Preparação de ultra-sons Rico em Plaquetas Soro

  • -Plasma rico em plaquetas (PRP) é plasma sanguíneo que tenha sido enriquecido com plaquetas, que é usado para tratamentos médicos e estethic.
  • Ultra-sons e a lise condicionado é um método muito eficaz para preparar plasma rico em plaquetas.
  • Hielscher Ultrasonics oferece vários sistemas de ultra-sons que correspondem aos requisitos do tratamento de sangue (por exemplo, para dentro e fora da preparação de uma sala limpa).

Rico em Plaquetas Soro

A sonicação é um método de confiança e fácil de efectuar a lise das plaquetas em soro de sangue autólogo, a fim de libertar os factores de crescimento. As fracções derivadas de plaquetas – também conhecido como soro autólogo condicionado (ACS) – são utilizados para a reparação de tecidos ou tratamentos estéticos. Para obter resultados óptimos, o PRP está enriquecido antes da injecção.
A fim de preparar plasma enriquecido com factores de crescimento celular, ultra-sons é um método muito eficaz e eficiente para efectuar a lise das membranas celulares e para libertar quase os factores de crescimento de células completas a partir das plaquetas. Por lise de ultra-sons e condicionado, mesmo sangue anti-coagulado pode ser utilizado.
Condicionado de PRP através de ultra-sons é uma forma conveniente e de baixo custo para produzir em factores de crescimento concentradas.

preparação de ultra-sons de plasma rico em plaquetas (PRP) © Fortunato, T. M. et al. (2016)

Ultra-sons de lise de plasma rico em plaquetas (PRP)

Efeitos de ultra-sons de lise

tratamento de ultra-sons de resultados no soro sanguíneo em uma lise homogénea das plaquetas de modo a libertar os factores de crescimento aprisionadas (factor de crescimento AB (PDGF-AB), factor de crescimento AA (FCDP-AA), factor de crescimento BB (PDGF-BB), vascular factor de crescimento endotelial (VEGF), factor de crescimento de transformação β (TGF-beta), factor de crescimento epidérmico (EGF), factor de crescimento semelhante à insulina (IGF), factor de crescimento epitelial células ECGF e factor de crescimento fibroblástico (FGF)). As plaquetas e os alfa-grânulos são rompidas por sonicação, utilizando o fenómeno de cavitação acústica. Usando cavitação ultra-sónica para a lise das plaquetas diminui o eventual impacto negativo sobre a actividade do factor de crescimento do método de congelação-descongelação repetidas.

Pedido de informação





Protocolo para Ultrasonic PRP Preparação

Sonda de tipo insonifier UP200St para liseAprox. 16 mL de amostra de sangue autólogo recolhido fresco é suavemente invertido 8-10 vezes em um tubo de modo que o sangue e os anticoagulantes são bem misturados. Em seguida, a amostra é centrifugada a 1800 g durante 20 min à temperatura ambiente. Após a centrifugação, as plaquetas e células mononucleares de construir uma camada esbranquiçada na parte inferior da camada de plasma, o qual é conhecido como plasma rico em plaquetas (PRP). A camada superior é conhecido como plasma pobre em plaquetas (PPP). As células mononucleares pode ser removida ou manter-se na amostra. Muitas vezes, as células mononucleares permanecem na amostra de PRP para evitar passos adicionais, que carregam o risco de contaminação.
Nota: O tratamento de ultra-sons de PRP autólogo deve ser levada a cabo sob condições estéreis.
PRP e PPP são separados e recolhidos. Para a solução de cloreto de cálcio PPP, 1,5 mL de 10% é adicionado, enquanto o etanol a PRP 0,5 mL de 5% é adicionado. Ambas as suspensões são suavemente agitada e deixada em repouso durante 5 min à temperatura ambiente. Finalmente, 1 ml de PPP é adicionado à suspensão e PRP é deixado em repouso até se formar um coágulo de fibrina.
tratamento de ultra-sons: À medida que os actos de gel de plaquetas formado como um reservatório para os factores de crescimento libertados, o gel de fibrina deve ser interrompido, a fim de libertar os factores de crescimento disponíveis. Os parâmetros para a lise de ultra-sons e a libertação do factor de crescimento, são as seguintes: Sonicar com um UP200Ht ou UP200St (200W, 26kHz) com sonotrodo S26d2 a amostra no tubo. Para evitar o sobreaquecimento da amostra de sangue, de ultra-sons pode ser efectuada em pulsação ciclos (por exemplo, 10 seg. Na, 30 seg. Desligado). A amostra deve ser colocada em gelo para arrefecimento de modo a que a temperatura é mantida entre dois optimamente – 5 ° C. Depois de sonicao, a amostra é centrifugada a 16.000 g durante 5 min. à temperatura ambiente. O sobrenadante é recolhido e pode ser armazenado a -70 ° C.
A concentração de plaquetas na fracção PRP foi enriquecida 1,7 – 4,5 vezes no método de ultra-sons quando comparada com a contagem de plaquetas médio literatura em sangue total.

PRP foi combinada com a terapia de células estaminais derivadas de tecido adiposo (ultrassonicamente libertado células estaminais autólogas a partir de tecido adiposo, Misturada com PRP, e injectadas de novo no tecido do paciente para reparação).

Equipamento ultra-som

O dispositivo de ultra-sons VialTweeter permite a preparação de amostras simultânea de até 10 frascos sob as mesmas condições de processo. (Clique para ampliar!)Hielscher Ultrasonics é especialista em tecnologia de ultra-som sofisticado e confiável. Os nossos dispositivos de ultra-sons são usados ​​em todo o mundo para a lise, extracção e preparação de amostras – pela direta e indireta. autoclavável assim como descartável acessórios garantir um livre de contaminação- tratamento de amostras de sangue autólogas. A maioria dos nossos sistemas podem ser usados ​​para a lise de ultra-som de células-tronco e PRP, que faz com que nossos dispositivos ultra-sônicos economicamente ainda mais eficiente.
Esta tabela abaixo lista os dispositivos de ultra-sons, que são adequados para a preparação de plasma rico em plaquetas, e seu volume recomendado de amostra, respectivamente. ultrasonicators maiores e sistemas personalizados estão disponíveis, também.

Dispositivo Potência [W] Frequencia. [KHz] Tipo Volume [ml]
VialTweeter 200 26 estar sozinho 0.5 1,5
UP50H 50 30 handheld ou standmounted 00,01 250
UP100H 100 30 handheld ou standmounted 00,01 500
UP200Ht 200 26 handheld ou standmounted 0.1 1000
UP200St 200 26 Handheld 0.1 1000
UP400St 400 24 Handheld 5 2000
UP200St-SonoStep 200 26 estar sozinho 30 500
GDmini2 200 26 célula de fluxo livre de contaminação

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GDmini2 pelo transdutor UP200St-TD (200 watts) durante sonicação livre de contaminação

GDmini2 pelo transdutor UP200St-TD (200 watts)

Literatura / Referências

  • Fortunato, T. M .; Beltrami, Ch .; Emanueli, C .; De Bank, P.A :; Pula, G. (2016): gel de lisado de plaquetas e células progenitoras endoteliais estimular a formação da rede microvascular in vitro: implicações para engenharia de tecidos. Sei. Rep. 6, de 2016.
  • Hamid, M.S.A .; Yusof, Ashril; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): Plasma Rico em Plaquetas (PRP) para a lesão muscular aguda: uma revisão sistemática. PLoS One Volume 9, Issue 2, 2014.


Fatos, vale a pena conhecer

Plasma Rico em Plaquetas

Plasma rico em plaquetas contém o factor de crescimento AB (PDGF-AB), derivado de plaquetas do factor de crescimento AA (FCDP-AA), derivado de plaquetas fator de crescimento BB (PDGF-BB), o factor de crescimento endotelial vascular (VEGF), transformando β do factor de crescimento (TGF -β), factor de crescimento epidérmico (EGF), factor de crescimento semelhante à insulina (IGF), factor de crescimento de células epiteliais ECGF e factor de crescimento fibroblástico (FGF), que são estimulantes importantes para o crescimento celular e a renovação.

Autólogo soro condicionado (ACS)

Plasma condicionado autólogo (ACP) é um plasma rico em plaquetas que é extraído do sangue autólogo que é usado para apoiar a regeneração em uma variedade de condições ortopédicas e procedimentos cirúrgicos. O soro condicionado é preparado separando o plasma dos outros componentes sanguíneos (como eritrócitos) e concentre-o. ACP é um plasma rico em plaquetas (PRP). O PRP é um termo geral para um tipo de plasma que contém uma concentração significativamente maior de trombócitos quando comparado com o sangue total. É extraído do sangue inteiro. Os principais componentes do ACP incluem trombócitos (plaquetas), e vários fatores de crescimento que desempenham um papel importante no processo de cicatrização. Ao contrário de outras formulações plasmáticas ricas em plaquetas, o ACP distingue-se por uma baixa concentração de glóbulos brancos, tais como granulócitos de neutrófilos, que podem ser prejudiciais para o processo de cicatrização quando presentes em concentrações elevadas.

Rico em Plaquetas injeções de plasma

O plasma rico em plaquetas é usada como injecção em medicina regenerativa, bem como em procedimentos cosméticos. A aplicação de PRP promete aceleração significativa da cura muscular e recuperação muscular. Além disso, ele é usado com sucesso para tratar a inflamação, artrite, dor, feridas, curativos de feridas abertas lento, e queimaduras na pele graves. O PRP contém um elevado nível de factores de crescimento, que estimulam e protegem as células de cura AO que o tecido danificado está reparados.
Para treaments cosméticos, PRP tem sido demonstrado eficaz para estimular o crescimento do cabelo, a renovação da pele (também conhecido como tratamento vampiro).

Factores de crescimento derivados de plaquetas (PDGF)

O factor de crescimento derivado de plaquetas termo (PDGF) refere-se aos factores de PDGF-A, PDGF-B, o PDGF-C e PDGF-D. É uma rede de sinalização de quatro ligandos (PDGF-A, PDGF-B, o PDGF-C e PDGF-D), e dois receptores, PDGFR-alfa e PDGFR-beta.
Os factores de crescimento ou proteínas, regulam o crescimento e divisão celular. À medida que o mitogénio principais encontrados no soro de mamífero, que é libertada a partir das plaquetas durante a formação de coágulos, que desempenha um papel significativo na formação dos vasos sanguíneos (angiogénese), o crescimento de vasos sanguíneos a partir de tecido de vaso sanguíneo já existente.

Ficaremos felizes em discutir seu processo.

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