Ultraschallgestëtzt Proteinextraktioun aus Geweebe an Zellkulturen
- D’Proteinextraktioun ass e wesentleche Schrëtt bei der Proufvirbereedung an der Proteomik.
- Proteinne kënnen aus planzlechem an déiereschem Geweebe, Hiefen a Mikroorganismen extrahéiert ginn.
- D’Ultraschallbehandlung ass eng zouverlässeg, effizient Method fir d’Proteinextraktioun, déi bannent enger kuerzer Extraktiounszäit héich Proteinausbeute liwwert.
Proteinextraktioun aus Geweeben an Zellen
D’Proteinextraktioun aus Geweeben a kultivéierten Zellen ass e wesentleche Schrëtt bei der Proufvirbereedung, dee bei ville biochemeschen an analyteschen Technike wéi ELISA, PAGE, Western Blotting, Massespektrometrie oder Proteinrengegung duerchgefouert gëtt. Zellopschloss, Lys an Extraktioun mat Ultraschall sinn eng präzis kontrolléierbar, netthermesch Technik, fir héich Proteinausbeuten ze garantéieren.
Proteinextraktioun aus Zelle mat der Ultraschallsond UP200St
- Séier
- Héich Ausbeuten
- Héich effizient
- Präzis Kontroll vun de Parameteren
- Reproduzéierbar Resultater
- Linear Skaléierbarkeet
Allgemeng Uweisunge fir d’ultraschallgestëtzt Lys a Proteinextraktioun
- Temperaturkontroll: Fir eng héich Proteinausbeut ouni thermesch Denaturéierung ze garantéieren, muss d’Temperatur wärend der Extraktioun kontrolléiert ginn. Déi modernst Ultraschallhomogenisatore vun Hielscher – och Ultraschalldesintegratoren oder Ultraschallapparater genannt – si präzis kontrolléierbar. Si gi mat engem uschléissbaren Temperatursensor geliwwert. An den Astellunge vum Ultraschallhomogenisator kann eng Maximaltemperatur festgeluecht ginn. Wann dës Maximaltemperatur erreecht gëtt, hält den Ultraschallapparat automatesch un, bis d’Prouf ofgekillt ass.
- Puffer: D’Wiel vun engem gëeegente Puffer an dem richtege Puffervolumen variéiert vu Geweebe zu Geweebe a muss duerch Ausprobéieren ermëttelt ginn.
- Isoléierung / Rengegung: Proteinlysater kënnen en Iwwerschoss u Biomoleküllen, wéi DNA oder Kuelenhydrater, enthalen, déi duerch Proteinpräzipitatioun (Desoxycholat–Trichloressigsäure) oder Pufferaustausch ewechgeholl kënne ginn.
Chittapalo an Noomhorm (2009) hunn an hirer Etüd bericht, datt d’Proteinausbeut duerch d’Ultraschallbehandlung geklommen ass an datt de Prozess vun der Gewebehomogeniséierung a Lys mat Ultraschall bestoend Extraktiounsprozesser däitlech verbessere kann – wouduerch nei kommerziell Extraktiounsméiglechkeeten entstinn.
Ultraschall-CupHorn fir déi gläichzäiteg, héichwierksam Virbereedung vu méi Prouwen ënner de selwechte Bedéngunge fir d’Proteinisoléierung an d’DNA-Fragmentéierung.
Proteinextraktioun aus déiereschem Geweebe
Fir d’Virbereedung vu ganzem Geweebe (z. B. Nier, Häerz, Long, Muskel asw.) soll d’Geweebe mat propperen Instrumenter a ganz kleng Stécker geschnidde ginn, am beschten op Äis an esou séier wéi méiglech, fir den Ofbau duerch Proteasen ze verhënneren (z. B. Lyspuffer wéi RIPA oder hypotonesche Lyspuffer, deen e Cocktail vu Proteas- a Phosphatasinhibitoren enthält). Nom Zerschneide gëtt d’Prouf a flëssege Stéckstoff agedaucht, fir se schockzefréieren. D’Prouf ka fir eng spéider Benotzung bei -80°C gelagert ginn oder fir eng direkt Homogeniséierung op Äis gehale ginn. Direkt virun der Ultraschallextraktioun gëtt äiskale Lyspuffer (mat de Proteasinhibitoren DTT, Leupeptin an Aprotinin) séier an d’Proufréierche bäiginn (pro ~10 mg Geweebe ginn ongeféier ~600 μL Puffer recommandéiert). Pro Proufréierche ginn ongeféier 20–60mg Geweebe recommandéiert.
D’Homogeniséierung, d’Lys an d’Extraktioun mat Ultraschall gi mat engem Ultraschallhomogenisator wéi dem UP100H oder UP200Ht duerchgefouert, dee mat enger Sonotrod mat Mikrospëtzt ekipéiert ass. D’Dauer vun der Ultraschallbehandlung ass 60–90 sec. an engem Ultraschallzyklusmodus mat 15 sec. Ultraschallbehandlung an 10 sec. Rouzäit. D’Prouf soll déi ganz Zäit am Äis gehale ginn.
No der Homogeniséierung / Extraktioun mat Ultraschall gëtt de Lysat bei 27.000g fir ongeféier 20 min. zentrifugéiert. Duerno gëtt den Iwwerstand gesammelt, fir datt d’Proteinkonzentratioun mat engem Proteintest wéi dem Pierce BCA-Proteintest bestëmmt ka ginn.
Proteinextraktioun aus Bluttserum
Fir eng homogen Mëschung aus dem Serum an dem Phosphatpuffer ze kréien, gëtt d’Prouf virun der Ultraschallzelllys als Éischt mat engem Vortexmëscher gemëscht. Fir d’Ultraschalllys gëtt d’Prouf mat engem Ultraschalllaborhomogenisator wéi dem UP100H iwwer 8 Zykle bei 20% Amplitud beschallt, mat jeeweils 5 Sekonne Beschallung a 15 Sekonne Paus pro Zyklus. D’Proteinextraktioun gëtt duerch Beschallung an Zyklen (Pulsatiounsmodus) an duerch d’Placéiere vun der Prouf op Äis duerchgefouert, sou datt eng Iwwerhëtzung an en thermeschen Ofbau vun der Prouf verhënnert ginn. Well Serum eng grouss Quantitéit u Proteinne mat héijem Molekulargewiicht enthält (wéi Albumin, α1-Antitrypsin, Transferrin, Haptoglobulin, Immunoglobulin G an Immunoglobulin A), déi d’Trennung vu Proteinne mat niddregem Molekulargewiicht wärend der IEF stéieren, gëtt recommandéiert, se mat enger Depletiounskolonn aus dem Serum ze entfernen.
Proteinextraktioun aus Planzegeweebe
Frëscht, mëllt Planzegeweebe, z. B. Moos asw., kann einfach opgeschloss ginn, andeems dat zerklengert Proufmaterial fir d’Beschallung an e Lyspuffer geluecht gëtt. Zéit, verholzt Planzegeweebe, wéi Somen, Dännennolen asw., soll am dréchenen Zoustand gemuel ginn. Verschidden haart, holzeg Planzematerialie musse gefruer an a flëssegem Stéckstoff gemuel ginn, ier se duerch Beschallung extrahéiert ginn. Fir Suspensioune vu Planzenzellkulturen ass eng Ultraschallbehandlung tëscht 30 an 150 Sekonnen an engem Lyspuffer meeschtens genuch. Méi zéit Material wéi Kürbiskäre brauch eng méi intensiv Beschallung, wéi hei ënnendrënner beschriwwen.
Protokoll fir d’Ultraschallextraktioun vun Albumin aus Kürbiskären
Fir d’Ultraschallproteinextraktioun vun Albumin aus reng gemuelenem Kürbiskärpolver ginn 10 g entfettent Kürbiskärpolver an 100 mL deioniséiert Waasser als Léisungsmëttel an en 250mL Becherglas ginn. D’Proteinextraktioun besteet aus zwee Schrëtt: Als Éischt gëtt d’Prouf mat engem Ultraschallapparat vum Sondentyp UP400St (400W, 24kHz), dee mat der Sonotrod S24d7 equipéiert ass, beschallt. D’Becherglas gëtt wärend der Ultraschallhomogeniséierung an e kaalt Waasserbad gestallt. Den uschléissbaren Temperatursensor an d’Astellunge fir d’Temperaturreegelung vum Ultraschallapparat UP400St suergen dofir, datt d’Prouftemperatur ëmmer ënner 30°C gehale gëtt. Duerch déi präzis Temperaturreegelung wärend der Beschallung gëtt eng Denaturéierung vum Albumin verhënnert. Am zweete Schrëtt gouf d’Extraktioun mat engem Mëscher bei enger Dréizuel vun 200 rpm a bei 30°C duerchgefouert. Duerno gëtt d’Becherglas an en thermostatesche Schüttelapparat iwwergefouert. Globulin gëtt duerch Dialys mat destilléiertem Waasser ewechgeholl. Nodeems de Globulin ewechgeholl gouf, kann eng Prouf vum Proteinextrakt geholl ginn, fir den Albuminprofil ze bestëmmen. Uschléissend gëtt de Proteinextrakt mat 0,1 M HCl op pI=3,0 agestallt, fir den Albumin ze koaguléieren. Déi fest Phas gëtt duerch Zentrifugatioun bei 5000g, 20°C ofgetrennt an nees an deioniséiertem Waasser opgeléist. D’Albuminkoagulatioun gëtt zweemol duerchgefouert, fir de Proteinundeel am Albuminkonzentrat ze erhéijen.
Déi alkalesch Ultraschallproteinextraktioun fir d’Hierstellung vu Proteinkonzentrat aus Räisklie weist, datt d’Ultraschallbehandlung zu enger méi héijer Ausbeut u Proteinne bei enger däitlech méi kuerzer Extraktiounszäit féiert – am Verglach mat konventionellen Extraktiounsmethoden.
Protokoll fir d’Proufvirbereedung fir funktionellt iNOS-Enzym
Fir voll funktionellt iNOS-Enzym ze kréien (z. B. fir de Screening vu Medikamenter), gëtt de folgende Protokoll recommandéiert: D’Zellsuspensioun soll op Äis gestallt ginn a gëtt mat engem UP100H bei enger Amplitud vun 10µm am Zyklusmodus mat 5 sec. Beschallung a 25 sec. Paus op Äis beschallt. D’Prozedur soll ongeféier 3-mol widderholl ginn. D’Paus tëscht de Beschallungszykle reduzéiert d’Temperaturerhéijung a wäert dofir de Risiko vun enger Denaturéierung reduzéieren.
Ultraschallsolubiliséierung vu Proteinnen
D’Beschallung kann de Prozess vun der Proteinsolubiliséierung beschleunegen, deen normalerweis e puer Stonnen dauert. Fir d’Prouf net ze iwwerhëtzen an de Proteinofbau souwéi Modifikatiounen a Léisungen, déi Harnstoff enthalen, ze verhënneren, sollen d’Ultraschallimpulser net méi laang wéi e puer Sekonnen daueren.
Ultraschallapparat UP200Ht mat 2mm Mikrospëtzt S26d2 fir d’Beschallung vu klenge Prouwen.
Ultraschallapparater fir d’Proteinextraktioun
Hielscher Ultrasonics bitt eng breet Palette vun Ultraschallhomogenisateure fir den Opbroch vun Zellen, Gewëss, Bakterien, Mikroorganismen, Hiefen a Sporen.
D’Ultraschallapparater fir de Labo vun Hielscher si leeschtungsstaark an einfach ze bedéngen. Si si fir de 24/7-Betrib gebaut an als robust an effizient Labo- an Dëschapparater konzipéiert. Bei allen Apparater kënnen d’Energieofgab an d’Amplitud präzis gesteiert ginn. Déi breet Palette vun Accessoirë bitt weider Konfiguratiounsméiglechkeeten. Déi digital Ultraschallapparater wéi de VialTweeter, UP200Ht, UP200St an UP400St hunn eng integréiert Temperaturreegelung an eng agebaut SD-Kaart fir d’automatesch Opzeechnung vun Donnéeën.
Fir déi indirekt a gläichzäiteg Beschallung vu méi Prouwen ouni Kräizkontaminatioun bidde mir de VialTweeter oder den Ultraschall-CupHorn un.
D’Tabell hei drënner gëtt Iech en Iwwerbléck iwwer eis Ultraschallapparater fir d’Proufvirbereedung, den Zellopbroch an d’Extraktioun. Klickt op den Apparattyp, fir méi Informatiounen iwwer all Ultraschallhomogenisateur ze kréien. Eist gutt ausgebilt technescht Personal mat laangjäreger Erfarung hëlleft Iech gär, dee gëeegentsten Ultraschallapparat fir Är Proufvirbereedung ze wielen!
| Chargevolumen | Duerchflossrate | Recommandéiert Apparater |
|---|---|---|
| bis zu 10 Fläschen oder Réier | net uwennbar | VialTweeter |
| Multiwell- / Mikrotiterplacken | net uwennbar | UIP400MTP |
| méi Réier / Gefäässer | net uwennbar | CupHorn |
| 1 bis 500mL | 10 bis 200mL/min | UP100H |
| 10 bis 1000mL | 20 bis 200mL/min | UP200Ht, UP200St |
| 10 bis 2000mL | 20 bis 400mL/min | UP400St |
Jee no Ärer Uwendung, Ärem Material an Ärem Proufvolumen empfeele mir Iech déi gëeegentst Konfiguratioun fir Är Proufvirbereedung. Kontaktéiert eis nach haut!
Kontaktéiert eis! / Stellt eis Är Froen!
Déi digital Ultraschallapparater vun Hielscher hunn eng Fernsteierung iwwer de Browser an eng automatesch Protokolléierung vun Donnéeën op enger integréierter SD-Kaart.
VialTweeter fir indirekt Beschallung.
Wëssenswäert Fakten
Proteomik
D’Proteomik ass dat Fuerschungsgebitt, dat Proteinnen an de Proteom ënnersicht. Proteinnen erfëllen eng grouss Villfalt vu liewenswichtege Funktiounen an Organismen. De Proteom ass d’Gesamtheet vun de Proteinnen, déi zu engem bestëmmten Zäitpunkt vun engem Genom, enger Zell, engem Gewëss oder engem Organismus expriméiert ginn. De Proteom verännert sech mat der Zäit a mat de spezifeschen Ufuerderungen oder Belaaschtungen, deenen eng Zell oder en Organismus ausgesat ass. Méi genee ass et d’Gesamtheet vun den expriméierte Proteinnen an engem bestëmmten Zelltyp oder Organismus zu engem bestëmmten Zäitpunkt ënner definéierte Bedéngungen. De Begrëff ass eng Zesummesetzung aus Proteinnen a Genom. D’Proteomik ass d’Erfuerschung vum Proteom.
Protein
Proteinne si grouss Biomoleküllen, sougenannt Makromoleküllen – déi aus enger oder méi laange Kette vun Aminosaierreschter bestinn. Proteinne kommen an allen Organisme vu planzlechem an déiereschem Ursprong vir a si fir déi meescht biologesch Funktiounen entscheedend. Well Proteinne vill biologesch Informatiounen enthalen, gi si fir analytesch Zwecker extrahéiert, z. B. fir d’proteomesch Fuerschung. Zu de wichtegste Funktiounen, déi Proteinnen erfëllen, gehéieren d’Katalys vu metabolesche Reaktiounen, d’DNA-Replikatioun, d’Reaktioun op Reizer an den Transport vu Moleküllen vun enger Plaz op eng aner. Proteinnen ënnerscheede sech virun allem duerch hir Aminosaiersequenz, déi duerch d’Nukleotidsequenz vun hire Gene bestëmmt gëtt an déi normalerweis dozou féiert, datt de Protein sech an eng spezifesch dräidimensional Struktur faalt, déi seng Aktivitéit bestëmmt. Proteinne sinn – nieft Peptiden – ee vun den Haaptbestanddeeler vu Liewensmëttel. Dofir ass d’Proteomik e leeschtungsstaarkt Instrument an der Liewensmëttelwëssenschaft, fir Prozesser, d’Liewensmëttelsécherheet an d’Bewäertung vum Närwäert ze optiméieren.
Cloud Point Extraction
Cloud Point Extraction ass eng preanalytesch Method, fir Analyten ze trennen a virzekonzentréieren. A Kombinatioun mat Ultraschall kann d’Extraktioun um Tréiungspunkt verstäerkt ginn, wouduerch de Prozess méi effizient, méi séier a méi ëmweltfrëndlech gëtt. Mat Ultraschall ass d’Extraktioun um Tréiungspunkt eng däitlech méi effizient Method fir d’Virbereedung vun Analyten. Liest méi iwwer d’ultraschallënnerstëtzt Extraktioun um Tréiungspunkt!
Gelelektrophorees
D’Gelelektrophorees ass déi wichtegst Method fir d’Trennung an d’Analys vu Makromoleküllen ewéi DNA, RNA a Proteinen souwéi hire Fragmenter op Basis vun hirer Gréisst a Ladung. Si gëtt an der klinescher Chimie benotzt, fir Proteinen no hirer Ladung an/oder Gréisst ze trennen (IEF-Agarose, am Fong onofhängeg vun der Gréisst), an an der Biochemie, der Molekularbiologie an der Proteomik, fir eng gemëschte Populatioun vun DNA- an RNA-Fragmenter no hirer Längt ze trennen, d’Gréisst vun DNA- an RNA-Fragmenter ze schätzen oder Proteinen no hirer Ladung ze trennen.
Zellkulturen
D’Zellkultur ass de kontrolléierte Wuesstemsprozess, bei deem Zellen ënner kontrolléierte Bedéngunge kultivéiert ginn. D’Bedéngunge vun der Zellkultur variéiere jee no Zelltyp. Am Allgemenge besteet d’Ëmfeld vun enger Zellkultur aus engem gëeegente Gefääss (z. B. enger Petrischuel) mat engem Substrat oder Medium, dat déi essentiell Närstoffer (Aminosaieren, Kuelenhydrater, Vitaminnen, Mineralstoffer), Wuesstemsfacteuren, Hormonen a Gasen (CO2, O2) liwwert an dat physiochemescht Ëmfeld (pH-Puffer, osmoteschen Drock, Temperatur) reguléiert. Déi meescht Zelle brauchen eng Uewerfläch oder e kënschtlecht Substrat, wärend aner Zellkulture fräi schwiewend am Kulturmedium kultivéiert kënne ginn (Suspensiounskultur, Zellsuspensioun).
Massekulture vun Déierenzelllinne ginn an der industrieller Produktioun vu viralen Impfstoffer an anere biotechnologesch gewonnene Produkter benotzt. Mënschlech Stammzelle gi kultivéiert, fir d’Zuel vun den Zellen ze erhéijen an d’Zelle fir Transplantatiounszwecker a verschidde somatesch Zelltypen ze differenzéieren.
Tissuprouwen
De Begrëff Tissu beschreift eng zellulär Tëschenstuf, bei där d’Zellmaterial op engem Organisatiounsniveau tëscht Zellen an engem kompletten Organ läit. An engem Tissu si gläichaarteg Zelle mat deem selwechten Ursprong zesummegefaasst, déi zesummen eng spezifesch Funktioun erfëllen. Duerch d’funktionellt Zesummefaasse vu méi Tissuen entstinn déi komplex Strukture vun den Organer.
Tissuprouwe gi fir d’Fuerschung an der Biologie, Histologie/Histopathologie, Parasitologie, Biochemie an Immunhistochemie geholl, souwéi fir DNA ze kultivéieren an ze extrahéieren. Et kann tëscht Déierentissu (Ënnerdeelung: Mamendéierentissu) a Planzentissu ënnerscheet ginn. Déierentissue ginn an déi véier Grondzorte Bindegeweebe, Muskeltissu, Nerventissu an Epitheeltissu agedeelt. Planzentissu gëtt an déi folgend dräi Tissusystemer ënnerdeelt: d’Epidermis, de Grondtissu an de vaskulären Tissu.
Tissuprouwe kënnen aus Deeler vun Déieren oder Planze preparéiert ginn, z. B. aus Schanken, Muskelen, Blieder asw.
Kierperflëssegkeeten
Blutt, Serum, Plasma, zerebrospinal Flëssegkeet, Spaut a Synovialflëssegkeet si Kierperflëssegkeeten, déi eng räich Quell vun diagnostesch relevanten Informatioune bidden. Dofir ass eng ausgefeilt Preparatioun vu Kierperflëssegkeetsprouwe fir d’Analys wichteg. Déi éischt Schwieregkeet hänkt mat der breeder dynamescher Spannbreet vun de Komponenten zesummen, déi a Kierperflëssegkeete virkommen.
Bestëmmung vun der Proteinkonzentratioun
De Bradford-Test, de Lowry-Test an de Bicinchoninsäure-Test (BCA) si gängeg Tester fir d’Konzentratioun vu Proteinen ze bestëmmen. Rannerserumalbumin (BSA) ass ee vun de Proteinst Standarden, déi am heefegste benotzt ginn.
Lysepuffer
De Lysepuffer muss jee no Zellmaterial oder Tissu (Tissukultur, Planz, Bakterien, Pilzer asw.) ausgewielt ginn, an och ofhängeg dovun, ob d’Zellen an enger Struktur virleien a wéi eng Zort Struktur et ass. Eng breet Palett vu Lysepuffere fir d’Extraktioun vu Proteinnen, Membranen an Organelle gëtt mat engem oder méi Detergenzien formuléiert. D’Detergens gëtt normalerweis duerch Ausprobéieren oder – wann e verfüügbaar ass – no engem bestoende Protokoll fir d’Proteinextraktioun ausgewielt. D’Detergens muss mat dem Ursprongstissu an de Proteinne kompatibel sinn. Am Allgemenge gëtt dat mëllst Detergens ausgewielt, dat fir e bestëmmten Tissu / Protein funktionéiert, fir déi maximal Funktionalitéit vum Extrait z’erhalen. Ausserdeem hält e mëllt Detergens bei der Extraktioun vu Membranen an Organellen d’Membran intakt. Déi Detergenzien, déi heefeg a Lysepuffere benotzt ginn, si meeschtens netionesch oder zwitterionesch, z. B. CHAPS, Deoxycholat, Triton™ X-100, NP40 an Tween 20.
Zum Beispill kënnen Tissuë wéi Gehier, Liewer, Daarm, Nier, Mëlz asw. einfach mat RIPA gepuffert ginn – dobäi sollten awer Proteaseinhibitoren an DTT (z. B. fir d’Gelelektrophorees) bäigesat ginn.
Lysepuffer fir Skelettmuskeltissu (äiskal): 20 mM Tris (pH 7,8), 137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 1 mM MgCl2, 1 % Triton X-100, 10 % (w/v) Glycerol, 1 mM EDTA, 1 mM Dithiothreitol, ergänzt duerch e Cocktail vu Protease- a Phosphataseinhibitoren
Tabell vu gebräichleche Pufferen an hirem pH-Beräich. Am Allgemenge ginn dës Pufferen normalerweis a Konzentratioune vun 20–50 mM benotzt.
| Puffer | pH-Beräich |
|---|---|
| Zitrounesaier – NaOH | 2,2 – 6,5 |
| Natriumcitrat – Zitrounesaier | 3,0 – 6,2 |
| Natriumacetat – Essigsaier | 3,6 – 5,6 |
| Natriumsalz vun der Kakodylsaier – HCl | 5,0 – 7,4 |
| MES – NaOH | 5,6 – 6,8 |
| Natriumdihydrogenphosphat – Dinatriumhydrogenphosphat | 5,8 – 8,0 |
| Imidazol – HCl | 6,2 – 7,8 |
| MOPS – KOH | 6,6 – 7,8 |
| Triethanolaminhydrochlorid – NaOH | 6,8 – 8,8 |
| Tris – HCl | 7,0 – 9,0 |
| HEPES – NaOH | 7,2 – 8,2 |
| Tricin – NaOH | 7,6 – 8,6 |
| Natriumtetraborat – Borsaier | 7,6 – 9,2 |
| Bicin – NaOH | 7,7 – 8,9 |
| Glycin – NaOH | 8,6 – 10,6 |
Bei de meeschte Pufferen hänkt de pH-Wäert vun der Temperatur of. Dat gëllt besonnesch fir Tris-Pufferen. De pKa ännert sech vun 8,06 bei 25°C op 8,85 bei 0°C.
(pH a pKa vun engem Puffer: De pH moosst d’Konzentratioun vu Waasserstoffionen an enger wässerlecher Léisung. De pKa (= Saierdissoziatiounskonstant) ass eng verbonnen, awer méi spezifesch Moossgréisst, well en hëlleft virauszesoen, wéi eng Moleküll sech bei engem bestëmmte pH-Wäert verhält.)
TRIzol
TRIzol ass eng cheemesch Léisung, déi benotzt gëtt, fir RNA/DNA/Protein bei der Guanidiniumthiocyanat-Phenol-Chloroform-Extraktioun ze extrahéieren. D’Benotzung vun enger ultraschallënnerstëtzter TRIzol-Extraktioun féiert zu héijen Ausbeute vun DNA, RNA a Proteinnen aus där selwechter Prouf an iwwertrëfft doduerch aner Extraktiounsmethoden.
Literatur/Referenzen
- Chittapalo T, Noomhorm A (2009): Ultrasonic assisted alkali extraction of protein from defatted rice bran and properties of the protein concentrates. Int J Food Sci Technol 44: 1843–1849.
- Simões, André E.S:; Pereira, Diane M.; Amaral, Joana D.; Nunes, Ana F.; Gomes, Sofia E.; Rodrigues, Pedro M.; Lo, Adrian C.; D’Hooge, Rudi; Steer, Clifford J.; Thibodeau, Stephen N.; Borralho, Pedro M.; Rodrigues, Cecília M.P. (2013): Efficient recovery of proteins from multiple source samples after trizol or trizol LS RNA extraction and long-term storage. BMC Genomics 2013, 14:181.