EPA3550 초음파 추출 가이드
초음파 추출 작은 실험실 샘플뿐만 아니라 상업적 생산 규모에서 귀중한 화합물의 추출에 적용 할 수있는 녹색, 환경 친화적 인 추출 방법입니다. 미국 환경보호국(EPA)은 다양한 분석 화학 및 특성 테스트 방법론, 환경 샘플링 및 모니터링, 품질 보증을 권장하여 자원 보존 및 복구 법 (RCRA). 초음파 보조 추출을 위해 EPA는 다음과 같은 지침을 발표했습니다.
방법 3550C – 초음파 추출
1. 범위 및 응용 프로그램
또한, SW-846 방법은 방법 정의 파라미터의 분석에 필요한 방법을 제외하고, 실험실에서 분석 절차 또는 기술을 수행하는 방법에 대한 일반적인 정보를 포함하는 지침 방법이 기재되어 있습니다. 자체 일반 사용 또는 특정 프로젝트 응용 프로그램에 대한 자체 상세 표준 운영 절차(SOP)를 생성하기 위한 기본 시작점으로 사용할 수 있습니다. 이 방법에 포함된 성능 데이터는 지침 용이며 실험실 인증을 위한 절대 QC 승인 기준으로 사용되어서는 안 됩니다.
1.1 이 방법은 토양, 슬러지 및 폐기물과 같은 고체에서 비휘발성 및 반휘발성 유기 화합물을 추출하는 절차를 설명합니다. 초음파 공정은 추출 용매와 샘플 매트릭스의 친밀한 접촉을 보장합니다.
1.2 이 방법은 유기 화합물의 예상 농도에 따라 두 가지 절차로 나뉩니다. 저농도 절차(초 11.3)는 20 mg/kg 이하로 예상되는 개별 유기 성분에 대한 것이며 더 큰 샘플 크기와 3개의 직렬 추출을 사용합니다(낮은 농도는 추출하기가 더 어렵습니다). 중간/고농도 절차(초 11.4)는 20 mg/kg 이상으로 예상되는 개별 유기 성분에 대한 것이며 더 작은 샘플과 단일 추출을 사용합니다.
1.3 분석 전에 추출이 일종의 정리(예: 3600 계열의 방법을 사용)의 대상이 되는 것이 좋습니다.
1.4 최대 추출 효율을 달성하기 위해 제조업체의 지침을 포함하여 메서드를 명시적으로 따르는 것이 중요합니다. 추출 절차의 중요한 측면에 대한 설명은 Sec. 11.0을 참조하십시오. 특정 작동 설정에 대한 제조업체의 지침을 참조하십시오.
1.5 이 방법은 분석물의 상이한 그룹에 사용될 수 있는 적어도 3개의 추출 용매 시스템을 설명합니다(Sec. 7.4 참조). 관심 있는 해석에 대해 적절한 성능을 입증할 수 있는 경우 다른 용매 시스템을 사용할 수 있습니다. 추출 용매의 선택은 관심 있는 분석체에 따라 달라지며 단일 용매는 모든 분석물 그룹에 보편적으로 적용되지 않습니다. 초음파 추출의 효율성에 대한 우려, 특히 약 10 μg / kg 이하의 농도에서 분석가가 특정 용매 시스템의 성능과 작동 조건을 입증하는 것이 필수적입니다. 관심의 해부학과 관심의 농도. 이 데모는 이 방법에 특별히 나열된 용매를 포함하여 사용되는 모든 용매 시스템에 적용됩니다. 최소한 이러한 데모는 깨끗한 참조 매트릭스를 사용하여 Method 3500에 설명된 숙련도의 초기 데모를 포함합니다. 방법 8000은 매트릭스 스파이크 및 실험실 제어 샘플 결과뿐만 아니라 이러한 데모에 대한 성능 기준을 개발하는 데 사용할 수있는 절차를 설명합니다.
1.6 EPA는 유기 인산농약과 관련하여 초음파 추출의 효율성에 대한 제한된 공개 데이터가 10 억 ppb 이하의 낮은 부분 당 농도와 아래에 있다고 지적합니다. 결과적으로, 특히 이러한 화합물에 대한 이 방법의 사용은 위에서 설명한 것과 같은 성능 데이터 및 Method 3500에 의해 지원되어야 한다.
1.7 이 방법을 사용하기 전에 분석가는 전체 분석 (예 : Method 3500, 3600, 5000 및 8000)에 사용될 수있는 각 절차 유형에 대한 기본 방법을 참조하여 품질 관리 절차에 대한 추가 정보를 참조하는 것이 좋습니다. QC 승인 기준, 계산 및 일반 지침의 개발. 또한 분석가들은 매뉴얼 앞면의 면책 조항과 2장의 정보를 참조하여 방법, 장치, 재료, 시약 및 소모품의 선택에 대한 의도된 유연성에 대한 지침을 제공해야 하며, 분석가는 채택된 기술이 관심 의 분석물, 관심 의 매트릭스 및 관심 수준에 적합하다는 것을 입증합니다.
또한 분석가와 데이터 사용자는 규정에 명시적으로 명시된 경우를 제외하고 연방 테스트 요구 사항에 따라 SW-846 메서드를 사용해야 하는 것이 아니라는 점을 권장합니다. 이 방법에 포함된 정보는 EPA가 분석가와 규제 커뮤니티에서 의도한 애플리케이션의 데이터 품질 목표를 충족하는 결과를 생성하는 데 필요한 판단을 내리는 데 사용할 수 있는 지침으로 제공됩니다.
1.8 이 방법의 사용은 적절히 경험이 풍부하고 숙련된 분석가에 의해 또는 감독하에 사용이 제한됩니다. 각 분석가는 이 방법을 사용하여 허용 가능한 결과를 생성하는 능력을 입증해야 합니다. 위에서 언급했듯이 이러한 데모는 관심 있는 해석물 및 사용된 용매 시스템뿐만 아니라 저농도/중/고농도 시료에 대한 절차에 특정합니다.
유리 병 초음파 시료 준비 용
2. 방법의 요약
2.1 낮은 농도 절차 — 샘플은 무수 황산 나트륨과 혼합되어 자유롭게 흐르는 분말을 형성합니다. 혼합물은 초음파 추출을 사용하여 용매로 세 번 추출됩니다. 추출물은 진공 여과 또는 원심분리에 의해 샘플로부터 분리된다. 추출물은 최종 농도, 정리 및/또는 분석을 위해 준비되었습니다.
2.2 중간 /고농도 절차 — 샘플은 무수 황산 나트륨과 혼합되어 자유롭게 흐르는 분말을 형성합니다. 이것은 초음파 추출을 사용하여 한 번 용매로 추출됩니다. 추출의 일부가 정리 및/또는 분석을 위해 수집됩니다.
3. 정의
이 방법과 관련이 있을 수 있는 정의에 대한 1장 및 제조업체의 지침을 참조하십시오.
4. 간섭
4.1 용매, 시약, 유리 제품 및 기타 시료 처리 하드웨어는 시료 분석에 아티팩트 및/또는 간섭을 생성할 수 있습니다. 이러한 모든 재료는 분석 방법 블랭크를 분석하여 분석 조건에서 간섭이 없는 것으로 입증되어야 합니다.
모든 유리 시스템에서 증류에 의한 시약및 용매의 정제의 특정 선택이 필요할 수 있습니다. 품질 관리 절차에 대한 구체적인 지침과 유리 제품 세척에 대한 일반적인 지침은 4장에 사용되는 각 방법을 참조하십시오.
4.2 간섭은 일반적으로 관심 있는 타말체에 따라 다릅니다. 따라서 추출 간섭에 대한 특정 지침에 대한 Method 3500 및 적절한 결정 방법을 참조하십시오.
5. 안전
이 방법은 사용과 관련된 모든 안전 문제를 해결하지 는 않습니다. 실험실은 안전한 작업 환경과 이 방법에 나열된 화학 물질의 안전한 취급에 관한 OSHA 규정에 대한 현재 의식 파일을 유지할 책임이 있습니다. 이러한 분석에 관련된 모든 직원이 재료 안전 데이터 시트(MSDS)의 참조 파일을 사용할 수 있어야 합니다.
6. 장비 및 소모품
본 매뉴얼의 상품명 또는 상업용 제품에 대한 언급은 예시적인 목적으로만 사용되며 EPA 보증 또는 독점적 사용 권고를 구성하지 않습니다. SW-846 방법에 인용된 제품 및 계측기 설정은 방법 개발 중에 사용하거나 기관에서 나중에 평가한 제품 및 설정을 나타냅니다. 본 매뉴얼에 나열된 것 이외의 유리 제품, 시약, 소모품, 장비 및 설정은 의도한 용도에 적합한 방법 성능이 입증되고 문서화된 경우 사용될 수 있습니다.
이 섹션에는 일반적인 실험실 유리 제품(예: 비커 및 플라스크)이 나열되어 있지 않습니다.
6.2 초음파 준비 — 티타늄 팁이 장착된 혼형 장치 또는 적절한 성능을 제공하는 장치를 사용해야 합니다. (예: UP200Ht 또는 UP200St)
6.2.1 초음파 파괴자 — 파괴자는 펄스 기능을 갖춘 최소 전력 와트 300와트의 전력 을 가져야 합니다. 캐비테이션 사운드를 줄이기 위해 설계된 장치를 권장합니다. 낮은 및 중간 / 높은 농도의 샘플 추출을위한 파괴기를 준비하기위한 제조업체의 지침을 따르십시오. (예: UP400S)
6.2.2 낮은 농도 방법 절차에 3/4 인치 혼을 사용하고 중간 / 고농도 방법 절차에 대한 1/2 인치 혼에 부착 된 1/8 인치 테이퍼 마이크로 팁을 사용합니다.
6.3 사운드 보호 박스 – 청력 손상을 방지하기 위해 사운드 보호 보호 상자(예: 사운드 보호 상자 SPB-L)를 사용하는 것이 좋습니다. 따라서 초음파 처리의 캐비테이션 노이즈가 크게 감소 될 수 있습니다.
추가 장비
6.4.1 건조 오븐 — 105 도GC를 유지할 수 있습니다.
6.4.2 데시카토르.
6.4.3 도가니 — 도자기 또는 일회용 알루미늄.
6.5 파스퇴르 파이펫 — 1 mL, 유리, 일회용.
6.7 진공 또는 압력 여과 장치
6.7.1 부흐너 깔때기
6.7.2 필터 용지
6.8 쿠데르나 덴마크어 (K-D) 장치
6.8.1 농축기 튜브 — 10 mL, 졸업. 접지 유리 스토퍼는 추출물의 증발을 방지하는 데 사용됩니다.
6.8.2 증발 플라스크 — 500 mL. 스프링, 클램프 또는 이에 상응하는 플라스크를 농축기 튜브에 부착합니다.
6.8.3 스나이더 열 — 세 공 매크로.
6.8.4 스나이더 열 — 2 볼 마이크로.
6.8.5 스프링스 — 1/2 인치.
6.9 용매 증기 회수 시스템.
참고 :이 유리 제품은 Kuderna - 덴마크 증발 농축기의 사용을 필요로하는 농도 절차 동안 용매 회수의 목적을 위해 권장됩니다. 휘발성 유기물의 공기 배출을 규제하는 연방, 주 또는 지방 자치 단체 규정에 따라 이 장치의 통합이 필요할 수 있습니다. EPA는 배출 감축 프로그램을 구현하는 방법으로 이러한 유형의 매립 시스템을 통합할 것을 권장합니다. 용매 회수는 폐기물 최소화 및 오염 방지 이니셔티브를 준수하는 수단입니다.
6.10 끓는 칩 — 용매 추출, 약 10/40 메쉬 (실리콘 카바이드 또는 이에 상응하는).
6.11 수조 — 가열, 동심 링 커버, ° 5 degC에 온도 제어 할 수 있습니다. 목욕은 후드에 사용해야합니다.
6.12 밸런스 — 가장 가까운 0.01 g까지 정확하게 계량할 수 있는 최고 로딩.
6.13 바이알 — 2-mL, GC 자동 샘플러, 폴리테트라 플루오로에틸렌 (PTFE)- 줄 지어 나사 캡 또는 크림프 상판이 장착되어 있습니다.
6.14 유리 반짝이 바이알 — PTFE 안감이 있는 스크류 캡이 장착된 20mL.
6.15 주걱 — 스테인레스 스틸 또는 PTFE.
6.16 건조 컬럼 — 하단에 유리 울 20mm ID 붕산 염 유리 크로마토 그래피 컬럼.
참고: 유리 디스크가 있는 기둥은 오염이 심한 추출물을 건조하는 데 사용한 후에는 오염을 제거하기 어렵습니다. 프랙츠가 없는 컬럼은 구입이 될 수 있습니다.
흡착제는 유지하기 위해 유리 울의 작은 패드를 사용합니다. 아세톤의 50 mL로 유리 울 패드를 예세척한 다음 흡착제로 컬럼을 포장하기 전에 용출 용매 50 mL을 제거합니다.
6.17 질소 증발 장치(선택 사항) — N-Evap, 12- 또는 24 위치 (조직 모델 112, 또는 이에 해당).
7. 시약 및 표준
7.2 무유기 시약물. 이 방법의 물에 대한 모든 참조는 제 1 장에 정의된 바와 같이 유기-무첨가 시약 물을 지칭한다.
7.3 황산 나트륨 (과립, 무수), Na2SO4. 400 degC에서 4시간 동안 얕은 트레이에 가열하거나, 염화 나트륨으로 황산나트륨을 미리 세척하여 정화합니다. 황산 나트륨이 염화 질화 메틸렌으로 미리 세척되면 황산 나트륨의 간섭이 없음을 입증하는 방법을 분석해야합니다.
7.4 추출 용매
시료는 관심 있는 농도에서 시료 매트릭스로부터 관심 있는 골재의 최적의 재현 가능한 회수를 제공하는 용매 시스템을 사용하여 추출해야 합니다. 추출 용매의 선택은 관심 있는 분석체에 따라 달라지며 단일 용매는 모든 분석물 그룹에 보편적으로 적용되지 않습니다. 이 방법에 구체적으로 나열된 용매 시스템을 포함하여 어떤 용매 시스템이 사용하든, 분석가는 관심 있는 수준에서 관심 있는 분석체에 대해 적절한 성능을 입증해야 합니다. 최소한 이러한 데모는 깨끗한 참조 매트릭스를 사용하여 Method 3500에 설명된 숙련도의 초기 데모를 포함합니다. 방법 8000은 매트릭스 스파이크 및 실험실 제어 샘플 결과뿐만 아니라 이러한 데모에 대한 성능 기준을 개발하는 데 사용할 수있는 절차를 설명합니다.
아래에 기술된 많은 용매 시스템은 아세톤과 같은 수분 용매, 및 메틸렌 염화물 또는 헥산과 같은 수질 불분해성 용매의 조합을 포함한다. 상기 수분-혼화용매의 목적은 혼합 용매가 고체 입자의 표면의 물층을 침투하도록 함으로써 습식 고체의 추출을 용이하게 하는 것이다. 수분 비수정 용매는 유사한 극성을 가진 유기 화합물을 추출합니다. 따라서, 헥산과 같은 비극성 용매는 PCB와 같은 비극성 분석액에 자주 사용되고, 한편 메틸렌 염화물과 같은 극성 용매는 극성 분석물들을 위해 사용될 수 있다. 아세톤의 극성은 혼합 용매 시스템에서 극성 분석물을 추출하는 데 도움이 될 수 있습니다.
표 1은 다양한 추출 용매 시스템을 사용하여 NIST SRM에서 추출된 선택된 반휘발성 유기 화합물에 대한 예시 회수 데이터를 제공합니다. 다음 섹션에서는 다양한 종류의 해석물용 매에 대한 용매 선택에 대한 지침을 제공합니다.
모든 용매는 농약 품질 또는 이와 동등해야 합니다. 용매는 사용하기 전에 탈기될 수 있다.
7.4.1 반휘발성 유기물은 아세톤/헥산(1:1, v/v CH3COCH3/C6H14) 또는 아세톤/메틸렌 염화물(1:1, v/vCH3COCH3/CH2Cl2)으로 추출할 수 있습니다.
7.4.2 오르가노클로린 살충제는 아세톤/헥산(1:1, v/v CH3COCH3/C6H14) 또는 아세톤/메틸렌 염화물(1:1, v/vCH3COCH3/CH2Cl2)으로 추출할 수 있습니다.
7.4.3 PCBs는 아세톤/헥산(1:1, v/v CH3COCH3/C6H14) 또는 아세톤/메틸렌 염화물(1:1, v/vCH3COCH3/CH2Cl2) 또는 헥산(C6H14)으로 추출할 수 있습니다.
7.4.4 다른 용매 시스템은 분석가가 관심 있는 농도에서 관심 있는 분석체에 대해 적절한 성능을 입증할 수 있는 경우, 샘플 매트릭스에서 사용될 수 있다(방법 3500 참조).
7.5 교환 용매 — 일부 결정적 방법을 사용하여 추출 용매는 결정적 방법에 사용되는 계측과 호환되는 용매로 교환되어야 합니다. 적절한 교환 용매의 선택에 사용되는 결정적 방법을 참조하십시오. 모든 용매는 살충제 품질 또는 이와 동등한 품질이어야 합니다. 교환 용매의 예는 아래에 제시된다.
7.5.1 헥산, C6H14
7.5.2 2-프로판올, (CH3)2CHOH
7.5.3 사이클로헥산, C6H12
7.5.4 아세토니트릴, CH3CN
7.5.5 메탄올, CH3OH
사운드 보호 박스 SPB-L은 초음파 처리의 캐비테이션 노이즈를 크게 줄입니다.
8. 견본 수집, 보존 및 저장
8.1 제4장 소개 자료를 참조하세요. “유기 세포” 방법(3500)은, 구체적인 결정적 방법이 채택될 것이다.
8.2 이 절차에 의해 추출되는 고체 샘플은 반휘발성 유기물을 함유한 다른 고체 샘플과 마찬가지로 수집하여 보관해야 합니다.
9. 품질 관리
9.2 숙련도의 초기 데모
각 실험실은 깨끗한 매트릭스에서 표적 분석체에 대한 허용 가능한 정확도 및 정밀도 데이터를 생성하여 활용하는 각 시료 전처리 및 결정적 방법 조합에 대한 초기 숙련도를 입증해야 합니다. 또한 실험실은 새로운 직원을 교육하거나 계측에 중대한 변화가 이루어질 때마다 숙련도의 시연을 반복해야 합니다. 숙련도 데모를 수행하는 방법에 대한 자세한 내용은 방법 8000을 참조하십시오.
9.3 처음에는 샘플을 처리하기 전에 분석가가 샘플 및 시약과 접촉하는 장비의 모든 부품이 간섭이 없다는 것을 입증해야 합니다. 이 작업은 메서드 공백의 분석을 통해 수행됩니다. 지속적인 검사로서, 시료를 추출, 정리 및 분석할 때마다 시약의 변화가 있을 때, 만성 실험실 오염에 대한 보호장치로서 관심 있는 화합물에 대해 빈 방법을 추출하고 분석해야 합니다.
9.4 모든 방법 블랭크, 매트릭스 스파이크 샘플 또는 복제 샘플은 실제 샘플에 사용되는 것과 동일한 분석 절차(Sec. 11.0)를 거쳐야 합니다.
9.5 표준 품질 보증 관행은 적절한 체계적인 계획 문서 및 실험실 SSO에 포함된 이 방법과 함께 사용해야 합니다. 모든 계측기 작동 조건을 기록해야 합니다.
9.6 또한 추출 및 시료 준비 품질 관리 절차 및 결정적인 QC 절차에 사용되는 결정적 방법에 대한 Method 3500을 참조하십시오.
9.7 적절한 결정적 방법에 나열될 때, 대리 표준은 추출하기 전에 모든 샘플에 추가되어야 합니다. 자세한 내용은 메서드 3500 및 8000 및 적절한 결정 방법을 참조하십시오.
9.8 앞에서 언급했듯이, 초음파 추출을 포함한 모든 추출 기술의 사용은 관심 있는 수준에서 관심 있는 분석물의 특정 용매 시스템 및 작동 조건의 성능을 입증하는 데이터에 의해 지원되어야 합니다. 샘플 매트릭스.
10. 교정 및 표준화
이 샘플 추출 절차와 직접 연관된 교정 또는 표준화 단계는 없습니다.
11. 수속
Sec. 1.4에서 언급했듯이 초음파 추출은 토양 / 고체에 대한 다른 추출 방법과 같이 엄격하지 않을 수 있습니다. 따라서 최대 추출 효율성을 달성하기 위해 이 방법을 명시적으로(제조업체의 지침 포함)을 따르는 것이 중요합니다. 최소한 이 기술을 성공적으로 사용하려면 다음을 수행하십시오.
11.1 샘플 처리
11.1.2 폐기물 샘플 — 다중 상으로 구성된 샘플은 제2장에 설명된 상 분리 절차에 의해 추출되기 전에 제조되어야 합니다. 이 추출 절차는 고체전용입니다.
11.1.3 건식 폐기물 시료 는 연삭 가능 — 분쇄 하거나 그렇지 않으면 1 mm 체를 통과 하거나 1-mm 구멍을 통해 압출 될 수 있도록 폐기물을 세분화. 분쇄 후 적어도 10g을 산출하기 위해 충분한 샘플을 분쇄 장치에 도입하십시오.
주의 : 실험실의 오염을 피하기 위해 건조 및 연삭을 후드에서 수행해야합니다.
11.1.4 거미, 섬유질 또는 지성 물질은 연삭에 허용되지 않습니다. — 절단, 파쇄, 또는 그렇지 않으면 추출을위한 샘플 표면의 혼합 및 최대 노출을 허용하기 위해 이러한 재료의 크기를 줄일 수 있습니다.
11.2% 건조 중량 측정 — 시료 결과를 건조 중량 기준으로 계산할 때, 분석 측정에 사용되는 부분과 동시에 별도의 시료 부분을 계량해야 합니다.
주의: 건조 오븐은 후드에 포함되거나 환기되어야 합니다. 심각한 실험실 오염은 심하게 오염된 유해 폐기물 샘플로 인해 발생할 수 있습니다.
추출할 샘플 aliquot를 계량한 직후, 시료의 5-10g aliquot를 타르도크로 추가로 칭량합니다. 105 degC에서 하룻밤 동안 이 알리쿼트건조. 계량하기 전에 건조기에서 식힙니다.
다음과 같이 건조 중량 백분율을 계산합니다.
% 건조 중량 = (건조 시료 g/ 시료 g) x 100
이 오븐 건조 알리쿼트 추출에 사용 되지 않습니다 및 건조 중량결정 되 면 적절 하 게 폐기 한다.
11.3 저농도 추출 절차
이 절차는 유기 분석의 20 mg/kg 이하또는 같을 것으로 예상되는 고체 시료에 적용됩니다.
초음파 처리 전 단계
11.3.1 다음 단계는 더 휘발성 추출물의 손실을 피하기 위해 신속하게 수행되어야 합니다.
11.3.1.1 400 mL 비커에 약 30g의 시료를 계량하십시오. 가장 가까운 0.1 g에 무게를 기록합니다.
11.3.1.2 스파이크를 위해 선택한 각 배치의 샘플에 대해 행렬 스파이크 솔루션의 1.0 mL를 추가합니다. 매트릭스 스파이크 화합물 및 농도의 적절한 선택에 대한 지침은 Method 3500을 참조하십시오. 또한 11.3초에 있는 메모를 참조하십시오.
11.3.1.3 모든 샘플, 스파이크 샘플, QC 샘플 및 블랭크에 서로게이트 표준 솔루션의 1.0mL를 추가합니다. 대리 화합물 및 농도의 적절한 선택에 대한 지침은 Method 3500을 참조하십시오. 또한 11.3초에 있는 메모를 참조하십시오.
11.3.1.4 겔 투과 정리(Method 3640 참조)를 사용하는 경우, 분석가는 대리 스파이크 솔루션(및 해당되는 경우 매트릭스 스파이크 솔루션)의 부피를 두 배로 추가하거나 최종 추출물을 정상 볼륨의 절반으로 집중해야 합니다. GPC 열의 로딩으로 인해 손실된 추출의 절반을 보정합니다. 또한 11.3초에 있는 메모를 참조하십시오.
11.3.1.5 무분별한 모래 질감이 없는 비다공성 또는 습식 시료(구미 또는 점토 타입)는 주걱을 사용하여 무수 황산나트륨 60 g과 혼합되어야 합니다. 필요한 경우 황산 나트륨을 더 첨가할 수 있습니다. 황산 나트륨을 첨가 한 후, 샘플은 자유롭게 흐르셔야합니다. 또한 11.3초에 있는 메모를 참조하십시오.
11.3.1.6 즉시 추출 용매 또는 용매 혼합물의 100 mL을 추가합니다(용매 선택에 대한 정보는 Sec. 7.4 및 표 2 참조).
11.3.2 용매 표면 아래 약 1/2인치 의 3/4인치 파괴자 경적 끝의 바닥면을 침전물 층 위에 놓습니다.
참고 : 초음파 경적 / sonotrode가 제조업체의 지침에 따라 올바르게 장착되었는지 확인하십시오.
11.3.3 11.3 100%(완전 전력)로 설정된 출력 제어 또는 제조업체의 권장 전력 설정에서 3분 동안 샘플을 초음파로 추출하고, 펄스의 모드 스위치(연속 에너지가 아닌 맥동 에너지)를, 백분율 듀티 사이클을 50%로 설정합니다( 50%의 시간 및 50%의 시간 오프)에 에너지를 제공합니다) 마이크로팁 프로브를 사용하지 마십시오.
11.3.4 추출물을 Decant하고 깨끗한 500 mL 여과 플라스크에 부착된 Buchner 깔때기에서 여과지(예: Whatman No. 41 또는 이에 상응하는)를 통해 걸러내세요. 양자택일로, 추출물을 원심분리기 병으로 장식하고 원심분리기를 저속으로 제거하여 입자를 제거한다.
11.3.5 깨끗한 용매의 100-mL 부분을 두 번 더 추출하여 두 번 더 반복하십시오. 각 초음파 추출 후 용매를 꺼낸다. 최종 초음파 추출 후 전체 샘플을 Buchner 깔때기에 붓고 추출 용매로 비커를 헹검을 헹온 다음 깔때기에 헹검을 추가하십시오.
초음파 처리 후 단계
11.3.6 필요한 경우 Sec.11.5의 절차에 따라 분석하기 전에 추출물을 집중하십시오. 그렇지 않으면 11.7초로 진행합니다.
샘플 초음파 처리를위한 마이크로 팁이 달린 UP200St
11.4 중간/고농도 추출 절차
이 절차는 20 mg/kg 이상의 유기 세포가 함유될 것으로 예상되는 고체 시료에 적용됩니다.
초음파 처리 전 단계
11.4.2 스파이크를 위해 선택한 각 배치의 샘플에 대해 행렬 스파이크 솔루션의 1.0 mL를 추가합니다. 매트릭스 스파이크 화합물 및 농도의 적절한 선택에 대한 지침은 Method 3500을 참조하십시오. 또한 11.3초에 있는 메모를 참조하십시오.
11.4.3 모든 샘플, 스파이크 샘플, QC 샘플 및 블랭크에 1.0 mL의 대리 스파이크 솔루션을 추가합니다. 매트릭스 스파이크 화합물 및 농도의 적절한 선택에 대한 지침은 Method 3500을 참조하십시오. 또한 11.3초에 있는 메모를 참조하십시오.
11.4.4 겔 투과 정리(Method 3640 참조)를 사용하는 경우, 분석가는 대리 스파이크 솔루션(및 해당되는 경우 매트릭스 스파이크 솔루션)의 부피를 두 배로 추가하거나 최종 추출물을 정상 볼륨의 절반으로 집중해야 합니다. GPC 열의 로딩으로 인해 손실된 추출의 절반을 보정합니다.
11.4.5 무분별한 모래 질감이 없는 비다공성 또는 습식 시료(구미 또는 점토 타입)는 주걱을 사용하여 무수 황산나트륨 2 g과 혼합되어야 합니다. 필요한 경우 황산 나트륨을 더 첨가할 수 있습니다. 황산 나트륨을 첨가 한 후, 샘플은 자유롭게 흐르셔야합니다 (초 11.3의 참고 참조).
11.4.6 대리 및 매트릭스 스파이크의 추가 부피를 고려하여 최종 부피를 10.0 mL로 가져오는 데 필요한 용매의 부피를 즉시 추가합니다(용매 선택에 대한 정보는 Sec. 7.4 및 표 2 참조).
11.4.7 출력 제어 설정 5에서 2 분 동안 1/8 인치 테이퍼 마이크로 팁 초음파 프로브로 샘플을 추출하고 펄스에 모드 스위치와 50 %의 퍼센트 듀티 사이클로 추출하십시오.
11.4.8 일회용 파스퇴르 피펫을 2~3cm의 유리 울로 느슨하게 포장합니다. 유리 울을 통해 샘플 추출물을 걸러내고 적합한 용기에 추출물을 수집합니다. 추출 용매의 전체 10 mL은 샘플에서 회수 할 수 없습니다. 따라서 분석가는 사용할 결정적 방법의 민감도에 적합한 볼륨을 수집해야 합니다. 예를 들어, 추출물이 더 농축될 필요가 없는 방법(예를 들어, Method 8081은 전형적으로 10 mL의 최종 추출물 부피를 채용함), 추출물은 진틸레이션 바이알 또는 다른 밀봉 가능한 용기에서 수집될 수 있다. 추가 농도가 필요한 추출물의 경우 최종 샘플 결과의 계산을 단순화하기 위해 이러한 모든 샘플에 대한 표준 부피를 수집하는 것이 좋습니다. 예를 들어, 깨끗한 농축기 튜브에서 추출물 5.0 mL를 수집합니다. 이 볼륨은 원래 샘플 추출의 총 볼륨의 정확히 절반을 나타냅니다. 필요에 따라 “손실” 최종 샘플 계산에서 추출물의 절반을, 또는 손실을 보상하기 위해 최종 추출물을 명목 최종 부피(예를 들어, 0.5 mL 대 1.0 mL)의 절반에 집중한다.
11.4.9 필요한 경우, 11.5 초 또는 11.6초의 절차에 따라 분석하기 전에 추출물을 집중시소한다. 그렇지 않으면 11.7초로 진행합니다.
농도 기술
감도 기준을 충족하기 위해 필요한 경우, 낮은 농도 또는 중간/고농도 추출 절차의 샘플 추출물은 결정적 방법 및 특정 적용에 필요한 최종 부피에 집중될 수 있습니다. K-D 기술 또는 질소 증발을 사용하여 사용할 수 있습니다.
11.5.1 적절한 크기의 증발 플라스크에 10mL 농축기 튜브를 부착하여 쿠데르나 덴마크(K-D) 농축기를 조립합니다.
11.5.2 무수 황산나트륨 약 10 g을 함유한 건조 컬럼을 통과하여 추출물을 건조시다. K-D 농축기에서 말린 추출물을 수집합니다.
11.5.3 정량적 전달을 달성하기 위해 수집 튜브 및 건조 컬럼을 K-D 플라스크내로 추가로 20mL 의 용매 부분을 헹구십시오.
11.5.4 플라스크에 하나 또는 두 개의 깨끗한 끓는 칩을 추가하고 세 개의 볼 스나이더 열을 부착합니다. 용매 증기 회수 유리 제품 (콘덴서 및 수집 장치, Sec. 6.9 참조)을 제조업체의 지침에 따라 K-D 장치의 Snyder 열에 부착하십시오. 스나이더 컬럼을 약 1 mL의 메틸렌 염화물(또는 기타 적합한 용매)을 컬럼의 상부에 첨가하여 적시다. K-D 장치를 온수 욕조에 놓습니다(15 – 용매의 비점 위 20 EC)는 농축기 튜브가 부분적으로 뜨거운 물에 침지되도록 하고 플라스크의 전체 하부 둥근 표면은 뜨거운 증기로 목욕된다. 10에서 농도를 완료하기 위해 필요에 따라 장치의 수직 위치와 수온을 조정합니다. – 20분 증류의 적절한 속도로, 열의 공은 적극적으로 수다를 떨지만 챔버는 홍수되지 않습니다. 액체의 명백한 부피가 1 mL에 도달하면 수조에서 K-D 장치를 제거하고 적어도 10 분 동안 배수하고 식힙니다.
주의: 추출물이 건조해지지 않도록 주의하십시오. 유기 인산농약은 특히 그러한 손실에 취약합니다.
11.5.4.1 용매 교환이 필요한 경우(표 2 또는 적절한 결정 방법에 표시된 대로), Snyder 컬럼을 순간적으로 제거하고 교환 용매와 새 끓는 칩의 50 mL를 추가합니다.
11.5.4.2 Snyder 열을 다시 부착합니다. 적절한 증류 속도를 유지하기 위해 필요한 경우 수조의 온도를 높이기 위해 추출물을 농축하십시오.
11.5.5.5 Snyder 열을 제거합니다. K-D 플라스크와 스나이더 컬럼의 하부 관절을 1로 농축기 튜브에 헹구십시오. – 용매 2 mL. 추출물은 Sec. 11.6에 설명된 기술 중 하나를 사용하여 더 농축되거나 최종 부피 5.0으로 조정될 수 있습니다. – 10.0 mL은 적절한 용매를 사용하여(표 2 또는 적절한 결정적 방법 참조). 유황 결정이 존재하는 경우, 정화를 위해 방법 3660으로 진행하십시오.
11.6 추가 농도가 필요한 경우 마이크로 Snyder 컬럼 기법(초 11.6.1 참조) 또는 질소 증발 기술(11.6.2 참조)을 사용하십시오.
11.6.1 마이크로 스나이더 컬럼 기법
11.6.1.1 농축기 튜브에 신선한 깨끗한 끓는 칩을 추가하고 농축기 튜브에 직접 2 볼 마이크로 스나이더 컬럼을 부착합니다. 제조업체의 지시에 따라 용매 증기 회수 유리 제품(콘덴서 및 수집 장치)을 K-D 장치의 마이크로 스나이더 컬럼에 부착합니다. 스나이더 컬럼을 0.5 mL의 메틸렌 염화물 또는 교환 용매를 컬럼의 상부에 첨가하여 예열한다. 농축기 튜브가 부분적으로 뜨거운 물에 침지되도록 뜨거운 물에 마이크로 농도 장치를 놓습니다. 장치의 수직 위치와 필요에 따라 수온을 조정하여 농도를 5로 완료합니다. – 10분 증류의 적절한 속도로 열의 공은 적극적으로 수다를 떨지만 챔버는 홍수가 되지 않습니다.
11.6.1.2 액체의 명백한 부피가 0.5 mL에 도달하면 수조에서 장치를 제거하고 적어도 10 분 동안 배수하고 식힙니다. 최종 추출 볼륨을 1.0으로 조정 – 2.0 mL.
주의: 추출물이 건조해지지 않도록 주의하십시오. 유기 인산농약은 특히 그러한 손실에 취약합니다.
11.6.2 질소 증발 기술
11.6.2.1 농축기 튜브를 따뜻한 욕조(30 degC)에 놓고 깨끗하고 건조한 질소(활성탄 기둥을 통해 여과)를 사용하여 용매 부피를 0.5 mL로 증발시보냅니다.
주의: 프탈레이트 간섭이 발생할 수 있으므로 탄소 트랩과 시료 사이에 새로운 플라스틱 튜브를 사용해서는 안 됩니다.
11.6.2.2 농축기 튜브의 내부 벽을 농도 중에 용매로 여러 번 헹굴 수 있습니다. 증발 하는 동안, 추출물에 물을 응축 하지 않도록 농축기 튜브를 배치 합니다. 정상적인 절차에서 추출물은 건조하게 되어서는 안됩니다.
주의: 추출물이 건조해지지 않도록 주의하십시오. 유기 인산농약은 특히 그러한 손실에 취약합니다.
11.7 추출물은 이제 적절한 결정적 기법을 사용하여 표적 분석물을 위한 정화 절차를 거치거나 분석될 수 있다. 추출물의 추가 취급이 즉시 수행되지 않으면 농축기 튜브를 스토퍼하고 냉장고에 보관하십시오. 추출물이 2일 이상 보관될 경우 PTFE 라이닝 스크류 캡이 장착된 바이알로 이송하고 적절하게 라벨을 부착해야 합니다.
12. 데이터 분석 및 계산
이 추출 프로시저와 명시적으로 연관된 계산은 없습니다. 최종 샘플 결과 계산에 적합한 결정 방법을 참조하십시오.
13. 방법 성능
14. 오염 방지
14.1 오염 방지는 발생 시점에서 폐기물의 양 및/또는 독성을 줄이거나 제거하는 모든 기술을 포함합니다. 실험실 운영에는 오염 방지를 위한 수많은 기회가 존재합니다. EPA는 오염 방지를 우선 선택의 관리 옵션으로 두는 환경 관리 기술의 선호 계층 구조를 수립했습니다. 가능할 때마다 실험실 직원은 오염 방지 기술을 사용하여 폐기물 발생을 해결해야 합니다. 폐기물을 원천에서 가능한 비용으로 줄일 수 없는 경우, 기관은 다음 최선의 선택으로 재활용을 권장합니다.
14.2 실험실 및 연구 기관에 적용 될 수있는 오염 방지에 대한 정보는 덜 더 나은 상담 : 미국 화학 사회의 부서에서 사용할 수있는 폐기물 감소를위한 실험실 화학 관리 정부 관계 및 과학 정책, 1155 16th St., N.W. 워싱턴 D.C. 20036, https://www.acs.org.
15. 폐기물 관리
후드 및 벤치 운영, 하수도 배출 허가 및 규정의 서신 및 정신을 준수하고, 모든 고체 및 유해 폐기물 규정, 특히 유해 폐기물 식별 규칙 및 토지 처리를 준수함으로써 제한. 폐기물 관리에 대한 자세한 내용은 Sec. 14.2에 나열된 주소에서 미국 화학 협회에서 구할 수 있는 실험실 직원의 폐기물 관리 매뉴얼을 참조하십시오.
16. 참고 문헌
- 미국 EPA, “실험실 간 비교 연구: 휘발성 및 반휘발성 화합물에 대한 방법,” 환경 모니터링 시스템 연구소, 연구 개발 사무실, 라스베이거스, NV, EPA 600/4-84-027, 1984.
- C. S. 하인, P. J. 마스덴, A. S. S. Shurtleff, “고체 샘플에서 부록 IX 어음의 평가를위한 방법 3540 (Soxhlet) 및 3550 (소처리)의 평가,” S-CUBED, EPA 계약 보고서 68-03-33-75, 작업 할당 번호 03, 문서 번호. SSS-R- 88-9436, 1988년 10월.
알만한 가치가있는 사실
초음파 조직 균질 기는 종종 프로브 초음파기, 초음파 용해기, 초음파 분쇄기, 초음파 분쇄기, 초음파 분쇄기, 초음파 분쇄기, 초음파 분쇄기, 세포 분쇄기, 초음파 분 산기 또는 용해기로 불립니다. 서로 다른 용어는 초음파 처리로 수행 할 수있는 다양한 애플리케이션의 결과입니다.
UP200Ht에 대한 다른 sonotrode 크기