ბაქტერიული ნიმუშების ულტრაბგერითი დეზაგრეგაცია
ბაქტერიული ნიმუშები იშვიათად მოდის ნამდვილი ერთუჯრედიანი სუსპენზიების სახით. კულტურები იზრდება ჯაჭვებისა და ფლოკების სახით, გარემოდან გამოყოფილი იზოლატები ქმნიან აგრეგატებს, რომლებსაც უჯრედგარე პოლიმერული ნივთიერებები აკავშირებს, ხოლო ცენტრიფუგირებული ნალექები ხშირად არ ექვემდებარება რესუსპენზირებას საფუძვლიანი ვორტექსირების მიუხედავად. სიცოცხლისუნარიანი უჯრედების დათვლა, ოპტიკური სიმკვრივე, ნაკადის ციტომეტრია და მიკრობიომის პროფილირება ყველა გულისხმობს, რომ ერთი ნაწილაკი უდრის ერთ უჯრედს. უჯრედების ულტრაბგერითი დეაგრეგაცია ამ წინააღმდეგობას აგვარებს: მოკლე, კონტროლირებადი სონიკაციის იმპულსები ყოფს აგრეგატებს ცალკეულ უჯრედებად მათი ლიზისის გარეშე.
რატომ არღვევს უჯრედების აგრეგაცია თქვენს შედეგებს
აგრეგაცია ბიოლოგიური თვისებაა და არა მომზადების შეცდომა. Staphylococcus, Streptococcus, Lactobacillus, Actinomyces და მრავალი გარემოს სახეობა იზრდება ჯაჭვების, მტევნების ან ბიოფილმის ფრაგმენტების სახით, ხოლო უჯრედგარე დნმ და პოლისაქარიდები აწებებს უჯრედებს ერთმანეთზე ნალექებსა და ნაცხის ელუატებში. ანალიტიკური შედეგები სისტემატურია:
- კოლონიების რაოდენობა ნაკლებად ფასდება, რადგან ერთი გროვა წარმოქმნის ერთ კოლონიას, მიუხედავად იმისა, რამდენ უჯრედს შეიცავს.
- ოპტიკური სიმკვრივე და ნაწილაკების მრიცხველები უჯრედების ნაცვლად აგრეგატებს აფიქსირებენ, რაც ზრდის მრუდებს აღრევს.
- ნაკადის ციტომეტრია და უჯრედების დახარისხება არასწორად ითვლის დაგროვილ მოვლენებს და გამორიცხავს მათ ანალიზიდან.
- დნმ-ისა და ცილის ექსტრაქცია მხოლოდ აგრეგატის ზედაპირზე მყოფ უჯრედებს წარმოადგენს, რაც ამახინჯებს მიკრობიომისა და ომიკის მონაცემებს.
ჩვეულებრივი საშუალებები ნელია, არასრულია ან ქიმიურად ცვლის ნიმუშს. ენერგიული პიპეტირება და ვორტექსირება მიკროაგრეგატებს ტოვებს. ფერმენტული ან ქელატორზე დაფუძნებული დისპერგირება ცვლის უჯრედის ზედაპირს, რომლის ანალიზიც შესაძლოა გსურდეთ. კონტროლირებადი კავიტაციით მექანიკური დეაგრეგაცია წამებში მოქმედებს და დანამატებს არ საჭიროებს.
ერთი აგრეგატი უდრის ერთ კოლონიას – და ერთ არასწორ შედეგს. ნახეთ, როგორ წარმოქმნის ულტრაბგერითი დეაგრეგაცია ნამდვილ ერთუჯრედიან სუსპენზიებს ლიზისის, აეროზოლების ან ზონდთან მანიპულაციების გარეშე. მოითხოვეთ მეტი ინფორმაცია!
მრავალმილიანი სონიკატორი VialTweeter უკონტაქტო ნიმუშის მომზადებისთვის: უჯრედების გროვების დაშლა დალუქულ მილებში
როგორ ახდენს სონიკაცია უჯრედების დეაგრეგაციას მათი ლიზისის გარეშე
ულტრაბგერითი უჯრედული დეაგრეგაცია იყენებს მექანიკური სიმტკიცის განსხვავებას. ბაქტერიულ აგრეგატებს ერთად ინახავს შედარებით სუსტი უჯრედშორისი ბმები და უჯრედგარე მატრიქსი, ხოლო უჯრედის ხელუხლებელი გარსი გაცილებით მაღალ წანაცვლებას უძლებს. როდესაც კალიბრირებული ულტრაბგერა შედის სუსპენზიაში, აკუსტიკური კავიტაცია წარმოქმნის მიკროდინებას, წნევის იმპულსებსა და წანაცვლების ძალებს, რომლებიც პირველ რიგში აგრეგატების გამყოფ საზღვრებზე მოქმედებს. გროვები, ჯაჭვები და ბიოფილმის ფრაგმენტები იშლება (დეაგლომერაცია) მანამ, სანამ მიღწეულია ენერგიის დონე, რომელზეც მემბრანები გასკდება (ლიზისი).
ბაქტერიული უჯრედების გროვების ულტრაბგერითი დეაგრეგაცია
დეაგრეგაცია თუ ლიზისი – რატომ არის მნიშვნელოვანი სონიკაციის პარამეტრები
პრაქტიკული შედეგი ისაა, რომ დეაგრეგაცია და ლიზისი ერთსა და იმავე ინსტრუმენტზე სხვადასხვა პარამეტრებით ხორციელდება. ზომიერი ამპლიტუდის, მოკლე იმპულსური ციკლებისა და კონტროლირებადი ტემპერატურის პირობებში მიიღება სიცოცხლისუნარიანი ერთუჯრედიანი სუსპენზია. ამპლიტუდის, ექსპოზიციის დროის ან ნიმუშის ტემპერატურის გაზრდა პროცესს უჯრედშიდა სამიზნეებისთვის უჯრედების სრული დაშლისკენ გადახრის. Hielscher-ის გენერატორები საშუალებას გაძლევთ ზუსტად დააყენოთ ამპლიტუდა, სიმძლავრე, იმპულსი და ენერგიის შეყვანა და შეინახოთ მეთოდი, ამიტომ დეაგრეგაციის ეტაპი განმეორებადია ნიმუშებს, ოპერატორებსა და გაშვებებს შორის.
ეფექტური უკონტაქტო სონიკაცია
აბაზანური სონიკაცია ამგვარ კონტროლს ვერ უზრუნველყოფს. ულტრაბგერითი სარეცხი აბაზანები და ავზები მხოლოდ დაბალ ულტრაბგერით ენერგიას იძლევა, რაც არასრულ მომზადებას იწვევს, ხოლო კავიტაცია არათანაბრად ვითარდება, ამიტომ თითოეული მილი აბაზანაში თავისი მდებარეობის მიხედვით მუშავდება. VialTweeter ინტენსიურ, ფოკუსირებულ ულტრაბგერით ძალებს ჭურჭლის კედლის გავლით პირდაპირ ერთდროულად 10-მდე დალუქულ ნიმუშს გადასცემს. დამუშავება, რომელიც აბაზანაში ხანგრძლივ, ცვალებად ექსპოზიციას მოითხოვს, სტანდარტიზებული იმპულსური რეჟიმით სრულდება.
Hielscher-ის უკონტაქტო სონიკატორები ინტენსიურ, ფოკუსირებულ ულტრაბგერას იყენებენ დახურული ფლაკონების კედლების გავლით. VialTweeter ერთდროულად 10-მდე ფლაკონს ამუშავებს იდენტური ინტენსივობით, ნიმუშში ზონდის გარეშე, ჯვარედინი დაბინძურებისა და აეროზოლის გამოყოფის გარეშე. სადაც გამტარუნარიანობა ამას მოითხოვს, მიკროფირფიტების სონიკატორები UIP400MTP და UIP550MTP იმავე კონტროლირებად ენერგიის გადაცემას მრავალფოსოიან ფირფიტებზე ავრცელებენ.
VialTweeter ერთდროულად ამუშავებს 10-მდე პატარა ფლაკონს და 5-მდე დიდ საცდელ მილს.
უკონტაქტო ულტრაბგერითი დაშლის უპირატესობები
- ნულოვანი ჯვარედინი დაბინძურება: რადგან ფლაკონები მუდმივად დახურული რჩება და ნიმუშში ზონდი არ იძირება, ჯვარედინი დაბინძურება და ნიმუშის დაკარგვა მთლიანად გამოირიცხება. ნიმუშებს შორის სტერილიზაცია საჭირო არ არის და ერთი გაშვება მეორეზე ვერ იმოქმედებს.
- აეროზოლებისგან დაცვა: ღია ზონდით სონიკაცია წარმოქმნის ინფექციურ აეროზოლებს და აბინძურებს ინსტრუმენტის ზედაპირებს. დალუქული ფლაკონით სონიკაცია ნიმუშს საკუთარ მილში ინახავს, რაც მნიშვნელოვანია პათოგენური ბაქტერიების, მაგალითად Mycobacterium tuberculosis-ის და სხვა BSL-2 ან BSL-3 აგენტების დამუშავებისას.
- წვერის ეროზიის გარეშე: ტიტანის ზონდები მუშაობისას ნიმუშში მიკრონაწილაკების მცირე რაოდენობას გამოყოფენ. ეს ნაწილაკები შემდგომ ცვლიან ოპტიკურ სიმკვრივეს და ნაწილაკების დათვლას. ჭურჭლის კედლით არაპირდაპირი სონიკაცია მყარი ნაწილაკების ამ წყაროს მთლიანად გამორიცხავს.
- ერთგვაროვანი გამტარუნარიანობა: VialTweeter ერთსა და იმავე ულტრაბგერით ინტენსივობას გადასცემს 10-მდე ფლაკონიდან თითოეულს, ამიტომ სონიკაციის შედეგები ერთგვაროვანი და განმეორებადია. პოზიციის ეფექტები, რომლებიც აბაზანებსა და ერთნიმუშიან ზონდირებას ახასიათებს, ქრება, და თქვენი საბაზისო მაჩვენებლები რეპლიკატებს შორის შედარებადი რჩება.
- ნიმუშის მთლიანობა: მილები მთელი დამუშავების განმავლობაში დახურული რჩება, ამიტომ ნიმუში ვერ დაბინძურდება, ვერ გაფუჭდება და ვერ აქროლდება. მცირე მოცულობები განზავების გარეშე მუშავდება, მათ შორის ძვირფასი კლინიკური ნალექებიც, რომელთათვის დამატებითი გადატანის ეტაპი მიუღებელია.
- პროცესის კონტროლი: ამპლიტუდა რეგულირდება 20-დან 100%-მდე, იმპულსური რეჟიმი 0-დან 100%-მდე, ხოლო სისტემები უზრუნველყოფს ტემპერატურის მონიტორინგს, რათა თერმომგრძნობიარე შტამები და ცილები დაზიანების ზღვარს ქვემოთ დარჩეს.
ტიპიური აპლიკაციები
- მიკრობიომისა და ნაწლავის შიგთავსის ანალიზი: Lactobacillus-ის, Bifidobacterium-ისა და ფეკალური ნიმუშების დისპერგირება თესვამდე ან სეკვენირებამდე, რათა გროვების გამო რაოდენობები არ შემცირდეს.
- სურსათისა და წყლის მიკრობიოლოგია: ფლოკების დეაგრეგაცია ნაცხებში, ჩამორეცხვებსა და გამამდიდრებელ ბულიონებში კოლონიებისა და სიცოცხლისუნარიანობის ზუსტი განსაზღვრისთვის.
- ბიოფილმის კვლევა: მატარებლებიდან და ზედაპირებიდან უჯრედების გამოყოფა ერთუჯრედიანი სუსპენზიების სახით, ფერმენტული დამუშავების გარეშე, რომელიც ზედაპირულ ცილებს მოაცილებდა.
- კლინიკური დიაგნოსტიკა: ნახველის, ჩირქისა და ნაცხის ელუატების რესუსპენზირება იზოლირებულ პირობებში.
- უჯრედული კულტურა: შეჯგუფებული ძუძუმწოვრების, მწერებისა და CHO უჯრედების აგრეგატების დაშლა დათვლამდე და პასაჟირებამდე.
- სამუშაო პროცესის სრული მომზადება: იგივე ინსტრუმენტი, რომელიც დაბალ ამპლიტუდაზე უჯრედებს დეაგრეგირებს, უფრო მაღალ პარამეტრებზე უჯრედების სრულ დაშლას ახორციელებს, ამიტომ ლიზისი, ცილების ექსტრაქცია და დნმ-ის ფრაგმენტაცია მილებს შორის გადატანის გარეშე გრძელდება.
მრავალფოსოიანი ფირფიტების სონიკატორი UIP400MTP უჯრედების გროვების მაღალი გამტარუნარიანობის დეაგლომერაციისთვის
მიკროფირფიტების სონიკატორების UIP400MTP და UIP550MTP მოდელები არა მხოლოდ მრავალფოსოიან ფირფიტებს, არამედ მილების სადგამებსაც ამუშავებს.
იპოვეთ სწორი სონიკატორი თქვენი დეაგრეგაციის სამუშაო პროცესისთვის
მრავალმილიანი სონიკატორი VialTweeter
სტერილური დეაგრეგაციის სასურველი მეთოდი დალუქულ ფლაკონებში. 26 კჰც-ზე მომუშავე 200-ვატიანი UP200St პროცესორით და ავტომატური მორგებით VialTweeter ულტრაბგერას ირიბად, 10-მდე დახურული ფლაკონის კედლების გავლით ერთდროულად გადასცემს, თითო მილზე 10 ვტ-მდე სიმძლავრით, რაც უზრუნველყოფს თანაბარ და განმეორებად შედეგებს ჯვარედინი დაბინძურებისა და ნიმუშის დაკარგვის გარეშე. ტიტანის VialTweeter სონოტროდი ავტოკლავირებადია, ამპლიტუდისა და იმპულსის პარამეტრები კი რეგულირდება და ინახება, რაც დეაგლომერაციის პროტოკოლისთვის საჭირო კონტროლის დიაპაზონს უზრუნველყოფს. სტანდარტული 10-პოზიციანი სონოტროდი იტევს ავტომატური ნიმუშამღების ფლაკონებს, მიკროცენტრიფუგის მილებს და 1–5 მლ მოცულობის Eppendorf ან Nunc მილებს. VialPress დამჭერი მოწყობილობა ამუშავებს 5-მდე უფრო დიდ ჭურჭელს, 20 მმ-მდე დიამეტრით.
სპეციალური ერთმილაკიანი VialTweeter მოდელები ხელმისაწვდომია Falcon მილაკებისთვის და ჭურჭლის ზომაზე მორგებული ცალკეული ფლაკონებისთვის. ბლოკური სონოტროდის მოხსნის შემდეგ UP200St-ის ძირითადი ბლოკი მუშაობს როგორც ჩვეულებრივი ზონდიანი სონიკატორი მცირე და საშუალო ზომის ნიმუშების პირდაპირი დამუშავებისთვის.
მიკროპლანშეტების სონიკატორები
გაზარდეთ ნიმუშების მომზადების წარმადობა მრავალფოსოიანი პლანშეტების ულტრაბგერითი დამუშავებით: პლანშეტებზე დაფუძნებული სამუშაო პროცესებისთვის მიკროპლანშეტების სონიკატორები UIP400MTP და UIP550MTP უკონტაქტო, ერთგვაროვან ულტრაბგერით დამუშავებას ათი მილაკიდან მთელ პლანშეტზე ავრცელებენ.
400-ვატიანი UIP400MTP ამუშავებს სტანდარტულ მიკროტიტრულ და მრავალფოსოიან პლანშეტებს, მათ შორის 96-ფოსოიან ფორმატებს, ამპლიტუდის, სიმძლავრისა და პულსირების ზუსტი კონტროლით, აგრეთვე ტაიმერის, ტემპერატურის ზონდისა და წყლის აბაზანით გაგრილების გამოყენებით. ბიოფილმის მოცილება და ბაქტერიული კულტურების დამუშავება UIP400MTP მიკროპლანშეტების სონიკატორის დამკვიდრებული გამოყენებებია.
550-ვატიანი UIP550MTP უფრო მძლავრი ვარიანტია – იდეალურია უფრო მომთხოვნი გამოყენებებისთვის.
ორივე უკონტაქტო ულტრაბგერითი დამუშავების სისტემა საიმედოდ ამუშავებს 6-, 12-, 24-, 48-, 96- და 384-ფოსოიან პლანშეტებს, აგრეთვე მილაკების სადგამებსა და პეტრის ჯამებს. Hielscher-ის მიკროპლანშეტების სონიკატორები ნებისმიერ სტანდარტულ პლანშეტთან მუშაობს, რაც გამორიცხავს ძვირადღირებული, მხოლოდ კონკრეტული მწარმოებლისთვის განკუთვნილი სახარჯი მასალების საჭიროებას. პროგრამირებადი ტემპერატურული ზღვრების გამოყენებისას ულტრაბგერითი დამუშავება ავტომატურად ჩერდება ნიმუშის მაქსიმალური ტემპერატურის მიღწევისას და გაგრილების შემდეგ განახლდება, რაც განმეორებით ციკლებში სიცოცხლისუნარიანობას იცავს. ნიმუშების ინტელექტუალური და საიმედო, მაღალი წარმადობის მომზადება განმეორებადი შედეგებისთვის.
ქვემოთ მოცემული ცხრილი წარმოგიდგენთ ჩვენი ლაბორატორიული ნიმუშების სონიკატორების დამუშავების სავარაუდო შესაძლებლობებს; ეს მოწყობილობები გამოიყენება სიცოცხლის შემსწავლელ მეცნიერებებში, გენომიკაში, პროტეომიკასა და დიაგნოსტიკაში:
| რეკომენდებული მოწყობილობები | პარტიის მოცულობა | მოცულობითი ხარჯი |
|---|---|---|
| მრავალმილიანი სონიკატორი VialTweeter | 0.5–1.5მლ ფლაკონები | na |
| UIP400MTP მრავალფოსოიანი პლანშეტების სონიკატორი (440 ვატი) | მრავალფოსოიანი / მიკროტიტრული პლანშეტები | na |
| UIP550MTP მრავალფოსოიანი პლანშეტების სონიკატორი (550 ვატი) | მრავალფოსოიანი / მიკროტიტრული პლანშეტები | na |
| ულტრაბგერითი CupHorn | CupHorn ფლაკონებისთვის ან ლაბორატორიული ჭიქისთვის | na |
| UP100H 100-ვატიანი ზონდიანი სონიკატორი | 1-დან 500 მლ-მდე | 10-დან 200 მლ/წთ-მდე |
| UP200Ht, UP200 ქ 200-ვატიანი ზონდიანი სონიკატორის მოდელები | 10-დან 1000 მლ-მდე | 20-დან 200 მლ/წთ-მდე |
| UP400St 400-ვატიანი ზონდიანი სონიკატორი | 10-დან 2000 მლ-მდე | 20-დან 400 მლ/წთ-მდე |
| GDmini2 | სტერილური ულტრაბგერითი მიკროგამდინარე რეაქტორი | na |
| ულტრაბგერითი საცრის შემრხევი | na | na |
ხშირად დასმული კითხვები უჯრედების ულტრაბგერითი დეზაგრეგაციის შესახებ
რა განსხვავებაა უჯრედების დეზაგრეგაციასა და უჯრედების ლიზისს შორის?
დეზაგრეგაცია, რომელსაც დეაგლომერაციასაც უწოდებენ, შეჯგუფებულ უჯრედებს ერთმანეთისგან აცალკევებს და ცალკეული უჯრედების სუსპენზიას წარმოქმნის, ამასთან უჯრედები დაუზიანებელი და სიცოცხლისუნარიანი რჩება. ლიზისი არღვევს უჯრედის გარსს და ათავისუფლებს უჯრედშიდა შიგთავსს. ორივე პროცესს კავიტაციით წარმოქმნილი ძვრის ძალები განაპირობებს, განსხვავებას კი მიწოდებული ენერგიის რაოდენობა განსაზღვრავს. ამპლიტუდის, პულსირებისა და ტემპერატურის ოპტიმიზებული პარამეტრებით ულტრაბგერითი დამუშავება დეზაგრეგაციას ლიზისის ზღურბლზე დაბლა აღწევს.
რატომ არ არის შესაფერისი ულტრაბგერითი აბაზანები სტანდარტიზებული დეზაგრეგაციისთვის?
აბაზანები მხოლოდ მცირე ულტრაბგერით ენერგიას უზრუნველყოფს, რაც არასრულ მომზადებას იწვევს, ხოლო კავიტაცია ავზში ძალიან არათანაბრად ვითარდება, ამიტომ თითოეული ნიმუში მდებარეობის მიხედვით განსხვავებულად მუშავდება. მიკრობიოლოგიური დათვლები და შედარებითი კვლევები შედეგების შედარებადობაზეა დამოკიდებული. უკონტაქტო სონიკატორები, როგორიცაა მრავალმილაკიანი სონიკატორი VialTweeter და მიკროპლანშეტების სონიკატორების მოდელები UIP400MTP და UIP550MTP, ყველა ჭურჭელს ულტრაბგერითი დამუშავების მორგებულ პირობებში ამუშავებს, რაც განმეორებით ნიმუშებს შორის შედეგების განმეორებადობას აუმჯობესებს.
შეიძლება თუ არა სონიკაციამ უჯრედები დააზიანოს?
დიახ, თუ პარამეტრები არ კონტროლდება. გადაჭარბებულმა ულტრაბგერითმა დამუშავებამ ან უკონტროლო გათბობამ შეიძლება უჯრედები დააზიანოს, ხოლო გამოთავისუფლებული დნმ ნიმუშებს ბლანტს ხდის და ხელახალ აგრეგაციას უწყობს ხელს. ამიტომ პროცესი გააზრებულად უნდა შემუშავდეს: ზომიერი ამპლიტუდა, იმპულსური ციკლები, გაგრილება და ტემპერატურის შეზღუდვის ფუნქციის მქონე მოწყობილობები დამუშავებას მრუდის დეზაგრეგაციის მხარეს ინარჩუნებს.
Hielscher-ის ყველა ციფრული სონიკატორი უზრუნველყოფს ზუსტად კონტროლირებად პარამეტრებს, მიერთებად ტემპერატურის სენსორებს, პროგრამირებად პარამეტრებსა და მონაცემთა ავტომატურ აღრიცხვას ნიმუშების საიმედო მომზადებისთვის.
საჭიროა თუ არა ნიმუშის სხვა ჭურჭელში გადატანა?
არა. ფლაკონები და პლანშეტები თავდაპირველ დახურულ კონტეინერებში მუშავდება. არაპირდაპირი ულტრაბგერითი დამუშავება თავიდან აცილებს როგორც გადატანისას ნიმუშის დანაკარგს, ისე ზონდის გამოყენებასთან დაკავშირებულ ნიმუშის ნარჩენების გადატანას სხვა ნიმუშში.
რომელი ფორმატის ფლაკონების დამუშავება შეუძლია VialTweeter-ს?
სტანდარტული 10-პოზიციანი სონოტროდი იტევს ავტომატური სინჯამღების ფლაკონებს, მიკროცენტრიფუგის მილაკებსა და 1-დან 5 mL-მდე მოცულობის Eppendorf ან Nunc მილაკებს. VialPress აქსესუარი იტევს 5-მდე უფრო დიდ ჭურჭელს, რომელთა დიამეტრი 20 mm-მდეა. სპეციალური ერთმილაკიანი VialTweeter მოდელები ხელმისაწვდომია Falcon მილაკებისთვის და ინდივიდუალურად მორგებული ერთფლაკონიანი ან უფრო დიდი ფორმატებისთვის.
შეიძლება თუ არა ერთი მოწყობილობით უჯრედების დეზაგრეგაციაც და ლიზისიც?
დიახ. იგივე დანადგარი, რომელიც ზომიერ ამპლიტუდაზე დეზაგრეგაციას ახდენს, უფრო მაღალ ამპლიტუდასა და უფრო ხანგრძლივი ზემოქმედებისას უჯრედების სრულ დაშლას უზრუნველყოფს, ამიტომ ცალკეული უჯრედების სუსპენზიის მომზადება და შემდგომი ექსტრაქცია შეიძლება თანმიმდევრულად შესრულდეს პლატფორმის შეცვლის გარეშე.
გამოიყენება თუ არა სონიკაცია MBEC ანალიზებში?
სონიკაცია დამკვიდრებული და დიდწილად სტანდარტული კომპონენტია. შვერილებიანი თავსახურის მქონე MBEC ანალიზში, პოლისტიროლის შვერილებზე ბიოფილმების გაზრდისა და ანტიბიოტიკის ზემოქმედების შემდეგ, შვერილები გადააქვთ ახალ საკვებ არეში და ვორტექსითა და ულტრაბგერით ამუშავებენ, რათა მიმაგრებული ბიოფილმის უჯრედები მოაცილონ და ერთმანეთისგან განცალკევებულ მდგომარეობაში პლანქტონურ სუსპენზიაში გადაიყვანონ სერიულ განზავებამდე და სიცოცხლისუნარიანი უჯრედების დათვლამდე (MBEC განისაზღვრება, როგორც ყველაზე დაბალი კონცენტრაცია, რომელიც დამუშავების შემდეგ აღდგენილი სიცოცხლისუნარიანი უჯრედების რაოდენობას დაუმუშავებელ ბიოფილმთან შედარებით ≥3 log10-ით ამცირებს). სონიკაცია მნიშვნელოვნად აუმჯობესებს დისპერგირების ხარისხს: EPS მატრიცაში ჩაშენებული უჯრედების არასრული გამოთავისუფლება ერადიკაციის ხარისხის რეალურზე დაბალ შეფასებასა და MBEC მნიშვნელობების გადაჭარბებას იწვევს. საანალიზო პლანშეტებში შვერილების მოსათავსებელი ფოსოების მიზანმიმართული ულტრაბგერითი დამუშავება მიკროპლანშეტების სონიკატორით UIP400MTP გადალახავს აბაზანაში სონიკაციის ტრადიციულ ნაკლოვანებებს – კერძოდ, ენერგიის არათანაბარ განაწილებას, გათბობასა და აეროზოლების წარმოქმნისა და ჯვარედინი დაბინძურების რისკს.
შეიტყვეთ, როგორ ამარტივებს უკონტაქტო მიკროპლანშეტების სონიკატორი UIP400MTP MBEC ანალიზებს!
გამოიყენება თუ არა სონიკაცია MIC ანალიზებში?
სონიკაცია გამოიყენება MIC-თან დაკავშირებულ სხვადასხვა სამუშაო პროცესში ეფექტურობისა და განმეორებადობის გასაუმჯობესებლად:
- მიკობაქტერიოლოგიაში, სადაც ნახველი და სხვა ბლანტი ნიმუშები მგრძნობელობის ტესტირებამდე ჩვეულებრივ დეკონტამინაციასა და ჰომოგენიზაციას ექვემდებარება, ზოგჯერ სონიკაციის გამოყენებით, ხოლო გროვების წარმომქმნელი მიკობაქტერიული ინოკულუმების ხანმოკლე დისპერგირება MIC-ის ზუსტ განსაზღვრას უწყობს ხელს;
- აგრეგაციისადმი მიდრეკილ ორგანიზმებში (მაგ., სტრეპტოკოკები, სტაფილოკოკები ნალექებში), რომლებშიც მიკროაგრეგატები ინოკულუმის სიმკვრივეს ამახინჯებს; და
- კომბინირებულ დიაგნოსტიკაში, როგორიცაა პროთეზირებული სახსრის ინფექციისას იმპლანტის სონიკაციით მიღებული სითხის კულტივირება და შემდგომი მგრძნობელობის ტესტირება (MBEC-ის მსგავსი და არა კლასიკური MIC-ის გამოყენება).
ლიტერატურა / წყაროები
- FactSheet VialTweeter – Sonicator for Simultaneous Sample Preparation
- FactSheet UIP400MTP Plate-Sonicator for High-Throughput Sample Preparation – English version – Hielscher Ultrasonics
- FactSheet UIP550MTP Plate-Sonicator for High-Throughput Sample Preparation – English version – Hielscher Ultrasonics
- Bahnan W, Happonen L, Khakzad H, Kumra Ahnlide V, de Neergaard T, Wrighton S, André O, Bratanis E, Tang D, Hellmark T, Björck L, Shannon O, Malmström L, Malmström J, Nordenfelt P. (2023): A human monoclonal antibody bivalently binding two different epitopes in streptococcal M protein mediates immune function. EMBO Mol Med. 2023 Feb 8;15(2):e16208.
- Wrighton S., Ahnlide V.K., André O., Bahnan W., Nordenfelt P. (2023): Group A streptococci induce stronger M protein-fibronectin interaction when specific human antibodies are bound. Frontiers in Microbiology 14:1069789.
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
აირჩიეთ საკუთარი ფირფიტა! მიკროფირფიტის სონიკატორი UIP550MTP ახდენს ბაქტერიული ნიმუშების დეზაგრეგაციას ნებისმიერ სტანდარტულ მრავალფოსოიან ფირფიტაში.
Hielscher-ის მრავალნიმუშიანი სონიკატორის მოდელები UIP400MTP მიკროფირფიტებისთვის, VialTweeter და ჭიქის რქა: მაღალსიჩქარიანი და მაღალი გამტარუნარიანობის ნიმუშის მომზადება