초음파 줄기 세포 격리
- 초음파 캐비테이션은 인간 지방 조직에서 줄기 세포를 분리하는 매우 효과적인 기계적 방법입니다.
- Ultrasonically isolated stromal vascular fraction (SVF)은 의료 분야에서 높은 재생 잠재력을 보여줍니다.
- Hielscher Ultrasonics는 줄기 세포 수확을위한 직접 및 간접 초음파 처리의 다양한 옵션을 제공합니다.
줄기 세포의 초음파 격리
인체에서 추출한 지방 조직 (지방 흡입술을 통해)을 초음파 처리하여 줄기 세포 및 기타 성장 세포에서 조직을 제거합니다. 이 분리 된 세포 부분은 간질 혈관 분획 세포 (SVF)로 알려져 있습니다.
지방 조직에서 줄기 세포의 초음파 격리 기술은 기계적 전단 (shear) 인 초음파 유도 캐비테이션의 작동 원리만을 기반으로합니다. 캐비테이션 전단력은 지방 조직을 파괴하여 줄기 세포가 지방 조직의 구조에서 벗어나게합니다. 초음파 줄기 세포 분리는 콜라게나 제제, 트립신 또는 디스 페아 제의 사용을 피하면서 효소가 필요없는 과정입니다.
추출 된 줄기 세포, 중간 엽 줄기 세포, 내피 전구 세포 및 기타 성장 세포 유형을 분리하기 위해 초음파 처리 된 지방 조직을 원심 분리합니다.
분리 된 줄기 세포를 채취하고 세포 수, 생존력, 내 독소 및 그람 염색을 포함하여자가 이식을 위해 즉시 사용하기 전에 또는 저온 보관 보관시 보존합니다.
왜 효소를 피 하시는가?
줄기 세포 분리를위한 효소 소화가 효능이 부족할뿐만 아니라 높은 비용과 가능한 안전 위험을 동반하기 때문에 [Oberbauer et al. 2015], 초음파 캐비테이션과 같은 비 효소 적 분리 방법이 바람직하다. 초음파 분리 단계는 세포와 세포 응집체를 지방 조직에서 기계적으로 분리하여 효소 분해를 대체합니다.
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지방 - 유래 줄기 세포
줄기 세포 수율
초음파 캐비테이션 수율 1.67-2.24 × 10을 이용한 SVF 분리 방법 발표7 97.1-98.9%의 생존율을 가진 세포 [빅터, S., 2014]. 약 2-4백만 개의 세포/그램 지방 조직의 세포 수율은 해리된 지방 조직에서 성숙한 지방세포의 초음파 분해에 의해 수득되었다[Bright et al., 2014].
초음파로 준비된 세포는 표준 효소 단리 방법과 비교하여 똑같이 높은 지방 형성 및 골 형성 분화 잠재력을 가지고있다 [Oberbauer et al. 2015].
줄기 세포 분리를위한 초음파 시스템
줄기 세포 치료에 대한 정확한 제어를 가능하게하는 신뢰할 수있는 초음파 장비는 최고의 안전성과 최상의 품질을 보장하기 위해 환자의 성공적인 치료를위한 핵심 요소입니다. Hielscher Ultrasonics는 줄기와 내피 전구 세포를 분리 및 수확하기 위해자가 초음파 캐비테이션 분리 과정에 대한 다양한 옵션을 제공합니다.
직접 초음파 처리
직접 초음파 처리를 통한 줄기 세포 분리 과정에서 초음파 호른 (sonotrode, 초음파 팁 / 프로브)이 지방 지방 조직에 잠기 게됩니다. sonotrode를 통해, 초음파 파도가 autologous 지방에 직접 결합하여 초음파 cavitation 잔여 조직에서 줄기 세포와 stromal 세포를 해제합니다. Hielscher 초음파 프로세서 UP200Ht 과 UP200St sonotrode S26d14는자가 줄기 세포 치료에 일반적으로 사용되는 시스템입니다. 직접 초음파 처리에 의한 SVF 분리는 주로 청정실 설비에서의 사용에 적합합니다.
간접 초음파 처리
줄기 세포는자가 조직에 사용되기 때문에 공정의 무균 상태가 매우 중요합니다. 따라서, Hielscher는 간접 초음파의 여러 옵션을 개발했습니다. GDmini2, 유리 병 및 기타 사용자 정의 시스템. 간접 초음파 처리에 의해 초음파는 벽 컨테이너를 통해 지방 조직으로 연결됩니다. 간질 성 혈관 분획 (SVF)은 직접 초음파 처리와 마찬가지로 초음파 캐비테이션에 의해 지방 조직으로부터 해리됩니다.
간접 초음파 처리는 폐쇄 된 용기에서 세포를 처리하는 이점을 제공합니다 오염이없는 조건 이는 초음파 혼 (sonotrode)을 삽입함으로써 교차 오염의 위험이 제거되기 때문입니다. 세포 분리는 멸균 공정 조건을 보장하는 밀폐 시스템에서 수행됩니다.
Hielscher의 디지털 초음파 장치는 터치 디스플레이 또는 브라우저 제어를 통해 정밀하게 제어 할 수 있습니다. 초음파 처리 절차는 직관적 메뉴를 통해 사전 설정 될 수 있습니다. 초음파 장치에는 자동 데이터 기록 기능이 있습니다 (모든 초음파 처리 데이터는 통합 SD 카드에 저장됩니다). 초음파 전원 입력은 셀 격리 프로토콜에 맞게 정확하게 조정할 수 있습니다.
문학 / 참고 문헌
- 오버바우어, 엘레니; 스테펜하겐, 캐롤린; 뷔르저, 크리스토프; 가브리엘, 기독교; 레드, 하인즈; Wolbank, Susanne (2015) : 지방 조직 유래 세포에 대한 효소 및 비 효소 격리 시스템 : 현재 당해. 세포 재생 (2015) 4:7.
알만한 가치가있는 사실
줄기 세포
줄기 세포는 동일한 유형의 세포를 무한정 생산할 수있는 다세포 생물의 미분화 세포입니다. 그들은 삶과 성장의 초기 상태에서 신체의 많은 다른 세포 유형으로 발전 할 수있는 놀라운 잠재력을 특징으로합니다. 줄기 세포의 가장 두드러진 특징은 세포 분열에 의해 스스로를 갱신 할 수있는 능력과 특별한 기능을 가진 조직 또는 장기 특이 적 세포로 전환하는 능력입니다. 다 능성 줄기 세포는 내배엽 (내 위장, 위장관, 폐), 중배엽 (근육, 뼈, 혈액, 비뇨 생식기) 또는 외배엽 (표피 조직과 신경계)의 세 가지 생식 세포 중 하나로 분화 할 수 있습니다.
소화관 및 골수와 같은 일부 기관에서는 줄기 세포가 정기적으로 분열되어 마모되거나 손상된 조직을 수선하고 교체합니다. 줄기 세포는 췌장이나 심장과 같은 다른 기관에서는 특별한 조건 하에서 만 분열됩니다.
재생 및 미적 약물 치료에서 다양한 치료 응용 분야에 높은 잠재력을 제공하는 간엽 간질 / 간세포 (MSC)는 주로 골수에서 발견되지만 다른 조직 (예 : 연골, 지방, 근육 세포)에서 분리 될 수 있습니다. 너무. Mesenchymal 줄기 세포는 자체 갱신 능력을 특징으로하는 원형 성체 줄기 세포로 간주됩니다.
줄기 세포 연구 및 치료는 이식 목적 (조직 공학)을 위해 조직 및 기관을 육성하는 데 사용됩니다. 줄기 세포의 적용을위한 다른 의학 분야는 두뇌 질환 (예 : 파킨슨 병과 알츠하이머 병), 세포 결핍 치료, 혈액 질환 (예 : 백혈병), 관절과 연골 퇴행 (예 : 골관절염) 및 미용 치료 (예 : 노화 방지 트리트먼트). 일반적으로 줄기 세포는 대략 크기입니다. 직경 15-25 미크론.
간엽 줄기 세포 (뼈 세포), 연골 세포 (연골 세포), 근육 세포 (근육 세포) 및 지방 세포 (지방 세포)를 비롯한 다양한 세포 유형으로 분화 할 수있는 다 능성 간질 세포입니다.
간질 혈관 분획 (SVF)
Stromal Vascular Fraction (SVF)은 인체의 지방 조직에서 지방 흡입을 통해 추출 할 수있는 lipoaspirate의 구성 성분입니다. lipoaspirate는 세포의 이질적인 혼합물로 구성되어 있으며 여러 줄기 세포로 분화 할 수있는 능력과 같이 골수 줄기 세포와의 유사성을 나타내는 지방 줄기 세포 (ASC 또는 ADSC)로 알려진 줄기 세포의 함량이 높습니다.
SVF의 이종 인구는 지방 유래 줄기 세포의 중요 분획뿐만 아니라 내피 세포, 적혈구, 섬유 아세포, 림프구, 단핵 세포 / 대 식세포 및 혈관 주위 세포를 포함한다.
지방 - 유래 기질 / 줄기 세포 (ASC)
(EGF), 혈관 내피 세포 성장 인자 (VEGF), 염기성 섬유 모세포 성장 인자 (bFGF), 케 라티노 사이트 성장 인자 (KGF) 등의 생체 활성 성장 인자를 분비한다. (PDGF), 간세포 성장 인자 (HGF), 형질 전환 성장 인자 -β (TGF-β), 인슐린 성장 인자 (IGF) 및 뇌 유도 신경 영양 인자 (BDNF)를 포함한다. ACS는 성장 인자를 방출 할뿐만 아니라 fms 관련 티로신 키나아제 3 (Flt-3) 리간드, 과립구 콜로니 자극 인자 (G-CSF), 과립구 대식 세포 콜로니 자극 인자 (GM-CSF), 대 식세포 6, IL-7, IL-8, IL-11 및 IL-12와 같은 인터루킨 (IL), 백혈병 억제 인자 (LIF) 및 종양 괴사 인자 알파 (TNF-α).
줄기 세포 유형의 추출
인간에게서 자가 성체 줄기세포는 다음 근원에서 추출될 수 있습니다:
- 골수는 수확, 즉 뼈 속으로 굴착하여 추출해야합니다.
- 지방 흡입술로 추출해야하는 지방 조직 (지질 세포).
- 헌혈을 통한 추출이 필요한 혈액. 여기서 헌혈자의 혈액은 “투석” 줄기 세포가 추출되는 반면 다른 혈액 성분은 기증자에게 되돌려진다.