อัลตราโซนิกตัดดีเอ็นเอ
- ในระหว่างการตัดดีเอ็นเอและ RNA โมเลกุลดีเอ็นเอจะถูกแบ่งออกเป็นชิ้นเล็ก ๆ การกระจายตัวของ DNA / RNA เป็นหนึ่งในขั้นตอนการเตรียมตัวอย่างที่สําคัญที่จําเป็นในการสร้างห้องสมุดสําหรับการจัดลําดับรุ่นต่อไป (NGS)
- อัลตราโซนิกดีเอ็นเอตัดใช้กองกำลังของโพรงอากาศอะคูสติกที่จะทำลายดีเอ็นเอหรืออาร์เอ็นเอเป็นชิ้น 100 – bp 5KB
- ตัดอัลตราโซนิกช่วยให้การกระจายตัวของดีเอ็นเอที่แม่นยำและเหมาะสมกับความยาวของดีเอ็นเอที่ต้องการ
ตัดดีเอ็นเอโดยใช้ Ultrasonication
Hielscher Ultrasonics นำเสนอโซลูชั่นการอัลตราซาวนด์ต่างๆสำหรับดีเอ็นเออาร์เอ็นเอและโครมาตัด เลือกระหว่างการสอบสวนชนิด ultrasonicators (เช่น UP100H) สำหรับ sonication โดยตรงโดยใช้ microtip หรือใช้ VialTweeeter หรือ cuphorn ล้ำสำหรับการเตรียมดีเอ็นเอทางอ้อมของตัวอย่างต่าง ๆ ไปพร้อม ๆ กัน Hielscher มีอุปกรณ์ที่เหมาะพิจารณาความต้องการของคุณ: อากาศคุณมี 1 หรือเพิ่มขึ้นถึง 10 ตัวอย่าง, ไดรฟ์จากไมโครลิตรปริมาณลิตร – โปรเซสเซอร์ล้ำเสียง Hielscher พร้อมที่จะตอบสนองความต้องการของคุณเพื่อเตรียมความพร้อมดีเอ็นเออาร์เอ็นเอและโครมาชิ้นส่วนที่มีความยาวที่เหมาะสม การทำสำเนางานง่ายและการควบคุมที่แม่นยำอนุญาตให้มีห้องสมุดที่เชื่อถือได้สำหรับการจัดลำดับรุ่นต่อไป
ในทางตรงกันข้ามกับดีเอ็นเอเอนไซม์ตัดอัลตราโซนิกใช้บริสุทธิ์แรงเฉือนกลโดยไม่ต้องเพิ่มสารเคมีใด ๆ โดยการตั้งค่าที่แม่นยำของพารามิเตอร์กระบวนการตัดล้ำผลิตโมเลกุลดีเอ็นเอน้ำหนักสูง (พลาสมิดดีเอ็นเอและจีโนม)
กรดนิวคลีอิกบริสุทธิ์สามารถขยายก่อนหรือหลังจากขั้นตอนการกระจายตัวของ
พารามิเตอร์ sonication (อำนาจวงจรพัลส์ / ระเบิด, เวลาและอุณหภูมิ) สามารถควบคุมได้อย่างปลอดภัยผ่านการตั้งค่าซอฟต์แวร์
- การควบคุมที่แม่นยำ
- รอบ sonication และเวลาได้อย่างแม่นยำปรับให้เข้ากับขนาดของดีเอ็นเอที่ต้องการ
- สูงโมเลกุลดีเอ็นเอน้ำหนัก
- การควบคุมอุณหภูมิ
- รวดเร็ว
- ผลลัพธ์ที่เที่ยงตรง
- หม้อนึ่งฆ่าเชื้อ
- การแก้ปัญหาต่างๆ: Probe ชนิด, VialTweeter และ เต้าฮอร์น
โปรโตคอลสำหรับการอัลตราโซนิกตัดดีเอ็นเอ
สำหรับ Chromatin immunoprecipitation Assay
สั้นๆเซลล์ได้รับการชุบในอาหารขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง60มม. (๔๐๐,๐๐๐ต่อจาน) และการส่งผ่านกับ RhoA siRNA (ตามที่อธิบายไว้); หลังจาก๗๒ h พวกเขาถูก incubated กับฟอร์ลดีไฮด์ (ความเข้มข้นสุดท้าย 1%) สำหรับ10นาทีที่37° c ไปยังโปรตีนข้ามการเชื่อมโยงไปยัง DNA ปฏิกิริยาข้ามการเชื่อมโยงถูกดับด้วยนอกเหนือจากปริมาณหนึ่งในสิบของ๑.๒๕ mol/L glycine, ให้๑๒๕ mmol/L ความเข้มข้นสุดท้าย. เซลล์ได้รับการล้างสองครั้งด้วย PBS น้ำแข็ง, resuspended ในบัฟเฟอร์การทดสอบ radioimmunoprecipitation [๑๕๐ mmol/L NaCl, 1% NP40, ๐.๕% deoxycholate, ๐.๑% SDS, 5 mmol/L EDTA, ๕๐ mmol/L Tris-HCl (pH ๘.๐)] ที่ประกอบด้วย 1 mmol/L phenylmethylsulfonyl, 1 Ag/mL aprotinin, และ 1 Ag/mL pepstatin A, และเก็บไว้บนน้ำแข็ง30นาที. จากนั้น lysates เซลล์ถูกน้ำแข็งด้วย Hielscher UP200S อัลตราซาวนด์คลื่นเสียง (3 x 40 s กว้าง 40% รอบ 1; Hielscher Ultrasonics GmbH) จนกระทั่ง chromatins cross-linked ถูกตัดให้ผลผลิตดีเอ็นเอระหว่าง 200 และ 1,000 bp หนึ่งในสิบของ lysate ทั้งหมดถูกนำมาใช้เพื่อ quantitate ปริมาณของปัจจุบันดีเอ็นเอในตัวอย่างที่แตกต่างกันและถือว่าเป็น “ดีเอ็นเอเข้าทั้งหมด”. supernatants ถูกบ่มกับดีเอ็นเอของปลาแซลมอนสเปิร์ม / โปรตีน agarose-50% สารละลายเพื่อลดพื้นหลังที่ไม่เฉพาะเจาะจง immunoprecipitation ได้ทำแล้วค้างคืนที่ 4 องศาเซลเซียส 5 Ag ของการต่อต้าน NF-NB P65 (เหนือ) หรือไม่มีแอนติบอดี (ควบคุมลบ) supernatants เหล่านี้ถูกเสริมด้วย 5 mol / L โซเดียมคลอไรด์และให้ความร้อนในชั่วข้ามคืนที่ 65 ° C เพื่อกลับโปรตีนดีเอ็นเอข้ามการเชื่อมโยง immunocomplexes ได้รับการรักษาต่อไปด้วย DNase- และโปร RNase ฟรี K และดีเอ็นเอบริสุทธิ์โดยฟีนอล / สกัดคลอโรฟอร์มและฝนเอทานอล PCR ทำด้วยไพรเมอร์เฉพาะที่สอดคล้องกับลำดับภายในภูมิภาคโปรโมเตอร์ของยีน iNOS มนุษย์ (p1 ไพรเมอร์: 5¶-GAGGGCTTTCCCA- GAACCAAG-3¶; p2 ไพรเมอร์: GCTGGGCTACTGACCCAG- CAGTTCCAG-3¶) (Doublier et al., 2008)
การศึกษา EGFP แสดงออก
สำหรับการศึกษาการแสดงออกของ recombinant p10 ความเครียดลิตร tarentolae :: F9Begfp1.4dBsat # 12 (เจ Bioscience, เยอรมนี) กับยีนสำหรับ EGFP (Enhanced สีเขียวเรืองแสงโปรตีน) โครโมโซมซุแบบบูรณาการได้รับการปลูกฝังในสื่อต่าง ๆ ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้และ เสริมนอกจากนี้ยังมี 100 มิลลิกรัมต่อลิตร-1 Nourseothricin (เจ Bioscience, เยอรมนี) ในช่วงการเพาะปลูก 1 มิลลิลิตรตัวอย่างถูกนำหมุนเหวี่ยง (2000 ×กรัม 20 ° C, 10 นาที) และล้างด้วย 0.9% วิธีการแก้ปัญหาโซเดียมคลอไรด์ เม็ดถูก resuspended ในบัฟเฟอร์ (20 มิลลิเมตร HEPES 5 มิลลิ EDTA, 2 มิลลิ DTT) และชำรุดทรุดโทรมโดย sonification กับหน่วยประมวลผลอัลตราโซนิก UP400S (การประยุกต์ใช้พลังงาน ~ 400 Ws) เศษซากมือถือถูกถอดออกโดยการหมุนเหวี่ยง (6000 ×กรัม 4 ° C, 5 นาที) และวิเคราะห์โดยโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต - polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) ภายใต้เงื่อนไขการลดการตามวิธีการของ Laemmli นี้ (1970) 12.5% เจล polyacralamide . EGFP แสดงออกถูกตรวจสอบในวัฒนธรรมรัญจวน (Fritsche et al. 2007)

อิวิเคราะห์ดีเอ็นเอของเชื้อ E. coli EDL933 ยัดเยียดให้ 0-15 นาที ultrasonication L บ่งชี้บันไดดีเอ็นเอ (Basselet et al. 2008)
immunoprecipitation โครมาติ
การทดสอบโครมาติ immunoprecipitation ถูกดำเนินการโดยใช้ชิป-ITTm เอ็กซ์เพรส (Motif ที่ใช้งาน, Carlsbad, CA, USA) ตามคำแนะนำของผู้ผลิตมีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง สั้น ๆ , podocytes มนุษย์ที่แตกต่างก็เชื่อมโยงกับ 1% ไฮด์เป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง เซลล์ที่ถูกล้างด้วยเย็นพีบีเอสและปฏิกิริยาการตรึงก็หยุดโดยการเพิ่ม 0.125 M glycine เป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง เซลล์ที่ถูกล้างอีกครั้งกับเย็นพีบีเอสและคัดลอกมาจากจาน เซลล์ที่ถูกเม็ดโดยการหมุนเหวี่ยงและ resuspended ในบัฟเฟอร์สลาย หลังจากการหมุนเหวี่ยงนิวเคลียสเม็ดถูก resuspended ในบัฟเฟอร์ตัดบ่มบนน้ำแข็งเป็นเวลา 30 นาทีและโครมาติที่ถูกตัดโดย sonication เช่น UP100H (Hielscher Ultrasonics GmbH, Teltow, เยอรมนี) ที่25% พลังงาน5พัลส์ของ20วินาทีแต่ละในน้ำแข็งเป็นชิ้นส่วนของประมาณ200– 600 bp. โครเมียมถูกหมุนแล้วปั่นและมีการเก็บรวบรวมซุปเปอร์ สำหรับ immunoprecipitations, ๖๐μ l ของโครเมียมถูก incubated กับ1μ g ของ Sp1 (ซานตาครูซเทคโนโลยีชีวภาพ, ซานตาครูซ, CA, สหรัฐอเมริกา), NF-E κB (Abcam, เคมบริดจ์, สหราชอาณาจักร) หรือ NF-E (Abcam) แอนติบอดีหรือกับกระต่าย IgG (ห้องปฏิบัติการ Zymed, เซาท์ซานฟรานซิสโก, CA, สหรัฐอเมริกา), การควบคุมที่เป็นลบค้างคืนที่4° c ด้วยการหมุนอย่างอ่อนโยน ภูมิคุ้มกันที่ถูกผูกไว้กับลูกปัดแม่เหล็กถูกเก็บรวบรวมโดยใช้ขาตั้งแม่เหล็ก, ล้างอย่างกว้างขวาง, และโปรตีน/ดีเอ็นเอลิงค์ไขว้ถูกย้อนกลับและ dna ชะสำหรับการวิเคราะห์ PCR เรียลไทม์. (Ristola et al. ๒๐๐๙)
การเตรียมดีเอ็นเอ EHEC สำหรับการวิเคราะห์ชิปอาร์เรย์
การจัด lysates เซลล์และดีเอ็นเอที่สกัด
เม็ดแบคทีเรียที่ลอยอยู่ในพีบีเอสกับความเข้มข้นสุดท้ายที่ต้องการได้รับการรักษาด้วย อัลตราซาวนด์ disruptor UP100H (Hielscher GmbH, เยอรมนี) พร้อมกับ microtip MS1 (เส้นผ่าศูนย์กลาง1มม.) ความถี่ในการทำงานคือ 30 kHz และกำลังขับที่มีประสิทธิภาพ๑๐๐ W ในระหว่างการดำเนินการตัวอย่างถูกระบายความร้อนในอ่างน้ำแข็งผสมและปั่น ตัวอย่างที่ถูกนำมาใช้สำหรับการศึกษาการไหลเวียนของ cytometry ในขณะที่การจัดการในภายหลังตัวอย่างถูกใช้ในการรักษาความร้อน (95 ° c, 5 นาที) Lysates เซลล์หยาบถูกประมวลผลด้วยส่วนผสมของฟีนอล: คลอโรฟอร์ม: เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ isoamyl (25:24:1). ปริมาณที่เท่ากันของการผสมนี้ถูกเพิ่มเข้าไปในตัวอย่าง lysate, วิธีการแก้ปัญหาถูก vortexed ที่จริงจังสำหรับ 15 s และหมุนเหวี่ยงที่๑๕,๐๐๐ x g สำหรับ2นาทีที่อุณหภูมิห้อง (RT) รอบ22° c. เฟสน้ำด้านบนที่ประกอบด้วยดีเอ็นเอ genomic ถูกแยกออกอย่างระมัดระวังและเก็บรวบรวมในท่อ Eppendorf เชื้อใหม่
ต่อมาตัวอย่างถูก sonicated จะแยกชิ้นส่วนดีเอ็นเอ ขั้นตอน sonication ได้รับการตระหนักในเงื่อนไขเดียวกันตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ในการประเมินผลกระทบของการกระจายตัวของดีเอ็นเอ genomic ตัวอย่างถูกวิเคราะห์โดยใช้เจ electrophoresis
(…) ตัวอย่าง sonicated ใช้ก่อนหน้านี้สำหรับ๒.๕นาทีถูกนำไปสู่ขั้นตอนการสกัดหลังจากการรักษาความร้อนและการหมุนเหวี่ยง ดีเอ็นเอที่ปล่อยออกมาสองครั้งด้วยฟีนอล: คลอโรฟอร์ม: ผสมแอลกอฮอล์ isoamyl, และหลังจากนั้นอยู่ภายใต้ sonication ที่สองสำหรับ0–15นาที. Agarose เจลที่ถูกใช้ในการกำหนดขนาดการกระจายของ DNA ภายใต้การสกัดหลัง การกระจายตัวของอัลตราโซนิก (รูป ที่ด้านขวาบน) ดีเอ็นเอที่ถูกแยกส่วนสูงได้รับการเห็นชัดเจนจากการปรากฏตัวของดีเอ็นเอที่มีความสำคัญมากกว่าคลื่นน้ำหนักโมเลกุลที่ถูกตัดออกจากตัวอย่าง sonicated นาทีหรือนานกว่านั้น. Sonication อีกต่อไปค่อยๆลดความยาวแฟรกเมนต์ประมาณ๑๕๐–๖๐๐ bp, และ sonication สำหรับ15นาทีต่อไปย่อยสลายชิ้นส่วนเหล่านี้, ตามที่สามารถมองเห็นส่วนใหญ่โดยด้านบนของรอยป้าย. ดังนั้นขนาดชิ้นส่วนดีเอ็นเอเฉลี่ยจะค่อยๆลดลงด้วยเวลา ultrasonication และการรักษา5นาทีได้รับอนุญาตให้มีขนาดของชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการ assays ชิป ในที่สุด, ขั้นตอนการเตรียมการวิเคราะห์ DNA ประกอบด้วยครั้งแรก2นาทีของการรักษาล้ำ, การสกัดดีเอ็นเอ (2 ×), และต่อมา5นาที sonication, ได้ก่อตั้งขึ้น. (Basselet et al. ๒๐๐๘)
โครมาติ immunoprecipitation (ชิป)
เซลล์ HEK293 ได้รับการเพาะเลี้ยงตามที่อธิบายไว้ข้างต้นและคงที่ด้วย 2 mM disuccinimidyl-glutarate สำหรับ๔๕นาทีที่อุณหภูมิห้อง หลังจากนั้นเซลล์ถูกล้างด้วย PBS สองครั้ง โครเมียมมีการเชื่อมโยงข้ามสำหรับ10นาทีที่อุณหภูมิห้องโดยใช้ 1% (v/v) ฟอร์มาลดีไฮด์และล้างสองครั้งด้วย PBS น้ำแข็งเย็น. ปฏิกิริยาข้ามการเชื่อมโยงถูกหยุดโดยการบ่มด้วย glycine ที่ความเข้มข้นสุดท้ายของ๐.๑๒๕ M สำหรับ5นาทีที่อุณหภูมิห้อง หลังจากการบ่มด้วยความผิดบาป, เซลล์ถูกขูดออกจากวัฒนธรรมของเซลล์และล้างสองครั้งด้วย PBS. เม็ดเซลล์ถูก resuspended ในบัฟเฟอร์สลาย (5 มม. ท่อ, pH ๘.๐, ๘๕ mM KCl, และ๐.๕% (v/v) Nonidet P-๔๐), incubated บนน้ำแข็งเป็นเวลา10นาที, และการผสมยางกับเครื่องผสมยาง Dounce. ต่อจากนั้นนิวเคลียส pelleted โดยการหมุนเหวี่ยง (๓๕๐๐ x g, 5 นาที, 4 ° c) และ resuspended ในบัฟเฟอร์นิวเคลียส (๕๐ mM Tris-HCl, pH ๘.๑, 10 mM EDTA และ 1% (w/v) SDS) นิวเคลียสถูกหยุดชะงักโดย sonication ๓๒๐-s พัลส์ใน UP50H คลื่นเสียง (Hielscher Ultraschall Technologie) ในการตั้งค่าของวงจร 0.5 และความกว้าง 30% ยอมจีโนมดีเอ็นเอที่มีขนาดใหญ่ของ 200-1000 bp สำหรับชิป 50g ดีเอ็นเอถูกเจือจาง 4 เท่าในบัฟเฟอร์ immunoprecipitation (16.7 มิลลิ Tris-HCl พีเอช 8.1, 167 มิลลิโซเดียมคลอไรด์ 1.2 มิลลิ EDTA 1.1% (v / v) Triton X-100 และ 0.01% (w / โวลต์) SDS) (Weiske et al. 2006)
การวิเคราะห์การปรับเปลี่ยนสโตนโดยโครมาติ immunoprecipitation (ชิป)
สั้น ๆ , 6 x 106 เซลล์ถูกล้างครั้งที่สองกับพีบีเอสและ cross-linked บนจานเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้องในการปรากฏตัว 0.5% ฟอร์มาลดีไฮด์ ปฏิกิริยาการเชื่อมโยงข้ามก็หยุดโดยการเพิ่ม 0.125 M glycine ขั้นตอนต่อมาทั้งหมดถูกดำเนินการที่ 48 ° C บัฟเฟอร์ทุกคนก่อนการแช่เย็นและมีน้ำย่อย (สินค้าขนาดเล็ก, Roche) เซลล์ที่ถูกล้างครั้งที่สองกับพีบีเอสและจากนั้นคัดลอก เม็ดรวบรวมถูกกลืนหายไปใน 1 มิลลิลิตรบัฟเฟอร์สลาย (1% SDS 5 มิลลิ EDTA, 50 mM Tris ค่า pH 8) และได้รับการ sonicated ในห้องอาบน้ำเย็นเอทานอล 10 รอบที่ 100% กว้างใช้ UP50H คลื่นเสียง (Hielscher, Teltow, เยอรมนี) การกระจายตัวของโครมาติได้รับการมองเห็นในเจล agarose 1% ชิ้นส่วนที่ได้รับอยู่ในช่วง 200-500pb โครมาละลายน้ำได้มาจากการเหวี่ยงตัวอย่าง sonicated ที่ 14,000g เป็นเวลา 10 นาทีที่ 48 ° C ส่วนที่ละลายน้ำได้ถูกเจือจาง 1/10 ในบัฟเฟอร์เจือจาง (1% Triton X-100, 2 มิลลิ EDTA, 20 มิลลิเมตร Tris ค่า pH 8, 150 มิลลิเมตรโซเดียมคลอไรด์) แล้ว aliquoted และเก็บไว้ที่ 80 องศาเซลเซียสจนการใช้งาน (Rodriguez et al. 2008)
เครื่อง | เพาเวอร์ [W] | ชนิด | ปริมาณ [มล] | ||
---|---|---|---|---|---|
UIP400MTP | ๔๐๐ | สําหรับไมโครเพลท | จาก 6 | – | 3465 หลุม | VialTweeter | ๒๐๐ | ยืนอยู่คนเดียว | 00.5 | – | ๑.๕ |
UP50H | ๕๐ | มือถือหรือ standmounted | 001 | – | ๒๕๐ |
UP100H | ๑๐๐ | มือถือหรือ standmounted | 001 | – | ๕๐๐ |
Uf200 ःที | ๒๐๐ | มือถือหรือ standmounted | 00.1 | – | ๑๐๐๐ |
UP200St | ๒๐๐ | ติดตั้ง | 00.1 | – | ๑๐๐๐ |
UP400St | ๔๐๐ | ติดตั้ง | ๕.๐ | – | ๒๐๐๐ |
เต้าฮอร์น | ๒๐๐ | เต้าฮอร์น | 10 | – | ๒๐๐ |
GDmini2 | ๒๐๐ | เซลล์ไหลปนเปื้อนฟรี |

VialTweeter สําหรับการเตรียมตัวอย่างอัลตราโซนิกเช่น พลาสมิด (pDNA) การกระจายตัว
ติดต่อเรา! / ถามเรา!
วรรณคดี / อ้างอิง
- Basselet P., Wegrzyn G., Enfors S.-O., กาบัก-ซิมินสก้า เอ็ม. (2008): การประมวลผลตัวอย่างสําหรับการวิเคราะห์ตามอาร์เรย์ชิป DNA ของ enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC). โรงงานเซลล์จุลินทรีย์ 7:29 2008.
- Doublier S., Riganti Ch., Voena C., Costamagna C., Aldieri., เปสคาร์โมนา จี, กิโก ดี., โบเซีย เอ. (008): RhoA Silencing เปลี่ยนความต้านทานต่อ Doxorubicin ในเซลล์มะเร็งลําไส้ใหญ่ของมนุษย์. การวิจัยมะเร็งโมเลกุล 6(10), 2008
- เฟร็ดลันด์., Gidlund A., Olsen M., Börjesson T., Spliid N.H.H., Simonsson M. (2008): การประเมินวิธีการสกัดดีเอ็นเอ Fusarium จาก mycelia และข้าวสาลีสําหรับการวัดปริมาณ PCR แบบเรียลไทม์แบบดาวน์สตรีมและความสัมพันธ์กับระดับ mycotoxin วารสารวิธีการทางจุลชีววิทยา 2551
- Fritsche C., Sitz M., Weiland N., Breitling R., Pohl H.-D. (2007): ลักษณะของพฤติกรรมการเจริญเติบโตของ Leishmania tarentolae – ระบบการแสดงออกใหม่สําหรับโปรตีน recombinant. วารสารจุลชีววิทยาพื้นฐาน 47, 2007 384–393.
- Ristola M., Arpiainen S., Saleem M. A., Mathieson P. W., เวลส์ G. I., Lehtonen S., Holthöfer H. (2009): กฎระเบียบของยีน Neph3 ใน podocytes – บทบาทที่สําคัญของปัจจัยการถอดความ NF-αB และ Sp1. ชีววิทยาโมเลกุล BMC 10:83, 2009
- โรดริเกซ เจ, วิฟส์ แอล., จอร์ดา เอ็ม, โมราเลส ซี., มูนอซ เอ็ม, เวนเบรลล์., พีนาโด เอ็ม. เอ. (2008): การติดตามจีโนมกว้างของดีเอ็นเอ Alu unmethylated ซ้ําในเซลล์ปกติและมะเร็ง. งานวิจัยกรดนิวคลีอิก ปีที่ 36 ฉบับที่ 3 ปี 2551 770-784.
- ไวส์เค เจ ฮูเบอร์ โอ. (2006): โปรตีน Histidine Triad Hint1 ทําให้เกิด Apoptosis โดยไม่ขึ้นอยู่กับกิจกรรมของเอนไซม์. วารสารเคมีชีวภาพ ปีที่ 281 ฉบับที่ 37 ปี 2549 27356–27366.