ჩაანაცვლეთ უჯრედების ჩამოფხეკა UIP400MTP მაღალი გამტარუნარიანობის სონიკატორით

მულტიომიკური ანალიზისთვის მრავალფოსოიანი ფირფიტებიდან ადჰერენტული უჯრედული ხაზების მოცილება და ექსტრაქცია ლაბორატორიებში ყოველდღიური ამოცანაა. მრავალფოსოიანი ფირფიტების სონიკატორ UIP400MTP-ის გამოყენებით უჯრედების მაღალი წარმადობით მოცილება ანაცვლებს უჯრედების ხელით ჩამოფხეკას და უზრუნველყოფს რნმ-ის, საერთო ლიპიდებისა და საერთო პოლარული მეტაბოლიტების უფრო მაღალ გამოსავლიანობას. ახალი მეთოდი აერთიანებს Hielscher UIP400MTP სონიკატორსა და Beckman Coulter i7 სითხეების დამუშავების სამუშაო სადგურს, რაც უზრუნველყოფს უჯრედების მაღალი წარმადობით, განმეორებად და ეფექტურ დამუშავებას რნმ-ის, მეტაბოლიტებისა და ლიპიდების ექსტრაქციისთვის. წარმოდგენილი მეთოდი აღემატება უჯრედების ხელით ჩამოფხეკის ტრადიციულ მეთოდებს სხვადასხვა ტიპის უჯრედებისა და ექსპერიმენტული პირობებისთვის უკეთესი განმეორებადობისა და გამოსავლიანობის უზრუნველყოფით.

გაამარტივეთ უჯრედების მოცილება მიკროფირფიტის სონიკატორ UIP400MTP-ით

ადჰერენტული უჯრედების კულტივირების სისტემები გადამწყვეტ როლს ასრულებს ტოქსიკოლოგიურ და ბიოსამედიცინო კვლევებში. ამ კონტექსტში Cruchley-Fuge და სხვ. (2024) მუშაობდნენ მნიშვნელოვან გამოწვევაზე PrecisionTox პროექტის ფარგლებში, რომელიც ქიმიური საფრთხის შესაფასებლად ომიკური ტექნოლოგიების გამოყენებას ისახავს მიზნად. პროექტის მიზანი იყო სხვადასხვა ქიმიური ნივთიერებით დამუშავებული ათასობით ნიმუშის მაღალი წარმადობით ანალიზი. ამ მოთხოვნის დასაკმაყოფილებლად მკვლევარებმა შეიმუშავეს ავტომატიზებული სამუშაო პროცესი, რომელიც აერთიანებს UIP400MTP სონიკატორსა და დამკვიდრებულ ორფაზიანი ექსტრაქციის პროტოკოლებს თხევადი ქრომატოგრაფია-მასსპექტრომეტრიული (LC-MS) ანალიზისთვის. მათი კვლევა აფასებს მრავალფოსოიანი ფირფიტების სონიკატორ UIP400MTP-ის ეფექტურობას ადჰერენტული უჯრედების მოცილებისას ხელით ჩამოფხეკასა და სხვა ტრადიციულ მეთოდებთან შედარებით.

მულტიომიკური ანალიზის გამარტივება: ადჰერენტული უჯრედების ავტომატიზებული ექსტრაქცია UIP400MTP-ით

ბირმინგემის უნივერსიტეტის ლორა კრაჩლი-ფუგის მკვლევართა ჯგუფმა გამოიყენა ადამიანის სამი უჯრედული ხაზი: HepG2 (ღვიძლის კიბოს უჯრედები), HepaRG (დიფერენცირებული ჰეპატოციტების მსგავსი უჯრედები) და H295R (თირკმელზედა ჯირკვლის კიბოს უჯრედები). ეს უჯრედები კულტივირებული იყო 24-ფოსოიან და 96-ფოსოიან ფირფიტებში და ექვემდებარებოდა საცდელი ქიმიური ნივთიერებების, მაგალითად, აფლატოქსინი B1-ისა და ფორსკოლინის ზემოქმედებას.

ექსპერიმენტული დიზაინი:

• ფაზა 1: UIP400MTP სონიკატორის სიმძლავრის პარამეტრების ოპტიმიზაცია და შედარება უჯრედების ხელით ჩამოფხეკასა და ულტრაბგერით წყლის აბაზანებთან. HepG2 უჯრედები გამოიყენეს რნმ-ის, მეტაბოლიტებისა და ლიპიდების გამოყოფის გამოსავლიანობის შესაფასებლად.
• ფაზა 2: UIP400MTP-ის ინტეგრაცია ორფაზიანი ექსტრაქციის სამუშაო პროცესში Beckman Coulter i7 სისტემის გამოყენებით. ვალიდაცია ჩატარდა HepaRG და H295R უჯრედების გამოყენებით.

ექსტრაქციის სამუშაო პროცესი: სამუშაო პროცესი მოიცავდა მრავალფოსოიან ფირფიტებში უჯრედებზე ქიმიური ნივთიერებების ზემოქმედებას, უჯრედების მოცილებას UIP400MTP-ის გამოყენებით და ორფაზიან ექსტრაქციას Bligh & Dyer (B&D) მეთოდით. ლიპოფილური და პოლარული ნაერთების LC-MS ანალიზი ჩატარდა Thermo Scientific Orbitrap Exploris 120-ის გამოყენებით. B&D მეთოდი, ლიპიდების რაოდენობრივი განსაზღვრის ოქროს სტანდარტი, მოიცავს ორეტაპიან ექსტრაქციას მეთანოლით, ქლოროფორმითა და წყლით, რასაც მოჰყვება ლიპიდების რაოდენობრივი განსაზღვრა ქლოროფორმის ფაზაში.

მიკროფირფიტის სონიკატორი UIP400MTP აადვილებს ადჰერენტული უჯრედული ხაზების მოცილებას მრავალფოსოიანი ფირფიტებიდან და პეტრის ჯამებიდან

შედეგები:

• ფაზა 1: ულტრაბგერითი დამუშავების ოპტიმალური პირობები დადგინდა 60% სიმძლავრეზე.
  UIP400MTP-მ უზრუნველყო რნმ-ის გამოყოფის ყველაზე მაღალი გამოსავლიანობა განსაკუთრებული განმეორებადობით, ხელით ჩამოფხეკასა და ულტრაბგერით აბაზანებთან შედარებით.
  პოლარული მეტაბოლიტების გამოყოფის გამოსავლიანობა სხვადასხვა მეთოდის გამოყენებისას მსგავსი იყო, ხოლო ლიპიდების გამოყოფის გამოსავლიანობა მნიშვნელოვნად მაღალი იყო UIP400MTP-ის გამოყენებისას.
• ფაზა 2: HepaRG და H295R უჯრედებზე ჩატარებულმა ვალიდაციამ აჩვენა ლიპიდომიკისა და მეტაბოლომიკის მონაცემების მაღალი განმეორებადობა, რაზეც მიუთითებს PCA კოორდინატების მჭიდრო დაჯგუფება.
  აფლატოქსინი B1-ითა და ფორსკოლინით დამუშავებული ნიმუშები მკაფიოდ განირჩეოდა საკონტროლო ნიმუშებისგან, რაც ხაზს უსვამს მეთოდის მგრძნობელობასა და სანდოობას.

„Hielscher UIP400MTP ულტრაბგერითი მოწყობილობა წარმოადგენს უჯრედების ხელით ჩამოფხეკის „ოქროს სტანდარტის“ მაღალი ხარისხის და განმეორებად ალტერნატივას, რომელიც უზრუნველყოფს რნმ-ის, საერთო ლიპიდებისა და საერთო პოლარული მეტაბოლიტების უფრო მაღალ გამოსავლიანობას.“ (კრაჩლი-ფუგე და სხვ., 2024)

კრაჩლი-ფუგე და სხვ. ხაზს უსვამენ UIP400MTP სონიკატორის უპირატესობებს ადჰერენტული უჯრედების დამუშავებისთვის. ხელით ჩამოფხეკის ჩანაცვლებით ეს მეთოდი ზრდის განმეორებადობას, წარმადობასა და გამოსავლიანობას, რაც მას ფასდაუდებელ ინსტრუმენტად აქცევს ფართომასშტაბიანი კვლევებისთვის, როგორიცაა PrecisionTox. UIP400MTP-ის ინტეგრაცია ავტომატიზებულ სამუშაო პროცესებში არა მხოლოდ ამცირებს ცვალებადობას, არამედ ამარტივებს შრომატევად პროცესებს და შესაძლებელს ხდის მაღალი ხარისხის მულტიომიკური მონაცემების მიღებას.

კრაჩლი-ფუგესა და სხვათა (2024) ნაშრომი ხელს უწყობს და ამარტივებს ადჰერენტული უჯრედული კულტურების დამუშავებას მულტიომიკური ანალიზისთვის. UIP400MTP სონიკატორის ინტეგრაცია ავტომატიზებულ სამუშაო პროცესებში უზრუნველყოფს ნიმუშების ერთგვაროვან და ეფექტურ მომზადებას, რის გამოც იგი იდეალურად შეეფერება მაღალი წარმადობის ტოქსიკოლოგიურ კვლევებს.
 

დიზაინი, წარმოება და კონსულტაცია – გერმანული ხარისხი

Hielscher-ის ულტრაბგერითი აპარატები ცნობილია ხარისხისა და კონსტრუქციის უმაღლესი სტანდარტებით. გამძლეობა და მარტივი მართვა უზრუნველყოფს ჩვენი ულტრაბგერითი აპარატების შეუფერხებელ ინტეგრაციას სამრეწველო ობიექტებში. Hielscher-ის ულტრაბგერითი აპარატები ადვილად უმკლავდება მკაცრ პირობებსა და რთულ სამუშაო გარემოს.

Hielscher Ultrasonics არის ISO-ს სერტიფიცირებული კომპანია და განსაკუთრებულ ყურადღებას უთმობს მაღალი წარმადობის სონიკატორებს, რომლებიც გამოირჩევა უახლესი ტექნოლოგიითა და გამოყენების სიმარტივით. რა თქმა უნდა, Hielscher-ის ულტრაბგერითი აპარატები შეესაბამება CE-ის მოთხოვნებს და აკმაყოფილებს UL, CSA და RoHs მოთხოვნებს.