เทคโนโลยีอัลตราซาวนด์ Hielscher

อัลตราโซนิกเตรียมตัวอย่างสําหรับ ELISA Assays

การตรวจวิเคราะห์เช่น ELISA ใช้กันอย่างแพร่หลายสําหรับการวินิจฉัยในหลอดทดลอง, การตรวจวัดโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับโรคและการควบคุมคุณภาพ (เช่นการตรวจสอบสารก่อภูมิแพ้อาหาร) การเตรียมตัวอย่างอัลตราโซนิกเป็นเทคนิคที่รวดเร็วเชื่อถือได้และทําซ้ําได้เพื่อเซลล์ไลส์และแยกโปรตีนภายในเซลล์ดีเอ็นเออาร์เอ็นเอและออร์แกเนลล์ Hielscher Ultrasonics มีโซลูชั่นอัลตราโซนิกต่างๆสําหรับการเตรียมที่สะดวกของตัวอย่างเดียวขวดหลายเช่นเดียวกับแผ่นไมโครไทเตอร์และแผ่น 96 ดี

เอลิซา – เอนไซม์ที่เชื่อมโยงภูมิคุ้มกัน

ELISA ย่อมาจากการทดสอบภูมิคุ้มกันที่เชื่อมโยงเอนไซม์และเทคนิคการวิเคราะห์ทางชีวเคมีที่ใช้กันอย่างแพร่หลายของประเภทของการทดสอบ ligand ผูกพัน ใน ELISA ตัวอย่างของเหลวจะถูกเพิ่มเข้าสู่เฟสที่เป็นของแข็งนิ่งที่มีคุณสมบัติผูกพันพิเศษ โดยปกติเฟสของแข็งนิ่งถูกนําไปใช้เป็นเคลือบแผ่นดีหรือแผ่น ELISA จากนั้นน้ํายาเคมีชนิดต่างๆจะถูกเพิ่มตามลําดับการบ่มและล้างเพื่อให้ในที่สุดการเปลี่ยนแปลงแสง (เช่นการพัฒนาสีโดยผลิตภัณฑ์ของปฏิกิริยาของเอนไซม์) เกิดขึ้นในของเหลวสุดท้ายในดี การเปลี่ยนแปลงแสงช่วยให้การวัดปริมาณของการวิเคราะห์โดยสิ่งที่เรียกว่าปริมาณ “"อ่าน" สําหรับการอ่านเชิงปริมาณ เครื่องวัดสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ฟลูออโรมิเตอร์ หรือ luminometer จะถูกใช้เพื่อตรวจจับและวัดความเข้มของแสงที่ส่ง ความไวของการตรวจจับได้รับอิทธิพลจากการขยายสัญญาณในระหว่างปฏิกิริยาการวิเคราะห์ เนื่องจากปฏิกิริยาของเอนไซม์มีการตรวจสอบอย่างดีและกระบวนการขยายที่เชื่อถือได้, เอนไซม์ที่ใช้ในการสร้างสัญญาณ. เอนไซม์ที่เชื่อมโยงกับสารตรวจสอบในสัดส่วนคงที่เพื่อให้ปริมาณที่ถูกต้อง, ซึ่งอธิบายยังชื่อ"เอนไซม์ที่เชื่อมโยง"ทดสอบภูมิคุ้มกัน.
เป็น ELISA ทดสอบจะดําเนินการในแผ่นไมโครไทเทอร์ / แผ่นดี 96, เป็นที่รู้จักกันเป็นแผ่นที่ใช้เทคนิคการทดสอบและใช้เช่นในการวินิจฉัยในหลอดทดลองทางคลินิก, การวิจัย, การพัฒนายาเสพติด ฯลฯ สําหรับการตรวจสอบและปริมาณแอนติบอดี, เปปไทด์, โปรตีน, และฮอร์โมน.
เทคนิค ELISA มักถูกใช้เป็นเครื่องมือวินิจฉัยในการแพทย์, เทคโนโลยีชีวภาพ, พยาธิวิทยาพืชและยังเป็นการวัดการควบคุมคุณภาพที่สําคัญในหลายอุตสาหกรรม.

การติดตั้ง VialTweeter สมบูรณ์: VialTweeter sonotrode ที่หน่วยประมวลผลล้ำ UP200St

หน่วยเตรียมตัวอย่างอัลตราโซนิก VialTweeter ใช้สําหรับสลายเซลล์และโปรตีนสกัดก่อน ELISA ทดสอบ

ขอข้อมูล





อัลตราโซนิกเตรียมตัวอย่างก่อน ELISA

ก่อนที่ ELISA ทดสอบสามารถดําเนินการตัวอย่างต้องมีขั้นตอนในการเตรียมการสลายเซลล์ดังกล่าวและการสกัดโปรตีนภายในเซลล์ดีเอ็นเออาร์เอ็นเอเป็นต้น ประโยชน์ของการสลายเซลล์อัลตราโซนิกและการแยกโปรตีนคือประสิทธิภาพสูงความน่าเชื่อถือและการทําซ้ํา ปัจจัยเหล่านี้ทั้งหมดมีความสําคัญเพื่อให้ได้การวินิจฉัยและผลการวิจัยที่มีคุณภาพสูง

ข้อดีของการสลายอัลตราโซนิกก่อน ELISA

  • การรักษาตัวอย่างที่เป็นเนื้อเดียวกัน
  • การสลายตัวที่สมบูรณ์
  • การสกัดโปรตีนที่สมบูรณ์ (เช่นแอนติบอดีดีเอ็นเอ)
  • การปรับตัวให้เข้ากับเซลล์ประเภทที่เหมาะสมที่สุด
  • สําหรับตัวอย่างขนาดใด
  • ทำซ้ำได้
  • ควบคุมอุณหภูมิ
  • การโปรโตคอลข้อมูลอัตโนมัติบนการ์ด SD

โปรโตคอลสําหรับพรีเอลิซาอัลตราโซนิกเซลล์สลาย

Probe ชนิด insonifier UP200St สำหรับสลาย

  • สําหรับวัฒนธรรมของเซลล์: ก่อนที่จะสลายเซลล์อัลตราโซนิกเซลล์หมุนเหวี่ยงเป็นเวลา 5 นาทีที่ 270 x กรัมในไมโครเซนทริฟัจ ลบเหนือธรรมชาติโดยแรงบันดาลใจและเซลล์ที่ฟื้นคืนตัวใน 30 - 100 μL ของบัฟเฟอร์ RIPA. จากนั้นให้ใส่เม็ดเซลล์บนน้ําแข็งเป็นเวลา 30 นาที
  • ตอนนี้ตัวอย่างเซลล์พร้อมสําหรับการสลายอัลตราโซนิก:
    ใช้อัลตราโซนิกชนิดโพรบ (เช่น Uf200 ःที ด้วยโพรบ S26d2) หรืออุปกรณ์หลายตัวอย่างอัลตราโซนิก (เช่น VialTweeter สําหรับ sonication พร้อมกันถึง 10 ขวดหรือ UIP400MPT สําหรับแผ่นไมโครไทเทอร์ / แผ่น 96 ดี) ขึ้นอยู่กับจํานวนของตัวอย่างที่คุณต้องเตรียม
    สําหรับ sonication ชนิดโพรบของตัวอย่างเดียวให้วางเซลล์ในหลอดไมโครเซนทริฟ 1.5 มิลลิลิตร
  • ตั้งค่าล่วงหน้าระยะเวลาล้ําของคุณ, พลังงานรวม, โหมดวงจรและ / หรือขีดจํากัดอุณหภูมิในเมนูดิจิตอลของ ultrasonicator นี้ช่วยให้มั่นใจ sonication ที่เชื่อถือได้สูงและทําซ้ํา
  • ใส่ sonotrode และสลับอุปกรณ์อัลตราโซนิกบน ค่อยๆย้ายปลายไมโครของโพรบอัลตราโซนิกผ่านตัวอย่างเพื่อ sonicate ตัวอย่างสม่ําเสมอ
    สําหรับเซลล์ส่วนใหญ่, อัลตราโซนิกสลายจะแล้วเสร็จหลังจาก 2 -4 รอบของ sonication 10 วินาที.
  • หลังจาก sonication, เอา sonotrode จากตัวอย่าง ตัวอย่างควรจะบ่มบนน้ําแข็งเป็นเวลา 5 นาที จากนั้นหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 x กรัมเป็นเวลา 20 นาทีเพื่ออัดเศษ ถ่ายโอนสารเหนือไปให้หลอดไมโครเซนทริฟ ติดฉลากวิเคราะห์และเก็บที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียส
  • อัลตราโซนิก sonotrode สามารถทําความสะอาดได้โดยเช็ดอย่างถูกต้องด้วยแอลกอฮอล์หรือ sonicate ในบีกเกอร์ที่เต็มไปด้วยแอลกอฮอล์เช่น 70% เอทานอล ทั้งหมดอัลตราโซนิก probes ทําจากไทเทเนียมเป็นนึ่ง

สําหรับเนื้อเดียวกันเนื้อเยื่อ:

  • ล้างเนื้อเยื่อด้วยน้ําแข็งเย็น PBS (0.01M, pH = 7.4) เพื่อเอาเลือด hemolysis ส่วนเกินให้สะอาด.
  • ชั่งน้ําหนักเนื้อเยื่อ (ไต, หัวใจ, ปอด, ม้าม ฯลฯ ) และ macerate เป็นชิ้นเล็ก ๆ ซึ่งเป็นเนื้อเดียวกันใน PBS ปริมาณของ PBS ที่จําเป็นเกี่ยวข้องกับน้ําหนักของเนื้อเยื่อ ตามกฎของหัวแม่มือ, 1g ของเนื้อเยื่อต้องใช้ประมาณ. 9mL PBS. ขอแนะนําให้เพิ่มสารยับยั้งโปรตีเอสบางอย่างลงใน PBS (RIPA หรือบัฟเฟอร์สลาย hypotonic ที่มีโปรติเอและสารยับยั้ง phosphatase ค็อกเทลสามารถนํามาใช้อีกทางเลือกหนึ่ง.)
  • ทั้งนี้ขึ้นอยู่กับขนาดเนื้อเยื่อ, การรักษาน้ําวนสั้น (ประมาณ 1-2 นาที. ใน 15 วินาทีชีพจร) จะมีประโยชน์ในการรักษาเนื้อเยื่อก่อน
  • ติดไมโครปลายเช่น S26d2 กับเครื่องอัลตราโซนิกของคุณ วางหลอดตัวอย่างด้วยเนื้อเยื่อในอ่างน้ําแข็ง
  • sonicate ตัวอย่างกับ ultrasonicator ของคุณเช่น UP200St (80% แอมพลิจูด) เป็นเวลา 1 นาทีในโหมดชีพจร (15 วินาทีบนหยุดชั่วคราว 15 วินาที) เก็บตัวอย่างในอ่างน้ําแข็ง
  • เนื้อเดียวกันจะถูกหมุนวนแล้วเพื่อให้ได้สระว่ายน้ําที่เฉพาะเจาะจง (cytosolic, นิวเคลียร์, ยลนไดหรือไลโซม) เพื่อเพิ่มโปรตีนสําหรับการวิเคราะห์ โดยการเหวี่ยงตัวอย่างสําหรับ5นาทีที่5000×g,
มีแปดโพรบอัลตราโซนิกสําหรับ sonication ของหลุมของแผ่นไมโครไทเทอร์

มีแปดโพรบอัลตราโซนิกสําหรับ sonication ของหลุมของแผ่นไมโครไทเทอร์

การควบคุมอุณหภูมิที่เชื่อถือได้ในระหว่าง sonication

อุณหภูมิเป็นปัจจัยที่มีอิทธิพลต่อกระบวนการที่สําคัญอย่างยิ่งที่มีความสําคัญอย่างยิ่งสําหรับการรักษาตัวอย่างทางชีวภาพเช่นเพื่อป้องกันการย่อยสลายความร้อนของโปรตีน เป็นทุกเทคนิคการเตรียมตัวอย่างเชิงกล sonication สร้างความร้อน อย่างไรก็ตาม อุณหภูมิของตัวอย่างสามารถควบคุมได้ดีเมื่อใช้อุปกรณ์ Hielscher Ultrasonics เรานําเสนอตัวเลือกต่างๆเพื่อตรวจสอบและควบคุมอุณหภูมิของตัวอย่างของคุณในขณะที่การเตรียมพวกเขาด้วย ultrasonicator โพรบชนิดหรือ VialTweeter ก่อนการวิเคราะห์

  1. การตรวจสอบอุณหภูมิตัวอย่าง: โปรเซสเซอร์อัลตราโซนิกดิจิตอล Hielscher ทั้งหมดมีการติดตั้งซอฟต์แวร์อัจฉริยะและเซ็นเซอร์อุณหภูมิแบบเสียบได้ เสียบเซ็นเซอร์วัดอุณหภูมิเข้ากับอุปกรณ์อัลตราโซนิก (เช่น Uf200 ःที, UP200St, VialTweeter, UIP400MTP) และใส่ปลายเซ็นเซอร์อุณหภูมิในหลอดตัวอย่าง ผ่านดิจิตอลสีสัมผัสจอแสดงผล, คุณสามารถตั้งค่าในเมนูของหน่วยประมวลผลอัลตราโซนิกช่วงอุณหภูมิที่เฉพาะเจาะจงสําหรับ sonication ตัวอย่างของคุณ เครื่อง ultrasonicator จะหยุดโดยอัตโนมัติเมื่อถึงอุณหภูมิสูงสุดและหยุดชั่วคราวจนกว่าอุณหภูมิตัวอย่างจะลดลงไปต่ํากว่าค่าอุณหภูมิที่ตั้งไว้∆ จากนั้น sonication เริ่มโดยอัตโนมัติอีกครั้ง คุณสมบัติอัจฉริยะนี้ช่วยป้องกันการย่อยสลายที่เกิดจากความร้อน
  2. เกี่ยวกับชุดตัวอย่างหลายตัวอย่างอัลตราโซนิก VialTweeter บล็อกไทเทเนียมซึ่งถือหลอดตัวอย่างสามารถระบายความร้อนก่อน ใส่บล็อก VialTweeter (เฉพาะ sonotrode โดยไม่ต้องแปลงสัญญาณ!) ลงในตู้เย็นหรือช่องแช่แข็งเพื่อก่อนเย็นบล็อกไทเทเนียมช่วยเลื่อนอุณหภูมิเพิ่มขึ้นในตัวอย่าง ถ้าเป็นไปได้ตัวอย่างตัวเองสามารถระบายความร้อนก่อนเกินไป
  3. ใช้น้ําแข็งอาบน้ําหรือน้ําแข็งแห้งเย็นในระหว่าง sonication วางหลอดตัวอย่างของคุณในระหว่าง sonication ลงในอ่างอาบน้ําน้ําแข็ง สําหรับ VialTweeter ใช้ถาดตื้นที่เต็มไปด้วยน้ําแข็งแห้งและวาง VialTweeter บนน้ําแข็งแห้งเพื่อให้ความร้อนอย่างรวดเร็วสามารถกระจาย

ลูกค้าทั่วโลกใช้ Hielscher โพรบ ultrasonicators เป็นหน่วย sonication หลายตัวอย่าง VialTweeter และ UIP400MTP สําหรับงานเตรียมตัวอย่างประจําวันของพวกเขาในห้องปฏิบัติการทางชีวภาพทางชีวเคมีทางการแพทย์และทางคลินิก ซอฟต์แวร์อัจฉริยะและการควบคุมอุณหภูมิของโปรเซสเซอร์ Hielscher อุณหภูมิจะถูกควบคุมได้อย่างน่าเชื่อถือและหลีกเลี่ยงการย่อยสลายตัวอย่างความร้อน การเตรียมตัวอย่างอัลตราโซนิกด้วย Hielscher อัลตราโซนิกโซลูชั่นให้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้สูงและทําซ้ําได้!

ติดต่อเรา! / ถามเรา!

สอบถามข้อมูลเพิ่มเติม

กรุณาใช้แบบฟอร์มด้านล่างเพื่อขอข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับตัวประมวลผลอัลตราโซนิกโปรแกรมประยุกต์และราคา เราจะยินดีที่จะหารือเกี่ยวกับกระบวนการของคุณกับคุณและเพื่อให้คุณระบบอัลตราโซนิกการประชุมความต้องการของคุณ!










Ultrasonic high-shear homogenizers are used in lab, bench-top, pilot and industrial processing.

Hielscher Ultrasonics ผลิต homogenizers อัลตราโซนิกประสิทธิภาพสูงสําหรับการใช้งานผสมกระจาย emulsification และสกัดในห้องปฏิบัติการนักบินและอุตสาหกรรมขนาด

วรรณกรรม / อ้างอิง



ข้อเท็จจริงที่รู้

ประเภทของเอลิซา

มีหลายประเภทของ ELISA ซึ่งมีความโดดเด่นด้วยหลักการทํางานของพวกเขา พวกเขาเป็นที่รู้จักกันโดยตรงเอลิซา, ทางอ้อมเอลิซา, แซนวิชเอลิซา, การแข่งขันเอลิซา, และย้อนกลับเอลิซ่า. ด้านล่าง, เรานําเสนอภาพรวมมากกว่าหลากหลายชนิดและลักษณะหลักของพวกเขาและความแตกต่าง.
ELISA อาจทํางานในรูปแบบเชิงคุณภาพหรือเชิงปริมาณ ผลลัพธ์เชิงคุณภาพให้ผลบวกหรือลบที่เรียบง่ายในขณะที่ในเชิงปริมาณของ ELISA ความหนาแน่นของแสง (OD) ของตัวอย่างจะเปรียบเทียบกับเส้นโค้งมาตรฐานซึ่งโดยปกติจะเป็นเจือจางแบบอนุกรมของสารละลายที่รู้จักความเข้มข้นของโมเลกุลเป้าหมาย

ตรง ELISA

โดยตรง ELISA เป็นรูปแบบการทดสอบที่ง่ายที่สุดของ Elisa, ที่เพียงเอนไซม์ที่มีข้อความแอนติบอดีหลักที่ใช้และแอนติบอดีรองไม่จําเป็นต้อง. เอนไซม์ที่ติดฉลากแอนติบอดีหลักผูกโดยตรงกับเป้าหมายเช่นแอนติเจน สารละลายแอนติเจนบัฟเฟอร์จะถูกเพิ่มเข้ากับแผ่นไมโครไทเทอร์แต่ละแผ่น (โดยปกติแผ่น 96 แผ่นแผ่น ELISA แผ่น) ซึ่งยึดติดกับพื้นผิวพลาสติกผ่านการโต้ตอบค่าใช้จ่าย เมื่อเอนไซม์ที่เชื่อมโยงกับแอนติบอดีหลักทําปฏิกิริยากับพื้นผิวของมันก็จะสร้างสัญญาณที่มองเห็นได้ซึ่งสามารถวัดผ่านเครื่องวัดสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ฟลูออโรมิเตอร์หรือ luminometer

เอลิซ่าทางอ้อม

สําหรับการทดสอบ ELISA ทางอ้อม, แอนติบอดีหลักและแอนติบอดีรองจะต้อง. อย่างไรก็ตามในทางตรงกันข้ามกับ ELISA โดยตรงไม่ใช่แอนติบอดีหลัก แต่แอนติบอดีรองมีป้ายชื่อด้วยเอนไซม์ แอนติเจนถูกตรึงไว้กับแผ่นดีและผูกพันโดยแอนติบอดีหลัก ต่อมาแอนติบอดีรองที่เอนไซม์ติดกับแอนติบอดีหลัก ในที่สุดเอนไซม์ที่เชื่อมโยงกับแอนติบอดีรองทําปฏิกิริยากับพื้นผิวของมันในการผลิตสัญญาณที่มองเห็นได้ซึ่งสามารถตรวจพบได้

แซนวิชเอลิซา

ในขณะที่ในการทดสอบ ELISA โดยตรงและทางอ้อมแอนติเจนจะตรึงและเคลือบพื้นผิวของแผ่นดีในแซนวิช ELISA แอนติบอดีจะตรึงกับพื้นผิวพลาสติกของแผ่น ELISA แอนติบอดีที่ตรึงในแซนวิช ELISA เป็นที่รู้จักกันเป็นแอนติบอดีจับ นอกจากนี้เพื่อจับแอนติบอดี, ในแซนวิช ELISA ยังเรียกว่าแอนติบอดีการตรวจสอบจะต้อง. แอนติบอดีตรวจจับได้แก่แอนติบอดีตรวจจับหลักที่ไม่ติดฉลากและแอนติบอดีตรวจจับเอนไซม์ที่มีป้ายชื่อรอง
ขั้นตอนแอนติเจนที่น่าสนใจผูกกับแอนติบอดีจับตรึงกับแผ่น จากนั้นแอนติบอดีตรวจจับหลักผูกกับแอนติเจน หลังจากนั้นแอนติบอดีตรวจจับรองผูกกับแอนติบอดีตรวจจับหลัก ในขั้นตอนปฏิกิริยาสุดท้ายเอนไซม์ทําปฏิกิริยากับพื้นผิวของมันในการผลิตสัญญาณที่มองเห็นได้ซึ่งสามารถตรวจพบได้แบบออปติคอล

เอลิซาแข่งขัน

การแข่งขันเอลิซา, เรียกว่ายับยั้ง ELISA, เป็นชนิดที่ซับซ้อนมากที่สุด ELISA เพราะมันเกี่ยวข้องกับการใช้แอนติเจนยับยั้ง. แต่ละสามรูปแบบโดยตรงทางอ้อมและแซนวิช ELISA สามารถปรับให้เข้ากับรูปแบบการแข่งขัน ELISA ในการแข่งขัน ELISA, แอนติเจนยับยั้งและแอนติเจนที่น่าสนใจในการแข่งขันสําหรับการผูกกับแอนติบอดีหลัก.
สําหรับการแข่งขัน ELISA, แอนติบอดีไม่มีผละถูกบ่มในการปรากฏตัวของแอนติเจนเช่นตัวอย่าง แอนติบอดี/ แอนติเจนคอมเพล็กซ์เหล่านี้ถูกเพิ่มเข้าไปแล้วในการเคลือบแอนติเจนได้ดี.
แผ่นล้างเพื่อให้แอนติบอดีไม่ผูกจะถูกลบออก การแข่งขันเอลิซามีชื่อเนื่องจากความจริงที่ว่าแอนติเจนมากขึ้นอยู่ในตัวอย่างที่คอมเพล็กซ์แอนติเจนแอนติเจนแอนติเจนแอนติบอดีมากขึ้นจะเกิดขึ้น ซึ่งหมายความว่า, มีแอนติบอดีไม่ผูกน้อยพร้อมที่จะผูกแอนติเจนในดีและแอนติเจนต้องแข่งขันสําหรับแอนติบอดีที่มีอยู่. แอนติบอดีรองจับคู่แอนติบอดีหลักจะถูกเพิ่ม แอนติบอดีที่สองนี้เชื่อมโยงกับเอนไซม์ เมื่อสารตั้งต้นถูกเพิ่มเอนไซม์ที่เหลือผลิตสัญญาณ chromogenic หรือเรืองแสง
เมื่อถึงจุดนี้ปฏิกิริยาจะหยุดลงเพื่อหลีกเลี่ยงความอิ่มตัวของสัญญาณในที่สุด
บางชุดแข่งขัน ELISA รวมถึงแอนติเจนเอนไซม์ที่เชื่อมโยงแทนแอนติบอดีเอนไซม์ที่เชื่อมโยง. แอนติเจนที่มีป้ายชื่อแข่งขันสําหรับเว็บไซต์หลักที่มีผลผูกพันแอนติบอดีกับแอนติเจนตัวอย่าง (ไม่มีป้ายชื่อ). แอนติเจนน้อยในตัวอย่างแอนติเจนที่มีข้อความมากขึ้นจะถูกเก็บไว้ในดีและสัญญาณที่แข็งแกร่ง

ย้อนกลับของ ELISA

ย้อนกลับ ELISA ไม่ได้ใช้แผ่นดี แต่ใบแอนติเจนที่ถูกระงับในน้ําทดสอบ การทดสอบ ELISA ย้อนกลับวัดปริมาณของแอนติบอดีที่ถูกผูกไว้ผ่านทางแอนติเจน มันได้รับการพัฒนาโดยเฉพาะในการตรวจสอบและตรวจสอบเวสต์ไนล์ไวรัสโปรตีนซองจดหมายและวิธีการที่จะสามารถที่จะหาแอนติบอดีไวรัสเฉพาะ.

เอนไซม์เครื่องหมายที่ใช้สําหรับ ELISA

รายการด้านล่างให้เครื่องหมายเอนไซม์ที่ใช้บ่อยที่สุดใน ELISA assays, ซึ่งช่วยให้ผลของการทดลองที่จะวัดเมื่อเสร็จสิ้น.

  • OPD (o-ฟีไนลีนไดอามีน dihydrochloride) จะเปลี่ยนสีเหลืองอําพันเพื่อตรวจจับ HRP (ปลาเปอร์ออกไซด์) ซึ่งมักใช้เป็นโปรตีนที่ผันได้
  • ทหารทหาร (3,3)′,5,5′-tetramethylbenzidine) เปลี่ยนเป็นสีน้ําเงินเมื่อตรวจพบ HRP และเปลี่ยนเป็นสีเหลืองหลังจากการเติมซัลฟูริกหรือกรดฟอสฟอริก
  • ABTS (2,2′-อะซิโนบีส [3-เอทิลเบนโซเธียโซลีน-6-ซัลโฟนิกเกลือ]-เกลือไดอัมโมเนียม) จะเปลี่ยนเป็นสีเขียวเมื่อตรวจพบ HRP
  • PNPP (p-ไนโตรฟีนิลฟอสเฟต, เกลือโซเดียม) เปลี่ยนเป็นสีเหลืองเมื่อตรวจพบฟอสฟาอัลคาไลน์.