초음파로 준비된 버퍼 용액
용해 완충액은 초음파 조직 균질화기를 사용하여 효율적이고 신속하게 준비할 수 있습니다. 초음파 는 혼합, 용해 및 분산을위한 꿈의 도구이기 때문에 용해 버퍼를 안정적이고 사용자 친화적으로 준비 할 수 있습니다.
용해 완충액의 초음파 준비
초음파 조직 균질화는 세포 파괴, 용해 및 추출을위한 일반적인 도구이므로 대부분의 실험실에서 사용할 수 있습니다. 프로브 형 초음파 발생기의 2 차 응용 분야는 용해 완충액의 준비입니다.
용해 완충액은 개방(용해) 세포를 부수고 다운스트림 분석을 위해 내용물을 방출하는 데 사용되는 용액입니다. 용해 완충액의 구체적인 조성은 용해되는 세포의 유형과 다운스트림 적용에 따라 달라질 수 있습니다. 그러나 일반적인 용해 완충액에는 세제, 염 및 프로테아제 억제제와 같은 성분이 포함되어 있습니다. 완충염(예: Tris-HCl) 및 이온염(예: NaCl)은 일반적으로 용해물의 pH와 삼투압을 조절하는 데 사용됩니다.
용해 완충액을 만들기 위해 성분을 적절한 농도와 pH로 함께 혼합합니다. 혼합물은 일반적으로 성분이 용해되고 용액이 균질해질 때까지 교반되거나 흔들립니다.
초음파 균질화는 성분의 혼합 및 용해를 개선하여 좋은 용해 완충액을 만드는 데 사용할 수 있는 방법입니다. 이 방법에서는 초음파가 – 일반적으로 20-30kHz 범위 – 혼합물에 적용되어 붕괴되고 강렬한 국소 에너지를 생성하는 캐비테이션 기포를 생성하여 구성 요소의 기계적 전단 및 혼합을 유발합니다.
초음파 균질화 공정은 구성 요소의 덩어리 또는 응집체를 분해하고 용액이 균일하게 혼합되도록하는 데 도움이 될 수 있습니다. 결과적으로, 이러한 개선된 용해 완충액은 보다 효율적인 세포 파괴 및 추출된 물질의 더 높은 수율로 이어질 수 있다. 또한 초음파 균질화는 기존의 교반 또는 진탕 방법에 비해 용해 완충액을 만드는 데 필요한 시간을 줄일 수 있습니다.
전반적으로, 초음파 균질화는 용해 완충액 준비의 품질과 효율성을 향상시키는 강력한 도구입니다.
초음파 실험실 균질 기 UP200Ht 시료 전처리, 용해, 추출, DNA 단편화 및 용해를 위한 연구실에서 널리 사용됩니다.
초음파 용해 버퍼 준비를위한 프로토콜
이것은 프로브 형 초음파 발생기를 사용하여 용해 버퍼를 만들기위한 일반적인 프로토콜입니다.
자료:
- 선택한 세제(예: Triton X-100, SDS, CHAPS)
- 선택한 염(예: NaCl, KCl)
- 프로테아제 억제제(예: PMSF, 아프로티닌, 류펩틴)
- 초음파기
- 교 반기
- 탈이온수
- pH 측정기 또는 pH 스트립
단계별 지침 :
- 용해할 세포 또는 조직과 용해물을 사용할 다운스트림 응용 분야를 기반으로 용해 완충액의 조성을 결정하십시오. 세제, 소금 및 프로테아제 억제제의 원액을 원하는 농도로 준비하십시오.
- 세제, 소금 및 프로테아제 억제제의 원액을 비커 또는 플라스크에 추가합니다.
- 탈이온수를 추가하여 원하는 양의 완충액으로 볼륨을 높입니다.
- 사전 혼합 용액을 얻기 위해 교반기를 사용하여 성분을 혼합하십시오.
- pH 측정기 또는 pH 스트립을 사용하여 완충액의 pH를 측정하고 필요에 따라 소량의 산 또는 염기로 pH를 조정합니다.
- 프로브 형 초음파 를 사용하여 사전 혼합 용액을 균질화하여 매우 균질 한 용액을 얻습니다. 따라서 용액이 완전히 혼합되고 덩어리 또는 응집체가 분해 될 때까지 몇 초 동안 용액을 초음파 처리합니다. 초음파 처리의 지속 시간과 힘은 사용 된 특정 용해 버퍼와 초음파 발생기에 따라 최적화 할 수 있습니다.
- 초음파 처리 후 버퍼의 pH를 다시 측정하고 필요에 따라 조정합니다.
- 0.2 미크론 필터를 통해 버퍼를 필터링하여 초음파 처리 중에 형성되었을 수 있는 파편이나 응집체를 제거합니다.
- 이제 용해 버퍼를 사용할 준비가 되었습니다.
참고: 용해 완충액의 정확한 조성과 pH는 용해되는 세포 또는 조직과 다운스트림 응용 분야에 따라 달라질 수 있습니다. 위의 프로토콜은 일반적인 지침이며 특정 애플리케이션에 맞게 최적화해야 할 수 있습니다.
초음파 균질화는 일반적으로 세포 내 분자의 세포 파괴 및 추출에 사용됩니다. 따라서 많은 용해 응용 분야는 용해 완충액의 준비뿐만 아니라 기계적 세포 파괴 및 추출을 위해 프로브 형 초음파 처리를 사용합니다.
이것은 초음파 조직 균질화를 실험실을위한 다목적 도구로 만들고 미생물학, 생명 공학 및 생명 과학 분야에서 초음파 의 광범위한 사용을 설명합니다.
초음파 실험실 균질 기
Hielscher 초음파는 다양한 전력 등급과 샘플 볼륨에서 초음파 균질화 및 프로브 (sonotrodes)를 제조 및 공급합니다. 이를 통해 샘플 준비에 가장 적합한 초음파 파괴기를 제공 할 수 있습니다. 우리는 최고 품질, 뛰어난 사용자 편안함 및 신뢰할 수있는 초음파 처리 결과에 중점을 둡니다. 모든 디지털 초음파 는 스마트 소프트웨어, 초음파 프로토콜의 프로그래밍 및 사전 설정, 브라우저 원격 제어, 온도 제어, 샘플 조명 및 내장 SD 카드에 자동 데이터 기록 기능을 갖추고 있습니다.
설계, 제조 및 컨설팅 – 독일에서 만든 품질
Hielscher 초음파 는 최고 품질 및 디자인 표준으로 잘 알려져 있습니다. 견고성과 쉬운 작동으로 초음파 를 산업 시설에 원활하게 통합 할 수 있습니다. 거친 조건과 까다로운 환경은 Hielscher 초음파 로 쉽게 처리 할 수 있습니다.
Hielscher 초음파는 ISO 인증 회사이며 최첨단 기술과 사용자 친화성을 특징으로 하는 고성능 초음파 에 특히 중점을 둡니다. 물론, Hielscher 초음파 는 CE를 준수하고 UL, CSA 및 RoHs의 요구 사항을 충족합니다.
The table below gives you an overview of our various lab ultrasonicators:
| UP200St의 VialTweeter | 200W | 26kHz | 작은 유리 병의 초음파 처리, 예 : Eppendorf 1.5mL |
| UP50H | 50W | 30kHz | 핸드 헬드 또는 스탠드 마운트 실험실 균질 기 |
| UP100H | 100W | 30kHz | 핸드 헬드 또는 스탠드 마운트 실험실 균질 기 |
| UP200Ht | 200W | 26kHz | 핸드 헬드 또는 스탠드 마운트 실험실 균질 기 |
| UP200St | 200W | 26kHz | 스탠드 마운트 실험실 균질 기 |
| UP400St | 400W | 24kHz | 스탠드 마운트 실험실 균질 기 |
| SonoStep | 200W | 26kHz | 실험실 반응기 결합, 초음파, 펌프, 교반기 및 용기 |
| GDmini2 | 200W | 26kHz | 오염이없는 플로우 셀 |
| 쿠펀 | 200W | 26kHz | 바이알 및 비커를 위한 강렬한 초음파 수조 |
| UIP400MTP | 400W | 24kHz | 멀티 웰 플레이트 / 마이크로 타이터 플레이트 용 초음파 시스템 |
초음파 cuphorn 샘플의 멸균 균질화를 위해 닫힌 튜브와 바이알의 강렬한 초음파 처리.
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초음파 실험실 균질화 UP400St 용해 완충액 준비 및 후속 세포 파괴에 일반적으로 사용됩니다.
문학 / 참고 문헌
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