การชะแอนติบอดีด้วยการใช้คลื่นอัลตราโซนิกที่รองรับตัวอย่างจำนวนมาก
โครมาโทกราฟีแบบสัมพรรคภาพเป็นเทคนิคที่มีประสิทธิภาพสูงในการทำโปรตีนให้บริสุทธิ์ ซึ่งต้องอาศัย… การชะแบบไม่จำเพาะที่ใช้คลื่นอัลตราโซนิกช่วยเป็นเทคนิคการเตรียมตัวอย่างที่เชื่อถือได้เพื่อให้ได้แอนติบอดีจากโครมาโทกราฟีแบบสัมพรรคภาพ การใช้คลื่นอัลตราโซนิกช่วยเพิ่มประสิทธิภาพและความสามารถในการทำซ้ำของการชะแอนติบอดีเป้าหมายที่จับอยู่กับเมทริกซ์สัมพรรคภาพได้อย่างมีนัยสำคัญ เครื่องอัลตราโซนิกสำหรับเพลต UIP400MTP ที่รองรับตัวอย่างจำนวนมากเหมาะสมอย่างยิ่งสำหรับการชะตัวอย่างจำนวนมากในเพลต 96 หลุม เพลตไมโครไทเทอร์ และเพลตหลายหลุม และช่วยให้การเก็บคืนแอนติบอดีในโครมาโทกราฟีแบบสัมพรรคภาพทำได้สะดวกขึ้น
การใช้คลื่นอัลตราโซนิกช่วยในการชะได้อย่างไร?
ด้วยการชะแบบไม่จำเพาะที่เพิ่มประสิทธิภาพด้วยคลื่นอัลตราโซนิก บุคลากรห้องปฏิบัติการและนักวิทยาศาสตร์สามารถเก็บคืนแอนติบอดีที่ผ่านการทำให้บริสุทธิ์จากคอลัมน์โครมาโทกราฟีแบบสัมพรรคภาพได้อย่างมีประสิทธิภาพ แอนติบอดีบริสุทธิ์เหล่านี้จะถูกนำไปใช้ในงานขั้นปลายในหลากหลายสาขา เช่น ภูมิคุ้มกันวิทยา เทคโนโลยีชีวภาพ และการวินิจฉัยทางการแพทย์
การชะเป็นขั้นตอนการเตรียมตัวอย่างที่ใช้กันทั่วไปในโครมาโทกราฟีแบบสัมพรรคภาพ: โครมาโทกราฟีแบบสัมพรรคภาพอาศัยอันตรกิริยาที่มีความจำเพาะสูงระหว่างโมเลกุลเป้าหมาย (เช่น แอนติบอดี) กับลิแกนด์ที่ตรึงอยู่บนเมทริกซ์โครมาโทกราฟี วิธีนี้ช่วยให้สามารถเลือกทำโมเลกุลเป้าหมายให้บริสุทธิ์จากสารผสมที่ซับซ้อน โดยใช้สัมพรรคภาพการจับที่จำเพาะของโมเลกุล เช่น แอนติบอดี
การจับอย่างจำเพาะของแอนติบอดี: แอนติบอดีมักถูกทำให้บริสุทธิ์โดยใช้โครมาโทกราฟีแบบสัมพรรคภาพ ซึ่งแอนติบอดีจะเลือกจับกับลิแกนด์ที่ตรึงอยู่บนเรซินโครมาโทกราฟี ลิแกนด์นี้อาจเป็นแอนติเจน โปรตีน A/G หรือโมเลกุลอื่นใดที่มีอันตรกิริยาอย่างจำเพาะกับแอนติบอดีที่สนใจ
การชะ: หลังจากให้แอนติบอดีเป้าหมายจับกับเมทริกซ์แล้ว ขั้นตอนถัดไปคือการชะ (หรือล้างออก) แอนติบอดีที่จับอยู่จากเรซิน โดยทั่วไป ขั้นตอนการชะนี้เกี่ยวข้องกับการทำลายการจับอย่างจำเพาะระหว่างแอนติบอดีกับลิแกนด์ การใช้คลื่นอัลตราโซนิกสามารถช่วยให้ขั้นตอนนี้ทำได้สะดวกขึ้น
การชะแบบไม่จำเพาะที่ใช้คลื่นอัลตราโซนิกช่วย: ต่างจากวิธีการชะแบบจำเพาะที่ทำลายเฉพาะอันตรกิริยาระหว่างแอนติบอดีกับลิแกนด์ วิธีการชะแบบไม่จำเพาะจะทำลายอันตรกิริยาทั้งหมดบนเรซิน รวมถึงอันตรกิริยาที่ไม่จำเพาะด้วย วิธีนี้อาจเป็นประโยชน์เมื่อต้องจัดการกับสารปนเปื้อนที่จับอย่างแน่นหนา ซึ่งอาจรบกวนกระบวนการทำให้บริสุทธิ์ นี่คือจุดที่การใช้คลื่นอัลตราโซนิกเข้ามามีบทบาท! คลื่นอัลตราโซนิกถูกใช้เพื่อสร้างฟองคาวิเทชันในบัฟเฟอร์สำหรับการชะ เมื่อฟองเหล่านี้ยุบตัวใกล้กับเมทริกซ์เรซิน จะเกิดแรงเฉือนเฉพาะจุดที่รุนแรงและการไหลระดับจุลภาค การรบกวนเชิงกลนี้ช่วยทำลายอันตรกิริยาที่ไม่จำเพาะระหว่างแอนติบอดีกับลิแกนด์ ทำให้การชะแอนติบอดีที่จับอยู่กับเมทริกซ์ออกมาทำได้สะดวกขึ้น
เครื่องอัลตราโซนิก UIP400MTP ที่รองรับตัวอย่างจำนวนมาก ช่วยให้การชะแอนติบอดีและโปรตีนทำได้สะดวกขึ้น
ข้อดีของการชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิก
การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกมีข้อดีหลายประการ โดยเฉพาะในบริบทของเทคนิคการทำโปรตีนให้บริสุทธิ์ เช่น โครมาโทกราฟีแบบสัมพรรคภาพ
ตัวอย่างเช่น การใช้คลื่นอัลตราโซนิกเหนือกว่าวิธีทางเลือกอื่นในด้านความสมบูรณ์ของโปรตีน การเก็บคืน ความบริสุทธิ์ ความอเนกประสงค์ และประสิทธิภาพ ข้อดีเหล่านี้ทำให้การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกเป็นทางเลือกที่ได้รับความนิยมสำหรับกระบวนการทำโปรตีนให้บริสุทธิ์ โดยเฉพาะในงานที่จำเป็นต้องรักษาโครงสร้างและฤทธิ์ของโปรตีน นอกจากนี้ การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกยังโดดเด่นด้านความเรียบง่าย ประสิทธิภาพ ความอเนกประสงค์ และความเข้ากันได้กับโปรตีนและเมทริกซ์สัมพรรคภาพที่หลากหลาย ด้วยการใช้คลื่นอัลตราโซนิกเพื่อทำลายอันตรกิริยาระหว่างโปรตีนกับเมทริกซ์ การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกจึงเป็นวิธีทำโปรตีนให้บริสุทธิ์ที่อ่อนโยนและรวดเร็ว ซึ่งรับประกันอัตราการเก็บคืนที่สูงและรักษาความสมบูรณ์ของโปรตีนสำหรับการใช้งานขั้นปลาย
อ่อนโยนต่อโครงสร้างโปรตีนมากกว่า: การชะที่ pH ต่ำใช้บัฟเฟอร์ที่เป็นกรดเพื่อทำลายการจับระหว่างโปรตีนเป้าหมาย (เช่น แอนติบอดี) กับเมทริกซ์สัมพรรคภาพ อย่างไรก็ตาม การสัมผัสกับสภาวะ pH ต่ำสามารถทำให้โปรตีนเสียสภาพ ซึ่งอาจส่งผลเสียต่อโครงสร้างและฤทธิ์ทางชีวภาพของโปรตีน ในทางตรงกันข้าม การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกอาศัยการรบกวนเชิงกลเป็นหลัก แทนการทำให้เสียสภาพด้วยสารเคมี จึงอ่อนโยนต่อโครงสร้างโปรตีนมากกว่า ข้อนี้เป็นประโยชน์อย่างยิ่งเมื่อต้องทำโปรตีนที่เปราะบางหรือแอนติบอดีที่ไวต่อการเปลี่ยนแปลงของ pH ให้บริสุทธิ์
- ลดความเสี่ยงของการรวมกลุ่ม: การชะที่ pH ต่ำอาจเพิ่มความเสี่ยงของการรวมกลุ่มของโปรตีน เนื่องจากโปรตีนคลายตัวและบริเวณที่ไม่ชอบน้ำถูกเปิดเผย การรวมกลุ่มอาจทำให้โปรตีนสูญเสียฤทธิ์และทำให้กระบวนการขั้นปลายยุ่งยากขึ้น เมื่อเปรียบเทียบกัน การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกช่วยลดความเสี่ยงของการรวมกลุ่มให้เหลือน้อยที่สุด โดยใช้แรงเชิงกลทำลายอันตรกิริยาระหว่างโปรตีนกับเมทริกซ์สัมพรรคภาพ โดยไม่เปลี่ยนแปลงโครงรูปตามธรรมชาติของโปรตีนอย่างมีนัยสำคัญ
- เพิ่มการเก็บคืนและความบริสุทธิ์: การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกสามารถให้อัตราการเก็บคืนและระดับความบริสุทธิ์ที่สูงกว่าวิธีการชะทางเลือกอื่น การรบกวนเชิงกลจากการใช้คลื่นอัลตราโซนิกปลดปล่อยโปรตีนที่จับอยู่จากเมทริกซ์สัมพรรคภาพได้อย่างมีประสิทธิภาพ พร้อมลดอันตรกิริยาที่ไม่จำเพาะให้เหลือน้อยที่สุด ส่งผลให้เก็บคืนโปรตีนเป้าหมายได้มากขึ้น และลดการปนเปื้อนจากโมเลกุลที่จับแบบไม่จำเพาะ จึงช่วยเพิ่มความบริสุทธิ์ของส่วนที่ชะออกมา
- การประมวลผลตัวอย่างจำนวนมาก: Hielscher Ultrasonics มีเครื่องอัลตราโซนิกหลากหลายชนิดสำหรับการทำโปรตีนให้บริสุทธิ์ การชะ และไบโอแพนนิงโดยใช้คลื่นอัลตราโซนิกช่วย เครื่องอัลตราโซนิกสำหรับเพลตไมโครไทเทอร์ UIP400MTP ช่วยให้ประมวลผลตัวอย่างจำนวนมากในเพลต 96 หลุมและเพลตหลายหลุมชนิดอื่นได้ VialTweeter เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการใช้คลื่นอัลตราโซนิกกับหลอด เช่น หลอด Eppendorf สูงสุด 10 หลอดพร้อมกันภายใต้สภาวะเดียวกันอย่างสะดวกและไม่ยุ่งยาก CupHorn เป็นเครื่องอัลตราโซนิกอเนกประสงค์ที่เหมาะอย่างยิ่งสำหรับหลอดหลายหลอด บีกเกอร์ขนาดเล็ก และภาชนะอื่น ๆ และแน่นอนว่าเครื่องอัลตราโซนิกชนิดโพรบแบบดั้งเดิมที่มีปลายโพรบขนาดเล็กเป็นเครื่องมือห้องปฏิบัติการที่ใช้กันอย่างแพร่หลายสำหรับการเตรียมตัวอย่าง กลุ่มผลิตภัณฑ์ของ Hielscher Ultrasonics มีเครื่องอัลตราโซนิกที่เหมาะอย่างยิ่งกับการจัดชุดทดลองและขนาดตัวอย่างของคุณ
- ความอเนกประสงค์และความเข้ากันได้: การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกใช้ได้กับโปรตีนและเมทริกซ์สัมพรรคภาพที่หลากหลาย จึงมีความอเนกประสงค์สำหรับงานทำให้บริสุทธิ์ ในทางตรงกันข้าม การชะที่ pH ต่ำอาจไม่เหมาะกับโปรตีนบางชนิดที่ไวต่อสภาวะเป็นกรด หรือเมทริกซ์สัมพรรคภาพที่มีแนวโน้มจะเสื่อมสภาพหรือมีสารชะออกจากเมทริกซ์ที่ pH ต่ำ การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกเป็นทางเลือกที่อ่อนโยนและใช้ได้อย่างครอบคลุม ซึ่งสามารถปรับให้ตรงกับความต้องการเฉพาะในการทำให้บริสุทธิ์ โดยไม่ลดทอนความสมบูรณ์ของโปรตีนหรือเสถียรภาพของเมทริกซ์
- เวลาและประสิทธิภาพ: โดยทั่วไป การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกใช้เวลาชะสั้นกว่าวิธีการชะอื่น ๆ การปลดปล่อยโปรตีนที่จับอยู่อย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพด้วยความช่วยเหลือจากคลื่นอัลตราโซนิกช่วยลดเวลาการประมวลผลและเพิ่มประสิทธิภาพโดยรวมของการทำให้บริสุทธิ์ จึงเป็นทางเลือกที่น่าสนใจสำหรับงานที่ต้องประมวลผลตัวอย่างจำนวนมาก หรือเมื่อต้องการผลลัพธ์ภายในเวลาที่จำกัด
เครื่องอัลตราโซนิกสำหรับเพลต 96 หลุม UIP400MTP สำหรับการใช้คลื่นอัลตราโซนิกกับเพลตหลายหลุม เพลต PCR และเพลต ELISA
ไบโอแพนนิงที่ใช้คลื่นอัลตราโซนิกช่วย
ไบโอแพนนิงเป็นเทคนิคสำคัญในการทำแอนติบอดีให้บริสุทธิ์ โดยเฉพาะเมื่อต้องการแอนติบอดีที่มีความจำเพาะสูงสำหรับงานวิจัยหรือการวินิจฉัยทางการแพทย์ ไบโอแพนนิงเป็นกระบวนการแยกแอนติบอดีออกจากส่วนผสมของแอนติบอดีที่เรียกว่าคลังแอนติบอดี
ไบโอแพนนิงด้วยคลื่นอัลตราโซนิกทำงานอย่างไร?
กระบวนการเริ่มต้นด้วยคลังแอนติบอดี ซึ่งเป็นส่วนผสมของแอนติบอดีหลายชนิด แอนติบอดีแต่ละชนิดมีรูปร่างและความจำเพาะที่เป็นเอกลักษณ์ของตนเอง สำหรับการวิเคราะห์และการรักษา จำเป็นต้องแยกแอนติบอดีจำเพาะที่จดจำเป้าหมายเฉพาะ เช่น ไวรัสหรือเซลล์มะเร็ง ไบโอแพนนิงสามารถใช้แยกแอนติบอดีจำเพาะเหล่านี้ได้ การใช้คลื่นอัลตราโซนิกช่วยให้กระบวนการไบโอแพนนิงดำเนินไปได้สะดวกขึ้น ทำให้การทำแอนติบอดีให้บริสุทธิ์มีประสิทธิภาพมากขึ้น
เมื่อเริ่มต้นด้วยคลังแอนติบอดี โดยทั่วไปแอนติบอดีจะถูกแสดงบนพื้นผิวของแบคเทอริโอเฟจ เซลล์ยีสต์ หรือระบบแสดงโมเลกุลอื่น ๆ คลังนี้ประกอบด้วยแอนติบอดีที่หลากหลาย
ในขั้นตอนแรก คลังนี้จะถูกนำไปสัมผัสกับโมเลกุลเป้าหมายของคุณ แอนติบอดีที่จับกับเป้าหมายจะติดอยู่ ส่วนแอนติบอดีอื่น ๆ จะถูกล้างออก เพื่อกำจัดแอนติบอดีที่ไม่ได้จับ ตัวอย่างจะถูกล้างหลายครั้งด้วยสารละลายบัฟเฟอร์
ขณะนี้ เรามีตัวอย่างที่ประกอบด้วยแอนติบอดีที่จับอยู่เท่านั้น อย่างไรก็ตาม นั่นหมายความว่าแอนติบอดียังคงติดอยู่กับระบบแสดงโมเลกุลของมัน หากต้องการปลดปล่อยแอนติบอดีเหล่านี้ จะต้องทำลายอันตรกิริยาระหว่างแอนติบอดีกับลิแกนด์ ขั้นตอนนี้เรียกว่าการชะ สามารถชะตัวอย่างได้โดยใช้สารละลายที่ทำลายการจับ เช่น ใช้บัฟเฟอร์สำหรับการชะที่จำเพาะ สารเคโอโทรปิก ลดค่า pH หรือให้ความร้อน เป็นต้น เทคนิคการชะเหล่านี้ทำลายการจับระหว่างแอนติบอดีกับลิแกนด์ แต่ก็สามารถทำให้แอนติบอดีเองเสื่อมสภาพได้ด้วย ด้วยเหตุนี้จึงใช้คลื่นอัลตราโซนิกเป็นเทคนิคทางเลือกเพื่อแยกแอนติบอดีออกจากเป้าหมายอย่างอ่อนโยน
หลังจากเสร็จสิ้นขั้นตอนการชะ เราจะได้แอนติบอดีบริสุทธิ์ที่พร้อมใช้ในงานวิจัย การวินิจฉัย หรือการรักษา
ไบโอแพนนิงเป็นเทคนิคที่มีประสิทธิภาพสูงในการทำแอนติบอดีให้บริสุทธิ์ และการชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกช่วยให้กระบวนการดำเนินไปได้สะดวกขึ้นและเพิ่มประสิทธิผล – ส่งผลให้ได้แอนติบอดีที่มีความบริสุทธิ์สูงและไม่เสียหาย ไบโอแพนนิงด้วยคลื่นอัลตราโซนิกช่วยให้นักวิทยาศาสตร์แยกแอนติบอดีที่มีความจำเพาะสูงจากตัวอย่างที่ซับซ้อนได้ เปิดโอกาสสำหรับการใช้งานที่หลากหลาย
เครื่องอัลตราโซนิกสำหรับการทำแอนติบอดีให้บริสุทธิ์
เครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher เป็นเครื่องมือที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในสถานวิจัยที่ดีที่สุดทั่วโลก ด้วยการออกแบบที่ล้ำสมัยและสมรรถนะที่เหนือกว่า เครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher จึงได้รับการยอมรับว่าเป็นเครื่องมือห้องปฏิบัติการที่ขาดไม่ได้ในสาขาเทคโนโลยีชีวภาพและอณูชีววิทยา Hielscher Ultrasonics มีเครื่องอัลตราโซนิกสำหรับการเตรียมตัวอย่างเดี่ยวและการเตรียมตัวอย่างจำนวนมาก ซึ่งช่วยให้การทำแอนติบอดีให้บริสุทธิ์และการชะโมเลกุลที่จับกับเป้าหมายมีประสิทธิภาพ และช่วยให้ไบโอแพนนิงมีประสิทธิภาพในการแยกแอนติบอดีจำเพาะได้อย่างแม่นยำและรวดเร็ว
ในบริบทของการทำแอนติบอดีให้บริสุทธิ์ เครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher โดดเด่นในการช่วยขั้นตอนการล้างและการชะ โดยกำจัดแอนติบอดีที่ไม่ได้จับได้อย่างมีประสิทธิภาพ พร้อมรักษาความสมบูรณ์ของสารเชิงซ้อนที่จับกับเป้าหมาย การควบคุมที่แม่นยำและความสามารถในการปรับขนาดการประมวลผลช่วยให้ปรับสภาวะการประมวลผลได้ตามต้องการ เพื่อให้มั่นใจว่าจะได้ผลการทำให้บริสุทธิ์ที่เหมาะสมที่สุดสำหรับตัวอย่างที่มีปริมาตรและความซับซ้อนหลากหลาย
เครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher แสดงถึงนวัตกรรมทางเทคโนโลยีในการประมวลผลด้วยคลื่นอัลตราโซนิก โดยมีความสามารถที่ไม่มีใครเทียบได้สำหรับการทำแอนติบอดีให้บริสุทธิ์ การชะ และไบโอแพนนิง ด้วยความแม่นยำ ความเชื่อถือได้ และความสะดวกในการใช้งาน ระบบอัลตราโซนิกหลากหลายชนิดจึงให้ประสิทธิภาพและความอเนกประสงค์ที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการวิจัยชีวเภสัชภัณฑ์ การวินิจฉัย และการรักษา
ติดต่อเราตอนนี้เพื่อเรียนรู้เพิ่มเติมเกี่ยวกับเครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher สำหรับการทำแอนติบอดีให้บริสุทธิ์ การชะ และไบโอแพนนิง! บุคลากรด้านเทคนิคที่มีประสบการณ์สูงของเรายินดีหารือเกี่ยวกับการใช้งานที่เกี่ยวข้องกับแอนติบอดีของคุณ!
- ประสิทธิภาพสูง
- เทคโนโลยีล้ำสมัย
- เชื่อถือได้และทนทาน
- การควบคุมกระบวนการที่ปรับได้และแม่นยำ
- แบบแบตช์และแบบอินไลน์
- สำหรับทุกปริมาตร
- ซอฟต์แวร์อัจฉริยะ
- คุณสมบัติอัจฉริยะ (เช่น ตั้งโปรแกรมได้ บันทึกข้อมูล และควบคุมจากระยะไกล)
- ใช้งานง่ายและปลอดภัย
- ต้องการการบำรุงรักษาน้อย
- CIP (การทำความสะอาดโดยไม่ถอดชิ้นส่วน)
การออกแบบ การผลิต และการให้คำปรึกษา – คุณภาพที่ผลิตในเยอรมนี
เครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher เป็นที่รู้จักดีในด้านคุณภาพและมาตรฐานการออกแบบระดับสูงสุด ความทนทานและการใช้งานที่ง่ายช่วยให้สามารถผสานเครื่องอัลตราโซนิกของเราเข้ากับโรงงานอุตสาหกรรมได้อย่างราบรื่น เครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher รับมือกับสภาวะที่รุนแรงและสภาพแวดล้อมที่มีข้อกำหนดการใช้งานสูงได้อย่างง่ายดาย
Hielscher Ultrasonics เป็นบริษัทที่ได้รับการรับรอง ISO และให้ความสำคัญเป็นพิเศษกับเครื่องอัลตราโซนิกสมรรถนะสูงที่ใช้เทคโนโลยีล้ำสมัยและใช้งานง่าย แน่นอนว่าเครื่องอัลตราโซนิกของ Hielscher เป็นไปตามมาตรฐาน CE และตรงตามข้อกำหนดของ UL, CSA และ RoHs
ติดต่อเรา! / สอบถามเรา!
การเปรียบเทียบการชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกกับเทคนิคการชะแบบดั้งเดิม
- การชะแบบเกรเดียนต์: ในการชะแบบเกรเดียนต์ ความแข็งแรงของการจับระหว่างโปรตีนเป้าหมายกับเมทริกซ์สัมพรรคภาพจะค่อย ๆ ลดลงโดยเปลี่ยนองค์ประกอบของบัฟเฟอร์สำหรับการชะ ซึ่งอาจเกี่ยวข้องกับการปรับปัจจัยต่าง ๆ เช่น pH ความเข้มข้นของเกลือ หรือความเข้มข้นของลิแกนด์ที่แข่งขันในการจับ การชะแบบเกรเดียนต์ช่วยให้ปรับสภาวะการชะอย่างละเอียดเพื่อเลือกปลดปล่อยโปรตีนเป้าหมาย พร้อมลดการจับแบบไม่จำเพาะให้เหลือน้อยที่สุด
ข้อดีของการชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิก: การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกปลดปล่อยโปรตีนที่จับอยู่ได้รวดเร็วและสม่ำเสมอกว่าการชะแบบเกรเดียนต์ ในขณะที่การชะแบบเกรเดียนต์ต้องปรับสภาวะการชะให้เหมาะสมและติดตามอย่างรอบคอบ การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกเป็นวิธีเก็บคืนโปรตีนที่เรียบง่ายและมีประสิทธิภาพมากกว่า - การชะแบบแข่งขัน: ในการชะแบบแข่งขัน จะเติมลิแกนด์ที่แข่งขันในการจับในความเข้มข้นสูงลงในบัฟเฟอร์สำหรับการชะ เพื่อทำลายการจับระหว่างโปรตีนเป้าหมายกับเมทริกซ์สัมพรรคภาพ ลิแกนด์ที่แข่งขันในการจับจะแข่งขันกับโปรตีนเป้าหมายเพื่อจับกับตำแหน่งจับบนเมทริกซ์ จึงเข้าแทนที่โปรตีนและปลดปล่อยโปรตีนเข้าสู่สารละลายที่ชะออกมา
ข้อดีของการชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิก: การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกเป็นทางเลือกที่อ่อนโยนและอเนกประสงค์กว่าการชะแบบแข่งขัน การชะแบบแข่งขันอาจต้องใช้สารเคโอโทรปิกในความเข้มข้นสูง (กล่าวคือ สารที่ละลายร่วมซึ่งทำลายโครงข่ายพันธะไฮโดรเจนระหว่างโมเลกุลน้ำ และลดเสถียรภาพของสภาวะตามธรรมชาติของโปรตีนโดยทำให้ผลของความไม่ชอบน้ำอ่อนลง) หรือสารเคมีที่รุนแรง ซึ่งสามารถส่งผลต่อเสถียรภาพและฤทธิ์ของโปรตีน ในทางตรงกันข้าม การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกให้การรบกวนเชิงกลโดยไม่จำเป็นต้องใช้สารเคมีเพิ่มเติม จึงรักษาความสมบูรณ์ของโปรตีนและรับประกันอัตราการเก็บคืนที่สูง - การชะที่เหนี่ยวนำด้วยอุณหภูมิ: การชะที่เหนี่ยวนำด้วยอุณหภูมิเกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนอุณหภูมิของบัฟเฟอร์สำหรับการชะ เพื่อทำลายการจับระหว่างโปรตีนเป้าหมายกับเมทริกซ์สัมพรรคภาพ ซึ่งทำได้โดยเพิ่มหรือลดอุณหภูมิ ขึ้นอยู่กับอันตรกิริยาเฉพาะระหว่างโปรตีนกับเมทริกซ์
ข้อดีของการชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิก: การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกเป็นวิธีชะโปรตีนที่รวดเร็วกว่าและควบคุมได้มากกว่าเมื่อเทียบกับวิธีที่เหนี่ยวนำด้วยอุณหภูมิ ในขณะที่การชะที่เหนี่ยวนำด้วยอุณหภูมิอาจต้องควบคุมเกรเดียนต์อุณหภูมิอย่างแม่นยำและใช้เวลาปรับเข้าสู่สมดุลนานกว่า การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกให้การรบกวนเชิงกลทันที ส่งผลให้ใช้เวลาชะสั้นลงและมีประสิทธิภาพเพิ่มขึ้น - การชะด้วยเอนไซม์: การชะด้วยเอนไซม์ใช้เอนไซม์จำเพาะที่ตัดพันธะระหว่างโปรตีนเป้าหมายกับเมทริกซ์สัมพรรคภาพ เพื่อปลดปล่อยโปรตีนเข้าสู่สารละลายที่ชะออกมา วิธีนี้มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับโปรตีนที่จับกับเมทริกซ์อย่างแน่นหนา หรือสำหรับงานที่ต้องควบคุมสภาวะการชะอย่างแม่นยำ
ข้อดีของการชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิก: การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกเป็นทางเลือกแทนการชะด้วยเอนไซม์ที่ไม่ใช้เอนไซม์และปราศจากสารเคมี ในขณะที่การชะด้วยเอนไซม์อาจต้องปรับความเข้มข้นของเอนไซม์ ระยะเวลาบ่ม และสภาวะ pH ให้เหมาะสม การชะด้วยคลื่นอัลตราโซนิกเป็นวิธีเก็บคืนโปรตีนที่ตรงไปตรงมาและใช้ได้อย่างครอบคลุม โดยไม่จำเป็นต้องใช้สารรีเอเจนต์เพิ่มเติมหรืออุปกรณ์เฉพาะทาง
วรรณกรรม / เอกสารอ้างอิง
- Lunder, Mojca; Bratkovič, Tomaž; Urleb, Uro; Kreft, Samo; Strukelj, Borut (2008): Ultrasound in phage display: A new approach to nonspecific elution. BioTechnique 44, 2008. 893-900.
- Mallqui V, Speelmon EC, Verástegui M, Maguiña-Vargas C, Pinell-Salles P, Lavarello R, Delgado J, Kosek M, Romero S, Arana Y, Gilman RH. (2000): Sonicated diagnostic immunoblot for bartonellosis. Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology 1, 2000. 1-5.
- Alonso-Padilla J., Jiménez de Oya N., Blázquez A.B., Loza-Rubio E., Escribano J.M., Saiz J.C., Escribano-Romero E. (2010): Evaluation of an enzyme-linked immunosorbent assay for detection of West Nile virus infection based on a recombinant envelope protein produced in Trichoplusia ni larvae. Journal of Virology Methods, 2010.
- Alikhani M, Behzadian F, Mehrbod P, Khosravi Node F, Shokouhi Targhi H, Farahmand B. (2017): Polyclonal Antibody against Recombinant Nucleoprotein of the Influenza A Virus (H1N1); Production and Purification. Iranian Journal of Virology 11 (2), 2017. 36-42.
Hielscher Ultrasonics ผลิตเครื่องโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกสมรรถนะสูงตั้งแต่ขนาด ห้องปฏิบัติการ ไปจนถึง ขนาดอุตสาหกรรม



