนดีเอ็นเอปรับความยาวได้ (basepairs, bp) การใช้อัลตร้าซาวด์ดีเอ็นเอสามารถแยกส่วนได้อย่างมีประสิทธิภาพตามความยาวของดีเอ็นเอเป้าหมาย การควบคุมที่แม่นยําเหนือพารามิเตอร์อัลตราโซนิกและตัวเลือกการระบายความร้อนที่ซับซ้อนป้องกันการเสื่อมสภาพของดีเอ็นเอ
อ่านเพิ่มเติมเกี่ยวกับการกระจายตัวของดีเอ็นเออัลตราโซนิก!

การใช้งานอัลตราโซนิกในวัคซีนไวรัส Monkeypox

วัคซีนที่ใช้กับไวรัสโรคฝีดาษลิงเป็นวัคซีนไวรัสที่มีชีวิตในปัจจุบัน วัคซีนที่พัฒนาขึ้นใหม่อาจใช้แพลตฟอร์มอื่น ๆ เช่น DNA-based ปัจจุบันมี Vaccinia Ankara viurs ที่ได้รับการดัดแปลงซึ่งเป็นไวรัสออร์โธพอกซ์ที่ลดทอนและไม่ทําซ้ํา นอกจากนี้ยังมีทริส (ไตรส์-อะมิโนมีเทน) และโซเดียมคลอไรด์ วัคซีนอาจมีดีเอ็นเอและโปรตีนจํานวนเล็กน้อยจากเซลล์ไฟโบรบลาสต์ตัวอ่อนไก่ซึ่งใช้ในการปลูกไวรัสวัคซีนเบนโซเนสและสารประกอบยาปฏิชีวนะเช่น gentamicin และ ciprofloxacin

การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันอัลตราโซนิกใช้ในการผลิตวัคซีนไวรัสที่มีชีวิตลดทอน, วัคซีนดีเอ็นเอ, ค็อกเทลดีเอ็นเอหลาย valent, วัคซีน mRNA, วัคซีนโปรตีน recombinant, วัคซีนอนุภาคคล้ายไวรัส ฯลฯ

คุณสามารถค้นหาข้อมูลเพิ่มเติมในเชิงลึกเกี่ยวกับการใช้งานอัลตราโซนิกสําหรับการผลิตวัคซีนที่ดีขึ้น!

โปรโตคอลสําหรับการแยกอัลตราโซนิกของไวรัสโรคฝีดาษ Monkey

ทีมวิจัยของ Stittelaar (2005) ใช้การสลายอัลตราโซนิกเพื่อปล่อยไวรัส monkeypox จากการเพาะเลี้ยงเซลล์โฮสต์การเจริญเติบโตเช่นเดียวกับจากเซลล์ที่ได้จากการแลกเปลี่ยนคอจากบิชอพที่ติดเชื้อ

การเตรียมวัคซีนโรคฝีดาษลิง:

ไวรัส Monkeypox เติบโตในเซลล์ไฟโบรบลาสต์ตัวอ่อนไก่ที่ปราศจากเชื้อโรคบางชนิด หลังจากการฟักตัวเป็นเวลา 1 ถึง 2 วันการระงับเซลล์ไวรัสจะถูกเก็บเกี่ยวโดยการละลายน้ําแข็งหนึ่งรอบแล้วเข้มข้นโดยการหมุนเหวี่ยง เม็ดถูก resuspended และอยู่ภายใต้หลายรอบของการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันล้ําเสียง

การแยกไวรัส Monkeypox จากลิงแสมที่ได้รับวัคซีน:

ตัวอย่างถูกแช่แข็งละลายสามครั้งและ sonicated ใน CupHorn ล้ําเสียง การเจือจางสองครั้ง (1:10 และ 1:100) ในสื่อการขนส่งที่เสริมด้วยเซรั่มวัวของทารกในครรภ์ 1% ถูกนํามาใช้ในการฉีดวัคซีน monolayers เซลล์ Vero ในแผ่นหกหลุม หลังจากฟักตัว 1 ชั่วโมงที่ 37 °C inocula จะถูกลบออกและแทนที่ด้วยสื่อวัฒนธรรมที่เสริมด้วยเซรั่มวัวของทารกในครรภ์ 1% ชั้นเดียวได้รับการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 5 วันที่ 37 ° C และย้อมด้วยสารละลายคริสตัลไวโอเล็ต
(cf. Stittelaar et al., 2005)

เครื่องอัลตราโซนิกสําหรับการวิเคราะห์ไวรัสและการผลิตวัคซีน

กลุ่มผลิตภัณฑ์ Hielscher Ultrasonics กว้างนําเสนอ ultrasonicator ที่เหมาะสําหรับห้องปฏิบัติการวิจัยและวิเคราะห์เช่นเดียวกับการผลิตวัคซีนอุตสาหกรรม
Hielscher Ultrasonics มีความเชี่ยวชาญในการออกแบบการผลิตและจําหน่ายเครื่องอัลตราโซนิกประสิทธิภาพสูงและเครื่องปฏิกรณ์โซโนชีวภาพสําหรับใช้ในห้องปฏิบัติการวิจัยและวิเคราะห์รวมถึงการดําเนินการในการผลิตวัคซีนอุตสาหกรรม (เช่น วัคซีน, Apis)
Sonication สามารถนําไปใช้กับภาชนะเปิดเครื่องปฏิกรณ์ที่กวนอย่างต่อเนื่องแบบปิดและเครื่องปฏิกรณ์แบบไหลผ่านอย่างต่อเนื่อง ทุกส่วนของระบบอัลตราโซนิคซึ่งสัมผัสกับสื่อของเหลวทําจากสแตนเลสไทเทเนียมหรือแก้ว ชิ้นส่วนที่นึ่งด้วยความร้อนและอุปกรณ์สุขภัณฑ์ช่วยให้มั่นใจได้ถึงการผลิตภายใต้ เงื่อนไขระดับยา
การบันทึกข้อมูลอัตโนมัติ: ซอฟต์แวร์อัจฉริยะบันทึกพารามิเตอร์ของกระบวนการ sonication โดยอัตโนมัติในการ์ดหน่วยความจำ SD แบบบูรณาการ การควบคุมพารามิเตอร์กระบวนการทั้งหมดอย่างแม่นยำ การทำสำเนาได้, standardisation ของการผลิตและอํานวยความสะดวกในการปฏิบัติตามมาตรฐานความปลอดภัยของผลิตภัณฑ์ยา
Ultrasonics Hielscher’ โปรเซสเซอร์ล้ําเสียงมีความน่าเชื่อถือสูงและสามารถควบคุมได้อย่างแม่นยํา อัลตราโซนิกอุตสาหกรรมทั้งหมดสามารถปรับให้ส่งมอบช่วงเต็มจากด้านล่างถึงแอมพลิจูดสูงมาก ความทนทานของระบบอัลตราโซนิกของ Hielscher ช่วยให้การดําเนินงานตลอด 24 ชั่วโมงทุกวันภายใต้งานหนักและในสภาพแวดล้อมที่ต้องการ

ตารางด้านล่างนี้จะช่วยให้คุณมีข้อบ่งชี้ของความจุในการประมวลผลโดยประมาณของ ultrasonicators ของเรา: